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Expression of multiple glutamate transporter splice variants in the rodent testis 被引量:1
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作者 Aven Lee Ashley R Anderson Amanda C Barnett Anthony Chan David V Pow 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期254-265,共12页
Glutamate is a regulated molecule in the mammalian testis. Extracellular regulation of glutamate in the body is determined largely by the expression of plasmalemmal glutamate transporters. We have examined by PCR, wes... Glutamate is a regulated molecule in the mammalian testis. Extracellular regulation of glutamate in the body is determined largely by the expression of plasmalemmal glutamate transporters. We have examined by PCR, western blotting and immunocytochemistry the expression of a panel of sodium-dependent plasmalemmal glutamate transporters in the rat testis. Proteins examined included: glutamate aspartate transporter (GLAST), glutamate transporter 1 (GLT1), excitatory amino acid carrier 1 (EAAC1), excitatory amino acid transporter 4 (EAAT4) and EAAT5. We demonstrate that many of the glutamate transporters in the testis are alternately spliced. GLAST is present as exon-3- and exon-9-skipping forms. GLT1 was similarly present as the alternately spliced forms GLT1 b and GLTlc, whereas the abundant brain form (GLTla) was detectable only at the mRNA level. EAAT5 was also strongly expressed, whereas EAAC1 and EAAT4 were absent. These patterns of expression were compared with the patterns of endogenous glutamate localization and with patterns of D-aspartate accumulation, as assessed by immunocytochemistry. The presence of multiple glutamate transporters in the testis, including unusually spliced forms, suggests that glutamate homeostasis may be critical in this organ. The apparent presence of many of these transporters in the testis and sperm may indicate a need for glutamate transport by such cells. 展开更多
关键词 excitatory amino acid transporter glutamate aspartate transporter glutamate transporter 1 SPERM splice variant TESTIS transporter
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活血通络利水方含药血清在高浓度谷氨酸环境下对Müller细胞谷氨酸-天冬氨酸转运体、谷氨酰胺合成酶蛋白表达及活性的影响
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作者 贾鑫 苏学敏 +3 位作者 张越 袁立飞 杨赞章 张铭连 《河北中医》 2020年第3期425-431,共7页
目的研究活血通络利水方含药血清在高浓度谷氨酸(GLU)环境下对Müller细胞谷氨酸-天冬氨酸转运体(GLAST)、谷氨酰胺合成酶(GS)蛋白表达及活性的影响。方法将40只健康SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、银杏叶组、活血通络利水方低... 目的研究活血通络利水方含药血清在高浓度谷氨酸(GLU)环境下对Müller细胞谷氨酸-天冬氨酸转运体(GLAST)、谷氨酰胺合成酶(GS)蛋白表达及活性的影响。方法将40只健康SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、银杏叶组、活血通络利水方低剂量组和活血通络利水方高剂量组,每组10只。银杏叶组予银杏叶片水溶剂5.2 mg/kg灌胃,活血通络利水方低剂量组予活血通络利水方合剂20 g/kg灌胃,活血通络利水方高剂量组予活血通络利水方合剂40 g/kg灌胃,正常组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,每日1次,连续灌胃7 d后,腹主动脉取血后离心收集血清备用。培养Müller细胞,分别用不同浓度的GLU(0、0.1、0.5、1、10、20、25、30 mmol/L)干预24 h,采用噻唑蓝(MTT)法检测Müller细胞存活率。Müller细胞分为正常组、模型组、银杏叶组、活血通络利水方低剂量组和活血通络利水方高剂量组,正常组和模型组每孔加入正常血清0.5 mL、培养基2 mL,银杏叶组每孔加入银杏叶含药血清0.5 mL、培养基2 mL,活血通络利水方低、高剂量组每孔分别加入活血通络利水方20、40 g/kg含药血清0.5 mL、培养基2 mL。除正常组外,其余4组均加入GLU 25 mmol/L。相同条件下培养24 h后提取总蛋白,采用免疫印迹法(Western Blot)检测各组Müller细胞中GLAST、GS蛋白表达水平;用高效液相色谱法(HPLC)检测各组细胞培养液中GLU含量。结果MTT实验结果显示,GLU干预24 h后,与0 mmol/L浓度GLU比较,10 mmol/L及以下低浓度GLU细胞存活率升高(P<0.05);20、25、30 mmol/L浓度GLU细胞存活率逐渐降低(P<0.05),其中25 mmol/L浓度GLU细胞存活率下降至约0.67。Western Blot检测结果显示,与正常组比较,模型组GLAST、GS蛋白表达水平均降低(P<0.05);与模型组比较,银杏叶组和活血通络利水方低、高剂量组GLAST、GS蛋白表达水平均升高(P<0.05),且活血通络利水方高剂量组的上调高于银杏叶组( 展开更多
关键词 活血 通络 利水 谷氨酸 MÜLLER细胞 谷氨酸-天冬氨酸转运体 谷氨酰胺合成酶
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白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用研究 被引量:7
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作者 赵刚 王伟民 +3 位作者 杨帅 罗贵聪 刘晓燕 钟世镇 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期26-29,共4页
目的研究白藜芦醇(Res)对脑缺血再灌注损伤的保护作用和可能机制。方法135只大鼠按照随机数字表法分为9组,每组15只。A组为假手术组,B1、B2组分别为术后持续脑缺血和缺血再灌注后丙二醇溶液组,C1-C3组为持续脑缺血后Res干预组,D1... 目的研究白藜芦醇(Res)对脑缺血再灌注损伤的保护作用和可能机制。方法135只大鼠按照随机数字表法分为9组,每组15只。A组为假手术组,B1、B2组分别为术后持续脑缺血和缺血再灌注后丙二醇溶液组,C1-C3组为持续脑缺血后Res干预组,D1-D3组为缺血再灌注后Res干预组,药物剂量分别为10^-8g/kg、10^-7g/kg、10^-6g/kg。假手术组大鼠只分离右侧颈总动脉及颈内外动脉:脑缺血大鼠采用线栓法制作大脑中动脉栓塞模型:脑缺血再灌注大鼠缺血2h后再灌注;Res干预大鼠于再灌注2h后采用Res治疗3d。所有大鼠采用TTC法测量脑梗死体积,采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化染色测定谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)及谷氨酸转运体-1(GLT-1)蛋白表达。结果与B组比较,C组和D组中高剂量Res亚组能明显降低大鼠神经功能评分(D3组大鼠评分最低,为1.30±0.481,缩小脑梗死体积(D3组大鼠脑梗死体积比例最低,为16.00%±6.20%),降低脑含水量(D3组大鼠脑含水量最低,为52.30%±8.25%),提高GLAST和GLT-1的表达(D3组大鼠2种蛋白表达量最高,分别为39.98±0.77、171.76±7.22)。结论Res通过提高GLAST和GLT-1的表达,降低梗死区谷氨酸浓度,缩小脑梗死体积和减轻脑水肿来起到脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 脑梗死 谷氨酸 天冬氨酸转运体 谷氨酸转运体-1
原文传递
外源性瘦素通过上调星形胶质细胞GLT-1和GLAST的表达减轻小鼠脑缺血再灌注引起的谷氨酸兴奋毒性损伤
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作者 陈洁 刘晨旭 +5 位作者 王春 李丽 陶伟婷 徐婧茹 唐红辉 黄丽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1079-1087,共9页
目的 探究外源性瘦素(Leptin)对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其内在机制。方法 将100只C57BL/6小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)、瘦素低剂量组(Leptin-L组,0.5 mg/kg)、瘦素中剂量组(LeptinM组,... 目的 探究外源性瘦素(Leptin)对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其内在机制。方法 将100只C57BL/6小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组、脑缺血/再灌注模型组(I/R组)、瘦素低剂量组(Leptin-L组,0.5 mg/kg)、瘦素中剂量组(LeptinM组,1 mg/kg)和瘦素高剂量组(Leptin-H组,2 mg/kg),20只/组。采用改良线栓法复制小鼠局灶性脑缺血/再灌注模型,缺血1.5 h再灌注24 h后进行神经功能评分评估神经功能缺损程度,TTC染色测定脑梗死面积,HE染色观察皮层脑组织病理变化,退化神经元染色观察皮层神经元变性损伤程度,免疫组织化学染色测定皮层脑组织胶原酸性纤维蛋白的表达和形态变化,Western blot测定皮层脑组织胶原酸性纤维蛋白蛋白表达。在此基础上,另将45只C57BL/6小鼠随机分为Sham组、I/R组和Leptin组(1 mg/kg),15只/组。谷氨酸检测试剂盒检测皮层脑组织谷氨酸含量,免疫组织化学染色测定皮层谷氨酸-天冬氨酸转运体(GLAST)和谷氨酸转运体1(GLT-1)表达,Western blotting测定GLAST、GLT-1蛋白表达。结果 与I/R组比较,瘦素明显降低小鼠神经功能缺损评分(P<0.0001),缩小脑梗死面积(P<0.001),减轻皮层脑组织病理损伤程度,降低皮层神经元损伤程度(P<0.0001),维持星形胶质细胞正常形态及降低星形胶质细胞的过度增生和表达(P<0.01),使GLT-1、GLAST表达上调(P<0.01、P<0.05),脑组织谷氨酸含量降低(P<0.01)。结论 外源性瘦素对小鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的神经保护作用,其机制可能与调节星形胶质细胞过度增生和上调GLT-1、GLAST的表达从而降低谷氨酸的兴奋毒性损伤有关。 展开更多
关键词 瘦素 脑缺血再灌注损伤 星形胶质细胞 GLT-1 GLAST 兴奋性毒性
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GLAST与神经系统疾病的研究进展
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作者 吴芳杉 马科锋 崔博 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期119-124,共6页
谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质。生理情况下,谷氨酸发挥信号传导等重要功能;病理情况下,细胞外谷氨酸异常堆积,易造成细胞毒性水肿、神经元变性死亡等一系列兴奋性毒性损伤,导致各种神经系统疾病,如帕金森病、阿尔茨海默病... 谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质。生理情况下,谷氨酸发挥信号传导等重要功能;病理情况下,细胞外谷氨酸异常堆积,易造成细胞毒性水肿、神经元变性死亡等一系列兴奋性毒性损伤,导致各种神经系统疾病,如帕金森病、阿尔茨海默病、癫痫、视网膜损伤和听力损失等。谷氨酸-天冬氨酸转运蛋白(glutamate-aspartate transporter,GLAST)作为主要的兴奋性谷氨酸转运蛋白之一,可以维持谷氨酸浓度使其呈最适细胞外水平,防止谷氨酸在突触间隙堆积产生兴奋性毒性。本篇综述对GLAST在神经系统疾病的研究进展进行了归纳,以便增加对GLAST相关机制的了解。 展开更多
关键词 谷氨酸 兴奋性毒性 谷氨酸-天冬氨酸转运蛋白 神经系统疾病
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Dynamic expression of cerebral cortex and hippocampal glutamate transporters in a rat model of chest compression-induced global cerebral ischemia
6
作者 Qinhua Guo Jin Lan +4 位作者 Weiqiao Zhang Pin Guo Liemei Guo Zhiqiang Li Yongming Qiu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第2期125-130,共6页
The present study established a rat model of global cerebral ischemia induced by chest compression for six minutes to dynamically observe expressional changes of three glutamate transporters in the cerebral cortex and... The present study established a rat model of global cerebral ischemia induced by chest compression for six minutes to dynamically observe expressional changes of three glutamate transporters in the cerebral cortex and hippocampus. After 24 hours of ischemia, expression of glutamate transporter-1 significantly decreased in the cerebral cortex and hippocampus, which was accompanied by neuronal necrosis. At 7 days post-ischemia, expression of excitatory amino acid carrier 1 decreased in the hippocampal CA1 region and cortex, and was accompanied by apoptosis Expression of glutamate-aspartate transporter remained unchanged at 6 hours 7 days after ischemia. These results suggested that glutamate transporter levels were altered at different periods of cerebral ischemia. 展开更多
关键词 apoptosis excitatory amino acid carrier 1 global cerebral ischemia glutamate-aspartate transporter glutamate transporter glutamate transporter-1 NEUROPROTECTION
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脑源性神经营养因子对急性高眼压后大鼠视网膜 Müller 细胞的影响 被引量:2
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作者 熊鲲 黄菊芳 +4 位作者 蒋丽珠 陈旦 王慧 童建斌 罗学港 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期14-17,109,共5页
目的:检测脑源性神经营养因子(BDNF)干预急性高眼压后大鼠视网膜 Müller 细胞谷氨酰胺合成酶(GS) 和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)表达的变化,探讨 BDNF 保护节细胞(RGCs)的可能机制。方法:成年大鼠分为3个 BDNF 干预组和3个溶... 目的:检测脑源性神经营养因子(BDNF)干预急性高眼压后大鼠视网膜 Müller 细胞谷氨酰胺合成酶(GS) 和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)表达的变化,探讨 BDNF 保护节细胞(RGCs)的可能机制。方法:成年大鼠分为3个 BDNF 干预组和3个溶媒对照组并进行玻璃体内注射。2 d 后将预处理动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图 b 波消失的临界眼压且维持缺血60 min。实验动物分别存活1、3或7 d 后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜 GS 和 GLAST 的表达变化。结果:与正常对照组比较,溶媒对照组 GS 和 GLAST 在存活1 d 和3 d 时表达上调,7d 时下降;BDNF 干预组未出现表达明显变化。结论:BDNF 可能不是通过 Müller 细胞上调 GS 和 GLAST,降低胞外 Glu 来保护 RGCs。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 高眼压 谷氨酸/天冬氨酸转运体 谷氨酰胺合成酶 MUELLER细胞
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鞘内注射人参皂苷Rg_1对关节炎慢性吗啡耐受大鼠谷氨酸转运体水平的影响 被引量:4
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作者 穆艳月 景原媛 于泳浩 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1539-1542,共4页
目的探讨鞘内注射不同剂量人参皂苷Rg1对关节炎慢性吗啡耐受大鼠行为学和脊髓背角兴奋性氨基酸转运体1(excitatory amino-acid transporter1,EAAT1)即谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate-aspar-tate transporter,GLAST)表达的影响,进以探... 目的探讨鞘内注射不同剂量人参皂苷Rg1对关节炎慢性吗啡耐受大鼠行为学和脊髓背角兴奋性氨基酸转运体1(excitatory amino-acid transporter1,EAAT1)即谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate-aspar-tate transporter,GLAST)表达的影响,进以探讨人参皂苷Rg1对吗啡耐受影响的机制。方法鞘内置管成功并制成佐剂性关节炎模型的健康雄性SD大鼠36只,随机分为6组(n=6),分别经鞘内给予生理盐水10μL(NS组),吗啡10μg(M组),吗啡10μg加人参皂苷Rg150μg(MG50组)、100μg(MG100组)、200μg(MG200组)和单独人参皂苷Rg1100μg(G100组),鞘内注射生理盐水和吗啡每日2次,不同剂量人参皂苷Rg1每日1次,连续7天。动态检测各组大鼠50%机械缩爪阈值(paw withdrawal threshold,PWT),给药后第7天处死大鼠,取脊髓L3~L5节段,以免疫荧光方法检测大鼠脊髓背角GLAST表达水平。结果 M组在给药后第1、3天PWT显著高于NS组(P<0.05),随着用药天数增加,M组PWT逐渐缩短,到第7天与NS组差异无统计学意义(P>0.05),标志吗啡耐受的形成。MG100组PWT也呈下降趋势,但明显缓于M组(P<0.05)。G100组PWT高于NS组(P<0.05)。与NS组相比,M组脊髓背角GLAST表达下调(P<0.01),与M组比较,MG100组和G100组脊髓背角GLAST表达上调(P<0.05)。结论关节炎大鼠单独应用人参皂苷Rg1有轻微的镇痛作用,鞘内给予人参皂苷Rg1100μg有延缓吗啡耐受形成的作用,其机制可能与上调GLAST表达水平有关。 展开更多
关键词 人参皂苷Rg1 吗啡 药物耐受性 佐剂性关节炎 谷氨酸 天冬氨酸转运体
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隐性听力损失的发生与内耳GLAST相关性的研究进展 被引量:3
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作者 马科锋 佘晓俊 崔博 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期973-976,共4页
近年的研究表明,噪声或耳毒性药物可以引起暂时性阈移,病理表现为内毛细胞和I型听觉神经纤维形成的突触缺陷,由于常规手段难以检测故称其为"隐性听力损失"(Hidden Hearing Loss, HHL)。谷氨酸(Glutamate, Glu)兴奋性毒性作为... 近年的研究表明,噪声或耳毒性药物可以引起暂时性阈移,病理表现为内毛细胞和I型听觉神经纤维形成的突触缺陷,由于常规手段难以检测故称其为"隐性听力损失"(Hidden Hearing Loss, HHL)。谷氨酸(Glutamate, Glu)兴奋性毒性作为导致HHL的机制已被广泛报道。耳蜗中存在天然的谷氨酸清除系统-谷氨酸/天冬氨酸转运蛋白(Glutamate/aspartic transporter,GLAST),可以清除过多Glu防止兴奋性毒性,然而HHL的发生与内耳GLAST的功能是何关系尚不清楚。本综述将从Glu兴奋性毒性导致HHL、内耳GLAST的分布和功能以及GLAST功能缺陷与HHL的关系几方面进行简述。 展开更多
关键词 隐性听力损失 谷氨酸 兴奋性毒性 谷氨酸/天冬氨酸转运蛋白
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外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞GLAST表达的相关性研究 被引量:1
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作者 屈涓 邱建华 +1 位作者 刘顺利 刘津平 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2005年第6期436-438,441,i0002,共5页
目的观察外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞谷氨酸转运体(glutamate-aspartate trans-porter,GLAST)表达的相关性。方法将30只成年健康豚鼠随机分为3组,每组10只,经耳蜗钻孔,第一组动物左耳为对照组,给予人工外淋巴液(对照组)... 目的观察外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞谷氨酸转运体(glutamate-aspartate trans-porter,GLAST)表达的相关性。方法将30只成年健康豚鼠随机分为3组,每组10只,经耳蜗钻孔,第一组动物左耳为对照组,给予人工外淋巴液(对照组);第二组动物左耳给予20mmol/L谷氨酸(Glu组);第三组动物为正常组,不作特殊处理。采用听性脑干反应(ABR)测试、耳蜗铺片、硝酸银染色及免疫组织化学技术,观察Glu处理前后的听力学、形态学改变,以及引发的支持细胞GLAST的表达变化。结果给药后,三组豚鼠1kHz ABR平均阈值分别为8.00±2.68、18.00±3.50、8.00±2.58dB nHL;8kHz分别为10.00±3.33、27.00±4.22、7.50±2.64dB nHL;Glu组与对照组有显著差异(P<0.05)。形态学改变:给予20mmol/L谷氨酸3d后,外毛细胞有较明显改变,出现错乱、缺失,内毛细胞出现形态改变,与听力学变化一致。免疫组织化学:正常组GLAST在支持细胞有表达,给予Glu后GLAST强阳性表达。结论谷氨酸对豚鼠内耳毛细胞具有毒性作用,GLAST参与外源性谷氨酸的转运,并受细胞外谷氨酸浓度的调控。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 毛细胞 突触 免疫组织化学
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大黄酚对原代培养小鼠星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响 被引量:1
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作者 薛占霞 高永山 +2 位作者 武海霞 郝军荣 沈丽霞 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期35-39,共5页
目的探讨不同浓度大黄酚对原代培养小鼠星形胶质细胞活性及谷氨酸代谢功能的影响。方法原代培养小鼠星形胶质细胞,大黄酚10、20、40、60、80、100、200、250 mg/L处理细胞1、2、3d,MTT法检测大黄酚对星形胶质细胞活性的影响;RT-PCR检测... 目的探讨不同浓度大黄酚对原代培养小鼠星形胶质细胞活性及谷氨酸代谢功能的影响。方法原代培养小鼠星形胶质细胞,大黄酚10、20、40、60、80、100、200、250 mg/L处理细胞1、2、3d,MTT法检测大黄酚对星形胶质细胞活性的影响;RT-PCR检测谷氨酸/天门冬氨酸转运体(GLAST)及谷氨酸转运体1(GLT-1)mRNA表达水平。相关试剂盒检测谷氨酰胺合成酶(GS)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果大黄酚可抑制星形胶质细胞活性,可诱导星形胶质细胞GLAST和GLT-1 mRNA表达上调,GSH-Px和GS活性增加,且均具有时间和浓度依赖性。但相似浓度且作用时间相同的大黄酚并不增加细胞的活性,即大黄酚对细胞外谷氨酸浓度的影响并不依赖细胞数量或活性的增加。结论大黄酚可抑制小鼠星形胶质细胞活性,对谷氨酸代谢的调节具有时间和浓度依赖性。 展开更多
关键词 大黄酚 星形胶质细胞 谷氨酸/天门冬氨酸转运体 谷氨酸转运体1 谷胱甘肽过氧化物酶 谷氨酰胺合成酶 小鼠
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白藜芦醇对大鼠海马缺血再灌注损伤的保护机制
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作者 赵刚 王伟民 +3 位作者 杨欢 刘晓燕 杨帅 钟世镇 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2015年第1期27-29,44,共4页
目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤保护作用的可能机制。方法 90只大鼠随机平均分为9组,假手术组(A组)、术后持续缺血组(B1组)和缺血再灌注后丙二醇溶液组(B2组)、持续缺血后Re... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤保护作用的可能机制。方法 90只大鼠随机平均分为9组,假手术组(A组)、术后持续缺血组(B1组)和缺血再灌注后丙二醇溶液组(B2组)、持续缺血后Res干预组(C1~C3组)和缺血再灌注后Res干预组(D1~D3组),Res浓度分别为10~8 g/kg、10~7 g/kg、10~6 g/kg。大鼠脑缺血2 h后再灌注,之后Res治疗3天。反相高效液相层析检测海马组织谷氨酸(glutamate,Glu)含量,免疫组化方法测定谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter,GLAST)及谷氨酸转运体-1(glutamate transporter-1,GLT-1)蛋白阳性的表达。结果与B1~B2组比较,C1~C3组和D1~D3组Glu含量明显降低,同时GLAST和GLT-1的表达升高。结论 Res通过提高GLAST和GLT-1的表达,降低Glu含量,起到脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 缺血再灌注 谷氨酸 谷氨酸/天冬氨酸转运体 谷氨酸转运体-1
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GLAST基因敲除对小鼠表型及听力功能的影响
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作者 吴芳杉 马科锋 +4 位作者 郑鹏芳 佘晓俊 刘洪涛 翟庆峰 崔博 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期491-496,共6页
目的:观察谷氨酸天冬氨酸转运蛋白(GLAST)缺失对小鼠正常听觉功能的影响。方法:我们选用C57BL/6J背景的GLAST^(+/-)小鼠进行杂交,用琼脂糖凝胶电泳进行后代小鼠基因型鉴定。我们选用9~10周龄雄性小鼠,用免疫荧光染色技术检测耳蜗中GLAS... 目的:观察谷氨酸天冬氨酸转运蛋白(GLAST)缺失对小鼠正常听觉功能的影响。方法:我们选用C57BL/6J背景的GLAST^(+/-)小鼠进行杂交,用琼脂糖凝胶电泳进行后代小鼠基因型鉴定。我们选用9~10周龄雄性小鼠,用免疫荧光染色技术检测耳蜗中GLAST蛋白表达,对敲除结果进行验证(n=3)。比较雌雄小鼠出生后7d至30 d体重变化及30 d的体长(n=8)。听性脑干反应(ABR)测试9-10周龄雌性和雄性小鼠听觉阈值及其Ⅰ波振幅的变化(n=5)。结果:雄性GLAST^(-/-)小鼠与雄性GLAST^(+/+)和GLAST^(+/-)小鼠相比,体重及体长均显著降低(P<0.01),其中雄性GLAST^(-/-)小鼠与GLAST^(+/+)相比,在P7至P30统计时间里,均表现出明显差异;与雄性GLAST^(+/-)小鼠相比,P15后均表现出体重显著性降低。而雌性GLAST^(-/-)小鼠与雌性GLAST^(+/+)和GLAST^(+/-)小鼠相比,体重及体长均未见明显差异。雄性和雌性小鼠三种基因型之间ABR检测到听力阈值变化均无差异,但与雄性GLAST^(+/+)小鼠相比雄性GLAST^(-/-)小鼠Ⅰ波振幅明显降低(P<0.01);而雌性的I波振幅在整个刺激强度都有降低,但是多只在高强度刺激(如80 dB、90 dB)时具有显著性(P<0.05)。结论:GLAST敲除影响雄性小鼠正常生长发育,同时降低ABR I波振幅,但不改变阈值,这提示GLAST敲除可能导致突触病变,且这种影响存在性别差异。 展开更多
关键词 谷氨酸天冬氨酸转运蛋白 基因敲除 基因型鉴定 谷氨酸 听觉功能 小鼠
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脑源性神经营养因子对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的保护作用 被引量:6
14
作者 梁汇珉 李赵伟 +2 位作者 李铮 左中夫 刘学政 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第12期1110-1113,1118,共5页
目的探讨脑源性神经营养因子对糖尿病视网膜Müller细胞的保护作用。方法健康雄性SD大鼠54只,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。随机分为对照组、糖尿病组、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)组。含0.1... 目的探讨脑源性神经营养因子对糖尿病视网膜Müller细胞的保护作用。方法健康雄性SD大鼠54只,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。随机分为对照组、糖尿病组、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)组。含0.1 g·L^(-1)BSA的PBS平衡盐溶液制备BDNF注射液。BDNF组大鼠于糖尿病模型建成4周后开始注射BDNF注射液,对照组和糖尿病组注射等剂量的PBS平衡盐溶液。8周后,利用免疫荧光及Western blot检测胶质细胞谷氨酸转运体(L-glutamate/L-aspartate transporter,GLAST)、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)及神经元标记物SYN(synaptophysin)的表达量,谷氨酸含量测定试剂盒检测视网膜中谷氨酸的含量。结果与对照组相比,糖尿病组GLAST、GS、SYN表达显著下降,且视网膜谷氨酸含量均明显升高(均为P<0.01),而BDNF组差异均无统计学意义(均为P>0.05);与糖尿病组相比,BDNF组GLAST、GS、SYN表达均升高(均为P<0.01),谷氨酸含量均显著减少(均为P<0.01)。结论糖尿病视网膜病变早期给予外源性BDNF可以提高Müller细胞中GLAST、SYN及GS表达活性,改善Müller细胞功能,并且能使视网膜神经节细胞免受损害,提示BDNF对糖尿病视网膜病变条件下视网膜中的Müller细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 糖尿病视网膜病变 MÜLLER细胞 L谷氨酸/L天冬氨酸转运体
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鱼藤酮对星形胶质细胞谷氨酸摄取功能的影响
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作者 刘辉 李云鹏 +1 位作者 陈峻峰 董兆君 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期407-409,共3页
目的研究鱼藤酮对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运功能的影响。方法应用HPLC荧光法检测鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度,同位素标记法检测Glu摄取能力,采用RT-PCR与Western blot技术观察谷氨酸转运体基因及蛋白表达。结果鱼藤酮染毒... 目的研究鱼藤酮对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运功能的影响。方法应用HPLC荧光法检测鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度,同位素标记法检测Glu摄取能力,采用RT-PCR与Western blot技术观察谷氨酸转运体基因及蛋白表达。结果鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度明显升高,Glu摄取能力显著降低,谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter,GLAST)基因和蛋白表达均明显降低,而谷氨酸转运体-1(glutamatetransporter-1,GLT-1)蛋白表达升高。结论鱼藤酮可显著降低星形胶质细胞谷氨酸摄取功能,引起胞外Glu浓度升高;GLAST表达下调可能是鱼藤酮诱导胞外谷氨酸含量增加的主要原因之一,而GLT-1上调可能为神经细胞自我保护机制,以限制谷氨酸的神经毒作用。 展开更多
关键词 鱼藤酮 星形胶质细胞 谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST) 谷氨酸转运体-1(GLT-1)
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