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题名大豆血红蛋白串联基因簇转化根瘤菌工程菌株的构建
被引量：2
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作者
于海鹏
潘钰
李海英
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机构
黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室
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出处
《黑龙江大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2011年第2期233-236,共4页
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基金
黑龙江省科技攻关项目(GA08B101)
哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2009XK001004)
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文摘
研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为lbX),并构建了lbX的原核表达载体pTR-Plac-lbX;采用三亲本杂交的方法,将原核表达载体pTR-Plac-lbX转化土著大豆根瘤菌,构建转基因根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lbX),为研究转基因工程菌株对大豆根瘤固氮能力的影响奠定基础。
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关键词
大豆根瘤菌
大豆血红蛋白基因
串联基因簇
DNA重组技术
三亲本杂交
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Keywords
native Rhizobium japonicum
glycine max leghemoglobin gene
tandem genes cluster
DNA recombinant technology
triparental hybridization
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分类号
S566.3
[农业科学—作物学]
S188
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题名大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建
被引量：2
- 2
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作者
于海鹏
潘钰
蒙明明
李海英
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机构
黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室
黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心
中国农业科学院农业信息研究所
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期69-74,共6页
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基金
哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2009XK001004)
黑龙江省科技攻关项目(GA08B101)
黑龙江大学高层次人才(创新团队)支持计划(Hdtd2010-05)
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文摘
以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。
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关键词
土著大豆根瘤菌
大豆血红蛋白基因lba
DNA重组技术
工程菌株
三亲本杂交
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Keywords
Native Rhizobium japonicum glycine max leghemoglobin gene lba DNA recombinant technique Engineering strain Triparental hybridization
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分类号
S144.3
[农业科学—肥料学]
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