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基于纳米金探针和基因芯片的DNA检测新方法 被引量：10
1
作者 包华 贾春平 +2 位作者 周忠良 金庆辉 赵建龙 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第18期2144-2148,共5页
运用荧光纳米金探针和基因芯片杂交建立一种新的DNA检测方法.荧光纳米金探针表面标记有两种DNA探针:一种为带有Cy5荧光分子的信号探针BP1,起信号放大作用;另一种为与靶DNA一部分互补的检测探针P532,两种探针比例为5∶1.当靶DNA存在时,... 运用荧光纳米金探针和基因芯片杂交建立一种新的DNA检测方法.荧光纳米金探针表面标记有两种DNA探针:一种为带有Cy5荧光分子的信号探针BP1,起信号放大作用;另一种为与靶DNA一部分互补的检测探针P532,两种探针比例为5∶1.当靶DNA存在时,芯片上捕捉探针(与靶DNA的另一部分互补)通过碱基互补配对结合靶DNA,将靶DNA固定于芯片上;荧光纳米金探针通过检测探针与靶DNA及芯片结合,在芯片上形成"三明治"复合结构,最后通过检测信号探针上荧光分子的信号强度来确定靶DNA的量.新方法检测灵敏度高,可以检测浓度为1 pmol/L的靶DNA,操作简单,检测时间短.通过改进纳米金探针的标记和优化杂交条件,可进一步提高核酸检测的灵敏度,这将在核酸检测方面具有重要的应用价值. 展开更多
关键词 纳米金探针 荧光探针 基因芯片 杂交 DNA检测
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基于纳米金探针和蛋白芯片高灵敏检测肺癌CEA和CYFRA21-1标志物 被引量：4
2
作者 王文涛 贾春平 +2 位作者 金庆辉 赵建龙 张国俊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期500-503,共4页
目的构建基于纳米金探针和蛋白芯片的快速、多肿瘤标志物高灵敏检测体系。方法将待检测的肿瘤标志物捕获抗体(捕获待测抗原)结合在醛基化修饰的玻片上;用检测抗体制备纳米金探针;经过免疫反应形成三明治夹心结构(蛋白芯片-目标蛋白-纳... 目的构建基于纳米金探针和蛋白芯片的快速、多肿瘤标志物高灵敏检测体系。方法将待检测的肿瘤标志物捕获抗体(捕获待测抗原)结合在醛基化修饰的玻片上;用检测抗体制备纳米金探针;经过免疫反应形成三明治夹心结构(蛋白芯片-目标蛋白-纳米金探针)。利用纳米金沉积的方法进行染色,通过肉眼或显微镜观察显色结果。结果该蛋白检测体系在1 h内可检测两种肿瘤标志物,其中CEA可检测到最低浓度为45 pg/mL,CYFRA21-1可检测到90 pg/mL,与传统的酶联免疫吸附法(ELISA)相比,检测灵敏度大大提高。并利用此体系,检测肺癌患者及正常人血清,结果与临床所用电化学分析方法一致。结论该检测体系操作简单、方便、快速,同时具有高灵敏度、多指标联合检测等优点,在临床蛋白检测中具有重要的价值和应用前景。 展开更多
关键词 纳米金探针 蛋白芯片 纳米金沉积 肿瘤标志物 肺癌
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环介导等温扩增结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术快速检测脑膜炎奈瑟菌 被引量：4
3
作者 陈银 葛以跃 +3 位作者 赵康辰 崔仑标 史智扬 周明浩 《江苏预防医学》 CAS 2018年第6期607-610,共4页
目的 建立一种适合现场使用、灵敏、特异的脑膜炎奈瑟菌（N.men）检测方法。 方法 针对N.men的ctrA基因设计环介导等温扩增（LAMP）特异性引物和核酸侵入反应探针，对LAMP扩增产物进行核酸级联侵入反应和纳米金颗粒探针杂交检测。优... 目的 建立一种适合现场使用、灵敏、特异的脑膜炎奈瑟菌（N.men）检测方法。 方法 针对N.men的ctrA基因设计环介导等温扩增（LAMP）特异性引物和核酸侵入反应探针，对LAMP扩增产物进行核酸级联侵入反应和纳米金颗粒探针杂交检测。优化反应体系和反应条件后进行敏感性和特异性实验，并与Real-Time PCR检测方法进行比较。 结果 以核酸级联侵入反应和纳米金颗粒探针显色技术检测LAMP扩增产物和毛细管电泳法具有相同的敏感性和特异性；LAMP结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术的检测敏感性为10 copies DNA分子/反应，且与其他病原体之间无交叉反应。在临床样本检测方面，LAMP结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术与Real-Time PCR检测效果相当。 结论 结合LAMP、核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术建立的N.men检测方法灵敏、特异，无需特殊仪器，适用于基层检测和现场快速检测。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 环介导等温扩增 核酸级联侵入反应 纳米金颗粒探针
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浊点萃取-纳米金探针联用可视化检测鱼肉中的Hg^(2+) 被引量：1
4
作者 王正 王晓伟 +4 位作者 郭蒙京 李倩 薛颖 沙博郁 赵婕 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第8期3197-3201,共5页
目的建立一种浊点萃取与纳米金探针联用快速可视化检测鱼肉中Hg^(2+)的方法。方法修饰的纳米金粒子与Hg^(2+)的特异性络合,经浊点萃取进入有机相,并出现可肉眼观察的红色沉淀。根据有机相中沉淀量的多少或颜色深浅可判定Hg2+的浓度。结... 目的建立一种浊点萃取与纳米金探针联用快速可视化检测鱼肉中Hg^(2+)的方法。方法修饰的纳米金粒子与Hg^(2+)的特异性络合,经浊点萃取进入有机相,并出现可肉眼观察的红色沉淀。根据有机相中沉淀量的多少或颜色深浅可判定Hg2+的浓度。结果 Hg^(2+)的浓度在1~15μg/L范围内,沉淀量和沉淀颜色与溶液中的Hg^(2+)的浓度呈正相关。本方法肉眼可识别的Hg^(2+)的浓度最低为2μg/L。结论本方法对Hg^(2+)的选择性好、灵敏度较高、检测时间短、操作简便,可用于鱼肉中Hg^(2+)的的快速定性分析。 展开更多
关键词 浊点萃取 纳米金探针 可视化检测 汞 鱼
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新型比色法快速测定天然矿泉水中的痕量汞离子
5
作者 王正 王晓伟 +3 位作者 薛颖 赵榕 罗仁才 陈东 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期640-644,共5页
目的运用浊点萃取与纳米金探针联用技术,建立快速可视化检测天然矿泉水中汞离子的方法。方法合成可与汞离子特异性结合的小粒径纳米金探针,在pH 7.5条件下,于10 mL样品中加入200μL纳米金探针溶液和400μL 5%的Triton X-114进行浊点萃取... 目的运用浊点萃取与纳米金探针联用技术,建立快速可视化检测天然矿泉水中汞离子的方法。方法合成可与汞离子特异性结合的小粒径纳米金探针,在pH 7.5条件下,于10 mL样品中加入200μL纳米金探针溶液和400μL 5%的Triton X-114进行浊点萃取,样品中的汞离子可进入Triton X-114相生色,通过观察Triton X-114相颜色的变化以及分光光度计检测,实现天然矿泉水中痕量汞离子的定性与定量检测。结果本方法肉眼可识别的汞离子浓度最低为5μg/L,分光光度法的检出限为1.8μg/L,线性范围为0~50μg/L,相关系数0.9945,分光光度法浓度测定结果与电感耦合等离子质谱法测定结果一致。结论该方法灵敏度高,检测时间短,操作简便,可用于天然矿泉水中汞离子的快速定性以及定量检测。 展开更多
关键词 浊点萃取 纳米金探针 比色法 汞离子
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纳米探针芯片技术用于微量乙肝病毒DNA的检测 被引量：12
6
作者 汪毅 毛红菊 +3 位作者 臧国庆 张宏莲 金庆辉 赵建龙 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1133-1138,共6页
利用两组探针修饰的微粒:(1)表面标记有可与待测乙肝病毒(HBV)DNA另一端结合的纳米金探针1(信号探针)以及可与信号探针部分结合的纳米金探针2(检测探针);(2)表面标记有可与待测HBVDNA一端结合的磁珠探针(捕捉探针1)。检测靶HBV DNA时,... 利用两组探针修饰的微粒:(1)表面标记有可与待测乙肝病毒(HBV)DNA另一端结合的纳米金探针1(信号探针)以及可与信号探针部分结合的纳米金探针2(检测探针);(2)表面标记有可与待测HBVDNA一端结合的磁珠探针(捕捉探针1)。检测靶HBV DNA时,磁珠探针与信号探针在液相中可分别与HBV DNA靶序列一端结合最终形成三明治样结构。再以磁场将三明治样复合物从反应液中分离,以DTT溶液将信号探针从纳米金颗粒上洗脱。洗脱后的信号探针数量反映靶基因的多寡,信号探针一段与预先点样的基因芯片上的捕捉探针2结合,检测探针与信号探针另一段相结合,最后用银染液将检测探针显色从而得到靶目标DNA相对定量信息。结果表明,本检测方法的检测灵敏度达到10-15mol/L水平。检测时间少于1.5h,检测结果与HBV DNA水平呈现较好的线性关系且无假阳性结果;本方法有望用于乙肝病人血清中HBV DNA的快速筛测及其它微生物基因的检测。 展开更多
关键词 乙肝病毒DNA 纳米金探针 生物条形码扩增 纳米探针芯片
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