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TRIM5α对肝癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
1
作者 余庆 张文美 +3 位作者 孙迎迎 龚媛媛 李东升 王小莉 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2016年第2期103-108,共6页
目的探讨TRIM5α（Tripartitemotif5alpha）对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建TRIM5α质粒，通过酶切、PCR和测序鉴定。将TRIM5α质粒转入人肝癌细胞株（HepG2），通过PCR、Westernblot检测TRIM5α的表达。采用RTCA仪器实时检测... 目的探讨TRIM5α（Tripartitemotif5alpha）对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建TRIM5α质粒，通过酶切、PCR和测序鉴定。将TRIM5α质粒转入人肝癌细胞株（HepG2），通过PCR、Westernblot检测TRIM5α的表达。采用RTCA仪器实时检测细胞的增殖情况，采用流式细胞仪检测细胞的凋亡，Westernblot检测凋亡相关蛋白的表达。结果本研究成功构建了TRIM5α质粒，RT—PCR和Westernblot的结果显示构建的TRIM5α质粒可转入HepG2细胞中并且能够抑制肝癌细胞的增殖促进其凋亡。TRIM5ct主要是通过抑制Bcl-2的表达，激活Caspase-3的表达从而引起肝癌细胞凋亡，并且TRIM5α还可抑制肝癌细胞体内成瘤。结论TRIM5α可抑制人肝癌细胞的增殖促进其凋亡并抑制体内成瘤，为进一步研究其作用机制及其临床应用奠定基础。 展开更多
关键词 TRIM5α 肝癌细胞 增殖 凋亡
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三氯化镧对CBRH-7919细胞CyclinD1和CDK4蛋白表达的影响 被引量：1
2
作者 姜文华 陈东 +1 位作者 郝利铭 孟晓婷 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2007年第2期136-138,共3页
背景与目的:研究三氯化镧(LaCl3)对大鼠肝癌细胞Cyclin D1和CDK4蛋白表达的影响。材料与方法:采用体外培养大鼠肝癌细胞株CBRH-7919,分别加入0.01、0.10、1.00mmol/L LaCl3培养1、3、5d后观察CBRH-7919细胞生长变化;运用流式细胞术、MT... 背景与目的:研究三氯化镧(LaCl3)对大鼠肝癌细胞Cyclin D1和CDK4蛋白表达的影响。材料与方法:采用体外培养大鼠肝癌细胞株CBRH-7919,分别加入0.01、0.10、1.00mmol/L LaCl3培养1、3、5d后观察CBRH-7919细胞生长变化;运用流式细胞术、MTT实验和免疫细胞化学检测与G1期调控有关的CyclinD1和CDK4的变化情况,以培养液中不加LaCl3体外培养CBRH-7919作为对照。结果:0.10、1.00mmol/LLaCl3组培养后3、5d对细胞的生长均具有抑制作用,与对照组比差异具有统计学意义(P<0.01);G0/G1期细胞百分数均有显著性增加,与对照组比差异均具有统计学意义(P<0.01);CyclinD1、CDK4阳性表达均显著减弱,与对照组比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:LaCl3可通过下调CyclinD1和CDK4,使肿瘤细胞从G1期进入S期受阻,从而抑制CBRH-7919细胞的生长。 展开更多
关键词 稀土元素 三氯化镧 肝癌细胞细胞周期 CYCLIND1 CDK4
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去甲肾上腺素通过PI3K/Akt信号通路上调Sox4表达促进肝癌细胞增殖 被引量：4
3
作者 杨大鹏 宦洪波 +3 位作者 张亮 温旭东 吴黎雳 夏锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期821-826,共6页
目的探讨去甲肾上腺素对肝癌细胞自我更新能力的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR和Western blot检测去甲肾上腺素对肝癌细胞(Huh7、PLC)中CD133表达水平的影响;肿瘤细胞球形成实验以及克隆形成实验检测去甲肾上腺素和哌唑嗪对肝... 目的探讨去甲肾上腺素对肝癌细胞自我更新能力的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR和Western blot检测去甲肾上腺素对肝癌细胞(Huh7、PLC)中CD133表达水平的影响;肿瘤细胞球形成实验以及克隆形成实验检测去甲肾上腺素和哌唑嗪对肝癌细胞自我更新能力的作用;实时荧光定量PCR和Western blot检测去甲肾上腺素(10μmol/L)和哌唑嗪(5μmol/L)对肝癌细胞中干性相关基因表达的影响,并检测相关的信号通路。结果去甲肾上腺素使Huh7和PLC肝癌细胞中的CD133表达升高;去甲肾上腺素处理Huh7和PLC肝癌细胞后的成球率较对照组明显上升,哌唑嗪处理后明显降低(P<0.05);在克隆形成实验中,去甲肾上腺素处理Huh7和PLC肝癌细胞的后,克隆形成率高于哌唑嗪组和对照组(P<0.05);与对照组和哌唑嗪组相比,去甲肾上腺素组中Sox4基因表达明显升高,同时p-Akt表达相较于哌唑嗪和对照组相比也明显上调(P<0.05)。结论去甲肾上腺素激动肝癌细胞中α肾上腺素能受体,通过激活PI3K/Akt信号通路上调肝癌细胞中Sox4基因表达,从而提高肝癌细胞自我更新的能力。 展开更多
关键词 肝癌细胞增殖 去甲肾上腺素 Sox4 自我更新
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大鼠肝癌细胞系N1不同途径造模及比较
4
作者 罗霞 阮思蓓 +4 位作者 郭庆喜 刘勇 唐红 唐晓琴 唐明希 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期193-196,共4页
目的观察大鼠肝癌细胞系N1经肝、脾原位接种后肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生与转移等情况,比较及筛选适宜的HCC N1发生及肺转移动物模型。方法 N1细胞进行体外培养。24只8周龄雌性BALB/c A裸鼠随机分为2组(12只/组)并... 目的观察大鼠肝癌细胞系N1经肝、脾原位接种后肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生与转移等情况,比较及筛选适宜的HCC N1发生及肺转移动物模型。方法 N1细胞进行体外培养。24只8周龄雌性BALB/c A裸鼠随机分为2组(12只/组)并分别进行N1的肝、脾原位接种,观察并比较两组间小鼠的存活率,肝、脾成瘤及肝、肺转移率等肿瘤生物及病理学特征。结果 N1细胞肝原位接种组肝成瘤率为100%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织有不同程度的粘连侵袭,肺及肺门淋巴结转移率分别为44%和22%,未见脾转移。N1细胞脾原位接种组脾成瘤率为64%,肝转移率为91%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织亦有不同程度的侵袭粘连,肺及肺门淋巴结转移率均为18%。结论 N1细胞肝、脾原位接种均易成瘤,是良好的HCC发生、发展及相关干预的动物模型,其中,肝原位接种鼠可能更适合于HCC发生与肺转移机制及药物干预等研究。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 N1肝癌细胞系 肿瘤发生 肿瘤转移 原位接种 动物模型
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人树突状细胞与肝癌细胞系HLE融合细胞的构建 被引量：14
5
作者 关心 彭吉润 冷希圣 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期465-467,共3页
目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC... 目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC和HLE细胞,以50%聚乙二醇和10%二甲基亚砜为融合剂,构建可供流式细胞仪快速筛选的融合细胞。结果成功构建具有红、绿双色荧光的人源DC与HLE的融合细胞,融合率为16.8%。结论利用PKH67GL和PKH26GL为标记,可获得便于快速识别和筛选的DC与肝癌细胞的融合细胞,为使用融合DC疫苗治疗肝癌奠定了基础。 展开更多
关键词 人树突状细胞 肝癌细胞系HLE细胞 融合细胞 HLE细胞 肝癌细胞系 人外周血单核细胞 荧光染料 快速筛选 TNF-α 二甲基亚砜
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不同铂类药物对人肝癌细胞株抑制作用的实验研究 被引量：30
6
作者 钱军 秦叔逵 +3 位作者 杨爱珍 徐海军 华海清 刘沈林 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2009年第5期414-417,共4页
目的:顺铂(PDD)是原发性肝癌的基本化疗药物之一,但是毒性显著,应用明显受限;如今多种新型铂类药物已经陆续上市,因此,本研究拟观察和比较不同的铂类药物在体外实验中对于肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721和Bel-7402的抑制作用,为临床上选择... 目的:顺铂(PDD)是原发性肝癌的基本化疗药物之一,但是毒性显著,应用明显受限;如今多种新型铂类药物已经陆续上市,因此,本研究拟观察和比较不同的铂类药物在体外实验中对于肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721和Bel-7402的抑制作用,为临床上选择恰当的铂类药物治疗肝癌提供参考依据。方法:采用MTT法检测加入不同铂类药物后对于肝癌细胞的抑制作用,观察给药前、后肝癌细胞的形态学变化,计算半数抑制浓度,绘制肝癌细胞生长曲线。流式细胞术分析给药后细胞周期的变化。结果:给予铂类药物后肝癌细胞生长减慢,胞浆内颗粒增多;随着给药时间延长,对肝癌细胞的抑制作用逐渐增强。对于肝癌细胞的抑制作用,PDD和奥沙利铂(OXA)强于洛铂(LBP)、奈达铂(NDP)和卡铂(CBP)。流式细胞术分析不同铂类药物对细胞周期的影响趋于一致。结论:在体外研究中,铂类药物对于肝癌细胞具有抑制作用,PDD仍为基本用药,而OXA具有明显的优势,可推荐在临床上用于治疗原发性肝癌。 展开更多
关键词 肝癌细胞株 顺铂 奥沙利铂 洛铂 奈达铂 卡铂 体外实验
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