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杨树葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)基因启动子的克隆与分析 被引量：15
1
作者 林元震 张志毅 +2 位作者 郭海 刘纯鑫 陈晓阳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期445-449,共5页
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶是磷酸戊糖途径的关键性调控限速酶,其主要功能是为脂肪酸合成、氮还原和谷胱甘肽等生物分子合成提供还原力NADPH,也为核酸合成提供戊糖;此外,还参加非生物逆境胁迫应答反应。因此,G6PDH对植物的生长发育起着非常重... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶是磷酸戊糖途径的关键性调控限速酶,其主要功能是为脂肪酸合成、氮还原和谷胱甘肽等生物分子合成提供还原力NADPH,也为核酸合成提供戊糖;此外,还参加非生物逆境胁迫应答反应。因此,G6PDH对植物的生长发育起着非常重要的作用。本文利用甜杨G6PDH基因和毛果杨基因组序列,通过PCR获得了甜杨G6PDH基因上游1400bp的序列。序列分析结果表明,该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box。此外,还包含多个胁迫诱导元件,如低温诱导元件LTR,盐诱导元件GT-1,抗冻、缺水、脱落酸、抗寒元件MYB和MYC,以及光响应元件L-box、G-box、3AF-1、TC丰富区等。 展开更多
关键词 杨树 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 启动子
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龟裂链霉菌zwf2基因敲入及阻断对土霉素合成的影响 被引量：3
2
作者 廖瑜玲 刘志勇 +3 位作者 唐振宇 郭美锦 庄英萍 张嗣良 《食品与药品》 CAS 2009年第1期7-10,共4页
目的考察敲入及阻断zwf2基因对6-磷酸葡糖脱氢酶(G6PDH)活性、细胞生长、土霉素合成的影响。方法构建敲入转化子M4018-(zwf2)和阻断转化子M4018-Δzwf2后,以原始菌株为对照,比较敲入转化子菌株M4018-(zwf2)和阻断转化子菌株M4018-Δzwf... 目的考察敲入及阻断zwf2基因对6-磷酸葡糖脱氢酶(G6PDH)活性、细胞生长、土霉素合成的影响。方法构建敲入转化子M4018-(zwf2)和阻断转化子M4018-Δzwf2后,以原始菌株为对照,比较敲入转化子菌株M4018-(zwf2)和阻断转化子菌株M4018-Δzwf2摇瓶发酵后G6PDH活性、细胞生长、土霉素合成等生物性质的变化。结果阻断转化子菌株M4018-Δzwf2的G6PDH活性是原始菌的50%左右,敲入转化子菌株M4018-(zwf2)的G6PDH活性则略高于原始菌;阻断转化子菌株M4018-Δzwf2土霉素生物合成水平比原始菌提高27%,比敲入转化子菌株M4018-(zwf2)高约40%;发酵结束时敲入转化子菌株M4018-(zwf2)的细胞干重高于其他2株菌,其它2株菌的细胞干重差异不大。结论zwf2阻断有利于土霉素的生物合成,zwf2增强则对细胞生长有利。 展开更多
关键词 6-磷酸葡糖脱氢酶 zwf2 龟裂链霉菌M4018 土霉素生物合成
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白木香3个G6PDH基因的鉴定与表达分析 被引量：1
3
作者 高博闻 戎玉清 +3 位作者 李铁铮 魏胜利 王晓晖 屠鹏飞 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2216-2225,共10页
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶,在植物响应胁迫方面发挥重要作用。本研究对白木香转录组数据进行分析,设计特异性引物,首次从白木香中克隆得到3条AsG6PDHs基因的cDNA序列,分别... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶,在植物响应胁迫方面发挥重要作用。本研究对白木香转录组数据进行分析,设计特异性引物,首次从白木香中克隆得到3条AsG6PDHs基因的cDNA序列,分别命名为AsG6PDH1、AsG6PDH2和AsG6PDH3,其开放阅读框(ORF)分别为1809、1767、1548 bp,编码蛋白分别含有602、588、516个氨基酸,蛋白分子质量分别为68.02、67.02、59.35 kDa。3个G6PDH蛋白的氨基酸序列与其他植物G6PDH的氨基酸序列相似性比较高,都含有G6PDH蛋白的3个特征性序列。系统进化树显示AsG6PDH1和AsG6PDH2属于质体G6PDH,AsG6PDH3属于胞质G6PDH。组织特异性分析结果表明,AsG6PDH1和AsG6PDH2主要在根中表达,AsG6PDH3在各组织中表达量都比较高,茎中表达量最高。实时荧光定量PCR结果显示盐、干旱、低温和重金属胁迫都能够诱导白木香中3个AsG6PDHs基因表达,其中干旱胁迫对AsG6PDH1和AsG6PDH2的转录水平影响最显著,重金属胁迫对AsG6PDH3的表达水平影响最显著。同时,盐、干旱、低温和重金属胁迫都能够提高愈伤组织中G6PDH酶活性,其中干旱胁迫对白木香愈伤组织中G6PDH酶活性影响最显著。本研究为进一步阐明G6PDH基因在白木香防御反应中的作用和沉香结香机制奠定基础。 展开更多
关键词 白木香 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 表达分析 g6pdh酶活性
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龟裂链霉菌中zwf基因的克隆及其生物信息学分析 被引量：1
4
作者 逄春梅 张萍 +1 位作者 石彦鹏 王小娟 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2015年第2期59-64,共6页
利用RT-PCR技术、巢式PCR技术、3'-RACE和5'-RACE技术从龟裂链霉菌K-16菌株中克隆获得zwf基因的全长c DNA序列。测序结果表明:经软件Vector NTI 11.0拼接zwf基因全长c DNA序列为1 679 bp,并带有一段很短的poly(A)尾巴,包含1 347... 利用RT-PCR技术、巢式PCR技术、3'-RACE和5'-RACE技术从龟裂链霉菌K-16菌株中克隆获得zwf基因的全长c DNA序列。测序结果表明:经软件Vector NTI 11.0拼接zwf基因全长c DNA序列为1 679 bp,并带有一段很短的poly(A)尾巴,包含1 347 bp的开放读码框(ORF),编码一个含449个氨基酸残基的蛋白质。Blast2go生物信息学分析结果表明:该基因编码的酶为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,通过KEGG代谢途径注释明确该基因编码的酶是参与谷胱甘肽代谢和磷酸戊糖途径代谢的关键酶。 展开更多
关键词 zwf 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(g6pdh) 龟裂链霉菌 土霉素生物合成 Blast2go
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的Candida tropicalis过量表达及其对木糖醇合成代谢的影响 被引量：1
5
作者 高雪楠 张婵 +3 位作者 尹胜 张秋晨 王成涛 徐宝财 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第7期102-106,共5页
研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因g6pd过量表达对Candida tropicalis木糖醇生物合成代谢的影响。克隆Candida tropicalis CT16的g6pd基因,并将其与表达载体pYES-pgk重组连接,构建重组载体pYES-pgk-g6pd,LiAc/ssDNA/PEG方法转化导入C.tropica... 研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因g6pd过量表达对Candida tropicalis木糖醇生物合成代谢的影响。克隆Candida tropicalis CT16的g6pd基因,并将其与表达载体pYES-pgk重组连接,构建重组载体pYES-pgk-g6pd,LiAc/ssDNA/PEG方法转化导入C.tropicalis CT16,筛选阳性转化子,实现g6pd基因的过量表达。结果表明:发酵62 h,阳性转化子C.tropicalis SYG5的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力提高了300%,发酵液中木糖醇质量浓度达到79.90 g/L,较野生型对照菌株的木糖醇产量提高了12.41%,木糖醇产率提高了44.94%。因此,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在C.tropicalis木糖醇的合成代谢途径中发挥重要作用,增强g6pd基因的表达,可以明显提高菌体NADPH供应量和还原力,有利于木糖醇的生物合成。 展开更多
关键词 CANDIDA TROPICALIS 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 g6pd基因 过量表达 木糖醇
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乳腺癌、乳腺良性疾病中葡萄糖—6—磷酸脱氢酶活性变化及其意义
6
作者 曾庆富 许建晃 沈明 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第5期375-377,T000,共4页
应用酶组织化学技术,观察86例原发性乳腺癌和24例乳腺良性疾病中葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PDH)的活性和分布。结果表明:乳腺癌组织内酶活性显著高于乳腺良性疾病;乳腺癌间质酶活性与癌细胞内酶活性成正相关;乳腺增生症中终末导管上皮细... 应用酶组织化学技术,观察86例原发性乳腺癌和24例乳腺良性疾病中葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PDH)的活性和分布。结果表明:乳腺癌组织内酶活性显著高于乳腺良性疾病;乳腺癌间质酶活性与癌细胞内酶活性成正相关;乳腺增生症中终末导管上皮细胞高度增生者或纤维囊性乳腺病其细胞成分增生为主者,酶活性显著增高。文中对上述酶活性变化的临床和生物学意义进行了讨论。 展开更多
关键词 乳腺 癌 乳腺疾病 g6pdh
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发菜G6PDH基因(GND)克隆及其干旱胁迫下的差异表达分析 被引量：7
7
作者 刘阳 严奉坤 +4 位作者 丁苗苗 李晓旭 王玲霞 岳思君 梁文裕 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1263-1270,共8页
由GND编码的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶。为了解发菜GND分子信息以及对干旱胁迫的响应机制,该研究设计了特异性引物克隆发菜GND全长,进行序列分析、原核表达和MALDITOF-TOF/MS鉴定,并对干旱胁迫下发菜GND的差异... 由GND编码的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶。为了解发菜GND分子信息以及对干旱胁迫的响应机制,该研究设计了特异性引物克隆发菜GND全长,进行序列分析、原核表达和MALDITOF-TOF/MS鉴定,并对干旱胁迫下发菜GND的差异表达水平和G6PDH活性进行分析。结果表明:(1)发菜GND全长1 431bp(GenBank登录号为KX553955),与点形念珠藻(73102)的GND核苷酸序列相似性为96%,G6PDH氨基酸相似性为98%;氨基酸序列中第26和27位的Ile疏水性最强,在第302位的Arg亲水性最强,Thr有19个磷酸化位点,Ser有18个磷酸化位点,Tys有5个磷酸化位点,二级结构和三级结构主要由α螺旋、β折叠、β转角和随机卷曲构成。(2)将GND基因进行原核表达,获得47.23kD的外源表达蛋白G6PDH。(3)随干旱胁迫程度加剧,GND在转录水平的表达量和G6PDH活性均逐渐增加。研究结果为进一步探讨干旱胁迫条件下发菜GND表达调控奠定了基础。 展开更多
关键词 发菜 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 克隆 差异表达
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砷对兰州鲇组织中代谢酶活性及RNA和蛋白质含量影响 被引量：7
8
作者 吴旭东 连总强 侯玉霞 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1073-1078,共6页
采用毒性试验方法,研究了安全浓度(1.288 mg/L)条件下亚砷酸钠(NaAsO2)对兰州鲇(Silurus lanzhouensis)脑、鳃、肝脏、肌肉4种组织中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,以及RNA和蛋白质含量的影响。结果表明,染毒21d时,... 采用毒性试验方法,研究了安全浓度(1.288 mg/L)条件下亚砷酸钠(NaAsO2)对兰州鲇(Silurus lanzhouensis)脑、鳃、肝脏、肌肉4种组织中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,以及RNA和蛋白质含量的影响。结果表明,染毒21d时,As(Ⅲ)可显著降低4种组织中G-6-PDH和LDH活性、RNA和蛋白质含量(P≤0.05)。撤毒后21d,除脑和肝组织中蛋白质含量未恢复到对照组水平(P≤0.05),肝脏中G-6-PDH活性超过了对照组水平(P≤0.05)外,其余各组织中G-6-PDH和LDH活性、RNA和蛋白质含量均可恢复到对照组水平(P>0.05)。以上结果表明,As(Ⅲ)对兰州鲇组织中代谢酶活性具有明显的抑制作用,可致组织细胞RNA损伤和可溶性蛋白质减少,但这种影响是可逆的,撤毒后一定时间内可恢复到正常水平。 展开更多
关键词 NaAsO2 兰州鲇 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 乳酸脱氢酶 RNA 蛋白质
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米曲霉6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因gsdA的克隆及生物信息学分析 被引量：3
9
作者 刘薇 吴晶晶 陈宏文 《亚热带植物科学》 2012年第3期11-15,共5页
6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖酸,并生成NADPH,是微生物胞内磷酸戊糖途径(PPP)的关键酶。本研究以食品安全菌米曲霉CICC2012为材料,克隆获得6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因(GenBank登录号:JN123468)。序列分析表明,该酶... 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖酸,并生成NADPH,是微生物胞内磷酸戊糖途径(PPP)的关键酶。本研究以食品安全菌米曲霉CICC2012为材料,克隆获得6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因(GenBank登录号:JN123468)。序列分析表明,该酶是由222个氨基酸组成的亲水性蛋白;128～134位氨基酸序列DHYLGKE为活性区域;170～176位氨基酸序列GTEGRGG可能为辅因子结合位点。进化树分析表明,米曲霉6-磷酸葡萄糖脱氢酶同其他丝状真菌及酵母的G6PDH较相似。 展开更多
关键词 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 克隆 生物信息学分析
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温度对鱼类同工酶活性的影响 被引量：1
10
作者 薛国雄 周卫 +1 位作者 夏德全 张兴忠 《核农学报》 CAS CSCD 1992年第4期237-242,共6页
通过人工低温环境,对某些鱼类乳酸脱氫酶(LDH)同工酶,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)同工酶,乙酰胆碱酯酶(AchE)同工酶活性进行了测定,对LDH-A,LDH-B亚基变化进行了分析,以探索鱼类酶系统对低温环境的适应和抗低温机制。
关键词 鱼类 同功酶 温度
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