期刊文献+
共找到7篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
大豆及腐竹中转基因成分的多重PCR分析 被引量:16
1
作者 邵碧英 陈文炳 +1 位作者 江树勋 李寿崧 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第1期117-121,共5页
采用CTAB法提取大豆干样、新鲜毛豆及腐竹中的总DNA,内源LECTIN基因扩增结果均为阳性,表明提取到的DNA中不存在抑制PCR的物质.应用花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子和根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(NOS)终止子的二重... 采用CTAB法提取大豆干样、新鲜毛豆及腐竹中的总DNA,内源LECTIN基因扩增结果均为阳性,表明提取到的DNA中不存在抑制PCR的物质.应用花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子和根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(NOS)终止子的二重PCR分析,筛选到7个含转基因成分的样品.半嵌套式PCR检测结果表明阳性样品中的外源目的基因为来自根癌农杆菌CP4菌株的EPSPS基因.最后成功进行了扩增内源LECTIN基因、CaMV35S启动子和NOS终止子的三重PCR分析,以及内源LECTIN基因和EPSPS基因的二重PCR分析,得到预期结果.多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,在植物产品的转基因成分检测上具有重要的应用价值. 展开更多
关键词 大豆 多重pcr分析 根癌农杆菌 终止子 套式pcr检测 外源 转基因成分 NOS 阳性 MV
下载PDF
用PCR技术鉴定犬细小病毒弱毒疫苗株 被引量:9
2
作者 刘忠华 钟翎 +2 位作者 贺星亮 徐耀基 黄韧 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期444-446,共3页
通过分析比较犬细小病毒 (CPV)弱毒疫苗株和强毒株的基因序列 ,设计了 3条引物并组成 2对引物 ,对弱毒疫苗株和强毒株进行了半嵌套式 PCR扩增。第 1轮 PCR扩增的结果为 CPV弱毒疫苗株和强毒株有相同的目的片段(5 85 bp) ;第 2轮 PCR扩... 通过分析比较犬细小病毒 (CPV)弱毒疫苗株和强毒株的基因序列 ,设计了 3条引物并组成 2对引物 ,对弱毒疫苗株和强毒株进行了半嵌套式 PCR扩增。第 1轮 PCR扩增的结果为 CPV弱毒疫苗株和强毒株有相同的目的片段(5 85 bp) ;第 2轮 PCR扩增的结果为 CPV强毒株有 375 bp目的片段 ,而 CPV弱毒疫苗株没有 375 bp目的片段。对PCR产物进行电泳和酶切分析 ,结果证明 PCR产物片段大小和酶切位点与设计的产物完全一致。特异性和敏感性测定结果表明 ,该方法是高度特异和敏感的 。 展开更多
关键词 犬细小病毒 弱毒疫苗株 鉴定 pcr技术 细小病毒病 强毒株
下载PDF
半嵌套式PCR技术区别检测犬细小病毒疫苗株和强毒株的研究 被引量:3
3
作者 刘忠华 钟翎 +1 位作者 黄韧 程树军 《中国病毒学》 CSCD 2003年第4期401-403,共3页
犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)引起的一种多发于幼犬的致死性传染病,主要表现为出血性肠炎和心肌炎[1].在自然条件下本病多呈散发,而在养犬比较集中的地方则常群发[2].
关键词 半嵌套式pcr技术 检测 犬细小病毒 疫苗株 强毒株
下载PDF
半巢式PCR检测FOXC2基因多态性实验条件研究
4
作者 念馨 张旭祥 刘华 《医学理论与实践》 2012年第5期497-498,522,共3页
目的:研究半巢式PCR方法检测FOXC2基因5’非翻译区C-512T多态性的实验条件。方法:对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度和梯度,进行PCR反应后观察电泳结果,选取最适条件。结果:最适温度为58℃,最适Mg2+浓度为3.0mmol/L,最适dNTP浓... 目的:研究半巢式PCR方法检测FOXC2基因5’非翻译区C-512T多态性的实验条件。方法:对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度和梯度,进行PCR反应后观察电泳结果,选取最适条件。结果:最适温度为58℃,最适Mg2+浓度为3.0mmol/L,最适dNTP浓度为2.5mmol/L。最适扩增循环为第一次扩增35个循环,第二次扩增30个循环。结论:摸索最适实验条件是进行批量实验的前提和关键。 展开更多
关键词 半巢式pcr FOXC2基因多态性 实验条件
下载PDF
半巢式聚合酶链反应一次加样法检测血液HBV DNA
5
作者 肖生祥 闰呼玲 +1 位作者 吴艳红 肖生彬 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期541-542,共2页
目的 消除巢式聚合酶链反应 (nestedPCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV)实验中 2次加样带来交叉污染的机会 ,提高PCR特异性和敏感性。方法 通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度 ,改变退火温度 ,建立半巢式PCR一次加样法检测HBVDN... 目的 消除巢式聚合酶链反应 (nestedPCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV)实验中 2次加样带来交叉污染的机会 ,提高PCR特异性和敏感性。方法 通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度 ,改变退火温度 ,建立半巢式PCR一次加样法检测HBVDNA。 3个PCR引物同时加入反应管进行 2次PCR反应 ,在一个反应管内完成巢式PCR。结果 该法可检出 4个分子的目的基因片段。在 16例ELISA和常规PCR检测HBV阴性的血清标本中 ,半巢式PCR一次加样法检出 2例阳性。结论 该方法简便、敏感、特异。与ELISA同时应用 ,可提高临床标本HBV阳性检出率 ,减少假阴性 。 展开更多
关键词 乙型肝炎 半巢式聚合酶链反应 一次加样法 检测 血液 HBV DNA
下载PDF
一种从血清标本中快速提取HBV DNA方法的建立 被引量:13
6
作者 郭龙华 董长垣 +3 位作者 高婧 郭淑芳 陈晓 刘文惠 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2005年第3期333-335,共3页
目的:建立一种快速提取血清标本中HBVDNA的方法,即裂解液煮沸法。方法:以碱裂解法和经典的苯酚法为对照,比较3种方法提取的HBVDNA纯度和半巢式PCR后的阳性率。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA进行半巢式PCR的阳性率最高,与两种对照方... 目的:建立一种快速提取血清标本中HBVDNA的方法,即裂解液煮沸法。方法:以碱裂解法和经典的苯酚法为对照,比较3种方法提取的HBVDNA纯度和半巢式PCR后的阳性率。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA进行半巢式PCR的阳性率最高,与两种对照方法之间的差异有极显著意义(P<0.01)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 DNA提取 半巢式pcr
下载PDF
黄病毒属病毒RT-heminested-PCR方法的建立并用于蚊虫检测 被引量:2
7
作者 周正斌 朱淮民 +1 位作者 张仪 党晨珀 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期653-658,共6页
目的建立适合检测蚊虫携带黄病毒属病毒通用引物反转录半巢式PCR(RT-heminested-PCR)方法。方法根据GenBank黄病毒属病毒非结构蛋白基因(nonstructuralproteins gene)NS5序列,在保守区设计2对(3条)黄病毒属病毒通用引物,以日本脑炎病毒(... 目的建立适合检测蚊虫携带黄病毒属病毒通用引物反转录半巢式PCR(RT-heminested-PCR)方法。方法根据GenBank黄病毒属病毒非结构蛋白基因(nonstructuralproteins gene)NS5序列,在保守区设计2对(3条)黄病毒属病毒通用引物,以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)cDNA、登革病毒(Dengue virus,DENV)Ⅰ~Ⅳ型cDNA为模板优化条件建立RT-heminested-PCR方法;以日本脑炎病毒减毒活疫苗(SA14-14-2strain)测定该方法的敏感度,并用于野外采集蚊虫检测。结果在50只淡色库蚊中RT-heminested-PCR方法检测减毒活疫苗JEV最低检出浓度为1×10-2 PFU/mL。用该方法检测云南省普洱市采集的54组(540只)蚊虫,扩增产物经测序确认9组含有乙型脑炎病毒﹑3组含有登革病毒II型﹑1组含有登革病毒I型﹑1组含未报道的黄病毒属病毒,该病毒与Quang Binh virus同源性最高。结论黄病毒属病毒通用引物RT-heminested-PCR方法适合于蚊虫种群黄病毒属病毒监测。其不但适应已知黄病毒属病毒的检测,而且具备检测新型黄病毒属病毒的潜能。 展开更多
关键词 RT—heminested-pcr 蚊虫 黄病毒属病毒
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部