18°P高浓酿造抗葡萄糖阻遏效应啤酒酵母的选育 被引量：9

1

作者 郭立芸 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期91-96,共6页

首先通过在18°P超高浓麦汁中对燕京酵母YJ0002进行定向驯化,确定适应该浓度生长的出发菌株,经过2-脱氧-D-葡萄糖梯度培养、抗性平板分离初筛以及复筛,采用高通量法筛选出2株抗葡萄糖阻遏效应的适于高浓酿造的啤酒酵母,并进行100 L... 首先通过在18°P超高浓麦汁中对燕京酵母YJ0002进行定向驯化,确定适应该浓度生长的出发菌株,经过2-脱氧-D-葡萄糖梯度培养、抗性平板分离初筛以及复筛,采用高通量法筛选出2株抗葡萄糖阻遏效应的适于高浓酿造的啤酒酵母,并进行100 L微酿啤酒发酵实验,测定其发酵性能指标。实验结果表明:驯化代数为C8的菌株对数期酵母数和酵母细胞活性良好,确定其为出发菌株;与初始菌株YJ002相比,驯化菌株菌落大,且细胞形态饱满,经高通量筛选后优良菌株G2和G9可耐受高达13%的酒精浓度,在18°P 100 L微酿发酵中,发酵初期酒精含量提高10.52%和14.24%,发酵速率提高10.96%和15.11%,分别缩短发酵时间42 h和50 h,发酵度提高了6%和7%,且驯化菌株G2和G9生产的啤酒表现出较低浓度的乙酸乙酯和适宜浓度的高级醇,啤酒的口感较YJ0002有了显著的改善。 展开更多

关键词 啤酒酵母 高浓酿造 定向驯化 浓度梯度培养基 2-脱氧-D-葡萄糖

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敲除MIG1和SNF1基因对酿酒酵母共利用葡萄糖和木糖的影响 被引量：7

2

作者 蔡艳青 齐显尼 +3 位作者 齐奇 蔺玉萍 王正祥 王钦宏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期54-67,共14页

Mig1和Snf1是酿酒酵母葡萄糖阻遏效应的两个关键调控因子。为了提高酿酒酵母工程菌同时利用葡萄糖和木糖的能力,分别对MIG1和SNF1基因进行了单敲除和双敲除,并通过摇瓶发酵实验和RNA-Seq转录组分析,初步揭示了Mig1和Snf1可能影响葡萄糖... Mig1和Snf1是酿酒酵母葡萄糖阻遏效应的两个关键调控因子。为了提高酿酒酵母工程菌同时利用葡萄糖和木糖的能力,分别对MIG1和SNF1基因进行了单敲除和双敲除,并通过摇瓶发酵实验和RNA-Seq转录组分析,初步揭示了Mig1和Snf1可能影响葡萄糖和木糖共利用表达差异基因的层级调控机制。研究结果表明,MIG1单敲除对混合糖的共利用影响不大;SNF1单敲除会加快混合糖中木糖的利用而且葡萄糖和木糖可以被同时利用,这可能归因于SNF1单敲除会解除对一些氮分解代谢阻遏基因表达的抑制,从而促进了细胞对氮源营养的利用;进一步敲除MIG1,会解除更多氮分解代谢阻遏基因表达的抑制,以及一些碳中心代谢途径基因表达上调。虽然MIG1和SNF1双敲除菌株利用葡萄糖加快而利用木糖变慢,但是葡萄糖和木糖可以被同时利用,进而加快乙醇的积累。综上所述,MIG1和SNF1的敲除导致氮分解阻遏基因表达上调,有助于促进葡萄糖和木糖的共利用;解析Mig1和Snf1对氮分解阻遏基因的层级调控作用,为进一步提高葡萄糖和木糖的共利用提供新的靶点。 展开更多

关键词 酿酒酵母 葡萄糖阻遏 MIG1 SNF1 RNA-SEQ 氮分解代谢阻遏

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快速发酵面包酵母菌株的选育 被引量：7

3

作者 姜天笑 肖冬光 +1 位作者 刘青 胡娅兰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2006年第11期76-79,共4页

对出发菌株进行紫外-氯化锂复合诱变,通过初筛、复筛选育出高麦芽糖发酵力、低葡萄糖阻遏的面包酵母菌株BM-72,该菌株在不加糖、低糖面团中均表现出较好的发酵力,分别高于出发菌株19.4%和7.3%。

关键词 面包酵母 紫外-氯化锂复合诱变 麦芽糖发酵力 葡萄糖阻遏作用 不加糖面团

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超高浓酿造下抗葡萄糖阻遏啤酒酵母的筛选 被引量：5

4

作者 阚欣 孙军勇 陆健 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期153-157,161,共6页

根据高浓发酵下(16°P)发酵度的高低,挑选下面啤酒酵母C12作为出发菌株。经过2-去氧-D-葡萄糖的定向驯养、抗性平板分离初筛以及复筛验证等步骤,筛选出一株抗葡萄糖阻遏效应的菌株CM23。将该菌株在18°P麦汁15℃条件下进行3L的... 根据高浓发酵下(16°P)发酵度的高低,挑选下面啤酒酵母C12作为出发菌株。经过2-去氧-D-葡萄糖的定向驯养、抗性平板分离初筛以及复筛验证等步骤,筛选出一株抗葡萄糖阻遏效应的菌株CM23。将该菌株在18°P麦汁15℃条件下进行3L的EBC小型啤酒发酵实验并测定发酵指标。结果表明:与出发菌株相比,CM23的降糖速度提高了37%,达到1.8°P/d,真正发酵度达到66%,且双乙酰还原能力以及啤酒中主要风味物质含量基本不变。CM23是一株具有工业应用前景的啤酒超高浓酿造酵母菌株。 展开更多

关键词 超高浓酿造 葡萄糖阻遏 2-去氧-D-葡萄糖 啤酒酵母

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面包酵母无糖面团发酵力与麦芽糖发酵力相关性的探讨 被引量：4

5

作者 肖冬光 姜天笑 +1 位作者 刘青 胡娅兰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期6-8,共3页

探讨了面包酵母在无糖面团中的起发速度与麦芽糖发酵力之间的关系，包括葡萄糖阻遏作用对麦芽糖发酵力的影响。结果表明，在8株供试的面包酵母菌中，麦芽糖发酵力较强的菌株在无糖面团中的起发速度较快，反之则较慢。验证了麦芽糖发酵... 探讨了面包酵母在无糖面团中的起发速度与麦芽糖发酵力之间的关系，包括葡萄糖阻遏作用对麦芽糖发酵力的影响。结果表明，在8株供试的面包酵母菌中，麦芽糖发酵力较强的菌株在无糖面团中的起发速度较快，反之则较慢。验证了麦芽糖发酵力是决定面包酵母快速发酵无糖面团的关键因素。 展开更多

关键词 面包酵母 无糖面团 麦芽糖 发酵力 葡萄糖阻遏作用

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酵母中葡萄糖阻遏作用机制研究进展

6

作者 吴迪 程艺超 +2 位作者 姜娇 刘延琳 宋育阳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3409-3427,共19页

大多数微生物通过一种复杂的机制来感知和传递环境中的葡萄糖变化并对其做出适当的反应。酵母细胞中,葡萄糖主要通过Snf1/Mig1信号通路来阻遏三羧酸循环、糖异生、乙醛酸循环和替代碳源代谢等相关基因的转录表达。木糖、半乳糖、蔗糖、... 大多数微生物通过一种复杂的机制来感知和传递环境中的葡萄糖变化并对其做出适当的反应。酵母细胞中,葡萄糖主要通过Snf1/Mig1信号通路来阻遏三羧酸循环、糖异生、乙醛酸循环和替代碳源代谢等相关基因的转录表达。木糖、半乳糖、蔗糖、乙醇和有机酸等替代碳源只有当环境中的葡萄糖消耗殆尽后才能重启代谢编程,进行替代碳源的利用。而葡萄糖去抑制对于提高现代微生物工业生产效率、解决环境与能源问题具有重要意义。本文综述了Snf1/Mig1信号通路阻遏机制以及相关转录因子的活性位点,具体介绍了多种替代碳源的应用以及其受葡萄糖阻遏的具体机制,总结提出了根据不同背景缓解或解除碳代谢阻遏的策略,以期为酵母菌现代化生产应用范围的扩大和效率的提高提供新思路。 展开更多

关键词 葡萄糖阻遏作用 基因工程 酵母菌 葡萄糖信号通路 混合碳源利用

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利用基因工程提高酿酒酵母半乳糖代谢 被引量：1

7

作者 邹静 孟军 +1 位作者 张建才 郭硕 《河北科技师范学院学报》 CAS 2016年第4期14-22,共9页

为了提高酿酒酵母半乳糖利用速率,减弱葡萄糖阻遏半乳糖代谢,研究了负代谢调控基因GAL80,GAL6以及MIG1基因对半乳糖代谢的影响。通过重复利用loxp-Kan MX-loxp抗性基因对GAL80,GAL6以及MIG1基因进行单敲除、双敲除及三敲除,共构建了7株... 为了提高酿酒酵母半乳糖利用速率,减弱葡萄糖阻遏半乳糖代谢,研究了负代谢调控基因GAL80,GAL6以及MIG1基因对半乳糖代谢的影响。通过重复利用loxp-Kan MX-loxp抗性基因对GAL80,GAL6以及MIG1基因进行单敲除、双敲除及三敲除,共构建了7株工程菌株。结果表明,7株工程菌株的半乳糖利用速率、乙醇产率均加快。其中,GAL80和MIG1双敲除菌株FY-501α的半乳糖代谢速率为0.916 g·(L·h)^(-1),较亲本提高44.71%,乙醇产率为0.329 g·(L·h)^(-1),较亲本提高46.22%,而在FY-501α基础上继续敲除GAL6得到GY-501α,其半乳糖代谢速率以及乙醇产率均未见提高。7株菌的葡萄糖阻遏效应也得到减弱,其中FY-501α的葡萄糖阻遏效应较亲本减弱42.11%,其次为EY-502α,FY-502α和FY-503α,减弱31.57%。阻断半乳糖代谢途径的负调控基因可以加速半乳糖代谢、减弱葡萄糖阻遏效应。 展开更多

关键词 GAL基因 半乳糖代谢 葡萄糖阻遏 MIG1 GAL80

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几种面包活性干酵母发酵不加糖面团性能的比较

8

作者 王振 肖冬光 +1 位作者 张翠英 庞思娜 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期105-108,共4页

对市场上的5种面包活性干酵母(ADY)进行了发酵性能测定。结果表明,不同面包酵母对低糖面团与不加糖面团发酵力存在差异,其中ADY1基本无差别,ADY2的差别较小(3.2%),而ADY4(11.9%)、ADY5(9.4%)的差别较大。通过对5种酵母麦芽糖发酵速度和... 对市场上的5种面包活性干酵母(ADY)进行了发酵性能测定。结果表明,不同面包酵母对低糖面团与不加糖面团发酵力存在差异,其中ADY1基本无差别,ADY2的差别较小(3.2%),而ADY4(11.9%)、ADY5(9.4%)的差别较大。通过对5种酵母麦芽糖发酵速度和葡萄糖阻遏程度的分析表明,干酵母ADY1、ADY2发酵麦芽糖速度较快,葡萄糖阻遏程度较小;而ADY4、ADY5发酵麦芽糖速度较慢,葡萄糖阻遏程度较高。可见,麦芽糖发酵速度快、葡萄糖阻遏程度小的酵母品种比较适合于不加糖面团的发酵。 展开更多

关键词 活性干酵母 不加糖面团 麦芽糖发酵力 葡萄糖阻遏

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灰绿曲霉高产纤维素酶突变株的选育 被引量：16

9

作者 杜娟 曲音波 +3 位作者 林觐勤 徐惠娟 邬小兵 龙敏南 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期23-26,共4页

以一株具有较高纤维素酶活性的野生菌株-灰绿曲霉XC9为出发菌株,经过紫外线、氯化锂、甲基磺酸乙酯(EMS)等物理化学诱变剂多重诱变处理,获得了抗葡萄糖阻遏的突变株E2-26、E5-65、U6-31和EU7-22,其CMC酶活与出发菌株相比分别提高至1.7、... 以一株具有较高纤维素酶活性的野生菌株-灰绿曲霉XC9为出发菌株,经过紫外线、氯化锂、甲基磺酸乙酯(EMS)等物理化学诱变剂多重诱变处理,获得了抗葡萄糖阻遏的突变株E2-26、E5-65、U6-31和EU7-22,其CMC酶活与出发菌株相比分别提高至1.7、1.4、1.3、2.0倍.突变株经PDA斜面接种传代5次后产酶性能仍然保持稳定.变株的菌丝、孢子颜色也发生了较大的改变.对突变株EU7-22的形态结构进行了观察,并与出发菌株XC9作了发酵性状的比较,发现其产酶性能有了明显提高. 展开更多

关键词 灰绿曲霉 纤维素酶 诱变育种 抗葡萄糖阻遏

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β-葡萄糖苷酶高产菌株的选育及酶法转化葡萄糖生产龙胆低聚糖 被引量：15

10

作者 朱婧 覃拥灵 +4 位作者 陈桂光 张云开 刘演景 罗杰 梁智群 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期21-24,27,共5页

以高产β-葡萄糖苷酶米曲霉为出发菌株,经紫外-60Co复合诱变处理,用不同葡萄糖浓度梯度的β-葡萄糖苷酶鉴定平板筛选,在含4%葡萄糖的鉴定平板上获得1株抗葡萄糖阻遏的突变株ASPE0485,β-葡萄糖苷酶水解酶活提高1.78倍,达到17.65U/mL。AS... 以高产β-葡萄糖苷酶米曲霉为出发菌株,经紫外-60Co复合诱变处理,用不同葡萄糖浓度梯度的β-葡萄糖苷酶鉴定平板筛选,在含4%葡萄糖的鉴定平板上获得1株抗葡萄糖阻遏的突变株ASPE0485,β-葡萄糖苷酶水解酶活提高1.78倍,达到17.65U/mL。ASPE0485所产β-葡萄糖苷酶与高浓度葡萄糖反应,薄板层析和高效液相色谱检测反应产物有龙胆低聚糖,表明ASPE0485所产β-葡萄糖苷酶具有转苷活性;对酶转化葡萄糖生产龙胆低聚糖的反应条件进行了优化:当底物葡萄糖浓度为60%,pH3.0,反应温度为50℃,转化周期为72h,龙胆低聚糖累计达到最大,为44.16g/L。 展开更多

关键词 龙胆低聚糖 酶转化 Β-葡萄糖苷酶 抗葡萄糖阻遏 诱变

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快速筛选产β-葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育种 被引量：7

11

作者 郑毅 段慧明 +2 位作者 施巧琴 王水顺 李志康 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期21-24,共4页

采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β－葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始ｐＨ、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β－葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现，高浓度的葡萄糖对曲霉合成β－葡聚糖酶具有... 采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β－葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始ｐＨ、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β－葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现，高浓度的葡萄糖对曲霉合成β－葡聚糖酶具有阻遏作用，通过改变分离培养基的葡萄糖浓度，结合诱变育种可以快速筛选到抗葡萄糖阻遏的高产β－葡聚糖酶的菌株。 展开更多

关键词 Β-葡聚糖酶 曲霉 抗阻遏育种 抗葡萄糖阻遏

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米曲霉木聚糖酶生产菌的理性选育及发酵优化 被引量：7

12

作者 石磊 郑毅 +2 位作者 叶海梅 韩科 张志国 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期12-16,共5页

目的:米曲霉木聚糖酶生产菌的理性选育及发酵优化。方法:以米曲霉FS018为出发菌株,采用紫外和激光诱变先后处理3代,以抗高浓度葡萄糖阻遏效应为筛选模型获得一株高产木聚糖酶菌株FST036,并对该菌株的发酵培养基进行了初步优化。结果:突... 目的:米曲霉木聚糖酶生产菌的理性选育及发酵优化。方法:以米曲霉FS018为出发菌株,采用紫外和激光诱变先后处理3代,以抗高浓度葡萄糖阻遏效应为筛选模型获得一株高产木聚糖酶菌株FST036,并对该菌株的发酵培养基进行了初步优化。结果:突变株FST036产酶水平可达4200.57U/mL,产酶水平比出发菌株提高了24%。对该菌株的发酵培养基初步优化结果表明:培养基的最适氮源为牛肉膏;最适碳源为麸皮与玉米芯组合,总浓度为4%,二者最适比例为7∶3;对该菌株的发酵条件初步优化结果表明:最适接种量1%,初始pH6.78,250mL三角瓶装液量为45mL,培养72h酶活可达5404.24U/mL。结论:反复多次诱变处理,并结合抗高浓度葡萄糖阻遏效应作为一种理性筛选模型,为通过诱变育种来获得曲霉木聚糖酶高产菌株提供了一条有效的途径。 展开更多

关键词 木聚糖酶 米曲霉 诱变 抗葡萄糖阻遏 发酵条件

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碳源及阻遏蛋白CreA对黑曲霉产α-L-鼠李糖苷酶的影响 被引量：1

13

作者 张霞 李利君 +3 位作者 倪辉 肖安风 陈峰 苏文金 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期54-60,共7页

【目的】研究碳源对黑曲霉JMU-TS528发酵α-L-鼠李糖苷酶的影响,并探讨葡萄糖阻遏黑曲霉合成α-L-鼠李糖苷酶的分子机制。【方法】分别用5种单一碳源进行摇瓶发酵,高效液相色谱法测定经黑曲霉发酵后产物中的α-L-鼠李糖苷酶活性;通过在... 【目的】研究碳源对黑曲霉JMU-TS528发酵α-L-鼠李糖苷酶的影响,并探讨葡萄糖阻遏黑曲霉合成α-L-鼠李糖苷酶的分子机制。【方法】分别用5种单一碳源进行摇瓶发酵,高效液相色谱法测定经黑曲霉发酵后产物中的α-L-鼠李糖苷酶活性;通过在培养基中添加葡萄糖进行液态发酵,研究葡萄糖对黑曲霉JMU-TS528产α-L-鼠李糖苷酶的影响,并用实时定量PCR技术检测α-L-鼠李糖苷酶基因rha和葡萄糖抑制基因Cre A的相对表达量。【结果】黑曲霉JMU-TS528在以柚皮苷、橘皮苷、芸香苷和鼠李糖为唯一碳源时可分泌α-L-鼠李糖苷酶,以葡萄糖为唯一碳源时不能合成α-L-鼠李糖苷酶;培养基中添加葡萄糖后,黑曲霉发酵产物中α-L-鼠李糖苷酶活性降低,黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶基因rha表达量降低,而葡萄糖抑制基因Cre A表达量上升。【结论】黑曲霉JMU-TS528菌株液态发酵条件下合成α-L-鼠李糖苷酶需要诱导物作为碳源,该菌株合成α-L-鼠李糖苷酶的能力受到葡萄糖的调节作用,此调控过程可能通过一个依赖阻遏蛋白Cre A的机制实现。 展开更多

关键词 α-L-鼠李糖苷酶 葡萄糖抑制基因CreA 实时定量多聚核苷酸链式反应 黑曲霉

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枯草杆菌α-淀粉酶基因的克隆和表达

14

作者 熊占 涂祖新 +1 位作者 周和山 黄筱萍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期334-338,共5页

以自构的质粒pBE1为载体,采用鸟枪法克隆枯草杆菌168突变株GR10的α-淀粉酶基因,获得了在大肠杆菌中的表达。该基因片段位于7367bp的Bgl Ⅱ酶切片段上。利用质粒pUB110将此片段亚克隆到枯草杆菌中,同样也获得了表达。本文还测定了该基... 以自构的质粒pBE1为载体,采用鸟枪法克隆枯草杆菌168突变株GR10的α-淀粉酶基因,获得了在大肠杆菌中的表达。该基因片段位于7367bp的Bgl Ⅱ酶切片段上。利用质粒pUB110将此片段亚克隆到枯草杆菌中,同样也获得了表达。本文还测定了该基因克隆子是否有GR10的抗葡萄糖阻遏效应。 展开更多

关键词 基因克隆 Α-淀粉酶基因 大肠杆菌

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产碱性聚半乳糖醛酸酶嗜碱细菌抗利福平高产菌株的选育 被引量：3

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作者 曹军卫 孙卫华 《武汉大学学报（自然科学版）》 CSCD 1996年第6期753-758,共6页

分离得到产碱性果胶酶嗜碱芽孢杆菌ＮＴＴ３３，其聚半乳糖醛酸酶的产生强烈地受葡萄糖的代谢阻遏，对利福平敏感．通过抗利福平自然突变法，从出发菌株ＮＴＴ３３中筛选抗利福平突变株．采用透明圈法初步筛选出在含葡萄糖和不含葡萄糖... 分离得到产碱性果胶酶嗜碱芽孢杆菌ＮＴＴ３３，其聚半乳糖醛酸酶的产生强烈地受葡萄糖的代谢阻遏，对利福平敏感．通过抗利福平自然突变法，从出发菌株ＮＴＴ３３中筛选抗利福平突变株．采用透明圈法初步筛选出在含葡萄糖和不含葡萄糖果胶培养基上同时产生透明圈的菌株，进一步测定其产酶进程曲线，最后筛选出两株（ＮＴＴ３３－ｃｓ５２，ＮＴＴ３３－ｃｓ３０１）产聚半乳糖醛酸酶活力高的菌株，其酶活力比出发菌株提高５０％～２８０％，并且在葡萄糖存在时，酶活力更高． 展开更多

关键词 嗜碱细菌 聚半乳糖醛酸酶 利福平 芽孢杆菌 选育

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大肠杆菌耐酸分子机制研究进展 被引量：11

16

作者 陈卓逐 阚建全 石慧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第21期273-278,共6页

具有耐强酸能力的大肠杆菌在酸性胁迫条件下更易生存。这主要是由于其具有葡萄糖-阻碍耐酸系统、氨基酸依赖型耐酸系统、伴侣蛋白抗酸作用以及保持膜电荷稳定等耐酸机制。了解大肠杆菌的这些耐酸分子机制,可以为食品加工工业控制大肠杆... 具有耐强酸能力的大肠杆菌在酸性胁迫条件下更易生存。这主要是由于其具有葡萄糖-阻碍耐酸系统、氨基酸依赖型耐酸系统、伴侣蛋白抗酸作用以及保持膜电荷稳定等耐酸机制。了解大肠杆菌的这些耐酸分子机制,可以为食品加工工业控制大肠杆菌的污染提供新的认识,也对一些食源性致病菌的临床预防和治疗具有积极的作用。本文就大肠杆菌耐酸分子机制的研究进行综述。 展开更多

关键词 大肠杆菌 葡萄糖-阻碍 氨基酸依赖型 伴侣蛋白 膜电荷 交叉保护

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