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Bacillus subtilis NX-2合成γ-聚谷氨酸的立体构型调控机理 被引量：8
1
作者 吴群 徐虹 许琳 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期458-461,共4页
探讨了在BacillussubtilisNX-2发酵生产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)过程中,Mn2+对γ-PGA结构中D-和L-谷氨酸组成的影响及其与催化L-谷氨酸生成D-谷氨酸的两个相关酶-谷氨酸消旋酶和D-氨基酸转氨酶之间的关系.当Mn2+浓度由0增加到0.09g/L时,D-... 探讨了在BacillussubtilisNX-2发酵生产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)过程中,Mn2+对γ-PGA结构中D-和L-谷氨酸组成的影响及其与催化L-谷氨酸生成D-谷氨酸的两个相关酶-谷氨酸消旋酶和D-氨基酸转氨酶之间的关系.当Mn2+浓度由0增加到0.09g/L时,D-谷氨酸比例从18%增加到77%;谷氨酸消旋酶活性从0.200U/mg变为0.441U/mg,提高了1倍多,D-氨基酸转氨酶活性则几乎没有变化.说明谷氨酸消旋酶参与了L-到D-谷氨酸的转化过程,且Mn2+是通过改变谷氨酸消旋酶的活性来调节产物γ-PGA的立体组成的,这与目前报道的枯草芽孢杆菌合成γ-PGA过程中Mn2+浓度与γ-PGA中D-,L-构型比无关的结果不同.当Mn2+浓度为0.03g/L时,发酵过程中生成的γ-PGA中D-谷氨酸比例不变,维持在75%左右. 展开更多
关键词 Γ-聚谷氨酸 立体异构 谷氨酸消旋酶 MN^2+
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不同D/L单体比γ-聚谷氨酸的合成与调控 被引量：3
2
作者 朱亚鑫 段艳婷 +6 位作者 高宇豪 王籍阅 张晓梅 张晓娟 徐国强 史劲松 许正宏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-11,共11页
聚谷氨酸(γ-PGA)是由L-谷氨酸和/或D-谷氨酸聚合而成的一种聚氨基酸,广泛应用于化妆品、医药等领域。高聚物单体的立体构型会影响产品性质和应用,因此调控γ-PGA中D-谷氨酸/L-谷氨酸单体比(D/L单体比)具有重要意义。前期以谷氨酸棒杆... 聚谷氨酸(γ-PGA)是由L-谷氨酸和/或D-谷氨酸聚合而成的一种聚氨基酸,广泛应用于化妆品、医药等领域。高聚物单体的立体构型会影响产品性质和应用,因此调控γ-PGA中D-谷氨酸/L-谷氨酸单体比(D/L单体比)具有重要意义。前期以谷氨酸棒杆菌为底盘,表达来自于地衣芽孢杆菌的γ-PGA合成酶,合成以L-Glu(97.10%)为主的γ-PGA。通过外源添加不同浓度D-谷氨酸,合成了D-谷氨酸占比为15.71%~33.52%的γ-PGA。然后,在重组菌中表达来自于枯草芽孢杆菌的谷氨酸消旋酶,并使用三个不同强度RBS调控其表达水平,合成D-谷氨酸占比30.82%~34.59%的γ-PGA,但调控范围较窄。利用四个不同强度启动子调控谷氨酸消旋酶表达水平,扩大D/L单体比可调范围,合成D-Glu占比32.71%~52.53%的γ-PGA。提供一种理性调控γ-PGA的D/L单体比策略,实现了D-谷氨酸占比为2.90%~52.53%的γ-PGA的合成,为高效合成不同D/L单体比γ-PGA提供了基础。 展开更多
关键词 Γ-聚谷氨酸 D/L单体比 谷氨酸消旋酶 RBS 启动子
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地衣芽孢杆菌谷氨酸消旋酶基因克隆、原核表达及生物信息学分析 被引量：1
3
作者 邬旭龙 杨敏 +5 位作者 肖璐 张婧 杨苗 谢礼 安微 林华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期114-118,138,共6页
为了进一步分析谷氨酸消旋酶的结构和生物信息功能,试验以γ-PGA生产菌株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY136为材料,PCR扩增其谷氨酸消旋酶基因(racE),纯化racE基因进行原核表达,并运用多种在线生物信息学分析软件对该基因编码... 为了进一步分析谷氨酸消旋酶的结构和生物信息功能,试验以γ-PGA生产菌株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY136为材料,PCR扩增其谷氨酸消旋酶基因(racE),纯化racE基因进行原核表达,并运用多种在线生物信息学分析软件对该基因编码蛋白质的理化性质、亲/疏水性、信号肽、结构域等进行分析。结果表明:PCR扩增racE基因条带大小为819 bp,对racE基因进行大肠杆菌原核表达,通过构建表达载体和优化表达条件,成功表达了大小为30.15 ku的重组融合蛋白。racE蛋白编码272个氨基酸,氨基酸序列与NCBI中公布的地衣芽孢孢杆菌racE蛋白(GenBank登录号为KAA0845975.1)氨基酸同源性为99.62%。racE蛋白理化性质稳定,是亲水蛋白,无跨膜结构域,不含有信号肽,α-螺旋是其主要的二级结构,主要定位于细胞质中(73.90%)。说明racE基因保守且相对稳定,在谷氨酸的合成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 谷氨酸消旋酶 racE基因 克隆 原核表达 生物信息学分析
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靶向变异链球菌谷氨酸消旋酶的研究进展 被引量：1
4
作者 张剑英 凌均棨 《中华口腔医学研究杂志（电子版）》 CAS 2016年第5期352-355,共4页
变异链球菌是龋病发生的始动因子,与人类龋病密切相关。抑制变异链球菌致龋毒力相关的基因和酶,可影响细菌毒力因子的产生,降低细菌的致龋能力,有助于龋病的预防和治疗。谷氨酸消旋酶是一类不需辅助因子,专一催化L型和D型谷氨酸之间相... 变异链球菌是龋病发生的始动因子,与人类龋病密切相关。抑制变异链球菌致龋毒力相关的基因和酶,可影响细菌毒力因子的产生,降低细菌的致龋能力,有助于龋病的预防和治疗。谷氨酸消旋酶是一类不需辅助因子,专一催化L型和D型谷氨酸之间相互转化的酶,为细胞壁肽聚糖合成提供D-谷氨酸,是细菌生长的关键酶,目前已经成为研究和开发新型抗菌药物的新靶标。特异性靶向变异链球菌谷氨酸消旋酶,有望为龋病防治提供新的思路和方法。本文对谷氨酸消旋酶的分类、结构特征、酶抑制剂及基因遗传学等研究进展进行系统阐述,为进一步研究谷氨酸消旋酶与变异链球菌致龋毒力的关系,研发抗龋药物候选靶标提供理论基础。 展开更多
关键词 谷氨酸消旋酶 抑制剂 基因缺失突变 致龋毒力因子
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