慢性丙型肝炎患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒RNA检测 被引量：12

1

作者 于建国 侯宪荣 +2 位作者 潘伟 张光曙 周秀梅 《华人消化杂志》 1998年第7期580-581,共2页

目的了解慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况．方法用ＲＴＰＣＲ方法对４９例ＣＨＣ患者血清和其中１４例肝组织进行ＨＧＶＲＮＡ检测．结果在４９例ＣＨＣ患者的血清和其中１４例肝组织中Ｈ... 目的了解慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况．方法用ＲＴＰＣＲ方法对４９例ＣＨＣ患者血清和其中１４例肝组织进行ＨＧＶＲＮＡ检测．结果在４９例ＣＨＣ患者的血清和其中１４例肝组织中ＨＧＶＲＮＡ阳性检出率分别为１２２％和２１４％，证实ＨＧＶ和ＨＣＶ感染在ＣＨＣ患者血清和肝组织中同时存在，而肝组织中ＨＧＶＲＮＡ阳性检出率更高，其原因同受血或其直接经血液暴露密切相关．结论ＣＨＣ患者血清和肝组织中存在ＨＧＶ感染，而且感染率较高，故应加强对献血员进行ＨＧＶＲＮＡ和ＡＬＴ筛查。 展开更多

关键词 丙型肝炎 病毒学 肝炎病毒 遗传学 分离 提纯

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丙型肝炎病毒基因型在中国大陆汉族慢性丙型肝炎患者中的分布特征 被引量：6

2

作者 毛小荣 张立婷 +3 位作者 蒋妮 肖萍 彭雪彬 张有成 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期417-422,共6页

目的：调查中国大陆汉族慢性丙型肝炎（CHC）患者的HCV基因型与地区分布、性别、HCV-RNA复制水平之间的关系。方法：选取来自中国大陆不同地区28家医院的1014例汉族CHC患者，对其性别、分布区域、HCV基因型、HCV-RNA复制水平等指标进行... 目的：调查中国大陆汉族慢性丙型肝炎（CHC）患者的HCV基因型与地区分布、性别、HCV-RNA复制水平之间的关系。方法：选取来自中国大陆不同地区28家医院的1014例汉族CHC患者，对其性别、分布区域、HCV基因型、HCV-RNA复制水平等指标进行调查，用SPSS 20．0软件进行数据处理，采用X^2检验分析各指标的相互关系。结果：①中国大陆HCV1型患者人数最多（56．80％）；除西南、华南、华中地区外，其余地区HCV基因型分布频度均为HCV1型〉HCV2型〉HCV3型〉HCV6型。②HCV1型在华南地区男性患者多见（P〈0．05）；HCV2型在华北地区女性多见（P〈0．05）；HCV3型在华北、西北地区男性多见（P〈0．05）；HCV6型在西北地区男性多见（P〈0．05），其余各地区不同性别间HCV基因型分布差异无统计学意义。⑧在HCV1、HCV2、HCV3、HCV6型中，均多见HCV-RNA高水平复制，低水平复制患者数最少。结论：中国大陆汉族CHC患者HCV基因型在各地区分布不同，并与性别、HCV-RNA复制水平有关。 展开更多

关键词 肝炎 丙型/病毒学 肝炎病毒/遗传学 基因型 肝炎 慢性/病毒学 序列分析 基因 病毒/遗传学 中国 性别分布

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庚型肝炎患者肝组织中HGV表达的免疫组化研究 被引量：6

3

作者 赵西平 杨东亮 +4 位作者 王宝菊 杨燕 沈汉馨 彭志海 郝连杰 《华人消化杂志》 CAS 1998年第7期585-587,共3页

目的探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在庚型肝炎肝组织中的表达状况与临床意义．方法应用免疫组织化学ＰＡＰ方法以鼠抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体对庚型肝炎患者２０例（急性肝炎２例，慢性肝炎８例，肝硬变１０例，血清ＨＧＶＲＮＡ皆阳性）... 目的探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在庚型肝炎肝组织中的表达状况与临床意义．方法应用免疫组织化学ＰＡＰ方法以鼠抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体对庚型肝炎患者２０例（急性肝炎２例，慢性肝炎８例，肝硬变１０例，血清ＨＧＶＲＮＡ皆阳性）肝组织中ＨＧＶ抗原进行检测．结果庚型肝炎患者２０例中，８例（４０％）肝组织中检出ＨＧＶ抗原；不同病期检出率分别为：急性肝炎０／２（０％），慢性肝炎２／８（２５％），肝硬变６／１０（６０％），各组间差异无显著意义；阳性信号位于肝细胞胞质；阳性细胞可位于炎症坏死灶周围；抗原阳性与阴性组间肝组织炎症活动度及血清谷丙转氨酶水平无明显差别，但阳性组纤维化指数较高． 展开更多

关键词 病毒性肝炎 诊断 肝炎病毒 肝炎抗原 免疫组化

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慢性乙型肝炎患者血清IL-6水平与多聚人血清白蛋白受体的相关性研究 被引量：4

4

作者 李志清 魏瑞全 金伯泉 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期33-36,共4页

目的　探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素 6 (Interleukin 6 ,IL 6 )与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系及其在肝脏病理损伤中的作用。方法　对 6 6例不同类型的乙型肝炎标志物阳性患者及不同程度的慢性乙型肝炎患者血清IL 6水平进行检测 ... 目的　探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素 6 (Interleukin 6 ,IL 6 )与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系及其在肝脏病理损伤中的作用。方法　对 6 6例不同类型的乙型肝炎标志物阳性患者及不同程度的慢性乙型肝炎患者血清IL 6水平进行检测 ,同时检测HBV复制标志物———多聚人血清白蛋白受体 (polymerizedhumanserumalbuminreceptor,PHSA R)。结果　HBV携带组及轻度慢性乙型肝炎组中PHSA R阳性患者血清IL 6水平高于PHSA R阴性患者 (P <0 .0 1) ;38份PHSA R阳性患者PHSA R检测吸光度A值与血清IL 6水平显著相关 ,r =0 .6 94(P <0 .0 1) ;血清IL 6水平按乙型肝炎病情严重程度依次增高。结论　血清IL 6水平与HBV复制及肝脏损伤程度相关 ,血清IL 6水平检测作为指示乙型肝炎患者HBV的复制及辅助病情和疗效的判定 。 展开更多

关键词 乙型肝炎 白细胞介素6 多聚人血清白蛋白受体 DNA 病毒 遗传学

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广州地区吸毒人群感染丙型肝炎病毒基因分型研究

5

作者 钟秋林 刘展翅 《中国误诊学杂志》 CAS 2012年第15期3796-3798,共3页

目的了解广州市近年来吸毒人群丙型肝炎病毒（HCV）感染情况及其基因型分布情况，为制定有效的HCV防治措施提供依据。方法对广州市某戒毒所及某劳教所2010—01—2010—12新收入的586例吸毒人员抽静脉血，采用双抗夹心ELISA法检测抗HCV... 目的了解广州市近年来吸毒人群丙型肝炎病毒（HCV）感染情况及其基因型分布情况，为制定有效的HCV防治措施提供依据。方法对广州市某戒毒所及某劳教所2010—01—2010—12新收入的586例吸毒人员抽静脉血，采用双抗夹心ELISA法检测抗HCV抗体，采用套式PCR及DNA序列分析对阳性标本进行基因分型。结果本次调查研究的586例吸毒人员中HCV抗体阳性235例，阳性率检出率40．1％。235份HCV抗体阳性标本，218例PCR扩增得到特异性阳性条带，阳性扩增率92．8％。218例PCR扩增产物测序及序列分析，基因分型结果为：1b型138例（63．3％），6a型36例（16．5％），2a型25例（11．5％），3b型14例（6．4％），3a型5例（2．3％）。结论广州地区吸毒者感染HCV基因型以1b型为主，6a型也有较高的检出率。 展开更多

关键词 肝炎 丙型 吸大麻烟 肝炎病毒/遗传学

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HCVC基因腺病毒表达载体骨架质粒pAd.HCV-C的构建、鉴定及表达 被引量：15

6

作者 郝春秋 周永兴 +3 位作者 冯志华 李谨革 贾战生 王平忠 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第6期635-639,共5页

目的构建能表达HVC基因的腺病毒表达载体的重组骨架质粒,为进一步包装能高效表达HCVC基因的腺病毒载体做准备。方法用分别含有BgⅡ及HindⅢ酶切位点的HCVC区基因上、下游引物,以含有HCV H株基因序列的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板,通过PC... 目的构建能表达HVC基因的腺病毒表达载体的重组骨架质粒,为进一步包装能高效表达HCVC基因的腺病毒载体做准备。方法用分别含有BgⅡ及HindⅢ酶切位点的HCVC区基因上、下游引物,以含有HCV H株基因序列的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板,通过PCR扩增获得HCVC区基因片段,基因片段回收后,以BglⅡ及HindⅢ双酶切,定向插入到腺病毒骨架质粒pAd,CMV-Link.1中CMV启动子下游BglⅡ与HindⅢ位点之间,获得重组表达质粒pAd.HCV-C通过BglⅡ/HindⅢ双酶切、PCR及插入片段序列测定对质粒进行了鉴定,以抗HCVC单克隆抗体为一抗,利用间接免疫荧光法检测了pAd.HCV-C在人肝癌细胞7721中的瞬时表达。结果酶切、PCR及测序鉴定证实,pAd,HCV-C插入片段为HCVC区基因片段,免疫荧光法检测表明其可以在7721细胞中瞬时表达。结论构建的质粒pAd.HCV-C可以在7721细胞中瞬时表达HCVC区基因,为包装表达HCVC基因的腺病毒载体奠定了基础。 展开更多

关键词 C型肝炎样病毒属 遗传学 病毒基因 腺病毒科 遗传载体

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静脉药瘾者丙型肝炎病毒感染的分子流行病学 被引量：11

7

作者 陈嵩 王宇明 +1 位作者 李成明 方勇飞 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第5期526-528,共3页

目的调查重庆市静脉内药瘾者丙型肝炎病毒(HCV)不同基因型感染状况。方法静脉内药瘾者284例,其中男191例,女93例,年龄21岁～36岁,用酶标记免疫(ELISA)法检测HCV感染情况,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与限制性长度多态性(RFLP)分型检测... 目的调查重庆市静脉内药瘾者丙型肝炎病毒(HCV)不同基因型感染状况。方法静脉内药瘾者284例,其中男191例,女93例,年龄21岁～36岁,用酶标记免疫(ELISA)法检测HCV感染情况,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与限制性长度多态性(RFLP)分型检测HCV RNA,并观察血清ALT,AST水平。结果重庆市静脉内药瘾者中,anti-HCV IgG阳性率为40.5％;HCV RNA阳性率为34.5％,其中HCV 1b型,2a型及1b/2a混合型感染率分别为33.7％,46.9％及19.4％,HCV基因型与血清ALT,AST水平变化无明显关系。结论重庆地区静脉毒瘾者HCV感染以2a型为主(46.9％),其次为1b型(33.7％),1b/2a混合型亦不少见(19.4％),HCV基因型与血清ALT和AST水平变化无明显关系。 展开更多

关键词 丙型肝炎 HCV 感染 分子流行病学 静脉内药瘾者

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应用荧光定量PCR检测血清中HCV RNA 被引量：4

8

作者 潘宁 张建琼 +1 位作者 李丽 单祥年 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2003年第1期16-18,共3页

目的 :探讨荧光定量PCR(FQ PCR)法检测血清中丙型肝炎病毒 (HCV)含量的敏感性、特异性。方法 :采用FQ PCR和逆转录巢式PCR同步检测 76份HCV抗体阳性血清标本 ,并对两种方法的检测结果进行对照比较。结果 :FQ PCR定量HCVRNA拷贝数在 10 2... 目的 :探讨荧光定量PCR(FQ PCR)法检测血清中丙型肝炎病毒 (HCV)含量的敏感性、特异性。方法 :采用FQ PCR和逆转录巢式PCR同步检测 76份HCV抗体阳性血清标本 ,并对两种方法的检测结果进行对照比较。结果 :FQ PCR定量HCVRNA拷贝数在 10 2 ～10 6拷贝·μl-1,其中低于 10 3 拷贝·μl-1占 2 0 .93 % ,10 3 ～ 10 5拷贝·μl-1占 60 .47% ,高于 10 5拷贝·μl-1占 18.60 %。 76份HCV抗体阳性血清中 ,巢式PCR检测阳性为 45份 ,FQ PCR检测阳性为 43份 ,二者相对符合率为 97.3 7%。结论 :FQ PCR检测HCVRNA与常规定性巢式PCR特异性、敏感性基本一致。 展开更多

关键词 C型肝炎样病毒属/遗传学 RNA 病毒/分析 聚合酶链反应 荧光计

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血清抗-HBs阳性慢性肝病患者的病因研究 被引量：3

9

作者 陈耀凯 吴修斌 张振英 《华人消化杂志》 1998年第1期49-50,共2页

目的部分抗－ＨＢｓ阳性者仍有活动性肝病存在，其病因还不十分清楚．本研究旨在探讨血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者的病因．方法应用套式聚合酶链反应检测血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ．患者３２... 目的部分抗－ＨＢｓ阳性者仍有活动性肝病存在，其病因还不十分清楚．本研究旨在探讨血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者的病因．方法应用套式聚合酶链反应检测血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ．患者３２例，男２５例，女７例，平均年龄４１７岁（２１岁～６３岁），其中慢性肝炎１８例，肝硬变１４例．９例慢性肝炎和５例肝硬变经肝活检证实，其余为临床诊断．结果血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ的检出率分别为６２５％（２０／３２）和２８１％（９／３２）；ＨＢＶＤＮＡ和（或）ＨＣＶＲＮＡ总检出率为８１３％（２６／３２）．结论血清抗ＨＢｓ阳性慢性肝病患者的病因多数与ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染有关． 展开更多

关键词 病毒性肝炎 病因学 肝炎表面抗原 遗传学

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PCR循环测序法检测K-ras和HCV 5'非编码区基因变异 被引量：1

10

作者 任秀容 欧文晖 +2 位作者 李全贞 周新宇 何蕴韶 《中山医科大学学报》 CSCD 1998年第2期153-157,共5页

目的：建立一种简单、快速、可靠的ＤＮＡ序列分析方法，并利用此方法分析Ｋｒａｓ基因和ＨＣＶ５′非编码区基因的变异情况。方法：ＰＣＲ循环测序法是将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析相结合的一种研究方法。根据此技术原理，建立了以Ｐ... 目的：建立一种简单、快速、可靠的ＤＮＡ序列分析方法，并利用此方法分析Ｋｒａｓ基因和ＨＣＶ５′非编码区基因的变异情况。方法：ＰＣＲ循环测序法是将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析相结合的一种研究方法。根据此技术原理，建立了以ＰＣＲ扩增引物为测序引物，利用ＴａｑＤＮＡ聚合酶、荧光标记的２′，３′双脱氧核苷三磷酸（ｄｄＮＴＰ）直接进行ＰＣＲ扩增产物序列分析的方法。应用该方法对人肺癌组织中的Ｋｒａｓ癌基因和丙型肝炎病毒５′非编码区（ＨＣＶ５′ＮＴＲ）进行了序列测定。结果：肺癌组织中的Ｋｒａｓ基因第１外显子第３５位碱基发生点突变（ＧＧＴ→ＧＡＴ）；属于高度保守区的ＨＣＶ５′ＮＴＲ存在基因变异。结论：ＰＣＲ循环测序法具有简单、快速、结果可靠等特点，为基因突变的检测和病原体的核酸序列分析提供了一个快速实用的方法。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 序列分析 HCV 基因突变 K-RAS

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抗污染RT-PCR检测HCVRNA的研究 被引量：2

11

作者 汤伟 杜绍财 +1 位作者 陶其敏 朱凌 《新消化病学杂志》 1997年第10期638-639,共2页

目的研究与解决ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ过程中常见的产物污染问题．方法以稀释的含ｄＵＴＰ的ＰＣＲ产物加入ＲＴＰＣＲ反应的不同阶段以模拟ＰＣＲ产物污染，再采用尿苷酶以清除污染的ＰＣＲ产物分子．结果在检测ＨＣＶＲＮＡ的套... 目的研究与解决ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ过程中常见的产物污染问题．方法以稀释的含ｄＵＴＰ的ＰＣＲ产物加入ＲＴＰＣＲ反应的不同阶段以模拟ＰＣＲ产物污染，再采用尿苷酶以清除污染的ＰＣＲ产物分子．结果在检测ＨＣＶＲＮＡ的套式ＰＣＲ反应中，假阳性结果主要是由于ＰＣＲ终产物在实验过程中的任何阶段污染所引起，但污染的模板分子仅在第２次ＰＣＲ反应时扩增．将ＨＣＶＲＮＡ套式ＰＣＲ检测试剂盒中的第２次ＰＣＲ反应液中加入一定量的ｄＵＴＰ，可使反应终产物核酸分子上含有ｄＵＴＰ．此后，在每进行第２次ＰＣＲ反应前，均在每３０μｌ反应体系中加入尿苷酶１Ｕ，３７℃消化１ｈ，然后９４℃１０ｍｉｎ灭活尿苷酶，即可降解其中含ｄＵＴＰ的污染核酸分子．结论此法能消除同一实验室内套式ＰＣＲ终产物的污染，防止假阳性结果的出现． 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 RNA 聚合酶链反应 分析

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建立转录丙型肝炎病毒结构区基因细胞模型的研究 被引量：2

12

作者 陈前 窦骏 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2004年第1期31-33,共3页

目的 :建立转录丙型肝炎病毒 (HCV)结构区基因的细胞模型 ,为研究中药在体外对HCV结构区基因转录的抑制作用提供实验用细胞模型。方法 :用脂质体将已构建好的含HCV结构区基因 1.73kb的真核细胞表达载体pBK CMV转入人HeLa细胞 ,用G418选... 目的 :建立转录丙型肝炎病毒 (HCV)结构区基因的细胞模型 ,为研究中药在体外对HCV结构区基因转录的抑制作用提供实验用细胞模型。方法 :用脂质体将已构建好的含HCV结构区基因 1.73kb的真核细胞表达载体pBK CMV转入人HeLa细胞 ,用G418选择性培养基筛选出成功转染的HeLa细胞 (HeLaD细胞 ) ,用Trizol提取HeLaD细胞的总RNA ,通过特异性引物进行逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,从mRNA水平来验证HeLaD细胞中HCV结构区基因的有效转录。结果 :对从HeLaD细胞抽提的总RNA作RT PCR ,得到 14 4bp的特异的扩增片段 ,证实HCV结构区基因在HeLaD细胞中有转录水平的表达。结论 :重组质粒pBK CMV能被成功地转染人HeLa细胞 ,且HCV的结构区基因能够有效地表达 ,成功建立了能转录HCV结构区基因的细胞模型 HeLaD。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 基因细胞 细胞模型 HCV 遗传学 HELA细胞

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HCV、NS5A区部分基因克隆和序列分析 被引量：1

13

作者 张寿国 潘卫 +3 位作者 李慧 邓松华 仇小芳 朱扬 《疾病控制杂志》 2003年第2期103-105,共3页

目的　研究输血后肝炎病人的基因型 ,探讨 HCV抵抗 IFN疗效的作用机制。方法　以RT- PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段 4 86 bp的 c DNA片段作目的基因 ,插入 PQE30的多克隆位点 ,构建重组质粒 PQE30 - NS5 A- 1U 1D。结果　应用限制酶... 目的　研究输血后肝炎病人的基因型 ,探讨 HCV抵抗 IFN疗效的作用机制。方法　以RT- PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段 4 86 bp的 c DNA片段作目的基因 ,插入 PQE30的多克隆位点 ,构建重组质粒 PQE30 - NS5 A- 1U 1D。结果　应用限制酶酶切和测序分析 ,证实 PQE30 -NS5 A- 1U1D中克隆基因是 HCVJ的 NS5 A部分序列 ,核苷酸和氨基酸序列同源性均在 90 %以上 ,包含有干扰素敏感决定区 (ISDR)。结论　血清学抗体检测 NS5 A片段对 HCV诊断有独特的应用价值 。 展开更多

关键词 C型肝炎样病毒属 遗传学 序列分析

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