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nm23-H1基因稳定转染肺癌细胞的鉴定 被引量：5
1
作者 郑海霞 周清华 +3 位作者 申东兰 彭安 何艳玲 曹菊秀 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2011年第2期145-147,共3页
目的:通过稳定、高效、低毒的基因转染方法将nm23-H1基因导入该基因缺失的人肺大细胞癌株L9981,从基因及蛋白水平鉴定nm23-H1基因转染肺癌细胞的建立。方法:以JM109为宿主菌,转化质粒载体PCMV-neo-Bam-nm23-H1,制备nm23-H1基因的真核表... 目的:通过稳定、高效、低毒的基因转染方法将nm23-H1基因导入该基因缺失的人肺大细胞癌株L9981,从基因及蛋白水平鉴定nm23-H1基因转染肺癌细胞的建立。方法:以JM109为宿主菌,转化质粒载体PCMV-neo-Bam-nm23-H1,制备nm23-H1基因的真核表达载体;利用阳离子脂质体Lipofectamine介导,将nm23-H1基因导入L9981细胞株。采用RT-PCR技术检测转染后nm23-H1基因的表达,并用Western blot技术检测转染后nm23-H1蛋白的表达。结果:转染后的L9981细胞株中可检测到nm23-H1 mRNA及nm23-H1蛋白的阳性表达。结论:建立表达nm23-H1基因的肺癌细胞株L9981,为研究nm23-H1对肺癌恶性转移表型的逆转作用作基础准备。 展开更多
关键词 NM23-H1 基因转染 肺癌细胞 肿瘤转移
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新型肽-DNA复合颗粒性疫苗的制备方法 被引量：1
2
作者 唐艳 吴玉章 +5 位作者 刘宏利 赵建平 倪兵 贾正才 周伟 邹丽云 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期229-231,235,共4页
目的研究、优化新型颗粒性肽-DNA复合疫苗的制备方法。方法以DNA沉淀试验、DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和电镜分析对该疫苗颗粒的制备参数进行优化。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L,电荷比为2的制备条件下,该疫苗形成直径为20nm的均一颗... 目的研究、优化新型颗粒性肽-DNA复合疫苗的制备方法。方法以DNA沉淀试验、DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和电镜分析对该疫苗颗粒的制备参数进行优化。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L,电荷比为2的制备条件下,该疫苗形成直径为20nm的均一颗粒,并可有效介导DNA疫苗所携带基因的表达。结论该研究为颗粒性肽-DNA复合疫苗获得良好的免疫学效应奠定了基础。 展开更多
关键词 基因转染 阳离子肽 疫苗制备 多聚赖氨酸
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p21^(WAF1/CIP1)过表达对人肝癌细胞恶性表型和细胞凋亡的影响 被引量：9
3
作者 杨帆 王文亮 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期99-101,共3页
目的探讨ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１过表达对人肝癌细胞恶性表型和细胞凋亡的影响。方法用带有ｐ２１的真核表达载体ＰＣＥＰ，经基因转染，使其在有ｐ５３突变的人肝细胞癌细胞系（ＨＣＣ９２０４）中表达；通过流式细胞仪、透射电镜... 目的探讨ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１过表达对人肝癌细胞恶性表型和细胞凋亡的影响。方法用带有ｐ２１的真核表达载体ＰＣＥＰ，经基因转染，使其在有ｐ５３突变的人肝细胞癌细胞系（ＨＣＣ９２０４）中表达；通过流式细胞仪、透射电镜和ＤＮＡ电泳确定凋亡细胞。结果转基因后Ｇ１期细胞增加，并且在Ｇ１期前出现一凋亡峰，凋亡细胞占被检细胞总数的２２５％；电镜下可见部分细胞体积缩小，胞膜完整，有出芽现象，细胞器结构完整，致密的染色质边集于核膜内侧，呈明显的凋亡细胞的形态；琼脂糖凝胶电泳出现ＤＮＡ梯形条带。转染ｐ２１后，细胞的恶性表型发生了逆转，表现为细胞在软琼脂中克隆形成能力降低，ＢｒｄＵ掺入量Ａ值由对照组的１．３８±０．１１明显下降为０．７７±０．０６（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＣＥＰｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１能够抑制肝癌细胞的生长及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因转染 细胞凋亡
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