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瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑GABA含量及其受体表达的影响 被引量：8
1
作者 陈梦婷 鲁元星 +1 位作者 张力 唐玲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期709-713,共5页
目的观察瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)含量及其受体表达的影响,并探讨可能的机制。方法采用随机数字表法将雄性C57BL/6小鼠分为对照组、睡眠剥夺组、瘦素补充组,每组8只。对照组设置水环境不剥夺睡眠;睡眠剥夺组利用改良... 目的观察瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)含量及其受体表达的影响,并探讨可能的机制。方法采用随机数字表法将雄性C57BL/6小鼠分为对照组、睡眠剥夺组、瘦素补充组,每组8只。对照组设置水环境不剥夺睡眠;睡眠剥夺组利用改良多平台水环境法建立小鼠睡眠剥夺模型;瘦素补充组在剥夺同时予以每天两次瘦素1.3 mg/kg腹腔给药。睡眠剥夺7 d后,观察小鼠一般情况,测量体重并采集下丘脑组织和血浆标本,ELISA法检测各组小鼠血浆瘦素水平,下丘脑GABA、谷氨酸(Glu)含量。Western blotting检测下丘脑组织中GABA关键合成酶谷氨酸脱羧酶67(GAD67)及GABAA受体α1亚型蛋白(GABAARα1)的表达水平。结果与对照组相比,睡眠剥夺组小鼠体重明显减轻[(22.03±0.42)g vs.(17.75±0.75)g,P<0.01],而瘦素补充组小鼠体重[(15.10±0.38)g]较对照组和睡眠剥夺组均明显减轻(P<0.01)。与对照组比较,睡眠剥夺组小鼠皮毛失去光滑,对光线和声音特别敏感,表现为轻微躁狂,攻击性强,血浆瘦素水平明显降低[(483.81±21.72)ng/ml vs.(359.14±16.69)ng/ml,P<0.01],下丘脑GABA水平明显降低[(152.37±8.14)ng/g vs.(111.31±2.96)ng/g,P<0.05]。瘦素补充组小鼠下丘脑GABA水平[(132.19±3.38)ng/g]明显高于睡眠剥夺组[(111.31±2.96)ng/g,P<0.05],但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。睡眠剥夺组、瘦素补充组小鼠下丘脑Glu水平[分别为(686.56±10.01)ng/g、(668.64±9.93)ng/g]较对照组[(577.11±16.36)ng/g]明显升高(P<0.05),而瘦素补充组与睡眠剥夺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。睡眠剥夺组小鼠下丘脑GAD67、GABAARα1蛋白表达[分别为0.68±0.06、0.69±0.07]较对照组(分别为1.09±0.13、0.99±0.07)明显降低(P<0.05),而瘦素补充组(分别为1.39±0.19、1.33±0.14)较睡眠剥夺组及对照组均明显升高(P<0.05)。结论瘦素可上调睡眠剥夺小鼠下丘脑内GABA关键合成酶GAD67的表达,升高下丘脑GA 展开更多
关键词 瘦素 睡眠剥夺 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶67 GABAA受体α1亚型蛋白
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核因子-κB介导氯胺酮所致微清蛋白阳性中间神经元表型缺失 被引量：5
2
作者 王娴 杨春 +2 位作者 周志强 杨建军 徐建国 《医学研究生学报》 CAS 2010年第7期688-691,共4页
目的微清蛋白(parvalbumin,PV)阳性中间神经元的表型缺失在众多心理精神改变中起重要作用。文中研究观察在体外神经元培养中,核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与了氯胺酮所致PV阳性中间神经元表型缺失过程。方法采用0.5μmo... 目的微清蛋白(parvalbumin,PV)阳性中间神经元的表型缺失在众多心理精神改变中起重要作用。文中研究观察在体外神经元培养中,核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与了氯胺酮所致PV阳性中间神经元表型缺失过程。方法采用0.5μmol/L氯胺酮(氯胺酮组)、0.5μmol/L氯胺酮复合5μmol/LNF-κB转录抑制剂SN50(SN50组)及单纯培养基(对照组)处理体外原代培养21d的神经元,24h后检测神经元NF-κB活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成及PV阳性中间神经元PV和谷氨酸脱羧酶-67(glutamic acid decarboxylase-67,GAD67)的表达。结果氯胺酮组NF-κB活性是对照组的1.5倍(P<0.05),ROS生成是其2.1倍(P<0.05),PV阳性中间神经元PV及GAD67表达分别是其67.6%和63.0%(P<0.05)。与对照组比,SN50组NF-κB的活性、ROS生成、PV阳性中间神经元PV及GAD67表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在体外神经元培养中,NF-κB活化介导了氯胺酮所致PV阳性中间神经元PV及GAD67表达下降过程。 展开更多
关键词 氯胺酮 微清蛋白 核因子-ΚB SN50 活性氧 谷氨酸脱羧酶-67
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催产素对抑郁症模型大鼠中央杏仁核中催产素受体表达的影响 被引量：4
3
作者 申采薇 徐玉英 游言文 《解剖学研究》 CAS 2022年第2期139-145,共7页
目的探讨催产素(OT)在中央杏仁核(CeA)中改善抑郁症模型(CUMS)大鼠抑郁样行为的作用机制。方法36只SD大鼠随机分为对照组,模型组(抑郁组)和给药组。制作抑郁模型,给药组每天催产素干预,连续21d。糖水偏好实验和强迫游泳实验评价各组大... 目的探讨催产素(OT)在中央杏仁核(CeA)中改善抑郁症模型(CUMS)大鼠抑郁样行为的作用机制。方法36只SD大鼠随机分为对照组,模型组(抑郁组)和给药组。制作抑郁模型,给药组每天催产素干预,连续21d。糖水偏好实验和强迫游泳实验评价各组大鼠抑郁样行为;透射电镜技术检测CeA内突触超微结构的变化;免疫荧光双标法标记催产素受体(OTR),分别与谷氨酸脱羧酶67(GAD67)、谷氨酰胺酶(PAG)共标。结果造模前各组大鼠强迫游泳不动时间和糖水偏好率差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,造模组大鼠不动时间显著增加(P<0.01),糖水偏爱率下降(P<0.05);与造模组相比,给药组大鼠不动时间显著减少(P<0.01),糖水偏爱率显著升高(P<0.01)。透射电镜结果显示,与对照组比较,模型组中的对称型突触数量减少(P<0.05),突触间隙增加(P<0.01);与模型组比较,给药组的对称型突触数量增加(P<0.01),突触间隙变窄(P<0.01)。免疫荧光双标实验中显示,与对照组对比,模型组大鼠CeA中OTR和GAD67双标阳性细胞数量明显减少(P<0.01),OTR和PAG双标阳性细胞数量有增加,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,给药组大鼠CeA中OTR和GAD67双标阳性细胞数量增加(P<0.05),OTR和PAG的双标阳性细胞数量有减少趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。结论OT可改善CUMS大鼠的抑郁样行为,其作用机制可能与CeA中OT通过OTR调节抑制性GABA神经元,导致抑制性突触输出发生变化。 展开更多
关键词 催产素 慢性不可预知性应激 中央杏仁核 谷氨酸脱羧酶67 谷氨酰胺酶
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精神分裂症的表观遗传学机制及其相关药物的研究进展 被引量：2
4
作者 闻荣海 周晓娟 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期892-896,共5页
目的为药物治疗精神分裂症提供新的优化治疗方案。方法介绍近年来具有表观遗传学作用特点的抗精神病药物的研究进展。结果有3种药物包括丙戊酸是目前具有表观遗传学作用机制的抗精神病药物。结论应重视联用具有表观遗传学作用的抗精神... 目的为药物治疗精神分裂症提供新的优化治疗方案。方法介绍近年来具有表观遗传学作用特点的抗精神病药物的研究进展。结果有3种药物包括丙戊酸是目前具有表观遗传学作用机制的抗精神病药物。结论应重视联用具有表观遗传学作用的抗精神病药物治疗难治性精神分裂症。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶1 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 络丝蛋白 谷氨酸脱羧酶67 丙戊酸
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电针对癫痫模型大鼠自发性反复发作及海马CA3和DG区谷氨酸脱羧酶67表达的影响
5
作者 高东升 杨晓燕 +4 位作者 马临庆 谢云亮 龙莉莉 肖波 马舒宇 《国际神经病学神经外科学杂志》 2022年第5期1-6,共6页
背景由于对药物疗法不良反应的担忧,近几年人们对使用针灸治疗癫痫越来越感兴趣。尽管现已报道了不少针灸抗癫痫作用的临床证据,但其确切机制仍不清楚。目的 研究电针(EA)对癫痫大鼠自发性复发性癫痫(SRS),以及海马CA3和齿状回(DG)区中... 背景由于对药物疗法不良反应的担忧,近几年人们对使用针灸治疗癫痫越来越感兴趣。尽管现已报道了不少针灸抗癫痫作用的临床证据,但其确切机制仍不清楚。目的 研究电针(EA)对癫痫大鼠自发性复发性癫痫(SRS),以及海马CA3和齿状回(DG)区中谷氨酸脱羧酶67(GAD67)表达的影响。方法 将50只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、癫痫组、假刺激组、非穴位电针组和穴位电针组,每组10只。除对照组外,其余4组均制备氯化锂—匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型。造模成功的大鼠采用针刺或电针穴位治疗,8周后观察自发性复发性癫痫发作的次数。分别取5组大鼠海马组织,采用荧光定量PCR和Western blotting分别检测各组大鼠海马组织中GAD67 mRNA水平和蛋白水平表达变化;采用免疫组化法检测各组大鼠海马CA3和DG区GAD67蛋白水平表达变化。结果 治疗8周后,穴位电针组与癫痫组、假刺激组、非穴位电针组比较,减少了自发性复发性癫痫发作的次数,差异有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR结果显示:与对照组相比,癫痫组、假刺激组、非穴位电针组和穴位电针组大鼠海马组织中GAD67 mRNA表达均下调,差异有统计学意义(P<0.01);通过8周电针百会和大椎穴连续治疗后,穴位电针组与癫痫组、假刺激组、非穴位电针组比较,大鼠海马组织中GAD67 mRNA水平与上调,差异有统计学意义(P<0.01);假刺激组和非穴位电针组中GAD67 mRNA水平与癫痫组相比,无统计学意义(P>0.05)。Western blotting和免疫组化结果显示:GAD67蛋白水平变化趋势与mRNA水平相一致。结论 电针百会和大椎穴对癫痫大鼠具有一定的疗效,并与CA3和DG区GAD67表达水平的变化有关。 展开更多
关键词 癫痫 自发性复发性癫痫发作 电针 谷氨酸脱羧酶67 海马 大鼠
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大鼠大脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD67基因的克隆和序列测定
6
作者 邓志刚 陈盛强 陈德忠 《现代临床医学生物工程学杂志》 2004年第2期106-108,共3页
目的　克隆大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因 .方法　采用RT -PCR方法 ,大鼠脑组织中的mRNA逆转录成cDNA ,再以cDNA为模板 ,扩增谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因片段 ,克隆入T载体 ,并经序列测定 .结果　RT -PCR法扩增出一特异产物与预期长度... 目的　克隆大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因 .方法　采用RT -PCR方法 ,大鼠脑组织中的mRNA逆转录成cDNA ,再以cDNA为模板 ,扩增谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因片段 ,克隆入T载体 ,并经序列测定 .结果　RT -PCR法扩增出一特异产物与预期长度 1795bp相符 ,T载体克隆测序与大鼠谷氨酸脱羧酶GAD6 710 0 %同源 .结论　采用RT -PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因克隆 ,为该基因的体外表达打下基础 . 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶67 CDNA克隆 逆转录 聚合酶链式反应 大鼠
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三叉神经电刺激对慢性癫痫大鼠癫痫状态所致海马神经元损伤的保护作用观察 被引量：6
7
作者 左健 贺慧艳 +3 位作者 王倩倩 尹娜 谢成娟 王玉 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期250-254,共5页
目的观察经皮三叉神经电刺激对匹罗卡品诱发癫痫持续状态（sE）大鼠海马神经元的保护作用及对大鼠谷氨酸脱羧酶（GAD65／67）表达的影响。方法通过匹罗卡品建立癫痫点燃模型（即慢性癫痫模型），采用随机数字表法将其分为治疗组及模型... 目的观察经皮三叉神经电刺激对匹罗卡品诱发癫痫持续状态（sE）大鼠海马神经元的保护作用及对大鼠谷氨酸脱羧酶（GAD65／67）表达的影响。方法通过匹罗卡品建立癫痫点燃模型（即慢性癫痫模型），采用随机数字表法将其分为治疗组及模型组，同时选取正常大鼠纳入空白对照组进行对照。治疗组及模型组大鼠于制模后分别给予三叉神经电刺激或假刺激持续1个月。于电刺激结束并再次诱发sE后6h、24h、48h及72h分别采用TUNNEL和Nissl染色观察各组大鼠SE后海马神经元原位凋亡及脱失情况；于电刺激结束后24h、72h、1周、2周及4周时分别采用免疫组化法检测各组大鼠GAD65／67表达情况。结果sE后24h、48h及72h治疗组海马区TUNNEL阳性细胞、Nissl受损细胞均较模型组显著减少（P〈0．05），并以SE后72h治疗组减少幅度尤为显著（P〈0．05）。电刺激结束后24h、72h、1周、2周及4周时治疗组GAD65／67表达均较模型组明显增强（P〈0．05），治疗组GAD65于电刺激结束72h～1周时达到峰值，随后缓慢下降，于电刺激结束4周时接近正常水平。治疗组及模型组大鼠GAD67表达均未见明显峰值，治疗组GAD67表达至电刺激结束4周时仍显著强于模型组水平（P〈0．05）。结论经皮三叉神经电刺激治疗对癫痫大鼠海马神经细胞具有保护作用，增强脑内抑制功能可能是其发挥脑保护及抗癫痫作用机制之一。 展开更多
关键词 癫痫 经皮三叉神经电刺激 神经保护 谷氨酸脱羧酶
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淋巴性脑水肿大鼠孤束背内侧亚核Glu、GABA及GAD67的时程变化
8
作者 宋希俊 郑延红 +3 位作者 刘新民 王立为 赵晓民 夏作理 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第3期64-67,72,共5页
目的观察淋巴性脑水肿(LBE)模型大鼠孤束背内侧亚核(dmNTS)内谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的改变及谷氨酸脱羧酶亚型67(GAD67)表达的时程变化,并探讨其意义。方法应用免疫组化方法,观察LBE大鼠dmNTS内Glu、GABA及GAD67在颈淋巴引流... 目的观察淋巴性脑水肿(LBE)模型大鼠孤束背内侧亚核(dmNTS)内谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的改变及谷氨酸脱羧酶亚型67(GAD67)表达的时程变化,并探讨其意义。方法应用免疫组化方法,观察LBE大鼠dmNTS内Glu、GABA及GAD67在颈淋巴引流阻滞后不同时间点的变化情况。结果 LBE组Glu改变及GAD67表达在颈淋巴引流阻滞后1 d即开始升高,至第7天达高峰,后逐渐下降,于21 d恢复;而GABA在颈淋巴引流阻滞后1d即开始降低,至第7天降至最低,后逐渐升高,于21d恢复。结论 LBE大鼠dmNTS内Glu和GA-BA的改变可能参与了血压调节功能的降低;GAD67早期表达逐渐增加,可能是机体的一种代偿性机制,有助于神经递质水平的平衡和恢复。 展开更多
关键词 淋巴性脑水肿 孤束背内侧亚核 谷氨酸 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶亚型67 大鼠
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人类GAD_(67)基因扩增及pEGFP-C2-GAD_(67)真核表达载体的构建 被引量：1
9
作者 刘智良 马宏伟 +3 位作者 姚志彬 徐如祥 张世忠 王娆 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2006年第11期1090-1092,共3页
目的扩增人类谷氨酸脱羧酶(GAD)67基因,并构建pEGFP-C2-GAD67真核表达载体。方法应用基因重组技术,采用反转录PCR方法对来自人类脑组织cDNA中编码GAD67的基因片段进行扩增,插入PUC57克隆载体,经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切出GAD67基因片段,再... 目的扩增人类谷氨酸脱羧酶(GAD)67基因,并构建pEGFP-C2-GAD67真核表达载体。方法应用基因重组技术,采用反转录PCR方法对来自人类脑组织cDNA中编码GAD67的基因片段进行扩增,插入PUC57克隆载体,经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切出GAD67基因片段,再克隆入真核表达载体pEGFP-C2后构建pEGFP-C2-GAD67重组载体,经PCR扩增、酶切后测序鉴定。结果人类GAD67基因扩增产物大小为1785bp,编码594个氨基酸残基。重组真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子,PCR正确扩增出目的条带。与GenBank中人类GAD67基因序列比较,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别达99.78%和99.66%。结论人类GAD67基因克隆后,可成功构建真核表达载体pEGFP-C2-GAD67,为进一步该基因转染神经干细胞移植治疗癫痫提供了实验基础。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶(GAD)67 克隆 真核表达质粒
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携带人类GAD_(67)基因真核表达载体的构建及转染骨髓基质细胞
10
作者 谢三平 陈吉相 +2 位作者 李慧 徐婧 黄园园 《神经损伤与功能重建》 2011年第4期235-240,共6页
目的:构建携带人类谷氨酸脱羧酶67(GAD67)基因的真核表达载体pDC316-CMV-EGFP-GAD67,并转染大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)。方法:利用基因重组技术,构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体;利用脂质体将其转染通过贴壁方法分离培养出来的BMS... 目的:构建携带人类谷氨酸脱羧酶67(GAD67)基因的真核表达载体pDC316-CMV-EGFP-GAD67,并转染大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)。方法:利用基因重组技术,构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体;利用脂质体将其转染通过贴壁方法分离培养出来的BMSCs,荧光显微镜下观察并经流式细胞仪检测其转染效率,免疫组化检测GAD67蛋白在BMSCs中的表达。结果:成功构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体,转染BMSCs后荧光显微镜下观察可见绿色荧光细胞,流式细胞仪检测转染后48 h的转染效率为37.3%,免疫组化检测转染后48 h,BMSCs内GAD67蛋白呈阳性表达。结论:构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体并成功转染BMSCs。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶67 真核表达载体 转染 骨髓基质细胞
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