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大肠杆菌表达系统的研究进展 被引量:42
1
作者 戎晶晶 刁振宇 周国华 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第6期416-420,共5页
近年来利用基因调控、融合表达、共表达以及代谢工程、定向进化等策略对大肠杆菌系统的载体和宿主进行了合理的改进,使目的基因的表达水平以及产物蛋白的活性大大提高,尤其是对长期以来有关真核基因在原核细胞中表达所存在的糖基化、二... 近年来利用基因调控、融合表达、共表达以及代谢工程、定向进化等策略对大肠杆菌系统的载体和宿主进行了合理的改进,使目的基因的表达水平以及产物蛋白的活性大大提高,尤其是对长期以来有关真核基因在原核细胞中表达所存在的糖基化、二硫键形成等翻译后加工问题的研究取得了突破,使得大肠杆菌表达系统在研究和生产中的应用范围得到进一步拓宽。文章从表达载体和宿主细胞两个方面对大肠杆菌表达系统的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 大肠杆菌表达系统 表达载体 宿主细胞 重组蛋白
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美洲斑潜蝇寄主选择性与寄主植物叶片营养物质含量的关系 被引量:23
2
作者 戴小华 尤民生 付丽君 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第3期311-313,共3页
研究了美洲斑潜蝇的寄主选择性与寄主植物叶片营养物质含量的关系。结果发现 ,美洲斑潜蝇寄主选择性的大小与植物叶片中的蛋白质含量无关 ,与叶片中的可溶性糖含量呈负相关 ,即糖含量越高 ,美洲斑潜蝇越倾向于不取食和产卵。
关键词 美洲斑潜蝇 寄主选择性 蛋白质 可溶性糖 植物叶片 营养物质含量
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免疫受损大鼠铜绿假单胞菌肺部感染后肺表面活性物质的改变 被引量:9
3
作者 李倬哲 瞿介明 +3 位作者 何礼贤 孙波 陈雪华 王葆青 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期204-207,共4页
目的 了解免疫受损宿主肺部铜绿假单胞菌 (PA)感染后肺表面活性物质 (PS)的改变。方法 建立免疫受损宿主肺部PA感染的大鼠模型 ,同时设置对照组 ,在接种PA前后不同时间行左侧支气管肺泡灌洗 ,测定灌洗液中的总蛋白 (TP)、总磷脂 (TPL... 目的 了解免疫受损宿主肺部铜绿假单胞菌 (PA)感染后肺表面活性物质 (PS)的改变。方法 建立免疫受损宿主肺部PA感染的大鼠模型 ,同时设置对照组 ,在接种PA前后不同时间行左侧支气管肺泡灌洗 ,测定灌洗液中的总蛋白 (TP)、总磷脂 (TPL)、饱和磷脂酰胆碱 (DSPC)、肺表面活性物质蛋白 (SP A)及右侧肺组织湿 /干比。结果 感染PA后 ,大鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中TPL及DSPC较感染前并无明显改变 ,但DSPC/TPL、DSPC/TP下降 ;免疫受损大鼠SP A和SP A/TP在感染前与对照组差别无显著性 ,但感染后下降明显 ,分别由感染前的 (4 1± 1 2 ) μg/ml、(2 2 5± 5 0 ) μg/mg下降至接种后 6h的 (1 8± 1 1) μg/ml、(1 4± 0 7) μg/mg(P <0 0 5 ) ,低于同期对照组大鼠水平 [分别为 (4 2± 1 5 ) μg/ml,(11 7± 8 1) μg/mg,P <0 0 5 ],免疫受损大鼠TP及湿 /干比升高更明显 ,两组大鼠SP A与TP、湿 /干比的改变呈负相关 ;免疫受损大鼠BALF中SP A/TPL、SP A/DSPC较感染前下降 ,感染后 6h达最低 ,且感染后 6~ 9h比例明显低于同期对照组。结论 免疫受损大鼠PA肺部感染时 ,磷脂改变表现为DSPC/TPL、DSPC/TP降低 ,SP A的下降与肺损伤严重程度有关 ,肺表面活性物质中磷脂与蛋白成分的改变不同步 ,SP A下降幅度更? 展开更多
关键词 免疫受损宿主 铜绿假单胞菌 肺表面活性物质 肺表面活性物质蛋白 肺损伤
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益生菌在动物养殖业中应用的研究进展 被引量:9
4
作者 李盈 郭旭 宋伟健 《畜牧与饲料科学》 2019年第3期45-49,共5页
总结了益生菌在动物体内的作用机理及其在动物养殖业中的应用,并阐述了其在未来的应用前景,旨在为益生菌在动物养殖业上的应用提供参考。
关键词 益生菌 宿主 黏附位点 S-层蛋白 胞外多糖
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橘小实蝇对不同寄主果实的产卵偏好及其与寄主果实理化性质的相关性 被引量:9
5
作者 黄爱玲 王小云 +1 位作者 陆温 郑霞林 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期595-602,共8页
为明确橘小实蝇寄主偏好性机理,2018年于广西番石榴主产区测定橘小实蝇对14种不同寄主果实的产卵选择性、对嗜好寄主不同生育期果实的产卵选择性及嗜好寄主不同生育期的果实硬度、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量,并对果实硬度、可溶性糖... 为明确橘小实蝇寄主偏好性机理,2018年于广西番石榴主产区测定橘小实蝇对14种不同寄主果实的产卵选择性、对嗜好寄主不同生育期果实的产卵选择性及嗜好寄主不同生育期的果实硬度、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量,并对果实硬度、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量与橘小实蝇产卵率的相关性进行分析。结果表明,广西番石榴主产区不同月份均有多种不同种类的橘小实蝇潜在寄主果实成熟,但橘小实蝇偏好在台湾珍珠番石榴和西瓜红番石榴上产卵,产卵率分别为43.98%和39.43%,且对两者产卵无显著偏好性;橘小实蝇偏好在这2个番石榴品种的成熟期果实上产卵,产卵率分别为48.01%和44.84%,膨大期次之,产卵率分别为40.75%和41.75%。台湾珍珠番石榴成熟期果实硬度和可溶性蛋白含量均最低,分别为3.18 kg/cm^(2)和0.10 mg/g,均显著低于其他2个生育期;台湾珍珠番石榴成熟期果实可溶性糖含量为32.72%,显著高于其他2个生育期。西瓜红番石榴3个生育期果实硬度、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量的变化规律与台湾珍珠番石榴一致。橘小实蝇在台湾珍珠番石榴和西瓜红番石榴果实上的产卵率与果实硬度和可溶性蛋白含量呈负相关,与可溶性糖含量呈正相关。在生产上番石榴果实膨大期之前为防治该虫的关键窗口期。 展开更多
关键词 橘小实蝇 寄主 产卵偏好 果实硬度 可溶性糖 可溶性蛋白
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病毒类疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒的适用性验证 被引量:9
6
作者 贾丽丽 周荔葆 +10 位作者 王辉 徐宏山 刘苗苗 张月兰 刘欣玉 吴栩涛 张颖 李茂光 赵新 赵玉秀 万艾玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第7期696-698,704,共4页
目的对病毒类疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒进行适用性验证。方法将不同细胞基质制备的乙型脑炎灭活疫苗、人用狂犬病病毒疫苗共16批编盲后,每批疫苗均质等量分为44份,分别分发给3个实验室,用同批ELISA-Vero细胞宿主蛋白检... 目的对病毒类疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒进行适用性验证。方法将不同细胞基质制备的乙型脑炎灭活疫苗、人用狂犬病病毒疫苗共16批编盲后,每批疫苗均质等量分为44份,分别分发给3个实验室,用同批ELISA-Vero细胞宿主蛋白检测试剂盒进行检测,对试剂盒进行适用性验证,考核试剂盒的专属性、精密性、线性和范围等指标。结果3个实验室检测每批样品44次,原代地鼠肾细胞和鸡胚细胞为基质的疫苗检测结果均为阴性,以Vero细胞为基质的疫苗检测结果均为阳性。16份样本44次检测结果的变异系数在7.34%~14.77%之间,均低于15%;相对线性范围在12.5—400ng/ml之间。16份疫苗中6批Vero细胞乙脑疫苗和5批人用狂犬病病毒疫苗检出的细胞宿主蛋白残留量分别在153.3—5850.9ng/ml和1895.7~40625.1ng/ml之间。结论疫苗中Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒具有较好的专属性、精密性和线性,可用于Vero细胞为基质的病毒类疫苗宿主蛋白残留量的检测。 展开更多
关键词 病毒类疫苗 VERO细胞 宿主蛋白 试剂盒 适用性
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A型流感病毒研究进展 被引量:8
7
作者 邹积振 程凯慧 +1 位作者 陈为京 于志君 《安徽农业科学》 CAS 2017年第32期99-102,共4页
从A型流感病毒宿主范围、病毒结构、病毒蛋白种类及功能、流感大流行、禽流感病毒跨种传播等方面综述了目前A型流感病毒研究的最新进展,旨在为今后A型流感病毒的研究提供借鉴和参考。
关键词 A型流感病毒 宿主 病毒蛋白 流感大流行 跨种传播
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与乙肝病毒蛋白相互作用的宿主因子研究进展 被引量:6
8
作者 尧晨光 魏艳红 +1 位作者 寇铮 胡康洪 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第10期949-953,共5页
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是引起肝炎疾病的主要因素。HBV自身基因组极其简单,病毒复制生命过程都是在宿主因子协同作用下完成的。这些协同作用包括病毒包膜蛋白的加工对伴侣的依赖性、细胞因子对核衣壳的动力学修饰和转运... 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是引起肝炎疾病的主要因素。HBV自身基因组极其简单,病毒复制生命过程都是在宿主因子协同作用下完成的。这些协同作用包括病毒包膜蛋白的加工对伴侣的依赖性、细胞因子对核衣壳的动力学修饰和转运、伴侣分子引发的反转录过程、宿主多泡体通路组分促进病毒粒子成熟与分泌以及X蛋白调控机制。本文综述了宿主因子对HBV以上几方面的影响最新研究进展,旨在为新型乙肝药物设计提供基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒(HBV) 宿主因子 伴侣分子 包膜蛋白 病毒粒子 综述
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新型冠状病毒感染与复制的进展 被引量:5
9
作者 何丽红 刘文军 李晶 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1961-1969,共9页
冠状病毒是一类具有囊膜包裹的线性单股正链RNA病毒,在自然界广泛存在,可引起不同程度的呼吸性传染病。新型冠状病毒是一种新发突发病毒,对各类人群均易感。截止目前,该病已经在世界范围内广泛流行,对公共卫生安全构成极大的威胁。文中... 冠状病毒是一类具有囊膜包裹的线性单股正链RNA病毒,在自然界广泛存在,可引起不同程度的呼吸性传染病。新型冠状病毒是一种新发突发病毒,对各类人群均易感。截止目前,该病已经在世界范围内广泛流行,对公共卫生安全构成极大的威胁。文中从冠状病毒及新型冠状病毒的基因组特征、关键蛋白、对宿主的感染和复制的角度加以综述,旨在为获得病毒侵染宿主细胞致病机制的探究提供理论依据,也为特异的抗病毒药物的研发提供基础支持。 展开更多
关键词 新冠病毒 S 蛋白 宿主 血管紧张素转化酶2 非结构蛋白
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Hsp90βis critical for the infection of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus 被引量:1
10
作者 Bo Wang Leike Zhang +3 位作者 Fei Deng Zhihong Hu Manli Wang Jia Liu 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期113-122,共10页
Severe fever with thrombocytopenia syndrome(SFTS)caused by the SFTS virus(SFTSV)is an emerging disease in East Asia with a fatality rate of up to 30%.However,the viral-host interaction of SFTSV remains largely unknown... Severe fever with thrombocytopenia syndrome(SFTS)caused by the SFTS virus(SFTSV)is an emerging disease in East Asia with a fatality rate of up to 30%.However,the viral-host interaction of SFTSV remains largely unknown.The heat-shock protein 90(Hsp90)family consists of highly conserved chaperones that fold and remodel proteins and has a broad impact on the infection of many viruses.Here,we showed that Hsp90 is an important host factor involved in SFTSV infection.Hsp90 inhibitors significantly reduced SFTSV replication,viral protein expression,and the formation of inclusion bodies consisting of nonstructural proteins(NSs).Among viral proteins,NSs appeared to be the most reduced when Hsp90 inhibitors were used,and further analysis showed that their translation was affected.Co-immunoprecipitation of NSs with four isomers of Hsp90 showed that Hsp90βspecifically interacted with them.Knockdown of Hsp90βexpression also inhibited replication of SFTSV.These results suggest that Hsp90βplays a critical role during SFTSV infection and could be a potential target for the development of drugs against SFTS. 展开更多
关键词 Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus(SFTSV) Heat-shock protein 90 Hsp90β host-virus interaction Nonstructural protein
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寄主植物对昆虫抗寒力的影响 被引量:5
11
作者 程文杰 全为礼 +2 位作者 郑霞林 雷朝亮 王小平 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期532-537,共6页
寄主植物是影响昆虫抗寒力的重要因素之一。本文综述了寄主植物对昆虫越冬虫态的发育进度及抗寒物质的积累、抗冻蛋白、冰核物质的形成、虫体含水量等方面的影响。分析了目前研究寄主植物对昆虫抗寒力影响中存在的问题及今后的研究方向。
关键词 昆虫 寄主植物 抗寒力 抗冻蛋白 冰核 含水量
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Sf9昆虫细胞宿主蛋白含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:5
12
作者 王宁 佟雪莲 +4 位作者 边雅静 周思杭 李静 王奔 唐玉龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期716-719,共4页
目的建立Sf9昆虫细胞宿主蛋白(host cell protein,HCP)含量双抗体夹心ELISA检测方法。方法从Sf9昆虫细胞中提取总蛋白,免疫家兔,制备兔抗Sf9细胞总蛋白多克隆抗体,经辛酸-硫酸铵沉淀和CL-4B层析柱纯化后,采用SDS-PAGE分析抗体纯度,间... 目的建立Sf9昆虫细胞宿主蛋白(host cell protein,HCP)含量双抗体夹心ELISA检测方法。方法从Sf9昆虫细胞中提取总蛋白,免疫家兔,制备兔抗Sf9细胞总蛋白多克隆抗体,经辛酸-硫酸铵沉淀和CL-4B层析柱纯化后,采用SDS-PAGE分析抗体纯度,间接ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性;用纯化的多克隆抗体作为包被抗体,采用改良过碘酸钠法将HRP酶标记至纯化的抗体上作为酶标抗体,采用方阵滴定法确定双抗体夹心ELISA方法的最适工作条件。确定该方法的最佳线性范围及最低检测限,验证该方法的准确度及精密度。将表达戊型肝炎ORF2基因的重组杆状病毒感染Sf9细胞,收获病毒培养上清,制备3批纯化的重组蛋白,用建立的方法检测纯化过程中HCP含量的变化,验证其在纯化工艺中的适用性。与商品化试剂盒进行比较,检测两种方法的灵敏度及在制品中的适用性。结果纯化后的兔抗Sf9细胞总蛋白多克隆抗体纯度达90%以上,抗体效价为1∶10 000,可与Sf9细胞蛋白特异性结合。建立的双抗体夹心法ELSA方法最佳抗体包被浓度为20μg/ml,37℃孵育1 h;酶标抗体的工作浓度为1∶200,37℃孵育1 h;TMB室温显色30 min;测定各孔A450值。该方法的最佳线性范围为50~1 600 ng/ml,最低检测为50 ng/ml;不同浓度的Sf9细胞蛋白抗原回收率在87.8%~117%之间,变异系数均小于10%;制备的3批重组蛋白经超滤及层析纯化后,HCP含量均逐渐降低至小于50 ng/ml,纯化工艺可有效去除HCP;与商品化试剂盒比较,该方法更适用于检测戊肝类病毒颗粒样品。结论已成功建立Sf9昆虫细胞残余蛋白含量检测的双抗体夹心法ELSA方法,可用于检测Sf9昆虫细胞/杆状病毒表达系统纯化的重组蛋白中HCP含量。 展开更多
关键词 Sf9昆虫细胞 宿主蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附测定
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蛋白质精准修饰客体分子的方法
13
作者 戴震 刘育 刘涛 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期69-84,共16页
客体分子在蛋白质上的精准修饰为超分子调控蛋白质活性提供了重要技术基础,尤其是带正电荷的芳香官能团客体,可以与葫芦脲高效地结合.然而,该类分子很难通过非天然氨基酸定点修饰技术精准修饰到蛋白质上,而生物正交反应的连接子通常又... 客体分子在蛋白质上的精准修饰为超分子调控蛋白质活性提供了重要技术基础,尤其是带正电荷的芳香官能团客体,可以与葫芦脲高效地结合.然而,该类分子很难通过非天然氨基酸定点修饰技术精准修饰到蛋白质上,而生物正交反应的连接子通常又较大从而影响主客体分子识别.为此,本文通过非天然氨基酸定点修饰技术先将带碘或炔烃官能团的非天然氨基酸定点修饰到目的蛋白质上,再通过钯催化的Suzuki和Sonogashira偶联反应进一步修饰上带有正电荷的吡啶分子,以期与葫芦脲分子高效识别结合,通过对反应条件的筛选插入了带有炔烃官能团的非天然氨基酸,并通过Sonogashira偶联反应在蛋白质表面定点偶联带正电荷的吡啶分子,为主客体化学调控蛋白质奠定了重要的技术基础. 展开更多
关键词 精准修饰 非天然氨基酸 主客体 蛋白质
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Extensive Inter-plant Protein Transfer between Cuscuta Parasites and Their Host Plants 被引量:4
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作者 Nian Liu Guojing Shen +8 位作者 Yuxing Xu Hui Liu Jingxiong Zhang Shalan Li Jing Li Cuiping Zhang Jinfeng Qi Lei Wang Jianqiang Wu 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2020年第4期573-585,共13页
Cuscuta species(dodders)are holoparasites that totally rely on host plants to survive.Although various mobile proteins have been identified to travel within a plant,whether and to what extent protein transfer between ... Cuscuta species(dodders)are holoparasites that totally rely on host plants to survive.Although various mobile proteins have been identified to travel within a plant,whether and to what extent protein transfer between Cuscuta and host plants remain unclear.We found that hundreds to more than 1500 proteins were transferred between Cuscuta and the host plants Arabidopsis and soybean,and hundreds of interplant mobile proteins were even detected in the seeds of Cuscuta and the host soybean.Different hosts bridge-connected by dodder were also found to exchange hundreds of proteins.Quantitatively,the mobile proteins represent a few to more than 10%of the proteomes of foreign plants.Using Arabidopsis plants expressing different reporter proteins,we further showed that these reporter proteins could travel between plants and,importantly,retained their activity in the foreign plants.Comparative analysis between the interplant mobile proteins and mRNAs indicated that the majority of mobile proteins were not de novo synthesized from the translocated mRNAs,but bona fide mobile proteins.We propose that large-scale inter-plant protein translocation may play an important role in the interactions between host plants and dodder and even among the dodder bridge-connected hosts. 展开更多
关键词 DODDER CUSCUTA host plants protein transfer plant-plant interaction
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DEAD-box解旋酶21对猪传染性胃肠炎病毒复制的调控作用
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作者 谢立兰 尹杰 +1 位作者 黄冬蛾 李么明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期215-222,共8页
旨在探究DEAD-box解旋酶21(DDX21)对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)复制的调控作用。首先通过蛋白免疫印迹(Western Blot)分析了TGEV感染对DDX21表达的影响;进一步构建了猪DDX21真核表达质粒以及建立稳定敲低DDX21的PK-15细胞系,运用荧光定量... 旨在探究DEAD-box解旋酶21(DDX21)对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)复制的调控作用。首先通过蛋白免疫印迹(Western Blot)分析了TGEV感染对DDX21表达的影响;进一步构建了猪DDX21真核表达质粒以及建立稳定敲低DDX21的PK-15细胞系,运用荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹、间接免疫荧光(IFA)和半数细胞培养物感染量(TCID 50)探究外源过表达DDX21及敲低DDX21对TGEV体外复制的调控作用;构建一系列DDX21截短突变体真核表达质粒,鉴定了DDX21调控TGEV增殖的关键功能域。Western Blot分析显示,在TGEV WH-1株感染早期,PK-15细胞内源性DDX21蛋白的表达水平显著上调;RT-qPCR、Western Blot、IFA和TCID 50试验显示,超表达DDX21可以显著提高TGEV N基因的mRNA水平、N蛋白的表达及病毒滴度,且呈剂量依赖性,其601-784 aa区域是其影响TGEV复制的关键;与阴性对照相比,在相应DDX21敲低细胞系中TGEV的增殖显著被抑制,而回补试验逆转了DDX21敲低细胞系中TGEV的滴度。该研究首次揭示了猪DDX21对TGEV增殖的促进作用并鉴定了其调控TGEV复制的关键结构域,为今后研究DDX21蛋白的功能及TGEV的致病机理提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 DEAD-box解旋酶21 宿主蛋白 病毒复制
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与脑心肌炎病毒互作的宿主蛋白质及其作用研究进展
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作者 侯正阳 张雅欣 +2 位作者 谢晶莹 刘翊忠 冯若飞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期985-991,共7页
脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,属于小核糖核酸病毒科,心病毒属。EMCV可感染小鼠、猪和牛等多种哺乳动物,也可感染人类,且健康人群中相关抗体阳性率不断升高,具有潜在的大流行风险。病... 脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,属于小核糖核酸病毒科,心病毒属。EMCV可感染小鼠、猪和牛等多种哺乳动物,也可感染人类,且健康人群中相关抗体阳性率不断升高,具有潜在的大流行风险。病毒感染细胞的第一步是与细胞表面受体识别并吸附,通过细胞内吞进入细胞,之后病毒蛋白质在细胞内与宿主蛋白质相互作用来促进自身增殖。随着蛋白质互作与高通量测序技术的发展,已筛选出多种与EMCV互作的宿主蛋白质。本文通过综述与EMCV互作的宿主蛋白质,探究宿主蛋白质促进或抑制病毒侵入的作用机制,讨论EMCV激活细胞内吞、传递细胞内吞信号的最新进展,为EMCV受体蛋白的阐明、理解病毒感染增殖机制、研究病毒宿主特异性与组织嗜性以及新型靶向抗病毒药物的开发和防控策略的制备提供理论参考。 展开更多
关键词 脑心肌炎病毒 病毒周期 宿主蛋白质
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应用酵母双杂交系统筛选与流感病毒NS2蛋白相互作用的宿主蛋白 被引量:3
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作者 邵信媛 朱鹏阳 +7 位作者 罗维玉 赵玉辉 梁立滨 姜丽 陈化兰 胡永浩 李克生 李呈军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期576-580,共5页
流感病毒的NS2蛋白能够介导病毒核糖核蛋白复合体(v RNP)的核输出过程,而且可以调控病毒聚合酶的活性,参与禽流感病毒在哺乳动物宿主体内的适应过程。为鉴定与NS2相互作用的宿主蛋白,本研究利用流感病毒NS2蛋白作为"诱饵"蛋白... 流感病毒的NS2蛋白能够介导病毒核糖核蛋白复合体(v RNP)的核输出过程,而且可以调控病毒聚合酶的活性,参与禽流感病毒在哺乳动物宿主体内的适应过程。为鉴定与NS2相互作用的宿主蛋白,本研究利用流感病毒NS2蛋白作为"诱饵"蛋白,通过经典酵母双杂交系统筛选与其相互作用的宿主蛋白,并利用免疫共沉淀(Co-IP)和GST pull-down方法进一步验证其相互作用关系。结果表明,通过酵母双杂交系统筛选含有Calu-3、A549、THP-1和U251 4种细胞的c DNA文库,共筛选到7种蛋白,分别为HGS、EXOSC4、ZWINT、PRDX3、IRF3、NDUFB9和RMND5B,根据Gene Ontology分析结果表明,这些蛋白分别参与细胞生长发育、细胞代谢和细胞定位等过程。其中对过氧化物氧还酶3(PRDX3)进行了Co-IP和GST pull-down试验证实重组表达的NS2蛋白和PRDX3蛋白在293T细胞中存在特异性的相互作用。本研究为进一步研究两者之间相互作用如何影响NS2蛋白功能以及病毒的复制周期奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 NS2蛋白 酵母双杂交 免疫共沉淀 宿主蛋白
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Multi‑omics reveals that the host‑microbiome metabolism crosstalk of differential rumen bacterial enterotypes can regulate the milk protein synthesis of dairy cows 被引量:2
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作者 Chenguang Zhang Mengya Wang +8 位作者 Huifeng Liu Xingwei Jiang Xiaodong Chen Tao Liu Qingyan Yin Yue Wang Lu Deng Junhu Yao Shengru Wu 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期2496-2513,共18页
Background Dairy cows’lactation performance is the outcome of the crosstalk between ruminal microbial metabo-lism and host metabolism.However,it is still unclear to what extent the rumen microbiome and its metabolite... Background Dairy cows’lactation performance is the outcome of the crosstalk between ruminal microbial metabo-lism and host metabolism.However,it is still unclear to what extent the rumen microbiome and its metabolites,as well as the host metabolism,contribute to regulating the milk protein yield(MPY).Methods The rumen fluid,serum and milk of 12 Holstein cows with the same diet(45%coarseness ratio),parity(2–3 fetuses)and lactation days(120–150 d)were used for the microbiome and metabolome analysis.Rumen metabolism(rumen metabolome)and host metabolism(blood and milk metabolome)were connected using a weighted gene co-expression network(WGCNA)and the structural equation model(SEM)analyses.Results Two different ruminal enterotypes,with abundant Prevotella and Ruminococcus,were identified as type1 and type2.Of these,a higher MPY was found in cows with ruminal type2.Interestingly,[Ruminococcus]gauvreauii group and norank_f_Ruminococcaceae(the differential bacteria)were the hub genera of the network.In addition,differential ruminal,serum and milk metabolome between enterotypes were identified,where the cows with type2 had higher L-tyrosine of rumen,ornithine and L-tryptophan of serum,and tetrahydroneopterin,palmitoyl-L-carnitine,S-lactoylglutathione of milk,which could provide more energy and substrate for MPY.Further,based on the identi-fied modules of ruminal microbiome,as well as ruminal serum and milk metabolome using WGCNA,the SEM analysis indicated that the key ruminal microbial module1,which contains the hub genera of the network([Ruminococcus]gauvreauii group and norank_f_Ruminococcaceae)and high abundance of bacteria(Prevotella and Ruminococcus),could regulate the MPY by module7 of rumen,module2 of blood,and module7 of milk,which contained L-tyrosine and L-tryptophan.Therefore,in order to more clearly reveal the process of rumen bacterial regulation of MPY,we established the path of SEM based on the L-tyrosine,L-tryptophan and related components.The SEM based on the metabolites suggested that[Ruminococcus] 展开更多
关键词 Dairy cows Microbial and host metabolome Milk protein Ruminal microbiota enterotype Structural equation model Weighted gene co-expression network
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新城疫病毒M蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展 被引量:1
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作者 段志强 谢玲玲 +4 位作者 陈佳琪 唐宏 王燕碧 赵采芹 赵佳福 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期32-42,共11页
新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是单股负链不分节段的RNA病毒,其基因组大小约为15.2 kb,编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白。由于NDV基因组较小,不能编码病毒复制需要的所有蛋白,因此必须借助宿主蛋白来完成NDV的生活周期。M蛋... 新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是单股负链不分节段的RNA病毒,其基因组大小约为15.2 kb,编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白。由于NDV基因组较小,不能编码病毒复制需要的所有蛋白,因此必须借助宿主蛋白来完成NDV的生活周期。M蛋白是一种非糖基化膜相关蛋白,在抑制宿主细胞基因转录、调节病毒基因组复制和转录、促进子代病毒粒子组装和出芽等方面具有重要作用。目前,国内外在M蛋白与NDV毒力和复制的关系,以及以M蛋白为核心的病毒样颗粒形成和利用方面取得了较大的研究进展,但是对M蛋白与宿主蛋白相互作用以及M蛋白如何调控NDV的复制研究进展相对缓慢。鉴于M蛋白在NDV复制中的重要作用,本文主要从M蛋白的结构特征和细胞内定位特征,以及M蛋白与宿主蛋白相互作用的功能研究方面进行综述,以期为更好地认识和研究M蛋白在NDV复制和致病性中的作用提供参考。 展开更多
关键词 新城疫病毒 M蛋白 宿主蛋白 蛋白相互作用 病毒复制
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本氏烟中与番茄斑萎病毒N蛋白互作的寄主因子的筛选 被引量:2
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作者 苗淑月 高晓晓 +6 位作者 郑立敏 陈建斌 赵星月 程菊娥 陈莎 章松柏 刘勇 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期221-227,共7页
【目的】番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)是植物多分体负义链RNA病毒的代表性成员。TSWV的N蛋白在病毒感染的寄主植物内表达量高,可能调控病毒对寄主的感病,探究N蛋白通过影响哪些寄主蛋白的表达来完成病毒的侵染,以期为... 【目的】番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)是植物多分体负义链RNA病毒的代表性成员。TSWV的N蛋白在病毒感染的寄主植物内表达量高,可能调控病毒对寄主的感病,探究N蛋白通过影响哪些寄主蛋白的表达来完成病毒的侵染,以期为深入解析寄主蛋白调控病毒的分子机制提供理论基础,为后续有效的防控TSWV提供新的思路。【方法】以TSWV N蛋白作为诱饵蛋白,采用酵母双杂交(Yeast two-hybrid,Y2H)的方法筛选本氏烟内与TSWV N相互作用的寄主蛋白。【结果】共筛选获得15种与TSWV N相互作用的寄主蛋白。【结论】这些介体因子主要参与色素的生物合成、类囊体膜的组装、植物防御反应和核糖体生物发生的过程,调节脂质代谢和细胞功能,可能是翻译调控的辅助蛋白,在植物发育和对非生物胁迫的反应中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒(TSWV) N蛋白 酵母双杂交 寄主蛋白
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