对硝基苯酚降解菌P3的分离、降解特性及基因工程菌的构建 被引量：27

1

作者 崔中利 张瑞福 +1 位作者 何健 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期19-26,共8页

分离到一株假单胞菌 (Pseudomonassp .)P3 ,该菌能够以对硝基苯酚为唯一碳源和氮源进行生长。在有外加氮源的条件下 ,P3降解对硝基苯酚并在培养液中积累亚硝酸根。P3有比较广泛的底物适应性 ,对多种芳香族化合物都有降解能力。不同金属... 分离到一株假单胞菌 (Pseudomonassp .)P3 ,该菌能够以对硝基苯酚为唯一碳源和氮源进行生长。在有外加氮源的条件下 ,P3降解对硝基苯酚并在培养液中积累亚硝酸根。P3有比较广泛的底物适应性 ,对多种芳香族化合物都有降解能力。不同金属离子对P3降解对硝基苯酚有不同的作用。葡萄糖的存在对P3降解对硝基苯酚无明显促进作用 ,而微量酵母粉可以大大促进P3对硝基苯酚的降解。以P3为受体菌 ,通过接合转移的手段将甲基对硫磷水解酶基因mpd克隆至P3菌中 ,获得了表达甲基对硫磷水解酶活性的基因工程菌PM ,PM能够以甲基对硫磷为唯一碳源进行生长。 展开更多

关键词 对硝基苯酚 生物降解 mpd基因 基因工程菌 分离

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环境生物修复中高效基因工程菌的构建策略 被引量：20

2

作者 刘和 陈英旭 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期208-212,共5页

通过对环境污染物的生物降解机制及妨碍污染物降解的因素进行分析 ,提出了几种高效基因工程降解菌的构建策略 ,包括重组污染物降解基因以优化污染物降解途径。

关键词 生物修复 基因工程菌 污染物 降解基因 环境生物技术 构建策略

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微生物降解苯酚的研究进展 被引量：15

3

作者 冯思琦 魏炜 +1 位作者 袁雅姝 张黎 《环境保护与循环经济》 2009年第9期49-51,65,共4页

苯酚是一种生物毒性物质,即使在低浓度下对人体及微生物也有毒害作用。从微生物对苯酚降解的生化机制和关键酶、高效降酚微生物菌种的分离筛选,降解特性以及利用高效基因工程菌处理酚类化合物的研究进展等方面,对微生物降解苯酚进行了... 苯酚是一种生物毒性物质,即使在低浓度下对人体及微生物也有毒害作用。从微生物对苯酚降解的生化机制和关键酶、高效降酚微生物菌种的分离筛选,降解特性以及利用高效基因工程菌处理酚类化合物的研究进展等方面,对微生物降解苯酚进行了综述。 展开更多

关键词 苯酚 生物降解 基因工程菌

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猪防御素的研究进展及其在饲料中的应用 被引量：4

4

作者 王丹玉 彭子欣 +1 位作者 王洪彬 王安如 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期86-90,共5页

防御素是一类富合半胱氨酸的阳离子活性多肽,是动物先天性免疫防御系统的重要组成部分,防御素在动物组织细胞中广泛表达,是宿主抵抗外界病原微生物入侵的第一道防线。防御素具有的抗菌谱广、抗菌机制特殊、不易产生耐药性、残留低、对... 防御素是一类富合半胱氨酸的阳离子活性多肽,是动物先天性免疫防御系统的重要组成部分,防御素在动物组织细胞中广泛表达,是宿主抵抗外界病原微生物入侵的第一道防线。防御素具有的抗菌谱广、抗菌机制特殊、不易产生耐药性、残留低、对动物自身正常细胞没有伤害等特点,使防御素成为替代抗生素的最佳候选之一,未来将在畜禽生产中具有广阔的应用前景。本文主要对猪防御素基因的特点及其在动物组织中的表达谱、防御素在猪体内的表达调控特性、基因工程菌以及防御素在饲料业中的应用等方面进行阐述。 展开更多

关键词 猪防御素 表达调控 基因工程菌 饲料添加剂

原文传递

黄素单加氧酶在大肠杆菌中的表达及靛蓝的生物合成 被引量：3

5

作者 肖其敏 徐天虹 《江苏科技信息》 2016年第3期78-80,共3页

为实现生物转化法合成靛蓝,构建了携带黄素单加氧酶基因的工程菌E.coli BL21(pET28a/fmo)。工程菌经诱导表达后,加入吲哚进行转化,薄层分析确定产物即靛蓝。文章也对培养基中底物浓度、诱导剂、转化温度、转化时间等影响靛蓝合成的因子... 为实现生物转化法合成靛蓝,构建了携带黄素单加氧酶基因的工程菌E.coli BL21(pET28a/fmo)。工程菌经诱导表达后,加入吲哚进行转化,薄层分析确定产物即靛蓝。文章也对培养基中底物浓度、诱导剂、转化温度、转化时间等影响靛蓝合成的因子进行了初步探讨。结果表明,在合适的条件下,工程菌转化吲哚合成靛蓝产物浓度最高达到48.28mg/L,转化率到达64.4%。 展开更多

关键词 黄素单加氧酶 基因工程菌 靛蓝 生物转化

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产果聚糖蔗糖酶重组枯草芽孢杆菌的构建及表达 被引量：2

6

作者 孙惟沁 沐万孟 +1 位作者 张涛 江波 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期79-86,共8页

果聚糖蔗糖酶能够将蔗糖和乳糖转化为具有益生元功能的低聚乳果糖。为了实现果聚糖蔗糖酶在重组枯草芽孢杆菌中的高效表达,将两种启动子比较并进行串联操作,确定生产果聚糖蔗糖酶的最佳启动子并对重组菌的生长条件进行探索。构建WB-PH、... 果聚糖蔗糖酶能够将蔗糖和乳糖转化为具有益生元功能的低聚乳果糖。为了实现果聚糖蔗糖酶在重组枯草芽孢杆菌中的高效表达,将两种启动子比较并进行串联操作,确定生产果聚糖蔗糖酶的最佳启动子并对重组菌的生长条件进行探索。构建WB-PH、WB-P、WB-H、1A-PH、1A-P、1A-H六种重组枯草芽孢杆菌,其中WB-PH发酵酶活明显优于其他重组菌。研究生长条件对重组菌WB-PH产酶的影响,采用大豆蛋白胨作为氮源,果聚糖蔗糖酶的表达量明显增加,发酵过程中保持较高的溶氧水平也对产酶量有较大的提高。优化后的发酵酶活最高可达108.34 U/mL,相比优化前提高了25.92倍。 展开更多

关键词 果聚糖蔗糖酶 高效表达 基因工程菌 发酵

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一株海洋细菌高汞抗性及高富集能力的分析 被引量：2

7

作者 邓旭 黄慧炜 +1 位作者 梁彩柳 刘冰 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期551-557,共7页

为探究一株海洋类产碱假单胞菌A1高汞抗性和高富集能力的机制,从分子水平出发,对汞胁迫(或无汞胁迫)条件下的A1进行转录组学分析,得到差异表达基因427个.从中筛选出差异表达倍数较大且与重金属抗性相关的基因Unigene97-All,经Blast分析... 为探究一株海洋类产碱假单胞菌A1高汞抗性和高富集能力的机制,从分子水平出发,对汞胁迫(或无汞胁迫)条件下的A1进行转录组学分析,得到差异表达基因427个.从中筛选出差异表达倍数较大且与重金属抗性相关的基因Unigene97-All,经Blast分析和构建系统进化树,并构建基因工程菌进行抗性和生物富集性能验证.结果表明,Unigene97-All为Mer A汞还原酶编码基因,其编码的氨基酸序列与同样来自假单胞菌的Mer A(KJU79639.1)序列具有90%的相似性.构建成功的重组菌U97具有一定的抗汞能力,在Hg2+质量浓度为6.0 mg/L的培养基中能正常生长,但重组菌U97和对照组大肠杆菌的汞富集量无明显差异,说明细菌的汞富集量与抗性没有必然的联系. 展开更多

关键词 基因工程 假单胞菌 转录组学 汞 抗性基因 基因工程菌 生物富集

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重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化 被引量：2

8

作者 张悦 宿玲恰 吴敬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期913-919,共7页

为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/p ET24a(+)-Tre S基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加乳糖进行诱导产酶,... 为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/p ET24a(+)-Tre S基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加乳糖进行诱导产酶,在该条件下发酵35 h时酶活达到472 U/m L,是优化前的2.3倍;进而采用该条件在30 L发酵罐进行了初步放大研究,酶活达到356 U/m L。由于该海藻糖合酶热稳定性好,因此尝试了高温处理破碎E.coli细胞以释放海藻糖合酶,结果表明,80℃处理30 min,海藻糖合酶的得率可达72.3%,具有工业化应用前景。 展开更多

关键词 海藻糖合酶 高效表达 基因工程菌 发酵罐 高温处理

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L-色氨酸生产菌株TPO1发酵条件研究 被引量：1

9

作者 李维理 《甘肃农业科技》 2017年第7期57-60,共4页

对L-色氨酸生产基因工程菌TP01发酵的接种量、发酵温度和溶氧等条件进行了研究。结果表明,该菌株的最佳发酵条件初始培养基组成为葡萄糖30 g/L、硫酸铵40 g/L、酪氨酸0.2 g/L、玉米浆25 m L/L、磷酸氢二钾10 g/L、磷酸二氢钾5 g/L、七... 对L-色氨酸生产基因工程菌TP01发酵的接种量、发酵温度和溶氧等条件进行了研究。结果表明,该菌株的最佳发酵条件初始培养基组成为葡萄糖30 g/L、硫酸铵40 g/L、酪氨酸0.2 g/L、玉米浆25 m L/L、磷酸氢二钾10 g/L、磷酸二氢钾5 g/L、七水硫酸镁2 g/L、硫酸钠0.002 g/L、七水硫酸亚铁0.01 g/L、维生素B1100μg/L、维生素H 50μg/L,流加糖为浓度70%的葡萄糖(质量体积比),pH为7.0,温度为37℃,接种量为10%,溶氧控制在20%~30%。 展开更多

关键词 L-色氨酸 基因工程菌 发酵优化

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L-苯丙氨酸发酵条件研究

10

作者 李维理 《农业灾害研究》 2017年第2期28-29,62,共3页

对基因工程菌PA01发酵的接种量、发酵温度和溶氧等条件进行了研究,结果表明,该菌株的最佳发酵条件为:初始培养基组成为葡萄糖35.00 g/L,硫酸铵35.00 g/L,甲硫氨酸0.15 g/L,酵母浸粉2.00 g/L,磷酸氢二钾10.00 g/L,磷酸二氢钾5.00 g/L,七... 对基因工程菌PA01发酵的接种量、发酵温度和溶氧等条件进行了研究,结果表明,该菌株的最佳发酵条件为:初始培养基组成为葡萄糖35.00 g/L,硫酸铵35.00 g/L,甲硫氨酸0.15 g/L,酵母浸粉2.00 g/L,磷酸氢二钾10.00 g/L,磷酸二氢钾5.00 g/L,七水硫酸镁2.00 g/L,七水硫酸亚铁0.01 g/L,维生素B10.20 mg/L,流加糖为浓度70%的葡萄糖(质量体积比);pH为7.0,温度为37℃,接种量为10%,溶氧控制在10%~15%。 展开更多

关键词 L-苯丙氨酸 基因工程菌 发酵优化

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氨基葡萄糖发酵条件研究

11

作者 尚海涛 《甘肃农业科技》 2017年第1期40-43,共4页

对基因工程菌JZ2316发酵的接种量、pH及诱导剂IPTG添加时间等条件进行了研究。结果表明,该菌株的最佳发酵条件为:培养基组成为葡萄糖0.500 0 g/L、磷酸二氢钾0.667 0 g/L、一水柠檬酸0.355 0 g/L、七水硫酸镁0.250 0 g/L、二水氯化钙0.0... 对基因工程菌JZ2316发酵的接种量、pH及诱导剂IPTG添加时间等条件进行了研究。结果表明,该菌株的最佳发酵条件为:培养基组成为葡萄糖0.500 0 g/L、磷酸二氢钾0.667 0 g/L、一水柠檬酸0.355 0 g/L、七水硫酸镁0.250 0 g/L、二水氯化钙0.002 5 g/L、消泡剂0.025 0 g/L、微量元素母液(包括七水硫酸铁5.00 g/L、硼酸0.10 g/L、六水氯化钴0.10 g/L、一水硫酸锰0.33 g/L、七水硫酸锌3.80 g/L、二水钼酸钠0.10 g/L、硫酸钴0.10 g/L)0.010 0 g/L,流加糖为60%葡萄糖(质量体积比),pH为6.9,接种量为10%,发酵OD_(600 nm)达到28添加诱导剂。 展开更多

关键词 氨基葡萄糖 基因工程菌 发酵条件

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持久性生物累积性有毒污染物(PBT)及微生物降解

12

作者 吕叔华 李秀艳 徐亚同 《上海化工》 CAS 2005年第11期1-4,18,共5页

介绍了持久性生物累积性有毒污染物(PBT)的定义、来源及污染特征,分析总结了PBT的微生物降解技术和研究进展,包括PBT高效降解菌的筛选分离,基因工程菌降解PBT,物理化学技术强化微生物降解、利用共代谢技术、特种专一酶技术加快PBT的微... 介绍了持久性生物累积性有毒污染物(PBT)的定义、来源及污染特征,分析总结了PBT的微生物降解技术和研究进展,包括PBT高效降解菌的筛选分离,基因工程菌降解PBT,物理化学技术强化微生物降解、利用共代谢技术、特种专一酶技术加快PBT的微生物降解等方面,并对PBT微生物控制技术和应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 持久性生物累积性有毒污染物 高效降解菌 基因工程菌 共代谢

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微生物降解有机磷农药的研究进展 被引量：33

13

作者 刘云焕 陈东海 《北方环境》 2005年第1期22-24,共3页

大量研究表明利用微生物对环境中有机磷农药的净化处理是行之有效的。文章将从有机磷农药降解菌的分离、基 因工程菌的构建以及降解机理等几个方面阐述微生物降解有机磷农药的研究进展,并概括了微生物降解有机磷农药的几个 主要的研究... 大量研究表明利用微生物对环境中有机磷农药的净化处理是行之有效的。文章将从有机磷农药降解菌的分离、基 因工程菌的构建以及降解机理等几个方面阐述微生物降解有机磷农药的研究进展,并概括了微生物降解有机磷农药的几个 主要的研究方向。揭示了微生物降解有机磷农药的途径,该成果对控制和消除有机磷农药的污染,促进农业丰收将起到积极 作用。 展开更多

关键词 微生物降解 有机磷农药 降解菌 净化处理 污染 降解机理 基因工程菌 研究进展 分离 促进

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典型酚类废水的微生物处理研究现状及其进展 被引量：9

14

作者 贺强礼 关向杰 +2 位作者 黄水娥 狄准 杨海君 《环境工程》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期6-9,52,共5页

酚类是一种原生质的高毒物质,严重危害人类的健康与生存。含酚废水来源广泛、水质复杂、总量较大,因此必须对含酚废水进行有效处理。微生物以其高效、快速、无二次污染等优点成为降解酚类污染物的首选对象。对微生物降解酚类的生理生化... 酚类是一种原生质的高毒物质,严重危害人类的健康与生存。含酚废水来源广泛、水质复杂、总量较大,因此必须对含酚废水进行有效处理。微生物以其高效、快速、无二次污染等优点成为降解酚类污染物的首选对象。对微生物降解酚类的生理生化机制和关键酶,高效降酚菌株的分离筛选、降解特性以及利用细胞固定化技术、构建高效基因工程菌等技术手段处理酚类污染物的研究等方面进行综述。 展开更多

关键词 含酚废水 微生物 生物降解 基因工程菌

原文传递

枯草芽孢杆菌工程菌发酵技术的研究进展 被引量：5

15

作者 黄福佳 姜宁 +5 位作者 张爱忠 全佳慧 张晨雪 孙海森 杨萧华 申林用 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期63-67,共5页

枯草芽孢杆菌既是有益菌,又是表达外源蛋白的工具,其产生的工程菌的许多特性随着其所携带的基因发生一定变化。工程菌生物发酵的目的是扩大携带外源基因的菌体分泌蛋白量和菌体自身的产量。文章主要介绍枯草芽孢杆菌的表达系统,分析发... 枯草芽孢杆菌既是有益菌,又是表达外源蛋白的工具,其产生的工程菌的许多特性随着其所携带的基因发生一定变化。工程菌生物发酵的目的是扩大携带外源基因的菌体分泌蛋白量和菌体自身的产量。文章主要介绍枯草芽孢杆菌的表达系统,分析发酵条件控制和补料策略对基因工程菌体生产量的影响,并对枯草芽孢杆菌工程菌发酵领域的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 基因工程菌 表达系统 发酵 条件控制 补料策略

原文传递

可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5基因工程菌发酵培养和诱导表达条件的优化 被引量：1

16

作者 马晓娟 蔚萍 +1 位作者 妙亮 边六交 《化学与生物工程》 CAS 2012年第4期27-31,共5页

在实验室试管培养条件下优化了基因工程菌E.coli BL21(DE3)pET15b/K5发酵产可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5的培养基和诱导表达条件。经菌体干重测定和SDS-PAGE检测,确定最佳培养基(g.L-1)为:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10... 在实验室试管培养条件下优化了基因工程菌E.coli BL21(DE3)pET15b/K5发酵产可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5的培养基和诱导表达条件。经菌体干重测定和SDS-PAGE检测,确定最佳培养基(g.L-1)为:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10.0,葡萄糖6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2HPO46.0;优化的诱导表达条件为:诱导剂浓度0.01mmol.L-1,诱导时间6h,诱导温度37℃,摇床转速220r.min-1。在优化的培养基和诱导表达条件下,菌体干重为1.8g.L-1,Kringle 5表达量为360mg.L-1,占总蛋白含量的20%,与基础LB培养基相比,Krin-gle 5表达量提高了1.18倍。 展开更多

关键词 血管生长抑制因子Kringle5 发酵培养基 诱导表达 基因工程菌 优化

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重组昆虫病原细菌Cip蛋白基因工程菌发酵条件的初步研究

17

作者 游娟 黄建林 +1 位作者 曹莉 韩日畴 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期25-29,共5页

昆虫病原细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为新型的生物农药——昆虫病原线虫提供必需的营养。在已构建原核表达载体pET-15b-cipA和pET-15b-cipB的基础上,研究了这两种重组载体在不同宿主菌中的表达情况,重组菌的生长特性,摇瓶培养... 昆虫病原细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为新型的生物农药——昆虫病原线虫提供必需的营养。在已构建原核表达载体pET-15b-cipA和pET-15b-cipB的基础上,研究了这两种重组载体在不同宿主菌中的表达情况,重组菌的生长特性,摇瓶培养时表达重组Cip蛋白工程菌的发酵条件。结果显示:以E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在LB培养基中培养至OD600为0.8～1.0时,1 mmol/L IPTG诱导8 h,CipA和CipB的表达量可达30.9%和32.6%,重组质粒具有良好的分离稳定性和结构稳定性。 展开更多

关键词 胞内晶体蛋白 基因工程菌 发酵

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莽草酸生物合成途径的调控 被引量：17

18

作者 汪华 崔志峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期50-53,共4页

莽草酸是合成生物碱等许多其它物质的前体。近年来,莽草酸作为临床上惟一有效的抗禽流感药物——达啡的原料而倍受关注。简述了莽草酸生物合成的途径,着重从基因工程角度分析了莽草酸合成过程中的关键酶及其对莽草酸产量的影响,旨在为... 莽草酸是合成生物碱等许多其它物质的前体。近年来,莽草酸作为临床上惟一有效的抗禽流感药物——达啡的原料而倍受关注。简述了莽草酸生物合成的途径,着重从基因工程角度分析了莽草酸合成过程中的关键酶及其对莽草酸产量的影响,旨在为研究和开发微生物工程菌生产莽草酸提供参考。 展开更多

关键词 莽草酸 生物合成途径 遗传改造 工程菌

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高效除磷工程菌Pseudomonas putida GM6-PPK1的构建及其除磷能力研究 被引量：4

19

作者 李波 刘卫东 +4 位作者 刘娟 赵晓丽 高雅英 曹慧 崔中利 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期600-606,共7页

ppk1基因编码的多聚磷酸盐激酶主要负责多聚磷酸盐的合成,其表达量的高低直接决定聚磷菌的聚P能力的强弱。Pseudomonas putida GM6是从EBPR好氧池活性污泥中分离获得的一株具有聚P能力的菌株,该菌株含有两个编码多聚磷酸盐激酶的基因(p... ppk1基因编码的多聚磷酸盐激酶主要负责多聚磷酸盐的合成,其表达量的高低直接决定聚磷菌的聚P能力的强弱。Pseudomonas putida GM6是从EBPR好氧池活性污泥中分离获得的一株具有聚P能力的菌株,该菌株含有两个编码多聚磷酸盐激酶的基因(ppk1和ppk2)。通过PCR从高效聚磷菌株总DNA中扩增得到了ppk1及其启动子,并定向克隆到pBBRMCS-5载体上,构建了重组质粒pMEPE-PPK,在辅助质粒pRK2013的帮助下,通过三亲接合将pMEPE-PPK转移到原始菌株GM6中,获得的工程菌P.putidaGM6-PPK1。GM6-PPK1除P能力较原始菌株GM6和对照菌株GM6-P5提高了54%,生长能力较原始菌株也有一定增强。通过模拟EBPR工艺,发现GM6-PPK1在厌氧/好氧交替的环境条件下强化表达不但提高了菌体好氧段的吸P能力,而且厌氧段P的释放和PHA的合成较之原始菌株也有显著增加。 展开更多

关键词 强化生物除磷 多聚磷酸盐 多聚磷酸盐激酶 基因工程菌

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