分子印迹在仿生免疫吸附分析中的应用 被引量：4

1

作者 吕春晖 王硕 +2 位作者 方国臻 汤轶伟 王岁楼 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第5期844-851,共8页

分子印迹聚合物是一种含特异性识别位点的高分子材料,具有高稳定性、低成本、制备简单和可重复利用等特点,常被作为仿生抗体应用于免疫分析。本文综述了分子印迹免疫吸附分析(molecularlyimprinted sorbent immunoassays,MIAs)的研究进... 分子印迹聚合物是一种含特异性识别位点的高分子材料,具有高稳定性、低成本、制备简单和可重复利用等特点,常被作为仿生抗体应用于免疫分析。本文综述了分子印迹免疫吸附分析(molecularlyimprinted sorbent immunoassays,MIAs)的研究进展,介绍了以不同标记物为探针的仿生免疫分析方法的发展,着重介绍了均相免疫分析系统与分子印迹聚合物的新型合成方法在MIAs中的应用。最后,本文指出分子印迹聚合物的一些缺点并没有阻碍其在免疫吸附分析中的应用,并对MIAs仍然存在的问题和发展前景进行了分析。 展开更多

关键词 分子印迹聚合物 免疫吸附分析 均相免疫分析 新型合成方法

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均相免疫法甘胆酸试剂的分析性能验证 被引量：9

2

作者 吴定昌 陈丽萍 +1 位作者 黄晓华 卢丽珊 《医学理论与实践》 2016年第14期1847-1849,1855,共4页

目的：对应用于全自动生化分析仪的均相免疫法甘胆酸（Cholylglycine,CG）试剂进行分析性能验证。方法：实验性能验证。采用制造商提供的主校准品、质控品及我院门诊患者血清标本,参考美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP15-A、EP17-A、... 目的：对应用于全自动生化分析仪的均相免疫法甘胆酸（Cholylglycine,CG）试剂进行分析性能验证。方法：实验性能验证。采用制造商提供的主校准品、质控品及我院门诊患者血清标本,参考美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP15-A、EP17-A、EP6-A、EP7-P方案,于生化分析仪对该项目的正确度、精密度、定量检测下限（LoQ）、线性范围、干扰因素进行验证,同时与放射免疫法（RIA）CG试剂进行比较。结果：正确度验证显示测定值与标示值偏倚分别为-3.4%、1.33%。自动生化分析仪的LoQ为0.30mg/L;线性范围为0.30~56.86mg/L（R2=0.992 3）;重复精密度为4.3%、3.4%;中间精密度为5.3%、4.8%,均小于厂家声明的不精密度。3种干扰物在试验浓度内（胆红素≤39.2mg/dl,血红蛋白≤194mg/dl及甘油三酯≤285mg/dl）的偏差分别为7.2%、5.9%、-8.51%。该方法与放射免疫法比较回归方程为Y=0.964 3X＋0.025 3,R2=0.996 6,两种方法偏倚小于总允许误差。结论：均相免疫法测定CG,重复性好,线性范围宽,抗干扰能力强,与放射免疫分析法甘胆酸试剂具有高度相关性,适合在生化分析仪上进行自动分析,可满足临床测试要求。 展开更多

关键词 甘胆酸 均相免疫法 放射免疫法 性能验证

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基于光激化学发光均相免疫检测技术的黄曲霉毒素检测方法研究 被引量：6

3

作者 吴震 宗婧 +2 位作者 李晨曦 陈文亮 徐可欣 《光学技术》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期117-123,共7页

黄曲霉毒素是一种毒性极强的生物毒素,广泛存在于各种农产品与食品中,对公众健康危害极大。提出了一种基于光激化学发光均相免疫检测技术的黄曲毒素B1检测方法,利用生物素亲和及抗原与抗体免疫反应,形成受体微球—AFB1-BSA完全抗原—AFB... 黄曲霉毒素是一种毒性极强的生物毒素,广泛存在于各种农产品与食品中,对公众健康危害极大。提出了一种基于光激化学发光均相免疫检测技术的黄曲毒素B1检测方法,利用生物素亲和及抗原与抗体免疫反应,形成受体微球—AFB1-BSA完全抗原—AFB1单抗体—供体微球的聚合体系,在激发光作用下产生化学发光反应,根据化学发光值可定量分析样品中黄曲霉毒素浓度。通过分析并优化反应条件,包括各种反应物浓度、反应体系体积、反应温度与时间等,可实现最低检测限0.048ng/mL、最低定量限0.22ng/mL、批内与批间变异系数均小于10%、植物油样品中AFB1的加标回收率在87～105%之间。方法灵敏度高、特异性强、免清洗、检测速度快,在真菌毒素现场快速检测领域具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 光激化学发光 均相免疫 黄曲霉素B1 竞争法

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癌胚抗原毛细管电泳-化学发光均相免疫分析 被引量：3

4

作者 吴柯 章竹君 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期102-105,共4页

设计了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳-化学发光检测均相免疫分析新方法。采用四苯硼酸钠增强luminol-H2O2-HRP体系化学发光的原理,化学发光检测经毛细管电泳分离的,用辣根过氧化物酶（HRP）标记的癌胚抗体及免疫复合物。测定癌... 设计了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳-化学发光检测均相免疫分析新方法。采用四苯硼酸钠增强luminol-H2O2-HRP体系化学发光的原理,化学发光检测经毛细管电泳分离的,用辣根过氧化物酶（HRP）标记的癌胚抗体及免疫复合物。测定癌胚抗原的线性范围2.0-80.0μg/L（R=0.9921）,检出限为0.1μg/L（绝对检出限为0.75 fg）。 展开更多

关键词 毛细管电泳 化学发光 均相免疫分析 癌胚抗原

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前列腺特异抗原光激发化学发光免疫检测方法的建立 被引量：3

5

作者 刘志永 任杰 +3 位作者 李婵 李晓蕾 陈新瑛 李会强 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期117-119,共3页

目的建立前列腺特异抗原(Prostate specific antigen,PSA)光激发化学发光免疫(Light induced chemilumines-cent immunoassay,LICA)定量检测方法。方法用PSA多克隆抗体包被受体微粒,PSA单克隆抗体标记生物素,两者与链霉亲和素包被的供... 目的建立前列腺特异抗原(Prostate specific antigen,PSA)光激发化学发光免疫(Light induced chemilumines-cent immunoassay,LICA)定量检测方法。方法用PSA多克隆抗体包被受体微粒,PSA单克隆抗体标记生物素,两者与链霉亲和素包被的供体微粒共同组成检测试剂检测PSA,优化测定条件并对方法进行验证。分别采用本方法与Roche公司电化学发光免疫分析法对82份临床标本进行检测,并进行比较分析。结果本方法的分析灵敏度为0.31 ng/ml;批内变异系数为4.66%～6.75%,批间变异系数为5.68%～8.42%;回收率为95.1%～105.2%。两种方法具有较好的相关性,其R2为0.981 5。结论建立的均相化学发光免疫测定方法能够用于血清PSA的定量测定,且其性能指标符合临床要求。 展开更多

关键词 前列腺特异抗原 均相免疫分析 光激发化学发光免疫

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超敏妊娠相关血浆蛋白A均相化学发光免疫检测方法的建立 被引量：2

6

作者 王瑞 曾昭伟 +3 位作者 李会强 侯丽英 王雪颖 周玉章 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第4期507-510,共4页

目的建立有关急性冠脉综合征(ACS)患者血清中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的均相化学发光免疫检测方法。方法使用PAPP-A抗体与受体微球和生物素连接,以双抗体夹心法,生物素化抗体和受体微球与血清中PAPP-A结合,以鲁米诺氧途径免疫分析(LO... 目的建立有关急性冠脉综合征(ACS)患者血清中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的均相化学发光免疫检测方法。方法使用PAPP-A抗体与受体微球和生物素连接,以双抗体夹心法,生物素化抗体和受体微球与血清中PAPP-A结合,以鲁米诺氧途径免疫分析(LOCI)检测PAPP-A浓度。评价此方法各项性能指标。数据分析使用ELISA Calc软件。结果本研究PAPP-A检测方法灵敏度为0.55 m U/L,回收率为95%~100%;线性、稳定性及特异性良好;重复性批内变异系数(CV)<10%,批间CV<15%;检测不易受血红蛋白、甘油三酯和胆红素的干扰。该方法与时间分辨荧光免疫方法(TRFIA)进行相关分析(r=0.990,P<0.05)。检测104例正常健康人(男/女为43/61,年龄为24岁~69岁)血清PAPP-A,初步推算正常参考范围为1.60 m U/L^25.12 m U/L。结论本研究所建立的超敏PAPP-A检测方法准确性好,灵敏度、回收率、特异性较高,与TRFIA相关性良好,评价了其应用于临床检测的可行性,并为参考范围的确定提供了一定的依据。 展开更多

关键词 均相免疫分析 鲁米诺氧途径免疫分析 急性冠脉综合征 妊娠相关血浆蛋白A 检测方法

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血清催乳素光激化学发光法的建立及性能评价 被引量：2

7

作者 任杰 刘胜林 李会强 《临床检验杂志》 CAS 2019年第7期495-498,共4页

目的基于光激化学发光技术平台初步建立血清催乳素(PRL)的分析方法,并评估其性能指标。方法将发光纳米微球和生物素分别标记于一对人PRL单抗,两者与血清中待检PRL、链霉亲合素标记的感光微球(通用感光溶液)在均相条件下形成双抗体夹心... 目的基于光激化学发光技术平台初步建立血清催乳素(PRL)的分析方法,并评估其性能指标。方法将发光纳米微球和生物素分别标记于一对人PRL单抗,两者与血清中待检PRL、链霉亲合素标记的感光微球(通用感光溶液)在均相条件下形成双抗体夹心的检测体系,对该检测体系的性能指标和相关性进行评价。结果本方法的批内变异系数和日间变异系数分别为4.60%和5.25%;功能灵敏度为2.48μIU/mL,可报告范围为2.48~4 240μIU/mL;回收试验加入浓度为42.2、424、4 240μIU/mL PRL标准品时的回收率为96.25%~102.93%;胆红素<20 mg/dL、血红蛋白<200 mg/dL、三酰甘油<3 000 mg/dL、生物素<20 ng/mL时,均无干扰现象发生;该方法与贝克曼Unicel Dxi 800 Access 2增强化学发光酶免疫分析法具有良好的相关性。结论光激化学发光法检测血清PRL的方法具有良好的分析性能,可满足临床诊断需求。 展开更多

关键词 催乳素 光激化学发光分析 均相免疫分析

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基于纳米金多光子激发荧光的均相免疫检测新方法 被引量：2

8

作者 李慧 孙德恩 刘志洪 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期637-643,共7页

本文报道了粒径小于20nm的球形纳米金颗粒(AuNSs)的强多光子激发荧光,这主要归因于多光子激发过程中的高光子密度引起的局域场增强效应。AuNSs的多光子荧光与影响局域场增强效应的颗粒尺寸及团聚程度有关。基于吸附在纳米金表面的BSA与A... 本文报道了粒径小于20nm的球形纳米金颗粒(AuNSs)的强多光子激发荧光,这主要归因于多光子激发过程中的高光子密度引起的局域场增强效应。AuNSs的多光子荧光与影响局域场增强效应的颗粒尺寸及团聚程度有关。基于吸附在纳米金表面的BSA与Anti-BSA的作用引起纳米金团聚导致其多光子荧光增强,结合近红外区的多光子激发可以避免生物分子自发荧光及散射光的干扰这一优势,建立了一种高灵敏、高选择性检测血清中Anti-BSA的均相免疫分析方法。检测的线性范围从1.16nmol/L到35nmol/L,检出限为0.08nmol/L。而且通过在纳米金颗粒表面包覆硅壳实现了纳米金的荧光增强及表面功能化,由此可以建立一系列基于纳米金多光子荧光的分析检测方法。 展开更多

关键词 多光子激发荧光 球形纳米金 均相免疫分析 Anti-BSA 硅包球形纳米金

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荧光共振能量转移体系的均相免疫分析对前列腺癌诊断运用价值初探 被引量：2

9

作者 胡丹青 刘军 +5 位作者 杨爱平 杨国绘 杨文娟 雷和月 全建军 范祎 《中国性科学》 2016年第1期19-21,共3页

目的：初步探索荧光共振能量转移体系（FRET）的均相免疫分析对前列腺癌诊断运用价值。方法：选择2013年5月至2014年9月我院收治的182例前列腺疾病患者,其中有31例患者为前列腺癌（PCa）,151例患者为前列腺增生（BPH）。选择同期在我院... 目的：初步探索荧光共振能量转移体系（FRET）的均相免疫分析对前列腺癌诊断运用价值。方法：选择2013年5月至2014年9月我院收治的182例前列腺疾病患者,其中有31例患者为前列腺癌（PCa）,151例患者为前列腺增生（BPH）。选择同期在我院进行健康体检的122例男性健康人群。采取FRET的均相免疫分析法对游离前列腺特异抗原（f PSA）和总前列腺特异抗原（t PSA）指标进行测定。分别观察三组人群的f PSA、t PSA、f/t PSA三项指标。依据PCa患者检测的TPSA值,采用TPSA〈4μg/L、4~10μg/L以及〉10μg/L三组指标,将其患者分为A、B、C组,从中对其三组之间的f PSA、t PSA、f/t PSA三项指标进行比较。当TPSA〈4μg/L时,比较正常人群和前列腺患者之间的三项指标。结果：三组人群的f PSA、t PSA、f/t PSA三项指标均存在明显的差异,差异具有统计学意义（P〈0.05）。三组患者的f PSA、t PSA、f/t PSA三项指标均有明显的差异,差异具有统计学意义（P〈0.05）。前列腺癌患者和正常人群t PSA〈4μg/L的f PSA、t PSA、f/t PSA指标比较存在明显的差异,具有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用FRET的均相免疫分析法对f PSA和t PSA指标进行检测,能够准确、快速的提供有效的临床依据,在前列腺癌诊断中具有较高的诊断价值,值得广泛推广使用。 展开更多

关键词 荧光共振能量转移 均相免疫分析 前列腺癌

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基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法 被引量：2

10

作者 吴灿军 律清宇 +3 位作者 郝淮杰 赵成娜 郑玉玲 姜永强 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第8期689-693,共5页

目的建立一种基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法并用于检测降钙素原(PCT)重组抗原。方法以PCT单克隆抗体偶联铕离子荧光微球为检测抗体,另一株PCT单克隆抗体偶联生物素作为固相抗体,建立一种通过表面修饰有链霉亲和素... 目的建立一种基于时间分辨荧光纳米颗粒的磁分离均相免疫分析方法并用于检测降钙素原(PCT)重组抗原。方法以PCT单克隆抗体偶联铕离子荧光微球为检测抗体,另一株PCT单克隆抗体偶联生物素作为固相抗体,建立一种通过表面修饰有链霉亲和素的磁珠分离铕离子荧光微球-检测抗体-降钙素原-固相抗体-生物素复合物的均相免疫分析方法。用该法检测PCT重组抗原,通过Sigma Plot分析该法的最低检测限。结果 PCT重组抗原的标准曲线匹配二次函数,函数方程为Y=19170.12+75493.74X-26.00X2(r=0.9986),PCT重组抗原检测灵敏度为0.04 ng/ml。结论铕离子荧光微球可作为标记物应用于磁分离均相免疫分析方法,并在PCT重组抗原检测中获得较高的检测灵敏度。 展开更多

关键词 降钙素原 时间分辨荧光法 铕离子荧光微球 磁珠 均相检测

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微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化 被引量：2

11

作者 张艺 黄飚 +2 位作者 钮伟民 赵灿培 金坚 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期432-437,共6页

目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA）,用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,... 目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA）,用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006～5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。 展开更多

关键词 微囊藻毒素 微囊藻毒素-LR 化学发光测定法 均相免疫分析

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克隆酶均相免疫技术测定胃癌患者血清和粪便P53蛋白的研究 被引量：1

12

作者 沈建根 林洁 +1 位作者 朱永良 张钧 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期773-776,共4页

目的评价检测P53蛋白的克隆酶均相免疫分析方法的可行性。方法通过基因重组技术构建β半乳糖苷酶亚单位EA、ED及EDP53融合蛋白的原核表达质粒,建立克隆酶均相免疫技术,测定胃癌、非胃癌和正常对照组血清、粪便P53蛋白含量,并与酶联免疫... 目的评价检测P53蛋白的克隆酶均相免疫分析方法的可行性。方法通过基因重组技术构建β半乳糖苷酶亚单位EA、ED及EDP53融合蛋白的原核表达质粒,建立克隆酶均相免疫技术,测定胃癌、非胃癌和正常对照组血清、粪便P53蛋白含量,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)比较。结果31例胃癌患者的血清、粪便P53蛋白阳性率高于39例非胃癌患者和17名健康献血员(均P<001)。11例胃癌患者血清P53和免疫组化均阳性,且免疫复合物均以P53IgG形式存在,对5例胃癌血清动态观察表明,术后1周P53蛋白仍阳性,术后1个月显著下降,并在术后3个月消失。检测10份不同浓度的样本,表明克隆酶均相免疫法与ELISA具有较好的相关性。结论建立的克隆酶均相免疫技术可用于P53蛋白的测定,P53蛋白可作为判断胃癌预后的一项辅助诊断指标。 展开更多

关键词 克隆酶均相免疫技术 含量测定 胃癌 血清检测 粪便检测 P53蛋白

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血清糖链抗原-125均相化学发光免疫检测方法的初建 被引量：1

13

作者 赵爽 周宇捷 +2 位作者 相平 李会强 孙辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期434-437,共4页

目的建立血清糖链抗原-125(CA125)光激化学发光免疫分析的检测方法。方法用兔抗人CA125多克隆抗体包被受体微球,1株单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲和素包被的供体微球共同组成试剂检测人血清CA125,利用棋盘滴定法确定受体微球及生物... 目的建立血清糖链抗原-125(CA125)光激化学发光免疫分析的检测方法。方法用兔抗人CA125多克隆抗体包被受体微球,1株单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲和素包被的供体微球共同组成试剂检测人血清CA125,利用棋盘滴定法确定受体微球及生物素化抗体的最适浓度并进行方法学评价。结果本方法的批内及批间精密度为3.93%～4.40%和5.60%～8.39%;功能灵敏度为3.91 U/ml,分析灵敏度为3.49 U/ml;回收率为105.14%～108.74%;特异性分析中溶血、黄疸和类风湿疾病的干扰率均<10%;本文建立方法的CA125参考值上限为26.53 IU/ml;采用本方法检测50份临床标本结果与Roche Elecsys 2010电化学发光检测法的结果相关系数为0.974。结论本研究建立的方法能够用于定量检测血清CA125,且具有免洗涤、灵敏度强、准确性高、重复性好、便于操作等优点。 展开更多

关键词 糖链抗原125 均相免疫分析 检测方法 光激化学发光

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血清肌钙蛋白-I均相化学发光免疫检测方法的建立 被引量：1

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作者 李玉芹 牛文彦 +5 位作者 朱黎娜 周宇捷 相平 侯丽英 贾克刚 李会强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期1640-1643,共4页

目的：采用光激化学发光免疫分析技术建立血清肌钙蛋白-I（cTnI）均相免疫检测方法。方法：使用兔抗人cTnI多克隆抗体包被受体微球,羊抗人cTnI单克隆抗体进行生物素化与链霉亲和素包被的供体微球共同构成检测试剂,优化反应条件并进行方... 目的：采用光激化学发光免疫分析技术建立血清肌钙蛋白-I（cTnI）均相免疫检测方法。方法：使用兔抗人cTnI多克隆抗体包被受体微球,羊抗人cTnI单克隆抗体进行生物素化与链霉亲和素包被的供体微球共同构成检测试剂,优化反应条件并进行方法学评价。结果：本方法快速、敏感,检测时间为17.5 min;分析灵敏度为0.045 ng/mL,功能灵敏度为0.053 ng/mL;回收率为104.96%～108.21%;批内精密度为3.88%～5.53%,批间精密度为7.60%～8.75%;特异性分析中各种内源性物质的干扰率均〈10%;本方法测得的cTnI正常参考值上限为1.05 ng/mL。与直接化学发光检测法具有良好的相关性（r2=0.979）。结论：本研究建立的方法能够用于定量检测血清cTnI,该方法具有均相、免清洗分离等优点,为临床提供了一个便捷高敏的检测平台。 展开更多

关键词 肌钙蛋白-I 均相免疫分析 检测方法 光激化学发光

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孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立

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作者 郝颖新 侯丽英 +2 位作者 周宇捷 张月香 李会强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期917-920,共4页

目的：建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法：采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记，兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球，与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价检测... 目的：建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法：采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记，兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球，与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价检测性能。结果：本方法的批内及批间精密度为5.91％～7.94％和6.14％～9.69％；分析灵敏度2.8 mU／L，功能灵敏度4.6 mU／L，在2.8～8000 mU／L范围内线性良好；回收率为96.7％～100.3％，通过干扰性实验分析溶血、黄疸和脂血的干扰率均＜10％；当PAPP-A浓度高达8000 mU／L时，无Hook效应；本文所建立方法检测50份临床标本，结果与时间分辨荧光分析法的结果相关系数为0.989。结论：本研究建立的方法能够用于孕妇血清PAPP-A的定量测定，检测性能符合临床诊断试剂的要求。 展开更多

关键词 妊娠相关蛋白A 鲁米诺氧通道免疫测定 均相发光免疫分析 定量分析

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血清tIgE竞争性光激化学发光定量检测方法的建立及应用

16

作者 边颖 魏刚 +3 位作者 李军普 崔亚琼 魏殿军 李会强 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第1期1-4,13,共5页

目的基于光激化学发光分析(LICA),采用竞争免疫分析模式建立血清总免疫球蛋白E(tIgE)的定量检测方法。方法将抗人IgE抗体包被发光微球,生物素标记人IgE纯品,与血清原液(标准品)及包被有链霉亲合素的感光微球构成完整的分析体系,并对该... 目的基于光激化学发光分析(LICA),采用竞争免疫分析模式建立血清总免疫球蛋白E(tIgE)的定量检测方法。方法将抗人IgE抗体包被发光微球,生物素标记人IgE纯品,与血清原液(标准品)及包被有链霉亲合素的感光微球构成完整的分析体系,并对该方法进行条件优化、性能评估和相关性分析。结果本方法的重复性、期间精密度分别为5.50%~7.73%和6.45%~9.90%;功能灵敏度为12.65 IU/mL;回收试验回收率在104.15%~109.37%之间;总胆红素、血红蛋白、三酰甘油对不同浓度tIgE样本的干扰率在-4.49%~8.46%之间;在临床111例血清标本tIgE的检测中,该方法与Beckman Coulter IMMAGE 800免疫透射比浊法具有良好的相关性(r2=0.959)。结论本研究建立的血清tIgE定量检测方法性能良好,可满足临床应用的基本要求。 展开更多

关键词 总免疫球蛋白E 光激化学发光分析 均相免疫分析 竞争性分析 定量分析

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癌胚抗原毛细管电泳-化学发光均相免疫分析

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作者 吴柯 章竹君 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期43-46,共4页

建立了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳．化学发光检测的均相免疫分析新方法。采用四苯硼钠增强luminol—H2O2-HRP体系化学发光的原理，化学发光检测经毛细管电泳分离的，用辣根过氧化物酶（HRP）标记的癌胚抗体及免疫复合物。测... 建立了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳．化学发光检测的均相免疫分析新方法。采用四苯硼钠增强luminol—H2O2-HRP体系化学发光的原理，化学发光检测经毛细管电泳分离的，用辣根过氧化物酶（HRP）标记的癌胚抗体及免疫复合物。测定癌胚抗原的线性范围2．0～80．0ug／L（R=0．9921），检出限为0．1ug／L（绝对检出限为0．75fg）。 展开更多

关键词 毛细管电泳 化学发光 均相免疫分析 癌胚抗原

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氯霉素驱动的β-半乳糖苷酶互补体系的构建

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作者 李黄金 陈伟 +4 位作者 赵林 邱映丽 赖琼英 林冬霞 郭志云 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2010年第6期481-485,共5页

目的构建氯霉素驱动的β-半乳糖苷酶(β-gal)互补体系,以期建立氯霉素残留检测用非竞争性均相酶互补免疫分析系统(OS-ECIA)。方法从大肠杆菌DH5α和BL21株分别克隆β-galΔα和Δω基因,采用重叠延伸PCR组装含抗氯霉素抗体可变区的互补... 目的构建氯霉素驱动的β-半乳糖苷酶(β-gal)互补体系,以期建立氯霉素残留检测用非竞争性均相酶互补免疫分析系统(OS-ECIA)。方法从大肠杆菌DH5α和BL21株分别克隆β-galΔα和Δω基因,采用重叠延伸PCR组装含抗氯霉素抗体可变区的互补肽融合蛋白,在T7启动子驱动下于大肠杆菌宿主株中表达,表达产物纯化与复性后进行酶互补活性分析。结果成功克隆和高效表达融合肽基因VH-CAP-Δα和VL-CAP-Δω,表达产物为包涵体蛋白,经纯化和复性后呈现特征性酶学互补活性,且酶活性呈现氯霉素依赖性增加。结论成功构建氯霉素驱动的β-gal互补体系。 展开更多

关键词 氯霉素 抗体可变区 Β-半乳糖苷酶 互补肽 均相免疫分析

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光激化学发光分析法定性检测血清CMV-IgM抗体

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作者 刘浩 李军普 +3 位作者 崔亚琼 于洋 张月香 李会强 《天津医科大学学报》 2020年第3期261-265,共5页

目的:建立一种基于光激化学发光分析(LiCA)技术定性检测血清CMV-IgM抗体的新方法。方法:利用CMV抗原包被的发光微球,生物素标记的鼠抗人IgM抗体以及链霉亲和素包被的感光微球共同构成完整的分析体系,优化反应缓冲液、抗原抗体工作浓度... 目的:建立一种基于光激化学发光分析(LiCA)技术定性检测血清CMV-IgM抗体的新方法。方法:利用CMV抗原包被的发光微球,生物素标记的鼠抗人IgM抗体以及链霉亲和素包被的感光微球共同构成完整的分析体系,优化反应缓冲液、抗原抗体工作浓度和待检血清稀释比例,并进行方法学评价和临床结果比对。结果:本方法的批内和批间变异系数为5.3%~6.1%和6.9%~9.8%,均小于10%;ROC曲线分析显示,曲线下面积为0.997,灵敏度为100%,特异度为98.9%;在100例血清样本的检测中,本方法与LIAISON检测结果符合率为95.0%。结论:成功建立了LiCA间接法反应模式定性检测CMV-IgM抗体的方法。该检测方法操作简单、快速、灵敏度高,有潜在的临床应用前景。 展开更多

关键词 CMV-IgM抗体 产前筛查 光激化学发光分析 均相免疫分析 定性分析

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HBeAb光激化学发光免疫分析试剂盒的研制 被引量：5

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作者 马强 贺安 +5 位作者 董志宁 刘天才 邹丽萍 林冠峰 李明 吴英松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期810-812,共3页

目的研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒。方法采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒。结果自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003NCU/ml,可测范围为0.003-16NCU/ml。批内与批间... 目的研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒。方法采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒。结果自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003NCU/ml,可测范围为0.003-16NCU/ml。批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBcAb无交叉反应。使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961)。结论自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒e抗体 光激化学发光 试剂盒

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