一株基因Ⅶ型新城疫病毒的分离及分子鉴定 被引量：15

1

作者 刘华雷 王永坤 +3 位作者 朱国强 严维巍 田慧芳 周继宏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期216-218,共3页

从一起新城疫暴发的病例中分离出 1株新城疫病毒 (NDV) ,命名为铜山分离株 (TS)。运用 RT- PCR技术 ,克隆了该分离株 F基因的重要功能片段 (约 0 .5 kb) ,并进行了序列测定。序列分析表明 ,TS分离株在 F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为 1 1 ... 从一起新城疫暴发的病例中分离出 1株新城疫病毒 (NDV) ,命名为铜山分离株 (TS)。运用 RT- PCR技术 ,克隆了该分离株 F基因的重要功能片段 (约 0 .5 kb) ,并进行了序列测定。序列分析表明 ,TS分离株在 F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为 1 1 2 - R- R- Q- K- R- F1 1 7,与 NDV强毒株特征相符 ,且具有 10 1处的 K(赖氨酸 )和 12 1处 V(缬氨酸 ) 2个特征性氨基酸 ,与基因 型 展开更多

关键词 新城疫病毒 RT-PCR ⅶ型基因 病毒分离 分子鉴定

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几株鸡新城疫病毒的分离鉴定及其基因型分析 被引量：9

2

作者 孙丰廷 郑杰 +8 位作者 张发明 崔惠娟 杨国良 张红 张坦 张亮 陈玲 李静 王文泉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期76-79,共4页

从几个发生禽病的地区分离到6株病毒,经过血凝试验、血凝抑制试验、中和试验、分子生物学试验等确定为鸡新城疫病毒;根据GenBank公布的新城疫F基因强弱毒株相关基因序列设计合成1对特异性引物,扩增出的F基因片段长度约为610bp,测序后进... 从几个发生禽病的地区分离到6株病毒,经过血凝试验、血凝抑制试验、中和试验、分子生物学试验等确定为鸡新城疫病毒;根据GenBank公布的新城疫F基因强弱毒株相关基因序列设计合成1对特异性引物,扩增出的F基因片段长度约为610bp,测序后进行序列比对,并分析其核苷酸序列和氨基酸序列,结果显示,有3株具有新城疫强毒株特性,同时还具备新城疫Ⅶ基因型特征,另外根据平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)和静脉致病指数(IVPI)指标测定结果,最终判定这3株是新城疫强毒株且属于基因Ⅶ型,其余3株病毒分离株与La Sota的核酸序列同源性与氨基酸序列同源性均为99%。 展开更多

关键词 新城疫 F基因 强毒株 基因ⅶ型

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用反向遗传技术致弱基因VIId型鹅源新城疫病毒ZJI株 被引量：7

3

作者 胡顺林 孙庆 +4 位作者 吴艳涛 张艳梅 刘秀梵 刘玉良 王曲直 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期197-200,共4页

将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与3个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫... 将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与3个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫病毒粒子。设计两对引物,经overlapPCR方法将该毒株F蛋白裂解位点的112、115和117位碱性氨基酸突变成弱毒株特征的非碱性氨基酸后,替换pNDV/ZJI上的对应序列,构建了转录载体pNDV/ZJIFM,将pNDV/ZJIFM与3个辅助表达质粒共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了致弱的基因VIId型鹅源新城疫病毒NDV/ZJIFM,获救病毒的鸡胚最小致死剂量平均死亡时间(MDT)大于120h,同时该病毒的脑内接种致病指数(ICPI)为0.16,上述结果表明,获救病毒的毒力已被致弱,是一个较为理想的疫苗候选株。 展开更多

关键词 新城疫病毒 拯救 致弱 基因ⅶd型

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鸭源副粘病毒Y03株F基因的克隆及序列分析 被引量：5

4

作者 张青娴 李银 +2 位作者 张敬峰 刘宇卓 鲍恩东 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期421-424,共4页

从安徽某发病鸭场分离鉴定出1株副粘病毒Y03株,采用RT-PCR法扩增出包括裂解位点在内的部分F基因,对其进行序列测定,并与GenBank中的各基因型代表毒株进行比较。结果表明:所克隆片断长度为385 bp;Y03株F基因的裂解位点序列为112R-R-Q-K-R... 从安徽某发病鸭场分离鉴定出1株副粘病毒Y03株,采用RT-PCR法扩增出包括裂解位点在内的部分F基因,对其进行序列测定,并与GenBank中的各基因型代表毒株进行比较。结果表明:所克隆片断长度为385 bp;Y03株F基因的裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117,并且具有第101位的K(赖氨酸)和121位的V(缬氨酸),为基因Ⅶ型副粘病毒强毒株的特征序列;Y03株与NDV代表毒株间的同源性在80.3%至97.4%,与国内标准强毒F48E9的同源性只有83.6%,差异达到18.1%。 展开更多

关键词 鸭 副粘病毒 基因 基因ⅶ型 序列分析

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新城疫病毒野毒株(HBG-1)的F蛋白部分序列同源性分析 被引量：1

5

作者 杨润德 梅双双 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期188-190,共3页

采用RT_PCR方法对分离自河北省某鸡场的一株新城疫病毒 (HBG_1)的核苷酸进行扩增 ,获得了分离株F0 裂解位点附近的基因片段 ,经测序分析 ,并与国际上已发表的新城疫病毒的核酸序列进行比较 ,结果表明其与标准株和疫苗株之间的同源性较... 采用RT_PCR方法对分离自河北省某鸡场的一株新城疫病毒 (HBG_1)的核苷酸进行扩增 ,获得了分离株F0 裂解位点附近的基因片段 ,经测序分析 ,并与国际上已发表的新城疫病毒的核酸序列进行比较 ,结果表明其与标准株和疫苗株之间的同源性较低 ,仅为 82 %～ 86 %之间。运用计算机软件对其裂解位点处的氨基酸顺序进行预测和分析 。 展开更多

关键词 新城疫病毒 RT-PCR F蛋白 序列分析 基因ⅶ

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基因Ⅶ型新城疫病毒样颗粒作为疫苗候选株的免疫效果 被引量：6

6

作者 袁乾亮 丁佳欣 +9 位作者 高一丹 徐小红 钱晶 薛聪 杨明曦 李金斗 冉雄 胡国升 尹仁福 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期201-205,共5页

利用昆虫细胞/杆状病毒表达载体系统,将已构建编码新城疫病毒(NDV)M、F和HN结构基因的3种单顺反子重组杆粒共感染悬浮培养的Sf9细胞以大量制备新城疫病毒样颗粒(ND VLPs)。收集细胞培养上清经超速离心浓缩,蔗糖密度梯度纯化后,利用Weste... 利用昆虫细胞/杆状病毒表达载体系统,将已构建编码新城疫病毒(NDV)M、F和HN结构基因的3种单顺反子重组杆粒共感染悬浮培养的Sf9细胞以大量制备新城疫病毒样颗粒(ND VLPs)。收集细胞培养上清经超速离心浓缩,蔗糖密度梯度纯化后,利用Western blot检测和透射电镜观察。结果显示,3种目的蛋白均正确表达且组装形成与原病毒粒子形态相似的颗粒,测定其血凝活性效价可达12log2。动物试验结果表明,与LaSota灭活油乳苗相比,将纯化后的病毒样颗粒以含25μg蛋白的剂量或联合佐剂免疫商品蛋鸡后能产生较高水平的HI抗体,且可有效减少攻毒鸡只口咽、泄殖腔途径的排毒时间,从而减少病毒在健康鸡群中的传播感染机会;表明所研制的基因Ⅶ型ND VLPs可作为疫苗候选株具有很大的防控优势。 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因ⅶ型 病毒样颗粒 疫苗候选株

原文传递

一株鸡新城疫病毒的分离与鉴定 被引量：6

7

作者 高恒 周全 +3 位作者 管凤霞 戴宗仁 刘玲 温纳相 《现代农业科技》 2009年第20期321-322,共2页

从广东某发病鸡场分离鉴定出1株鸡新城疫病毒,采用RT-PCR法扩增出包括裂解位点在内的部分F基因,对其进行序列测定后与GenBank中的毒株进行比较。结果表明:所克隆片断长度为463bp;F基因的裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117,并且第101位为K... 从广东某发病鸡场分离鉴定出1株鸡新城疫病毒,采用RT-PCR法扩增出包括裂解位点在内的部分F基因,对其进行序列测定后与GenBank中的毒株进行比较。结果表明:所克隆片断长度为463bp;F基因的裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117,并且第101位为K(赖氨酸),121位为V(缬氨酸),具有基因Ⅶ型副粘病毒强毒株的特征序列;分离株与Lasota株同源性为81.2%,与我国标准强毒F48E9的同源性只有82.4%,表明该基因已经发生了变化。 展开更多

关键词 鸡新城疫病毒 F基因 基因ⅶ型

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我国部分地区近年来新城疫病毒流行株分子生物学特征的研究 被引量：5

8

作者 任涛 敖艳华 +4 位作者 曹伟胜 张桂红 罗开健 徐成刚 廖明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期89-92,共4页

参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列，在F基因的3’端相对保守区设计1对引物，利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增，其扩增长度为450bp．测序结果表... 参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列，在F基因的3’端相对保守区设计1对引物，利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增，其扩增长度为450bp．测序结果表明：近十几年来，我国流行的新城疫毒株主要为基因Ⅶ型，其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112～117）强毒株的氨基酸序列特征，并从分子水平上进一步证明我国最近流行的NDV主要为基因Ⅶ型NDV强毒株． 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 基因ⅶ型 强毒株

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一株广东鸽新城疫病毒的生物学特性分析 被引量：5

9

作者 何琴 焦培荣 +4 位作者 刘大伟 韦娜娜 龚军 廖明 任涛 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第9期23-26,共4页

为了解广东地区鸽新城疫病毒的生物学特性,对广东分离株SD54进行了鸡胚平均死亡时间(MDT)、6周龄鸡静脉接种的致病指数(IVPI)、1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)的测定,并对该毒株F基因的重要功能区片段进行RT-PCR扩增、测序,利用MEG... 为了解广东地区鸽新城疫病毒的生物学特性,对广东分离株SD54进行了鸡胚平均死亡时间(MDT)、6周龄鸡静脉接种的致病指数(IVPI)、1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)的测定,并对该毒株F基因的重要功能区片段进行RT-PCR扩增、测序,利用MEGA 4软件绘制系统进化树。经测定,分离株SD54的MDT为60 hI、VPI为2.49I、CPI为1.6;其F基因裂解位点的氨基酸序列为112RRQKRF117,符合NDV强毒株F基因裂解位点氨基酸序列的特征;系统进化树表明该毒株属于基因Ⅶ,与广西鸽源株Gxp40处于同一细分支,同源性最近,表明该分离株SD54为基因Ⅶ强毒株。 展开更多

关键词 鸽 新城疫病毒 基因ⅶ型

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基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：4

10

作者 孙军峰 刘华雷 +6 位作者 王志亮 赵云玲 郑东霞 张维 刘文华 冯莉莉 常娓娓 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1447-1452,共6页

根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测... 根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测。结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·μL-1的模板RNA,敏感性比普通RT-PCR高100倍。本试验建立了基因ⅤⅡ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,且该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因ⅤⅡ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因型毒株的快速鉴别检测。 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因ⅶ型 荧光定量RT-PCR

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鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其生物学特性的研究 被引量：4

11

作者 王敏 付祖权 +5 位作者 刘晓丽 谷长勤 张万坡 胡薛英 温国元 程国富 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1159-1166,共8页

为了探索湖北省黄冈市某鸡场在2016年9月自然发病的大批量鸡死亡的原因,为临床诊断新城疫病毒感染提供病理学依据。采集病死鸡的组织样品,经9日龄SPF鸡胚接种传代分离病毒后,利用HA和HI试验、RT-PCR扩增F基因,对分离株进行鉴定,并通过... 为了探索湖北省黄冈市某鸡场在2016年9月自然发病的大批量鸡死亡的原因,为临床诊断新城疫病毒感染提供病理学依据。采集病死鸡的组织样品,经9日龄SPF鸡胚接种传代分离病毒后,利用HA和HI试验、RT-PCR扩增F基因,对分离株进行鉴定,并通过测定鸡胚最小致死剂量的平均死亡时间、1日龄雏鸡脑内接种指数及组织病理学观察评估分离株的毒力和致病性。结果,从送检的病死鸡中分离到1株NDV,命名为Chicken-China-Hubei0901-2016,简称HB0901。HB0901株F基因裂解区域氨基酸序列为112R-RQ-K-R-F117,符合强毒株特征。HB0901株与F17株同处于基因Ⅶ型分支上,其核苷酸序列同源性高达99.4%。该分离株的MDT和ICPI分别为47.8 h和1.96。显微镜下可见新城疫典型的组织病理学变化。结果表明,基因Ⅶ型新城疫毒株是导致该批鸡大量发病死亡的原因。 展开更多

关键词 新城疫病毒 分离鉴定 致病性 基因ⅶ型 病理学观察

原文传递

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验 被引量：2

12

作者 刘慧谋 胡顺林 +3 位作者 孟春 王同燕 王晓泉 刘秀梵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第12期14-16,共3页

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定。免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各... 用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定。免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离。试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota。 展开更多

关键词 新城疫病毒 疫苗 基因ⅶ型 排毒

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一株鸵鸟源新城疫病毒的分离及其分子生物学特性 被引量：2

13

作者 汪艳 刘华雷 +3 位作者 伏小平 郑东霞 徐天刚 王志亮 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期482-485,共4页

从2005年山东省某鸵鸟饲养场发病鸵鸟分离出1株新城疫病毒,命名为SD01,采用一步法RT-PCR扩增了该分离株F基因的重要功能区片段(535 bp),并将其克隆到pMD18-T载体中,进行序列测定,研究了其分子生物学特性。序列分析结果表明,该分离株F基... 从2005年山东省某鸵鸟饲养场发病鸵鸟分离出1株新城疫病毒,命名为SD01,采用一步法RT-PCR扩增了该分离株F基因的重要功能区片段(535 bp),并将其克隆到pMD18-T载体中,进行序列测定,研究了其分子生物学特性。序列分析结果表明,该分离株F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构一致(112R-R-Q-K-R-F117);遗传进化分析表明,该分离株在分类地位上属于基因Ⅶd型,与目前报道的鸵鸟源和其他禽类NDV毒株基因型一样,说明目前我国流行的仍然是NDV基因Ⅶ型。提示,对于鸵鸟新城疫的防治,除进行疫苗免疫之外,采取生物安全措施也是非常重要的。 展开更多

关键词 鸵鸟 新城疫病毒 分子鉴定 进化树 ⅶd型

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基因Ⅶ型新城疫病毒融合前构象F蛋白的表达及结构分析 被引量：2

14

作者 陈林娜 孙军峰 +7 位作者 李乐 师乾凯 邸涛 刘添仪 赵冉 张春玮 韩宗玺 刘胜旺 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期475-482,共8页

目前,新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的融合前构象是未知的,为获得具有融合前构象的NDV F蛋白,本研究对基因Ⅶ型NDV CK/CH/LHLJ/1/06株的F基因胞外区编码序列进行了修饰和密码子优化,将其克隆至真核表达载体中构建获得了重组质粒pCAG-opti... 目前,新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的融合前构象是未知的,为获得具有融合前构象的NDV F蛋白,本研究对基因Ⅶ型NDV CK/CH/LHLJ/1/06株的F基因胞外区编码序列进行了修饰和密码子优化,将其克隆至真核表达载体中构建获得了重组质粒pCAG-optiF。通过SWISS-MODEL网站对蛋白结构进行预测,结果显示,质粒pCAG-optiF编码的蛋白能够形成与人呼吸道合胞体病毒F蛋白融合前构象相似的结构。将质粒pCAG-optiF转染至鸡源细胞LMH中,通过间接免疫荧光试验证实构建的蛋白在鸡源细胞中成功表达。将质粒p CAG-optiF转染悬浮培养的Expi293F细胞,表达并纯化获得重组蛋白roptiF。SDS-PAGE电泳结果显示获得了与预期大小相符的蛋白。Western-blotting结果显示,表达的roptiF蛋白能够与NDV CK/CH/LHLJ/1/06株的抗血清反应。进一步通过负染色电子显微镜观察roptiF蛋白结构,结果显示,roptiF蛋白具有典型的F蛋白融合前构象的结构特征。本研究成功获得了具有融合前构象的基因Ⅶ型NDV F蛋白,并且该蛋白能够与抗NDV的血清反应,本研究结果为研制新型NDV疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因ⅶ型 F蛋白 融合前构象

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基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及特性研究 被引量：1

15

作者 霍娜 金忠元 +5 位作者 卫巧林 王文彬 牟素菁 李永山 陈鸿军 萧飒 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期52-57,共6页

为制备基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)的单克隆抗体(MAb),本研究利用JS/17病毒株的HN重组蛋白和活病毒分别免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,并通过ELISA、间接免疫荧光和western blot方法筛选,制... 为制备基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)的单克隆抗体(MAb),本研究利用JS/17病毒株的HN重组蛋白和活病毒分别免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,并通过ELISA、间接免疫荧光和western blot方法筛选,制备了3株特异性识别HN蛋白的单克隆抗体(MAb)。其中,MAb1D4和4D9具有病毒中和活性(VN)及血凝抑制作用(HI),可以识别多种基因型的Ⅱ类NDV,但与Ⅰ类NDV病毒株无反应。MAb 2G8识别线性表位131DYIGGIGKE139,该表位在各病毒株中高度保守。获得的3株MAb可以用于NDV的鉴定及HN蛋白的功能研究。 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因ⅶ型 单克隆抗体 HN蛋白

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表达基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白的重组鸡痘病毒的构建和筛选 被引量：1

16

作者 辛舒 田明尧 +7 位作者 曹佳媛 薛斐 杜寿文 谭鹏 肖朋朋 陈兴 郭海宁 金宁一 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期235-240,共6页

为了构建并筛选表达新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组鸡痘病毒(rFPV-F),通过PCR扩增F基因,克隆至pMD18-T Simple载体,进行DNA序列分析和遗传进化关系分析。将测序正确的F基因克隆至笔者所在实验室自行构建的新型鸡痘病毒穿梭载体pTS2GFPV150... 为了构建并筛选表达新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组鸡痘病毒(rFPV-F),通过PCR扩增F基因,克隆至pMD18-T Simple载体,进行DNA序列分析和遗传进化关系分析。将测序正确的F基因克隆至笔者所在实验室自行构建的新型鸡痘病毒穿梭载体pTS2GFPV150中,获得重组质粒pTS2GFPV150-F。然后将其与鸡痘病毒FPV282E4株共转染鸡胚成纤维细胞进行同源重组,挑取表达增强型绿色荧光蛋白的噬斑,经多轮筛选获得重组病毒rFPV-F,应用PCR、RT-PCR、Western-blot等方法对重组鸡痘病毒进行鉴定。结果显示,成功获得NDV F基因及重组F基因的鸡痘病毒rFPV-F,并证实F基因已被整合到鸡痘病毒基因组中,且在感染细胞内被成功表达。本研究成功获得了1株表达NDV F基因的重组鸡痘病毒,为下一步开展动物体内免疫研究奠定了基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因ⅶ型 F蛋白 鸡痘病毒穿梭载体 同源重组

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番鸭源基因Ⅶ型新城疫病毒的生物学特性和免疫原性评价 被引量：1

17

作者 陈济铛 曹梦蕊 +9 位作者 谭华龙 李荣旭 朱婉君 伍辉吉 王杰煌 钟嘉诚 张溢珊 刘敏芳 陈建红 张济培 《中国家禽》 北大核心 2019年第24期23-27,共5页

为了解我国近年水禽主要流行的基因Ⅶ型新城疫病毒的生物学特性和免疫原性,通过攻毒试验和免疫保护试验测定了1株本实验室分离保存的番鸭源基因Ⅶ型新城疫病毒MDK/FS-SS/E/2007的致病指数、雏番鸭致病性和免疫保护性等特征。致病指数评... 为了解我国近年水禽主要流行的基因Ⅶ型新城疫病毒的生物学特性和免疫原性,通过攻毒试验和免疫保护试验测定了1株本实验室分离保存的番鸭源基因Ⅶ型新城疫病毒MDK/FS-SS/E/2007的致病指数、雏番鸭致病性和免疫保护性等特征。致病指数评价结果显示,该毒株符合新城疫病毒强毒株标准。雏鸭致病试验结果显示,攻毒组动物均出现沉郁、瘫痪和扭颈等神经症状,剖检可见脑部充血、出血,胰腺、脾脏和肝脏等器官出现变性坏死等典型新城疫临床特征。免疫保护试验结果显示,以该毒株制备的油乳灭活疫苗对雏番鸭进行3次免疫,免疫后42 d血清HI抗体几何平均滴度水平可达1∶238.9,能为番鸭提供有效保护。研究结果为水禽新城疫诊断与免疫防控研究提供了参考资料。 展开更多

关键词 基因ⅶ型 新城疫病毒 致病指数 免疫保护试验 番鸭源

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基于F和HN蛋白的基因Ⅶ型新城疫病毒嵌合疫苗的构建及免疫效力评估 被引量：1

18

作者 李丽 王国康 +9 位作者 商雨 徐英英 冯贺龙 汪宏才 张蓉蓉 曾哲 罗青平 邵华斌 曾驰 温国元 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期4346-4355,共10页

【目的】试验旨在构建一种基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)嵌合疫苗,并对其免疫效力进行评估。【方法】利用反向遗传学技术,以含有禽偏禽腮腺炎病毒2型(Avian metaavulavirus-2,AMAV-2)Y2株基因组的重组质粒pT7-Y2为模... 【目的】试验旨在构建一种基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)嵌合疫苗,并对其免疫效力进行评估。【方法】利用反向遗传学技术,以含有禽偏禽腮腺炎病毒2型(Avian metaavulavirus-2,AMAV-2)Y2株基因组的重组质粒pT7-Y2为模板,将Y2株的F和HN蛋白的胞外区替换为基因Ⅶ型NDV HB0901株的F和HN蛋白的胞外区,将HB0901株的F蛋白裂解位点突变为LaSota弱毒株的F蛋白裂解位点,构建嵌合重组病毒rY2-FHNR株。对rY2-FHNR株的增殖特性、致病力及遗传稳定性等生物学特性进行检测,并通过接种2周龄SPF鸡评估rY2-FHNR株的免疫原性及其免疫血清与Y2株的交叉反应性,利用NDV NP蛋白的间接ELISA方法对免疫血清进行检测,验证其鉴别诊断效果。【结果】试验成功获得了嵌合重组病毒rY2-FHNR株,生物学特性检测结果显示,rY2-FHNR株在鸡胚中的增殖滴度和致病性符合弱毒特征,其鸡胚传代的遗传稳定性良好。rY2-FHNR株可诱导机体产生针对NDV的抗体,且免疫血清不与rY2株抗原发生交叉反应。通过NDV NP ELISA抗体检测方法可以实现区分疫苗免疫与野毒感染。【结论】本试验研发了一种基因Ⅶ型NDV嵌合候选疫苗,为基因Ⅶ型NDV的监测、防控和净化提供了技术支撑。 展开更多

关键词 新城疫病毒(NDV) 基因ⅶ型 禽偏禽腮腺炎病毒血清2型(AMAV-2) 反向遗传技术 嵌合疫苗

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青海湖野生迁徙水鸟新城疫病毒的分离与鉴定 被引量：1

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作者 黄杰 郭军庆 +2 位作者 尹可 黎满香 周继勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期678-681,共4页

从青海湖地区野生迁徙水鸟粪便中分离到1株新城疫病毒QH0601,其脑内接种指数(ICPI)为1.88。以RT-PCR扩增该分离株F基因片段,并进行序列分析,结果显示QH0601分离株F蛋白裂解位点具有强毒株的特征性氨基酸序列112R-R-Q-K-R-F117,其101位和... 从青海湖地区野生迁徙水鸟粪便中分离到1株新城疫病毒QH0601,其脑内接种指数(ICPI)为1.88。以RT-PCR扩增该分离株F基因片段,并进行序列分析,结果显示QH0601分离株F蛋白裂解位点具有强毒株的特征性氨基酸序列112R-R-Q-K-R-F117,其101位和121位的氨基酸残基具有新城疫病毒基因Ⅶ型特征。聚类分析表明,QH0601毒株与我国普遍流行的基因Ⅶ型NDV具有很高的同源性,提示野生迁徙水鸟与家禽新城疫的发生在流行病学和生态学上有着非常密切的关系。 展开更多

关键词 野生迁徙水鸟 新城疫病毒 基因ⅶ型

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基因Ⅶ型新城疫病毒的免疫及生物学基础

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作者 陈申秒 吴雪莉 《中国动物保健》 2015年第1期62-65,共4页

基因Ⅶ型新城疫已成为我国禽业养殖中的主要新城疫类别,在商品肉鸡和蛋鸡养殖临床中成为防治重点,本文从基因Ⅶ型新城疫病毒的分子生物学基础上进行分析,结合生产实践,为养殖一线制定切实可行的防治措施提供比较有价值的参考。

关键词 基因ⅶ型 新城疫病毒 分子生物学

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