期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
人基质金属蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域克隆及原核表达 被引量：2
1
作者 李彦杰 杨俊年 +1 位作者 王保莉 郭蔼光 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期94-96,106,共4页
提取人神经胶质瘤U87细胞总RNA,通过RT-PCR克隆到人基质金属蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域pex的cDNA序列-PEX,连接pMD18-T载体和PEX,测序分析,构建原核表达载体PET42a-PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后... 提取人神经胶质瘤U87细胞总RNA,通过RT-PCR克隆到人基质金属蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域pex的cDNA序列-PEX,连接pMD18-T载体和PEX,测序分析,构建原核表达载体PET42a-PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后显示目的蛋白有37%的表达量,为进一步研究其抗肿瘤血管生成鉴定基础。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 PEX 抗血管生成
下载PDF
靶向基质金属蛋白酶14类血红素结构域特异活性位点的确定及反义肽虚拟筛选 被引量：1
2
作者 谭博文 周毅洁 +1 位作者 黄婷婷 茆灿泉 《生物技术通讯》 CAS 2014年第5期605-610,615,共7页
目的:确定基质金属蛋白酶14(MMP-14)类血红素结构域(HPX14)特异活性位点,虚拟筛选获得能与HPX14特异结合的短肽。方法:用metaPocket预测HPX14的活性口袋,多序列比对分析活性口袋的氨基酸残基特异性;基于M-I和R-B理论设计以特异活性位点... 目的:确定基质金属蛋白酶14(MMP-14)类血红素结构域(HPX14)特异活性位点,虚拟筛选获得能与HPX14特异结合的短肽。方法:用metaPocket预测HPX14的活性口袋,多序列比对分析活性口袋的氨基酸残基特异性;基于M-I和R-B理论设计以特异活性位点为正义肽的反义肽库,并进行虚拟筛研究及结合特异性确定。结果:生物信息学分析确定了KGRGLTD为HPX14的特异活性位点,并构建了其1036条反义肽;通过2轮虚拟筛选,获得10条得分居前的与HPX14结合较好的反义肽,它们与HPX14具有较高的亲和力,并可能影响MMP-14同源二聚体的形成和MMP-14活性的抑制;VSETAPF、IGEPPPF是对接打分最好的2条短肽,与HPX14的结合具有特异性。结论:KGRGLTD是HPX14的特异活性位点,虚拟筛选得到的VSETAPF、IGEPPPF等反义肽与HPX14具有较高的亲和力,这为基于MMP-14的HPX结构域的靶向小分子多肽先导药物的发现提供了重要的前期工作基础与新思路。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶14 类血红素结构域 反义肽 对接 虚拟筛选
下载PDF
人基质蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域原核表达优化 被引量：1
3
作者 李彦杰 王保莉 +1 位作者 张守涛 郭蔼光 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期109-111,116,共4页
用构建的人基质蛋白酶-2(MMP-2)类血红素结构域原核表达载体PET25b-PEX转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落LB液体培养基培养,异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达产生的表达蛋白,大小约29 kD,与预期大小相符。设置不同的IPTG诱导... 用构建的人基质蛋白酶-2(MMP-2)类血红素结构域原核表达载体PET25b-PEX转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落LB液体培养基培养,异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达产生的表达蛋白,大小约29 kD,与预期大小相符。设置不同的IPTG诱导终浓度,诱导时间,诱导时菌液OD值和LB液体培养基的pH值,SDS-PAGE电泳和软件分析发现,当IPTG浓度为0.7 mmol/L,诱导4 h,诱导时菌液OD值为0.7时,实验能获得最高的PEX蛋白表达;5 L大规模培养时,LB培养基pH值为7.5时,可获得较高的重组PEX蛋白表达。 展开更多
关键词 人基质金属蛋白酶-2 类血红素结构域 抑制血管生成 优化表达
下载PDF
MMP-2-PEX原核表达纯化及其对黑色素瘤细胞与内皮细胞黏附的影响
4
作者 宋直钰 赵敬湘 +3 位作者 魏广智 张磊 汤永永 王字玲 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第6期528-531,539,共5页
目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域(MMP-2-PEX)对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21(DE3),IPT... 目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域(MMP-2-PEX)对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;盐酸胍裂解包涵体,经镍琼脂糖凝胶柱纯化,透析复性后获得MMP-2-PEX蛋白,随后对其进行Western印迹和质谱鉴定。采用明胶酶谱法检测MMP-2-PEX的活性;采用平行板流动小室系统检测在流动状态下MMP-2-PEX对A375细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC黏附的影响,通过小鼠实验性肺转移模型检测MMP-2-PEX对A375细胞在小鼠肺内癌栓形成的影响。结果 Western印迹和质谱鉴定原核表达的MMP-2-PEX蛋白正确,明胶酶谱检测MMP-2-PEX能够明显抑制MMP-2的活性。表达的MMP-2-PEX蛋白能够在流动状态下抑制A375细胞与HUVEC细胞的黏附,其黏附抑制率与MMP-2-PEX蛋白浓度增加成正相关,MMP-2-PEX浓度为12.5,25和50μg/ml时抑制率分别为32.5%,41.4%和53.9%。用MMP-2-PEX处理后,A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成与对照组相比降低了26.4%。结论原核表达的人MMP-2-PEX在体外流动状态下可抑制A375细胞与内皮细胞的黏附,并抑制A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶2 黑色素瘤 血红素结合蛋白样结构域 细胞黏附 内皮细胞
原文传递
重组人基质金属蛋白酶2(MMP-2)血红素样蛋白表达优化
5
作者 李彦杰 肖国生 +1 位作者 刘仁华 杨俊年 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期248-250,259,共4页
为确定重组大肠杆菌(BL21(DE3)/PET42a-PEX)最佳表达条件。在单因素实验的基础之上,以目的蛋白PEX表达量为响应值,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,进行响应面分析。响应面分析确定的最优因素水平组合为:LB培养基pH为7.50,诱... 为确定重组大肠杆菌(BL21(DE3)/PET42a-PEX)最佳表达条件。在单因素实验的基础之上,以目的蛋白PEX表达量为响应值,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,进行响应面分析。响应面分析确定的最优因素水平组合为:LB培养基pH为7.50,诱导时菌液OD600为0.60,IPTG诱导浓度为0.60mmol/L,诱导培养时间为5.0h。对此工艺条件进行验证得到目的蛋白PEX表达量为20.98mg/L。结果显示,优化了基因重组大肠杆菌表达人PEX的条件,为实现基因重组原核工程菌发酵法制备重组PEX奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 基质金属蛋白酶2 血红素样蛋白 BOX-BEHNKEN设计
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部