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茉莉酸甲酯对丹参毛状根中丹参酮类成分积累和释放的影响 被引量:34
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作者 王学勇 崔光红 +1 位作者 黄璐琦 邱德有 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期300-302,共3页
目的:研究茉莉酸甲酯(methy jasmonat,M J)对丹参酮类成分的积累和向培养基中的释放的影响。方法:6-7V悬浮振荡培养ATCC15834农杆菌诱导的丹参毛状根培养18d后,液体培养基中加入化学诱导子——茉莉酸甲酯,采用HPLC的方法,测定M J处理后... 目的:研究茉莉酸甲酯(methy jasmonat,M J)对丹参酮类成分的积累和向培养基中的释放的影响。方法:6-7V悬浮振荡培养ATCC15834农杆菌诱导的丹参毛状根培养18d后,液体培养基中加入化学诱导子——茉莉酸甲酯,采用HPLC的方法,测定M J处理后不同时间段(2,6,9d)丹参毛状根中隐丹参酮、丹参酮IIA的含量以及其在培养基中的含量。结果:毛状根经M J处理后2,6,9d隐丹参酮的含量分别达0.039,0.204,0.572mg.g-1,分别是同时期未经M J处理的2.2,8.5,23.8倍;丹参酮IIA的含量达0.251,0.601,1.563mg.g-1,分别是同时间期未经M J处理丹参毛状根的1.9,4.1,6.2倍。结论:M J能显著促进丹参毛状根中丹参酮类成分的积累并向培养基中释放。 展开更多
关键词 茉莉酸甲酯 丹参 毛状根 HPLC
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新疆雪莲毛状根的诱导及其植株再生体系的建立 被引量:38
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作者 付春祥 金治平 +2 位作者 杨睿 吴风燕 赵德修 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期366-371,共6页
利用发根农杆菌R16 0 1、R10 0 0、LBA94 0 2感染新疆雪莲的叶片、叶柄和根段外植体 ,诱导产生毛状根。毛状根接种量为 2 8g L(FW)时 ,2 0d生长量可达 6 6 7g L ,黄酮含量达到干重的 10 2 3%。冠瘿碱的检测和rolB基因的PCR分析表明 ... 利用发根农杆菌R16 0 1、R10 0 0、LBA94 0 2感染新疆雪莲的叶片、叶柄和根段外植体 ,诱导产生毛状根。毛状根接种量为 2 8g L(FW)时 ,2 0d生长量可达 6 6 7g L ,黄酮含量达到干重的 10 2 3%。冠瘿碱的检测和rolB基因的PCR分析表明 ,Ri质粒中的T_DNA片段已经整合到毛状根细胞的基因组中。预培养时间、外植体类型以及发根农杆菌的菌株属性对毛状根诱导有着重要的影响。其中预培养 2d的新疆雪莲根段外植体 ,经过R16 0 1感染后 ,毛状根的诱导率可达 10 0 %。诱导产生的毛状根在附加生长素的液体培养基中 ,有少量愈伤组织产生。由毛状根再生的植株与雪莲外植体再生的植株在形态上无明显区别 ,但前者的黄酮含量仅为后者的 5 3%。 展开更多
关键词 新疆雪莲 发根农杆菌 毛状根 黄酮
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丹参毛状根生物反应器大规模培养的研究 被引量:31
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作者 邱德有 宋经元 +2 位作者 马小军 祁建军 张荫麟 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第5期699-703,共5页
以总丹参酮(脂溶性成分)的含量为监测对象,利用10L的球状气升式反应器进行了丹参毛状根培养的初级放大试验, 发现球状气升式反应器培养50d时丹参毛状根的增殖倍数为241.71倍,高于三角瓶摇瓶培养的丹参毛状根的增殖倍数,其总丹参酮的含... 以总丹参酮(脂溶性成分)的含量为监测对象,利用10L的球状气升式反应器进行了丹参毛状根培养的初级放大试验, 发现球状气升式反应器培养50d时丹参毛状根的增殖倍数为241.71倍,高于三角瓶摇瓶培养的丹参毛状根的增殖倍数,其总丹参酮的含量接近三角瓶摇瓶培养的丹参毛状根总丹参酮的含量。接着,以原儿茶醛和丹酚酸B这两种水溶性成分为监测对象,利用75L的气升式反应器进行了进一步的放大培养,发现它们的含量在75L的气升式反应器培养50d时所获得的丹参毛状根中与10L的球状气升式反应器培养50d时所获得的丹参毛状根中相当。这些结果表明,利用气升式反应器进行丹参毛状根初级放大和中试规模的培养是可行的,它为今后丹参毛状根的工业化生产奠定了基础,有望为象丹参这样的名贵植物资源的持续开发与利用以及绿色原料药的生产开辟一条新途径。 展开更多
关键词 丹参 毛状根 生物反应器 培养规模
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甘草毛状根培养系统的建立及化学成分分析 被引量:29
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作者 C 向德军 +1 位作者 丁家宜 刘涤 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2001年第1期7-10,共4页
利用发根农杆菌转化甘草 (GlycyrrhizauralensisFisch .)外植体获得毛状根 ,经PCR法检测 ,表明已转化成功。应用均匀设计法与比较法 ,建立了适合甘草毛状根的培养系统。化学成分分析结果表明 ,甘草毛状根含半胱亚磺酸 ,不含胱氨酸 ,商... 利用发根农杆菌转化甘草 (GlycyrrhizauralensisFisch .)外植体获得毛状根 ,经PCR法检测 ,表明已转化成功。应用均匀设计法与比较法 ,建立了适合甘草毛状根的培养系统。化学成分分析结果表明 ,甘草毛状根含半胱亚磺酸 ,不含胱氨酸 ,商品甘草却含胱氨酸而不含半胱亚磺酸 ;甘草毛状根能合成多种黄酮成分 ,其中甘草查尔酮A的含量高达干重的 0 18%。 展开更多
关键词 甘草 毛状根 培养 化学成分
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膜荚黄芪毛状根培养系统的建立和外界因子对其生长的影响 被引量:25
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作者 胡之璧 郑志仁 +1 位作者 李幸平 刘涤 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第5期448-452,共5页
建立了由发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)感染膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)叶片外植体形成的毛状根培养系统并研究了外界因子对其生长的影响。M... 建立了由发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)感染膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)叶片外植体形成的毛状根培养系统并研究了外界因子对其生长的影响。MS基本培养基(无激素)适合于黄芪毛状根的生长,但是由于NH4NO3具有抑制作用而被省略。3%的蔗糖和培养基pH6适宜毛状根生长。光抑制毛状根生长。每天12h的15℃处理对黄芪毛状根生长的影响不明显。与黄芪药用根生物活性成分比较表明,毛状根组织含有较多的粗皂甙和可溶性多糖。讨论了毛状根培养技术在中药材生产中的应用和潜力。 展开更多
关键词 膜荚黄芪 发根农杆菌 毛状根 体外培养 生物活性成分
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利用栝楼发根生产天花粉蛋白的研究 被引量:26
6
作者 邱德有 朱微 朱至清 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第6期439-443,共5页
利用发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes)菌株 R1 60 1 ,成功地从药用植物栝楼 (Trichosantheskirilowii Maxim.)中诱导出发根并建立了栝楼发根的离体培养系统。通过蛋白质印迹法对栝楼发根的天花粉蛋白进行了鉴定。利用 SDS- PAGE和... 利用发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes)菌株 R1 60 1 ,成功地从药用植物栝楼 (Trichosantheskirilowii Maxim.)中诱导出发根并建立了栝楼发根的离体培养系统。通过蛋白质印迹法对栝楼发根的天花粉蛋白进行了鉴定。利用 SDS- PAGE和 TLC扫描 ,测定出每克鲜重栝楼发根中天花粉蛋白的含量可达 8.1 6mg。 展开更多
关键词 栝楼 药用植物 发根 天花粉蛋白
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商陆毛状根的诱导、培养及其皂甙的产生 被引量:17
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作者 施和平 梁朋 权宏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-49,共4页
发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)R16 0 1感染商陆叶片外植体 1周后 ,在其切口处产生毛状根 ,2 0d后产生毛状根的外植体比例达 70 % ;毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。毛状根能在无激素的MS培养基... 发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)R16 0 1感染商陆叶片外植体 1周后 ,在其切口处产生毛状根 ,2 0d后产生毛状根的外植体比例达 70 % ;毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。毛状根能在无激素的MS培养基上自主生长 ,其呼吸速率比对照根提高 85 6 %。冠瘿碱检测和PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌RiT DNA的冠瘿碱合成酶基因及其Ri质粒的rol基因均已在商陆毛状根基因组中得到表达。毛状根中总皂甙含量约为自然根的 1 5 4倍 ,但其多糖含量则仅为非转化根的 70 %。 展开更多
关键词 商陆 毛状根 诱导 培养 皂甙
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粟米草毛状根的研究 被引量:26
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作者 许铁峰 张汉明 +3 位作者 丁如贤 李博华 张巧艳 郑汉臣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期764-766,F003,共4页
目的:建立粟米草(Mollugo pentaphylla L.)的毛状根培养系统并研究毛状根的生长特性。方法:分别用发根农杆菌R1601,ATCC 15834和A4感染粟米草无菌苗的子叶,获得毛状根,并筛选优质株系;用... 目的:建立粟米草(Mollugo pentaphylla L.)的毛状根培养系统并研究毛状根的生长特性。方法:分别用发根农杆菌R1601,ATCC 15834和A4感染粟米草无菌苗的子叶,获得毛状根,并筛选优质株系;用高压纸电泳法对毛状根进行甘露碱检测;测定其生长曲线;比较不同基本培养液、不同pH 值对毛状根生长的影响。结果:高压纸电泳结果显示,所获毛状根中均含有甘露碱,表明毛状根中确已转入发根农杆菌的T-DNA;1/2 MS0培养液pH 5.4~5.8最适合粟米草毛状根的生长。结论:快速生长的粟米草毛状根在药用活性成分的生产上将具有较大潜力。 展开更多
关键词 粟米草 毛状根 发根农杆菌 避孕药
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用RP-HPLC法测定黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量 被引量:23
9
作者 郑志仁 宋纯清 +1 位作者 刘涤 胡之璧 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期98-99,共2页
RP-HPLC法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析,在实验条件下,黄芪甲苷标准品在 10.64~53.20μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为92.66%;精密度试验相 对标准偏差为4.20%和2.40... RP-HPLC法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析,在实验条件下,黄芪甲苷标准品在 10.64~53.20μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为92.66%;精密度试验相 对标准偏差为4.20%和2.40%;测得黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量为0.14%(干重)。 展开更多
关键词 HPLC 黄芪 毛状根 黄芪甲苷 含量测定
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丹参毛状根诱导条件的优化 被引量:24
10
作者 周伟 姚倩雯 +5 位作者 钱忠英 沈亚芳 刘园园 张磊 周根余 开国银 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2007年第2期93-98,共6页
以发根农杆菌C58C1,A4,R1601为试验菌株,叶片、叶柄、茎段为外植体,研究了菌液浓度、共培养时间和乙酰丁香酮(AS)等因素对丹参毛状根转化频率的影响,并用PCR对诱导出的毛状根进行了阳性鉴定.试验结果表明:菌株和外植体类型对... 以发根农杆菌C58C1,A4,R1601为试验菌株,叶片、叶柄、茎段为外植体,研究了菌液浓度、共培养时间和乙酰丁香酮(AS)等因素对丹参毛状根转化频率的影响,并用PCR对诱导出的毛状根进行了阳性鉴定.试验结果表明:菌株和外植体类型对丹参毛状根诱导率存在着显著的差异;最佳共培养时间为3—4d,乙酰丁香酮(AS)浓度为400μmol/L有利于促进毛状根的产生.为进一步利用基因工程技术进行中药丹参的品质改良奠定了基础. 展开更多
关键词 丹参 毛状根 诱导
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植物毛状根的培养及其化学进展 2.植物毛状根的次生代谢 被引量:16
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作者 周立刚 王君健 杨崇仁 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1999年第3期104-112,共9页
本文介绍了毛状根的次生代谢调控、次生代谢物质的生产、生物转化、生物合成以及工业化应用。
关键词 毛状根 次生代谢 生物转化 生物合成
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外源激素对何首乌毛状根生长及蒽醌类成分生物合成的影响 被引量:21
12
作者 于荣敏 马娜 +1 位作者 严春艳 赵昱 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期619-623,共5页
研究了外源激素对液体培养何首乌毛状根生长及其蒽醌类化合物生物合成的影响。结果表明外源激素2,4-D、NAA和6-BA对何首乌毛状根的生长及蒽醌生物合成有较大的影响。在MS培养基中添加2,4-D对何首乌毛状根的生长和蒽醌类化合物的生物合... 研究了外源激素对液体培养何首乌毛状根生长及其蒽醌类化合物生物合成的影响。结果表明外源激素2,4-D、NAA和6-BA对何首乌毛状根的生长及蒽醌生物合成有较大的影响。在MS培养基中添加2,4-D对何首乌毛状根的生长和蒽醌类化合物的生物合成有很强的抑制作用,而添加适量浓度NAA和6-BA则可促进何首乌毛状根的生长以及蒽醌类物质的生物合成。 展开更多
关键词 何首乌 毛状根 悬浮培养 蒽醌类化合物 HPLC
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药用植物毛状根的研究和应用 被引量:17
13
作者 芮和恺 《自然杂志》 1997年第1期23-26,共4页
近十多年来植物基因工程的研究获得了很大的发展,其中药用植物毛状根(hsiry root)的研究取得了令人瞩目的进展。药用植物毛状根具有生长快、不需要添加激素、有效成分含量高、易于大量培养等优点。随着毛状根诱导和培养技术的日趋成熟,... 近十多年来植物基因工程的研究获得了很大的发展,其中药用植物毛状根(hsiry root)的研究取得了令人瞩目的进展。药用植物毛状根具有生长快、不需要添加激素、有效成分含量高、易于大量培养等优点。随着毛状根诱导和培养技术的日趋成熟,有可能使传统的植物药生产方式发生重大的变革。那么,毛状根发生的机理以及有关药用植物毛状根的研究和应用前景又如何呢? 展开更多
关键词 药用植物 毛状根 研究 应用 中药
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发根农杆菌诱导黄芩毛状根的研究 被引量:17
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作者 齐香君 陈秀清 何恩铭 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期244-247,共4页
利用发根农杆菌A4,A4 9615,1.2556诱导中药黄芩外植体,得到黄芩不定根,根据形态和在MS培养基中进行培养证实得到黄芩毛状根,经抗菌素氨苄西林钠500 mg/L除菌后,毛状根表现出分枝多,生长快,且能在MS中生长繁殖的特性,为采用生物技术生产... 利用发根农杆菌A4,A4 9615,1.2556诱导中药黄芩外植体,得到黄芩不定根,根据形态和在MS培养基中进行培养证实得到黄芩毛状根,经抗菌素氨苄西林钠500 mg/L除菌后,毛状根表现出分枝多,生长快,且能在MS中生长繁殖的特性,为采用生物技术生产黄芩活性成分奠定基础。 展开更多
关键词 黄芩 发根农杆菌 毛状根 诱导
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新疆紫草毛状根的诱导及培养 被引量:21
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作者 陈永芳 芦韦华 +2 位作者 王芳 麻浩 李建贵 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2423-2428,共6页
将处于对数生长期(A600为0.5)的发根农杆菌MSU440、A4、R1000、15834、1025和R1601与新疆紫草子叶外植体共培养.结果表明:(1)发根农杆菌不同菌种对转化率有显著影响,供试6个菌种中只有MSU440菌株获得转化株.PCR及序列分析表明发根... 将处于对数生长期(A600为0.5)的发根农杆菌MSU440、A4、R1000、15834、1025和R1601与新疆紫草子叶外植体共培养.结果表明:(1)发根农杆菌不同菌种对转化率有显著影响,供试6个菌种中只有MSU440菌株获得转化株.PCR及序列分析表明发根农杆菌Ri质粒的rolC基因已在新疆紫草毛状根基因组中整合并得到表达,转化率达4.5%.(2)子叶较真叶的不定根发生率高,且生根持续时间长.(3)在B5无铵无激素固体培养基上,毛状根分支多且根较长,达2-3 cm,毛状根鲜重月平均增殖达7-9倍,是固体培养毛状根的适宜培养基.(4)毛状根在MS无铵无激素液体培养基中培养12 d时,毛状根鲜重平均增殖达12倍,MS无铵液体培养基有利于毛状根的扩大生产.首次获得了激素自主、快速伸长生长、多分支、多根毛的新疆紫草毛状根株系,初步建立了新疆紫草毛状根诱导体系,为大规模培养、生产紫草素奠定了基础. 展开更多
关键词 新疆紫草 发根农杆菌 毛状根 PCR检测
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Ti和Ri质粒对栝楼双转化的研究 被引量:12
16
作者 雷和田 宋经元 +3 位作者 祁荫麟 张荫麟 杨峻山 郭志刚 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期162-165,共4页
目的 :建立栝楼双转化毛状根培养系统。方法 :①利用根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens菌株C5 8感染栝楼Trichosantheskirilowii.无菌苗诱导冠瘿瘤 ,然后用发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes菌株 15 834感染其再生植株 ,诱导出毛状... 目的 :建立栝楼双转化毛状根培养系统。方法 :①利用根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens菌株C5 8感染栝楼Trichosantheskirilowii.无菌苗诱导冠瘿瘤 ,然后用发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes菌株 15 834感染其再生植株 ,诱导出毛状根 ;②用纸电泳检测Ti和Ri质粒是否转化成功 ;③运用分光光度计和SDS PAGE检测栝楼组织中所含蛋白。结果 :Ti和Ri质粒转化成功并建立了栝楼双转化毛状根培养系统。结论 :双转化毛状根与一般毛状根相比 ,具有生长更迅速等特点而蛋白含量基本一样 ;因此 。 展开更多
关键词 栝楼 冠瘿瘤 双转化毛状根 TI质粒 RI质粒
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木本曼陀罗毛状根植株再生体系的建立 被引量:16
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作者 张继栋 杨雪清 +4 位作者 乔爱民 孙敏 何生根 雷桅 尹彩霞 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期480-485,共6页
建立了木本曼陀罗(Datura arborea L.)毛状根的植株再生体系并对再生植株进行了初步检测。采用"一步法"诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA2.0mgL-1+NAA0.2mgL-1;采用"两步法"诱导不定芽时,先在MS+6-BA4.0mgL-1+KT0.5... 建立了木本曼陀罗(Datura arborea L.)毛状根的植株再生体系并对再生植株进行了初步检测。采用"一步法"诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA2.0mgL-1+NAA0.2mgL-1;采用"两步法"诱导不定芽时,先在MS+6-BA4.0mgL-1+KT0.5mgL-1+2,4-D0.5mgL-1上诱导愈伤组织,然后在MS+6-BA4.0mgL-1+NAA0.2mgL-1上诱导愈伤组织分化不定芽。诱导不定芽的最适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1mgL-1。用PCR技术从再生植株叶片中得到了rolB、rolC目的基因片段。HPLC检测结果表明毛状根再生植株中莨菪烷类生物碱(Tropane alkaloids,TA)的含量较野生植株有明显的提高。 展开更多
关键词 木本曼陀罗 毛状根 再生 莨菪碱 东莨菪碱
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反相高效液相色谱法测定黄芪和黄芪毛状根中大极性异黄酮成分的含量 被引量:12
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作者 宋纯清 阎龙 +2 位作者 王海燕 刘涤 胡之壁 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1999年第2期12-17,共6页
本文用RP-HPLC法测定了黄芪和黄芪毛状根中四种大极性异黄酮成分,同时比较了硅胶处理法和溶剂萃取法制备样品对含量测定的影响.结果显示:对于极性较大的化合物用前法更精确、可靠、快速、误差小,将为生产工艺提供质量检测的可靠依据.色... 本文用RP-HPLC法测定了黄芪和黄芪毛状根中四种大极性异黄酮成分,同时比较了硅胶处理法和溶剂萃取法制备样品对含量测定的影响.结果显示:对于极性较大的化合物用前法更精确、可靠、快速、误差小,将为生产工艺提供质量检测的可靠依据.色谱柱采用大连化学物理研究所的YMG C_(18)柱(250mm×4.6mmID;10μm)流动相为:①MeOH:MeCN:H_2O=40:5:60,②MeOH:MeCN:H_2O=28:5:67,流速为1.0ml/min,检测波长:230nm. 展开更多
关键词 高效液相色谱 黄芪 黄芪毛状根 异黄酮 含量
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毛状根的研究进展及应用 被引量:16
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作者 姜伊娜 武天龙 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第1期27-32,共6页
作为一种天然遗传工程菌株,发根农杆菌可侵染160多种植物,使植物产生特殊的形态学变化并诱导植物产生大量的毛状根。由于毛状根可稳产高产的生成大量有重要价值的植物次生代谢物质,近几十年来毛状根系统的研究受到越来越多的关注。简要... 作为一种天然遗传工程菌株,发根农杆菌可侵染160多种植物,使植物产生特殊的形态学变化并诱导植物产生大量的毛状根。由于毛状根可稳产高产的生成大量有重要价值的植物次生代谢物质,近几十年来毛状根系统的研究受到越来越多的关注。简要阐述了发根农杆菌诱导毛状根生成的机理,着重介绍了毛状根培育的研究进展及在生产植物次级代谢产物方面的应用。 展开更多
关键词 发根农杆菌 毛状根 RI质粒 次生代谢物
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掌叶大黄毛状根培养及培养物中蒽醌类成分分析 被引量:12
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作者 常振战 果德安 +2 位作者 沈昕 王沙生 郑俊华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第11期869-872,共4页
大黄是我国特产的世界著名的传统中药,历代本草均有记载,始载于《神农本草经》,“味苦寒,有毒。主下瘀血、血闭、寒热,破征瘕积聚、留饮宿食,荡涤肠胃,推陈致新,通利水谷,调中化食,安和五脏”。作者已于近期报道了天山大黄发... 大黄是我国特产的世界著名的传统中药,历代本草均有记载,始载于《神农本草经》,“味苦寒,有毒。主下瘀血、血闭、寒热,破征瘕积聚、留饮宿食,荡涤肠胃,推陈致新,通利水谷,调中化食,安和五脏”。作者已于近期报道了天山大黄发根的诱导方法[1]掌叶大黄Rheu... 展开更多
关键词 掌叶大黄 毛状根 培养 蒽醌 成分分析
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