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PI3K/Akt信号通路对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响 被引量:18
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作者 唐剑 贺菊乔 +1 位作者 杨怡玲 王振冉 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第3期218-221,共4页
目的探讨PI3K/Akt信号通路在人结肠癌HT-29细胞增殖中的作用。方法人结肠癌HT-29细胞分为结肠癌组和抑制剂组,癌旁正常细胞株为对照组,均取对数生长期细胞进行实验。结肠癌组和对照组应用培养基+等量生理盐水进行培养,抑制剂组应用培养... 目的探讨PI3K/Akt信号通路在人结肠癌HT-29细胞增殖中的作用。方法人结肠癌HT-29细胞分为结肠癌组和抑制剂组,癌旁正常细胞株为对照组,均取对数生长期细胞进行实验。结肠癌组和对照组应用培养基+等量生理盐水进行培养,抑制剂组应用培养基+PI3K/Akt信号通抑制剂LY294002 10μL进行培养。MTT法检测3组培养24、48、72h时细胞增殖情况,Western blot法检测3组PI3K、Akt、磷酸化Akt、P-糖蛋白表达,流式细胞仪检测3组细胞周期及凋亡情况。结果培养24、48、72h,对照组和抑制剂组细胞吸光度值均小于结肠癌组(P<0.05),对照组与抑制剂组比较差异无统计学意义(P>0.05);培养24h,对照组和抑制剂组PI3K、Akt、磷酸化Akt和P-糖蛋白表达均低于结肠癌组(P<0.05),对照组与抑制剂组比较差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞仪检测结果显示,结肠癌组G_1期细胞比率[(62.54±5.15)%]、细胞凋亡率[(45.18±6.76)%]均高于对照组[(39.47±3.84)%、(10.98±0.62)%]和抑制剂组[(37.18±2.03)%、(9.31±0.41)%](P<0.05),G_2/M期细胞比率[(11.34±2.06)%]低于对照组[(29.32±3.77)%]和抑制剂组[(28.71±2.35)%](P<0.05),S期细胞比率[(26.75±2.46)%]与对照组[(29.81±3.18)%]和抑制剂组[(30.44±2.87)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05);抑制剂组G_1期、G_2/M期、S期细胞比率及细胞凋亡率与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PI3K/Akt信号通路可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,其机制可能与抑制其转导通路下游P-糖蛋白表达、使细胞周期阻滞于G_1期有关。 展开更多
关键词 人结肠癌 HT-29细胞 PI3K/AKT信号通路 细胞凋亡 细胞周期
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藏灵菇嗜热链球菌胞外多糖对人结肠癌细胞的增殖抑制 被引量:13
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作者 马杉姗 王世平 +2 位作者 连正兴 韩红兵 刘慧 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期405-408,共4页
探讨从藏灵菇中筛选的嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对人结肠癌HCT-8细胞增殖的影响。采用CCK-8法测定EPS对HCT-8细胞生长的抑制率;形态学观察EPS对HCT-8细胞的杀伤作用;流式细胞术检测EPS... 探讨从藏灵菇中筛选的嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对人结肠癌HCT-8细胞增殖的影响。采用CCK-8法测定EPS对HCT-8细胞生长的抑制率;形态学观察EPS对HCT-8细胞的杀伤作用;流式细胞术检测EPS对HCT-8细胞周期的影响。结果显示:EPS对HCT-8细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;倒置显微镜下观察部分细胞脱壁、核碎裂、固缩,细胞悬浮坏死;细胞周期分析显示G1期细胞百分率增大。说明EPS通过直接杀伤人结肠癌HCT-8细胞,使细胞周期阻滞于G1期而抑制细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 嗜热链球菌 胞外多糖 人结肠癌细胞 增殖抑制 细胞周期
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脾切除法建立人结肠癌细胞肝转移模型及对肝转移的评估 被引量:8
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作者 楼荣灿 张学栋 +1 位作者 黄平 周锡庚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第9期879-882,共4页
目的:建立类似临床大肠癌根治术后肝转移动物模型,并建立精确评估肝转移的方法。方法:在裸鼠脾内注入人结肠癌细胞5min后切除脾脏。术后第30天对裸鼠行病理检查并测定肝转移DNA含量。结果:发现肝转移率为100%,肝外其它脏器未见转... 目的:建立类似临床大肠癌根治术后肝转移动物模型,并建立精确评估肝转移的方法。方法:在裸鼠脾内注入人结肠癌细胞5min后切除脾脏。术后第30天对裸鼠行病理检查并测定肝转移DNA含量。结果:发现肝转移率为100%,肝外其它脏器未见转移结节,组织学证实肝转移结节为低分化腺癌。脾内注入105癌细胞、脾切除组肝转移癌DNA的含量比脾内注入106癌细胞、脾切除组肝转移癌DNA的含量低61.4%。结论:本实验方法建立的模型能很好地模拟临床上大肠癌根治术后肝转移征象,肝转移DNA含量的测定具有准确、可靠的优点。 展开更多
关键词 裸鼠 肝转移 脾切除术 DNA含量 结肠癌
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神经酰胺诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡的研究 被引量:7
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作者 张晓峰 李百祥 任锐 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期537-540,共4页
目的探讨外源性神经酰胺诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡作用及对Bcl-2家族蛋白基因表达的影响。方法不同浓度C2-神经酰胺处理HT-29细胞,采用Hoechest荧光染色和琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad和Bi... 目的探讨外源性神经酰胺诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡作用及对Bcl-2家族蛋白基因表达的影响。方法不同浓度C2-神经酰胺处理HT-29细胞,采用Hoechest荧光染色和琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad和Bid基因表达水平。结果C2-神经酰胺诱导HT-29细胞发生核染色质断裂、出现凋亡小体等典型凋亡改变,50μmol/L神经酰胺作用12和24小时凋亡细胞率分别达到64·7%和81·3%。同时神经酰胺使Bax、Bad和Bid基因表达水平增高,使Bcl-2和Bcl-xl基因表达水平减弱,Bcl-2与Bax比值下降,呈现剂量-效应关系。结论外源性神经酰胺能通过上调或下调Bcl-2家族基因表达水平诱导人结肠癌HT-29细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 神经酰胺 细胞凋亡 人结肠癌细胞 Bcl-2家族基因
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JAK1/STAT1/p21通路在姜黄素诱导结肠癌细胞HCT116周期阻滞中的作用
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作者 李天硕 席作武 +3 位作者 董文洁 史登辉 刘云蓉 林子栋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期74-82,共9页
目的:探讨姜黄素对人结肠癌HCT116细胞周期阻滞的影响及其可能的分子作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测姜黄素(0、12.5、25、50、75、100μmol·L^(-1))和5-氟尿嘧啶(5-FU)(600μmol·L^(-1))处理不同时间(24、48、72 h)对H... 目的:探讨姜黄素对人结肠癌HCT116细胞周期阻滞的影响及其可能的分子作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测姜黄素(0、12.5、25、50、75、100μmol·L^(-1))和5-氟尿嘧啶(5-FU)(600μmol·L^(-1))处理不同时间(24、48、72 h)对HCT116细胞增殖的影响;流式细胞术检测姜黄素(0、25、50、75μmol·L^(-1))和5-FU对HCT116细胞周期的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HCT116细胞中Janus酪氨酸蛋白激酶1(JAK1)/信号传导及转录激活因子1(STAT1)/细胞周期依赖性激酶抑制因子1A(p21)通路相关蛋白表达的影响;染色质免疫沉淀法(ChIP)检测STAT1与p21启动子区的结合情况;采用小干扰核糖核酸(siRNA),分别通过Western blot和细胞免疫荧光检测STAT1在调控p21表达中的作用及JAK1蛋白在调控STAT1活化中的作用。结果:与空白组比较,姜黄素各组和5-FU组HCT-116细胞活性明显降低(P<0.05)。与空白组比较,姜黄素组和5-FU组DNA合成前期(G0/G1)细胞比例明显升高(P<0.05),DNA复制期(S)和DNA合成后期(G2/M)细胞比例及磷酸化p21(p-p21)蛋白水平明显降低(P<0.05),p21蛋白表达明显升高(P<0.05)。与姜黄素组比较,p21 siRNA+姜黄素组G0/G1期细胞明显降低(P<0.05)。与空白组比较,姜黄素处理后细胞中磷酸化STAT1(p-STAT1)水平明显升高(P<0.05)。与姜黄素组比较,姜黄素+STAT1 siRNA组HCT116细胞中p21蛋白表达水平升高(P<0.05)。机制研究表明,与空白组比较,姜黄素处理明显增强了STAT1蛋白在p21启动子区的富集(P<0.05)。与空白组比较,姜黄素处理后细胞中磷酸化JAK1(p-JAK1)水平明显升高(P<0.05)。与姜黄素组比较,姜黄素+STAT1 siRNA组HCT116细胞中的p-STAT1和p21蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:姜黄素诱导的人结肠癌HCT116细胞周期阻滞,其机制可能与激活JAK1/STAT1/p21信号通路有关。 展开更多
关键词 姜黄素 人结肠癌细胞 细胞周期阻滞 Janus酪氨酸蛋白激酶1/信号传导及转录激活因子1(JAK1/STAT1)信号通路
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核因子-κB抑制剂联合核因子E2相关因子2抑制剂对人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究 被引量:5
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作者 罗欢 邹攀 +3 位作者 魏行云 刘灵 何迎春 江志超 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期123-126,141,共5页
目的探究核因子κB(NF-κB)抑制剂(BAY11-7082)联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)对人结肠癌细胞HCT116的作用机制。方法体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组。空白对照... 目的探究核因子κB(NF-κB)抑制剂(BAY11-7082)联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)对人结肠癌细胞HCT116的作用机制。方法体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组。空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L^(-1)BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L^(-1)ML385干预,联合组以10μmol·L^(-1)BAY 11-7082+5μmol·L^(-1)ML385干预,干预时间为24 h。MTT法检测人结肠癌细胞HCT116增殖抑制率,以流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡状况,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及Nrf2、NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果ML385、BAY 11-7082均能显著抑制人结肠癌细胞HCT116增殖(均P<0.05);干预24 h,空白对照组、Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组的细胞凋亡率分别为(1.77±0.60)%,(19.41±1.87)%,(21.55±2.33)%和(39.84±1.22)%;这4组的B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)的相对表达量分别为1.00,1.53±0.28,1.43±0.30和3.47±0.70;这4组的生存素蛋白的相对表达量分别为1.00,0.60±0.11,0.32±0.10和0.32±0.12;这4组的X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的相对表达量分别为1.00,0.50±0.11,0.19±0.06和0.25±0.04。空白对照组、Nrf2抑制剂组和NF-κB抑制剂组的NF-κB蛋白的相对表达量分别为1.00,0.71±0.10和0.44±0.06;这3组的IκB蛋白分别为1.00,0.37±0.15和0.33±0.13;这3组的Nrf2蛋白分别为1.00,0.14±0.09和0.75±0.08。Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NF-κB抑制剂联合Nrf2抑制剂可协同诱导人结肠癌细胞HCT116凋亡,该效应可能与下调Survivin和XIAP的表达、上调Bax表达有关。 展开更多
关键词 人结肠癌细胞 核因子-ΚB信号通路 核因子E2相关因子2信号通路 凋亡 协同
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Sphk1对人结肠癌细胞株Lovo增殖与侵袭的影响及其作用机制 被引量:6
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作者 钟月圆 黄杰安 +2 位作者 刘诗权 覃蒙斌 金卉 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第24期2528-2532,共5页
目的:研究Sphk1对结肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响并探讨其机制.方法:将人结肠癌Lovo细胞株分成Sphk1激活组,Sphk1抑制组,空白对照组.以佛波醇-12-豆蔻酸酯-13-乙酸酯(phorbol12-myristate13-acetate,PMA)为Sphk1激活剂(终浓度为100nm... 目的:研究Sphk1对结肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响并探讨其机制.方法:将人结肠癌Lovo细胞株分成Sphk1激活组,Sphk1抑制组,空白对照组.以佛波醇-12-豆蔻酸酯-13-乙酸酯(phorbol12-myristate13-acetate,PMA)为Sphk1激活剂(终浓度为100nmol/L),N,N-二甲基鞘胺醇(erythro-sphingo-sineN,N-Dimethyl,DMS)为Sphk1抑制剂(终浓度为50μmol/L)处理Lovo细胞24h后,用MTT方法测定细胞的增殖活性,用流式细胞术检测细胞凋亡,用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,用Westernblot测定细胞Sphk1、ERK1/2、p-ERK1/2、NF-κBp65蛋白水平的变化.结果:PMA可以明显诱导Sphk1蛋白的表达,促进Lovo细胞生长,抑制细胞的凋亡,并促进细胞的侵袭;相反,DMS明显抑制Sphk1的表达,抑制细胞生长,促进细胞的凋亡,并抑制细胞的侵袭.Sphk1激活组、对照组、抑制组的细胞凋亡率分别是9.15%,16.25%,32.58%.与对照组相比,Sphk1激活组、抑制组的细胞相对侵袭率分别是190.57%,9.65%,差异有统计学意义(均P<0.01).PMA诱导Sphk1表达,同时伴有ERK1/2、p-ERK1/2和NF-κBp65蛋白表达的上调,DMS抑制Sphk1表达,可抑制ERK1/2、p-ERK1/2、NF-κBp65蛋白的表达.结论:Sphk1可促进Lovo细胞的生长增殖与侵袭并抑制细胞的凋亡,其机制可能与ERK1/2和NF-κB信号通路的激活有关. 展开更多
关键词 鞘氨醇激酶-1 人结肠癌细胞 侵袭 凋亡 增殖
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腹腔镜手术CO_2气腹对人结肠癌细胞血路肝转移的影响 被引量:5
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作者 袁喜红 李坚 +2 位作者 黄琪 王俊 周凯 《江西医药》 CAS 2016年第4期311-314,共4页
目的探讨腹腔镜手术CO_2气腹对人结肠癌细胞血路肝转移的影响。方法将BALB/c裸鼠剖腹,经脾脏注入人结肠癌SW480细胞(2×106cells/只),立即关腹后随机分成4组(n=25),快速建立小鼠体内CO_2气腹模型,采用持续性不同强度的CO_2气腹... 目的探讨腹腔镜手术CO_2气腹对人结肠癌细胞血路肝转移的影响。方法将BALB/c裸鼠剖腹,经脾脏注入人结肠癌SW480细胞(2×106cells/只),立即关腹后随机分成4组(n=25),快速建立小鼠体内CO_2气腹模型,采用持续性不同强度的CO_2气腹压力(0mm Hg、5mm Hg、10mm Hg、15mm Hg)进行处理30mins。10d后各处死每组10只小鼠取出肝脏,15d后各处死全部剩下小鼠取出肝脏,肉眼观察肝表面有无转移结节及转移结节分布情况,比较各组肝转移灶情况;并对裸鼠肝转移灶行组织学HE染色病理检查分析。结果非正常死亡5只小鼠。第10d肝转移情况:高气腹组(10mm Hg+15mm Hg)与低气腹组(5mm Hg+0mm Hg)比较(17/20 vs 9/20)差异有显著统计学意义(χ^2=5.38,P=0.019)。第15d肝转移情况:各组间差异无显著统计学意义(χ^2=3.78,P=0.286)。各组总的肝转移发生为:0mm Hg气腹组15例(15/23),5mm Hg气腹组16例(16/24),10mm Hg气腹组21例(21/24)和15mm Hg气腹组23例(23/24),各组间差异有统计学意义(χ^2=9.96,P=0.019)。肝转移灶数目上各组间无显著统计学差异(P〉0.05)。但在肝转移灶大小方面,15mm Hg气腹组均明显大于0mm Hg气腹组和5mm Hg气腹组,有非常显著统计学差异(P〈0.01),10mm Hg气腹组较0mm Hg气腹组和5mm Hg气腹组,分别显示有非常显著统计学差异(P〈0.01)和显著统计学差异(P〈0.05)。结论腹腔镜手术CO_2气腹能促进人结肠癌细胞经血路肝脏转移的发生,并且随着气腹压力的升高作用越明显。 展开更多
关键词 人工气腹 动物模型 人结肠癌 BALB/C裸鼠
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人结肠腺癌细胞HCT-8绿色荧光标记肿瘤模型的建立 被引量:5
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作者 李小颖 高凯 +1 位作者 刘学丽 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第7期19-22,I0004,I0005,共6页
目的筛选表达绿色荧光蛋白基因的人的单克隆结肠腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chicken-βactin-GFP-NEO转染人结肠腺癌细胞HCT-8,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的... 目的筛选表达绿色荧光蛋白基因的人的单克隆结肠腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chicken-βactin-GFP-NEO转染人结肠腺癌细胞HCT-8,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP的人结肠腺癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤的发光随着观察时间的延长而增加。结论绿色荧光蛋白能够在人结肠腺癌细胞HCT-8中长期稳定表达,用绿色荧光蛋白标记的人结肠腺癌细胞HCT-8建立的裸鼠肿瘤模型为进一步研究结肠肿瘤和相应的药物筛选提供了一种简便、可行的新方法。 展开更多
关键词 人结肠腺癌细胞 绿色荧光蛋白 裸鼠 活体荧光成像系统
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薏苡仁油对HCT116细胞血管生成拟态形成的影响及机制 被引量:5
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作者 余涛 刘礼 +2 位作者 吕秀玮 贺文煜 袁昌劲 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期424-427,共4页
目的观察薏苡仁油(CLSO)对人结肠癌HCT116细胞血管生成拟态形成能力的影响,并观察CLSO对细胞迁移能力和迁移诱导蛋白-7(Mig-7)表达水平的影响,藉此探讨CLSO影响血管生成拟态形成的可能机制。方法 MTT法检测CLSO对HCT116的无毒浓度(增殖... 目的观察薏苡仁油(CLSO)对人结肠癌HCT116细胞血管生成拟态形成能力的影响,并观察CLSO对细胞迁移能力和迁移诱导蛋白-7(Mig-7)表达水平的影响,藉此探讨CLSO影响血管生成拟态形成的可能机制。方法 MTT法检测CLSO对HCT116的无毒浓度(增殖抑制率<10%时的浓度),选取无毒浓度以下不同浓度的CLSO作用于三维培养的HCT116细胞,观察其对HCT116细胞形成血管生成拟态的影响;并用划痕实验观察各组细胞的迁移能力,蛋白印迹法检测各组中Mig-7蛋白的表达水平。结果体外三维培养环境下,经CLSO作用的HCT116细胞形成血管生成拟态的结构比对照组减少。划痕实验中对照组、CLSO 5和10μL/mL浓度组的平均迁移距离依次缩小,迁移率分别为17.07%、9.19%、2.10%,2个实验组和对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白印迹法检测显示经不同浓度CLSO作用于HCT116细胞后实验组条带灰度值/内参条带灰度值的比值比对照组小,Mig-7蛋白表达受到抑制,其中10μL/mL浓度组的抑制作用比5μL/mL组更明显,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论CLSO体外对HCT116形成血管生成拟态的能力存在抑制,其机制可能与下调Mig-7蛋白表达,从而影响细胞的迁移能力有关。 展开更多
关键词 薏苡仁油 结肠癌 血管生成拟态 细胞迁移 迁移诱导蛋白-7
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欧前胡素阻断Noxs-ROS通路抑制MKN-45及HT-29细胞增殖活性
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作者 雍素云 史先鹏 +2 位作者 周楠 周永春 张雪婷 《现代药物与临床》 CAS 2023年第8期1836-1842,共7页
目的探讨欧前胡素对人胃癌细胞(MKN-45)和人结肠癌细胞(HT-29)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Noxs)-活性氧(ROS)氧化应激通路的作用及对肿瘤细胞增殖活性的影响。方法MKN-45和HT-29细胞经过不同浓度(3、10、30、100μmol/L)的欧前... 目的探讨欧前胡素对人胃癌细胞(MKN-45)和人结肠癌细胞(HT-29)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Noxs)-活性氧(ROS)氧化应激通路的作用及对肿瘤细胞增殖活性的影响。方法MKN-45和HT-29细胞经过不同浓度(3、10、30、100μmol/L)的欧前胡素及阳性对照二苯基氯化碘盐(DPI)处理后,使用CCK8法检测细胞增殖活性,使用DHE荧光探针检测细胞内ROS水平,使用Western blotting检测细胞内Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5家族蛋白表达。结果CCK8法结果显示,欧前胡素可浓度相关性地抑制MKN-45和HT-29细胞增殖活性;DHE荧光探针法结果显示,欧前胡素干预可使MKN-45和HT-29细胞荧光强度明显减弱,ROS水平降低;Western blotting结果显示,给予欧前胡素可使MKN-45细胞Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001),使HT-29细胞Nox1、Nox2蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论欧前胡素可通过抑制MKN-45和HT-29细胞中Noxs-ROS通路,诱导细胞增殖活性下降,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 欧前胡素 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 活性氧 人胃癌细胞 人结肠癌细胞
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大黄素抑制人结肠癌RKO、Caco-2细胞体外增殖作用的研究 被引量:4
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作者 左文英 陈媛媛 +1 位作者 蔡骏 李真 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第3期580-582,共3页
目的:探讨大黄素对人结肠癌细胞株RKO、Caco-2的体外增殖的抑制作用。方法:MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;FCM检测细胞凋亡率及周期分布;Caspase-3分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果:随着作用时间的延... 目的:探讨大黄素对人结肠癌细胞株RKO、Caco-2的体外增殖的抑制作用。方法:MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;FCM检测细胞凋亡率及周期分布;Caspase-3分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果:随着作用时间的延长以及大黄素浓度的升高,大黄素对人结肠癌RKO、Caco-2细胞的体外增殖抑制作用增高;大黄素阻滞两种细胞于S期,使G2/M期细胞比率明显下降,激活Caspase-3酶蛋白;提高细胞凋亡率。结论:大黄素抑制人结肠癌细胞株RKO、Caco-2体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞RKO、Caco-2细胞株细胞周期并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 大黄素 人结肠癌细胞 抑制增殖 细胞凋亡
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虎杖白藜芦醇对人结肠癌HCT-15细胞增殖及凋亡的影响 被引量:4
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作者 胡旻 桑雅清 《浙江中西医结合杂志》 2017年第12期1032-1034,共3页
目的观察虎杖白藜芦醇对人结肠癌HCT-15细胞增殖及凋亡的影响。方法以0、25、50、100、200μmol/L白藜芦醇作用人结肠癌HCT-15细胞24h以及50μmol/L白藜芦醇处理HCT-15细胞0、12、24、48、72h。采用噻唑蓝(MTT)法检测白藜芦醇对HCT-15... 目的观察虎杖白藜芦醇对人结肠癌HCT-15细胞增殖及凋亡的影响。方法以0、25、50、100、200μmol/L白藜芦醇作用人结肠癌HCT-15细胞24h以及50μmol/L白藜芦醇处理HCT-15细胞0、12、24、48、72h。采用噻唑蓝(MTT)法检测白藜芦醇对HCT-15细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期的分布以及细胞凋亡率,免疫印迹方法以及聚合酶链反应法观察主要的细胞周期蛋白以及基因的表达情况。结果虎杖白藜芦醇能显著抑制HCT-15细胞生长,并呈现时间-浓度依赖性。细胞形态学检测显示随着药物浓度升高,细胞明显皱缩。流式细胞检测显示,随着白藜芦醇浓度的增加以及作用时间的延长,G0/G1期细胞比例明显增加,其中0、50、100、200μmol/L白藜芦醇处理24h后分别为(42.81±1.21)%、(49.25±0.92)%、(54.67±1.03)%、(64.24±1.17)%,50μmol/L白藜芦醇作用0、24、48、72h后分别为(32.41±1.09)%,(48.35±1.03)%,(55.61±1.33)%,(70.24±1.43)%,各组数据差异均有统计学意义(P<0.05)。0、50、100、200μmol/L白藜芦醇组S期细胞比例随着浓度增大而减小,分别为(34.89±0.66)%、(31.07±1.75)%,(28.66±1.71)%,(23.65±0.62)%,各组数据差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹法检测显示,白藜芦醇以时间依赖方式下调周期蛋白cyclin D1表达,上调p21cip1蛋白以及细胞凋亡相关蛋白剪切行Caspase-3和PRAP表达。结论白藜芦醇能明显抑制HCT-15细胞增殖,并诱导其细胞凋亡,可引起HCT-15细胞的S期阻滞。 展开更多
关键词 人结肠癌 HCT-15细胞 虎杖 白藜芦醇 细胞周期 凋亡
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淫羊藿苷激活内质网应激对人结肠癌细胞的凋亡作用
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作者 王璐 王杰 +1 位作者 陈腾 殷佩浩 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期3106-3110,共5页
目的基于内质网应激探讨淫羊藿苷(ICA)对人结肠癌细胞HCT116、SW620增殖、凋亡的影响。方法选取不同浓度的ICA处理HCT116、SW620细胞48 h,分别用平板细胞克隆实验、Annexin-V/PI流式凋亡检测法和蛋白质印迹(Western Blot)法检测ICA对HCT... 目的基于内质网应激探讨淫羊藿苷(ICA)对人结肠癌细胞HCT116、SW620增殖、凋亡的影响。方法选取不同浓度的ICA处理HCT116、SW620细胞48 h,分别用平板细胞克隆实验、Annexin-V/PI流式凋亡检测法和蛋白质印迹(Western Blot)法检测ICA对HCT116、SW620细胞的增殖抑制作用、凋亡的影响和内质网应激相关蛋白表达的影响。将HCT116、SW620细胞分别分为对照组、ICA组、ICA+4-PBA组。对照组均用完全培养基培养48 h;ICA组分别用80、100μmol·L^(-1)ICA培养HCT116、SW62048 h;ICA+4-PBA组分别用80μmol·L^(-1)ICA+2 mmol·L^(-1)4-PBA、100μmol·L^(-1)ICA+2 mmol·L^(-1)4-PBA培养HCT116、SW62048 h;用蛋白质印迹法检测各组细胞中内质网应激相关蛋白的表达。结果ICA对HCT116细胞48 h IC50值为111.10μmol·L^(-1),对SW620细胞48 h IC50值为159.40μmol·L^(-1)。平板细胞克隆实验结果显示,随着ICA浓度的增加,HCT116、SW620细胞增殖减少(P<0.05)。流式细胞术显示,HCT116细胞48 h的0、55、110、220μmol·L^(-1)ICA组凋亡率分别为(6.70±3.19)%、(12.73±1.90)%、(31.71±3.30)%、(56.85±3.66)%,SW620细胞48 h的0、80、160、320μmol·L^(-1)ICA组凋亡率分别为(3.28±0.12)%、(10.27±0.77)%、(22.34±2.16)%、(50.35±2.17)%。Western Blot结果显示,随着ICA浓度的增加,HCT116、SW620细胞凋亡蛋白c-cas3、Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,内质网应激相关蛋白表达上调。结论淫羊藿苷对HCT116、SW620细胞具有抑制增殖、促凋亡的作用,其机制可能与上调内质网应激信号通路有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 人结肠癌细胞 细胞凋亡 内质网应激
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受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)调控人结肠癌HT-29细胞程序性坏死的分子机制 被引量:4
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作者 王海玉 张波 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期720-726,741,共8页
目的研究受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)在人结肠HT-29细胞程序性坏死过程中的作用,并探讨E3泛素连接酶三重结构域包含蛋白16(tripartite domain containing protein 16,Trim16)对其作用的潜在调... 目的研究受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)在人结肠HT-29细胞程序性坏死过程中的作用,并探讨E3泛素连接酶三重结构域包含蛋白16(tripartite domain containing protein 16,Trim16)对其作用的潜在调控机制。方法用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)建立HT-29细胞的程序性坏死模型,采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测其对凋亡、坏死细胞数目的影响。分别用Western blot和qRT-PCR检测RIPK1在细胞程序性坏死中的表达。构建稳定表达Flag标记的RIPK1的HT-29细胞株,采用Flag标记的pulldown试验结合质谱检测发现与RIPK1有相互作用的新蛋白。应用NiNTA pulldown试验检测筛选出的E3泛素连接酶对RIPK1泛素化的调控。结果 TNFα能够成功诱导HT-29细胞程序性坏死。HT-29细胞在TNFα和半胱天蛋白酶抑制剂z-VAD处理后,表现出RIPK1、RIPK3、混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)表达水平显著增加,并伴随着炎性因子白介素1α(IL1α)和白介素6(IL6)水平明显升高。Flag标记的pulldown试验结合质谱检测发现一个与RIPK1有相互作用的E3泛素连接酶Trim16,体外实验表明Trim16可以增强RIPK1的泛素化程度,其可能调节RIPK1在程序性坏死过程中的作用。结论 RIPK1在TNFα和z-VAD诱导人结肠癌HT-29细胞的程序性坏死过程中起重要作用,E3泛素连接酶Trim16对此过程可能有重要调控作用。 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1) 人结肠癌细胞 程序性坏死 E3泛素连接酶 三重结构域包含蛋白16(Trim16)
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新型异吲哚酮衍生物的合成与活性研究
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作者 曹瑞霞 贾玉萍 《合成化学》 CAS 2022年第2期90-97,共8页
为了寻找结构新颖,活性较好的抗肿瘤化合物,本文设计并合成了15个未见报道的异吲哚酮衍生物(Ⅰ_(1)~Ⅰ_(5),Ⅱ_(1)~Ⅱ_(5)和Ⅲ_(1)~Ⅲ_(5)),其结构经^(1)H NMR和HR-MS(ESI)表征。使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,初步的生物活性测试结果表明... 为了寻找结构新颖,活性较好的抗肿瘤化合物,本文设计并合成了15个未见报道的异吲哚酮衍生物(Ⅰ_(1)~Ⅰ_(5),Ⅱ_(1)~Ⅱ_(5)和Ⅲ_(1)~Ⅲ_(5)),其结构经^(1)H NMR和HR-MS(ESI)表征。使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,初步的生物活性测试结果表明:部分化合物对人肺癌细胞A549(Ⅱ_(4),IC_(50)=15.49μM)、人结肠癌细胞Colo205(Ⅱ_(4),IC_(50)=15.54μM)、人胰腺癌细胞PNAC-1(Ⅱ_(4),IC_(50)=37.07μM)和人骨髓瘤细胞U266(Ⅱ_(5),IC_(50)=75.27μM)表现出明显的抑制作用。 展开更多
关键词 异吲哚酮 抗肿瘤 合成 人肺癌细胞 人结肠癌细胞 人胰腺癌细胞 人骨髓瘤细胞
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戊地昔布对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 韦金英 刘玉 +3 位作者 李宏博 王烨 张海强 韩彩丽 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期549-551,共3页
目的观察戊地昔布(Valdecoxib)对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法将体外培养HT-29细胞分为正常组(C)、药物处理组(V)及溶剂对照组(S)。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-... 目的观察戊地昔布(Valdecoxib)对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法将体外培养HT-29细胞分为正常组(C)、药物处理组(V)及溶剂对照组(S)。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38MAPK。结果与正常组相比,药物处理组细胞凋亡明显增加(P<0.05),cleaved caspase-3和p-p38MAPK表达增高,Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Valdecoxib干预能够显著促进HT-29细胞凋亡,上调cleaved caspase-3和p-p38 MAPK的表达,增加Bax/Bcl-2比率。结论 COX-2选择性抑制剂Valdecoxib能够促进HT-29细胞凋亡部分可能是通过激活p38MAPK信号通路而实现的。 展开更多
关键词 结肠癌 HT-29细胞 戊地昔布 凋亡
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干扰REV3L基因表达逆转结肠癌的耐药性 被引量:3
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作者 李利坚 隋御 +4 位作者 周翔 王婷 张蕾 李元杰 徐方 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第5期542-547,共6页
目的探讨跨损伤DNA合成途径(TLS)关键基因REV3L的靶向下调对人耐药结肠癌细胞系耐药性的逆转作用。方法用RNA干扰技术(RNAi)沉默REV3L基因在人耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3... 目的探讨跨损伤DNA合成途径(TLS)关键基因REV3L的靶向下调对人耐药结肠癌细胞系耐药性的逆转作用。方法用RNA干扰技术(RNAi)沉默REV3L基因在人耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3L基因mRNA及蛋白均低表达的细胞作为实验组。运用四甲基噻唑蓝(MTT)、流式细胞术和细胞形态学的方法检测肿瘤细胞耐药系数变化、耐药性相对逆转率及细胞凋亡的情况。结果转染mU6pro-siREV3质粒的实验组细胞REV3L基因的表达被成功抑制。基因低表达的细胞耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组,相对耐药逆转率显著高于阴性对照组(P<0.05)。细胞凋亡指标显示实验组细胞凋亡率显著高于两对照组(P<0.05)。结论下调REV3L基因的表达,可逆转人结肠癌细胞的耐药性并促进细胞凋亡,REV3L可以作为肿瘤基因治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 REV3L RNAI 人耐药性结肠癌细胞系(THC8307 L—OHP) 耐药性逆转 细胞凋亡
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鞣酸通过下调TMEM16A的表达抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖 被引量:2
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作者 李尚坤 傅仲学 +1 位作者 文坤明 吴星烨 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期5-8,共4页
目的:探讨鞣酸对人结肠癌SW620细胞增殖及TMEM16AmRNA与蛋白水平的影响。方法将对数生长期的人结肠癌细胞SW620分为3组,分别是鞣酸低剂量组(50μmol/L)及高剂量组(100μmol/L),以及二甲基亚砜(DMSO)作为空白对照组,培养48、72... 目的:探讨鞣酸对人结肠癌SW620细胞增殖及TMEM16AmRNA与蛋白水平的影响。方法将对数生长期的人结肠癌细胞SW620分为3组,分别是鞣酸低剂量组(50μmol/L)及高剂量组(100μmol/L),以及二甲基亚砜(DMSO)作为空白对照组,培养48、72h。MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期的分布及凋亡情况,RT-PCR和Westernblot分别检测TMEM16A的mRNA水平和蛋白水平。计量资料采用x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK检验。结果MTT结果显示:鞣酸处理能显著抑制SW620的增殖。高剂量组对SW620细胞的抑制作用比低剂量大。处理48h,高剂量组比低剂量组抑制作用明显(t=15.35,P<0.01);处理72h,高剂量组同样比低剂量组抑制作用明显(t=22.32,P<0.01)。流式细胞检测结果显示:与对照组相比,各个剂量组都能显著将SW620细胞抑制在G0/G1期和S期(F=6782.1、1509.3,P<0.01),G2/M期的细胞比例差异无统计学意义(F=1.37,P>0.05)。各个剂量组处理后,凋亡率差异有统计学意义(F=545.3,P<0.01)。与对照组比较,鞣酸高剂量组的3H-TdR、3H-Leucine掺入量在48、72h均明显低于对照组(P<0.05)。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16AmRNA相对表达量分别为0.63±0.01和0.62±0.01;鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16AmRNA相对表达量分别为0.58±0.01和0.50±0.01,均低于空白对照组的0.85±0.01(F=7.645,P<0.05)。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16A蛋白相对表达量分别为0.68±0.14和0.65±0.12;鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16蛋白相对表达量分别为0.64±0.15和0.63±0.11,低于空白对照组的1.28±0.06(F=4.508,P<0.05)。结论鞣酸能明显抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖,将其细胞周期阻滞于G1~S期,并下调T 展开更多
关键词 鞣酸 结肠癌细胞 细胞周期
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人结肠癌那可丁耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的构建及其生物特性探究 被引量:2
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作者 韩峥 黄晓东 +5 位作者 刘蒙 朱庆曦 谭洁 邹艳丽 黄莎莎 田霞 《广东医学》 CAS 2018年第2期176-180,共5页
目的构建那可丁(Nos)耐药的人结肠癌细胞株(HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos),探究细胞株的生物学特性。方法采用反复大剂量结合药物浓度梯度法建立人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos。CCK-8法检测Nos对人结肠癌细胞株H... 目的构建那可丁(Nos)耐药的人结肠癌细胞株(HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos),探究细胞株的生物学特性。方法采用反复大剂量结合药物浓度梯度法建立人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos。CCK-8法检测Nos对人结肠癌细胞株HT-29、LoVo、SW480和耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos细胞的半数抑制率(IC_(50))。细胞生长曲线的测定。流式细胞术测定各组细胞株的细胞周期变化。Real time PCR和Western blot分别检测耐药相关基因和蛋白的表达。结果成功构建人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,耐药指数分别为6.37、7.15、6.81。HT-29/Nos细胞倍增时间较HT-29显著增长[(51.42±2.83)h vs(35.05±3.61)h,P<0.05];LoVo/Nos细胞倍增时间较LoVo显著增长[(61.93±4.22)h vs(38.38±1.88)h,P<0.05];SW480/Nos细胞倍增时间较SW480增长[(48.84±1.40)h vs(31.30±1.75)h,P<0.05]。耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的G_1期细胞数目显著增加(P<0.05),S期细胞数目显著减少(P<0.05)。耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的P-gp和MDR-1 mRNA和蛋白表达均高于HT-29、LoVo、SW480细胞株。结论成功构建了Nos耐药人结肠癌细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,为下一步耐药性分子机制的研究奠定基础。 展开更多
关键词 人结肠癌细胞 NOSCAPINE 耐药性 生物学特性
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