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瓜叶菊花青素合成关键结构基因的分离及表达分析 被引量：42
1
作者 胡可 孟丽 +2 位作者 韩科厅 孙翊 戴思兰 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1013-1022,共10页
通过RT-PCR的方法分离了花青素合成途径上的关键结构基因片段:CHS、CHI、F3H、F3′H和DFR。在白色系、红色系、紫色系和蓝色系瓜叶菊舌状花中,采用半定量RT-PCR的方法分析CHS、CHI、F3H、F3′H、DFR、F3′5′H、3MaT这7个结构基因在花... 通过RT-PCR的方法分离了花青素合成途径上的关键结构基因片段:CHS、CHI、F3H、F3′H和DFR。在白色系、红色系、紫色系和蓝色系瓜叶菊舌状花中,采用半定量RT-PCR的方法分析CHS、CHI、F3H、F3′H、DFR、F3′5′H、3MaT这7个结构基因在花不同发育阶段的表达模式。结果表明:在白色花中不存在CHS的表达;在红色花中检测到F3′H基因的高丰度表达,但没有检测到F3′5′H的转录本;在蓝色花中没有F3′H表达的信号,但在花序开放的第Ⅰ阶段有较强的F3′5′H的表达信号;而在紫色花中可同时检测到F3′H和F3′5′H的转录本。此外,瓜叶菊花青素合成相关结构基因在花序开放初期高丰度表达,随后逐渐降低,在第Ⅳ阶段表达量再次升高,而在花序开放末期表达量极低或没有表达信号。 展开更多
关键词 瓜叶菊 花色 花青素 基因分离 基因表达
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猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化 被引量：26
2
作者 郭瀛军 吴丹 +1 位作者 陈蕊雯 孙树汉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期183-186,共4页
以RT PCR方法 ,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA 5 0 3 ,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE... 以RT PCR方法 ,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA 5 0 3 ,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE Sepharose离子交换柱、Sephdex 2 0 0凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN γ蛋白 ,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性。 展开更多
关键词 Γ干扰素 基因表达 分离纯化 大肠杆菌
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猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定 被引量：32
3
作者 曹瑞兵 周斌 +1 位作者 陈德胜 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期71-75,共5页
提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA ,RT -PCR扩增出猪IFN -γ基因并克隆到pGEM -T -easy载体 ,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN -γ的完整基因。设计 1对引物亚克隆猪IFN -γ成熟蛋白基因并对其5′端前 2个稀有密码子... 提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA ,RT -PCR扩增出猪IFN -γ基因并克隆到pGEM -T -easy载体 ,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN -γ的完整基因。设计 1对引物亚克隆猪IFN -γ成熟蛋白基因并对其5′端前 2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造。经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC ,并实现在大肠杆菌中的高效表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及 0 5mol·L-1盐酸胍复性液复性处理 ,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化。细胞病变抑制法测定结果表明 ,重组猪IFN -γ具有较高的干扰素活性 ,约为 4 5× 10 6U·mg-1。 展开更多
关键词 猪Γ干扰素 基因克隆 基因改造 基因表达 活性 细胞病变抑制法
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食用菌基因工程研究进展 被引量：24
4
作者 王丕武 王东昌 李玉 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期23-27,共5页
对近年来食用菌基因工程研究已取得的研究成果进行了综述 ,主要包括食用菌染色体组学、基因分离和克隆、遗传转化的选择标记和途径等相关内容。
关键词 染色体组学 基因分离 选择标记 转化方法 食用菌 遗传育种
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甘薯NBS类抗病基因类似物的分离与序列分析 被引量：26
5
作者 陈观水 周以飞 +1 位作者 林生 潘大仁 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期359-365,共7页
利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotidebindingsite)序列中的保守模体(motif)“P-loop”和“GLPL”合成简并引物,以甘薯(Ipomoeabatatas)栽培品种青农2号基因组DNA为模板进行PCR扩增,通过T/A克隆、测序和序列分析,共得到15条具有连续OR... 利用已克隆植物抗病基因NBS(Nucleotidebindingsite)序列中的保守模体(motif)“P-loop”和“GLPL”合成简并引物,以甘薯(Ipomoeabatatas)栽培品种青农2号基因组DNA为模板进行PCR扩增,通过T/A克隆、测序和序列分析,共得到15条具有连续ORF的抗病基因类似物(Resistancegeneanalogues,RGAs)序列,它们之间核苷酸序列间的相似性系数在41.2%-99.4%之间,而相应推测的氨基酸序列间的相似性系数在20.6%-100%之间,同时对分离的RGAs的核苷酸和氨基酸序列进行系统发育树分析,表明甘薯RGAs可分为TIR(DrosophilaTollorhumaninterleukinreceptor-like)和nonTIR两类。对甘薯RGAs和5个已克隆植物NBS的氨基酸序列进行结构分析表明,它们包括“P-loop”、“Kinase-2”、“Kinase-3a”“、GLPL”4个抗病基因所共有的保守模体。这些表明甘薯与其它物种的NBS类RGAs可能具有同样的起源和进化机制。 展开更多
关键词 甘薯 NBS 抗病基因类似物 基因分离 序列分析
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乳酸菌素生产菌的分离与鉴定 被引量：24
6
作者 刘长建 徐洪涛 +1 位作者 权春善 范圣第 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期26-30,共5页
对乳酸菌素产生菌进行分离,得到4株理想菌株。利用高效液相色谱检测其发酵液,初步确定4菌株均为乳酸菌,其中Ⅱ32菌株产乳酸最多,对各指示菌的抑制作用最显著,对该菌株作进一步的研究。Ⅱ32菌株在MRS培养基上可以生长,最适生长温度为28℃... 对乳酸菌素产生菌进行分离,得到4株理想菌株。利用高效液相色谱检测其发酵液,初步确定4菌株均为乳酸菌,其中Ⅱ32菌株产乳酸最多,对各指示菌的抑制作用最显著,对该菌株作进一步的研究。Ⅱ32菌株在MRS培养基上可以生长,最适生长温度为28℃,革兰氏染色呈阳性,无芽孢。通过API生化反应实验、16SrDNA测序可进一步确定该菌株是L·paraplantarum或L·paraplantarum。最终通过对recA-gen的PCR产物检测,鉴定菌株Ⅱ32为Lactobacillusparaplantarum(类植物乳杆菌)。牛津杯抑菌试验显示,该菌株的发酵液不仅对多数G+细菌的生长有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等Gˉ细菌的生长也具有明显的抑制作用,但对真菌没有活性。 展开更多
关键词 乳酸菌 分离鉴定 抑菌活性 recA-gene 乳酸菌素 LACTOBACILLUS 鉴定 分离 最适生长温度 生产菌
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基因流存在条件下的物种形成研究述评:生殖隔离机制进化 被引量：24
7
作者 李忠虎 刘占林 +7 位作者 王玛丽 钱增强 赵鹏 祝娟 杨一欣 阎晓昊 李银军 赵桂仿 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期88-96,共9页
物种形成过程是生物多样性形成的基础,长期以来一直是进化生物学的中心议题之一。传统的异域物种形成理论认为,地理隔离是物种分化的主要决定因子,物种形成只有在种群之间存在地理隔离的情况下才能发生。近年来,随着种群基因组学的发展... 物种形成过程是生物多样性形成的基础,长期以来一直是进化生物学的中心议题之一。传统的异域物种形成理论认为,地理隔离是物种分化的主要决定因子,物种形成只有在种群之间存在地理隔离的情况下才能发生。近年来,随着种群基因组学的发展和溯祖理论分析方法的完善,种群间存在基因流情况下的物种形成成为进化生物学领域新的研究焦点。物种形成过程中是否有基因流的发生?基因流如何影响物种的形成与分化?基因流存在条件下物种形成的生殖隔离机制是什么?根据已发表的相关文献资料,作者综述了当前物种形成研究中基因流的时间和空间分布模式、基因流对物种分化的影响以及生殖隔离机制形成等问题,指出基因流存在条件下的物种形成可能是自然界普遍发生的一种模式。 展开更多
关键词 基因流 物种形成 生殖隔离 自然选择 分化选择
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茶树功能基因分离克隆研究进展 被引量：22
8
作者 马春雷 陈亮 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第z1期16-22,共7页
茶叶是世界上最流行的无酒精饮品之一,具有许多生理保健作用。在包括中国在内的许多国家,茶树是重要的木本经济作物之一,它含有许多有价值的次生代谢产物。最近十多年来,茶树分子生物学研究是茶叶科学中最活跃和进展最快的一个领域。分... 茶叶是世界上最流行的无酒精饮品之一,具有许多生理保健作用。在包括中国在内的许多国家,茶树是重要的木本经济作物之一,它含有许多有价值的次生代谢产物。最近十多年来,茶树分子生物学研究是茶叶科学中最活跃和进展最快的一个领域。分离和克隆重要的茶树功能基因,对揭示茶树优质、高产和抗逆的分子机理,对采用基因工程技术进行茶树遗传调控等都有重要意义。本文介绍了茶树功能基因分离克隆的研究进展,并对今后茶树功能基因的研究提出了展望。 展开更多
关键词 茶树 功能基因 分离克隆
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白梨新S基因的克隆 被引量：16
9
作者 乌云塔娜 谭晓风 +1 位作者 曹玉芬 李秀根 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期385-388,共4页
采用PCR-RFLP检测、DNA序列分析和田间杂交试验,从白梨中分离鉴定了1个新的SRNase基因。该SRNase基因PCR扩增产物大小与S8RNase基因PCR产物相似,为450bp左右。但PCR-RFLP和DNA序列分析均表明,它与S8RNase基因存在较大差异,该基因内含子... 采用PCR-RFLP检测、DNA序列分析和田间杂交试验,从白梨中分离鉴定了1个新的SRNase基因。该SRNase基因PCR扩增产物大小与S8RNase基因PCR产物相似,为450bp左右。但PCR-RFLP和DNA序列分析均表明,它与S8RNase基因存在较大差异,该基因内含子为252bp,而S8RNase的内含子为234bp,并在高变区中具有10个氨基酸出现替换,有两个氨基酸出现缺失。而该SRNase基因却与S12RNase基因具有较高的相似性,在HV区中只有1处碱基被替换,周边区中有10处出现碱基替换或缺失。因此,继梨S18RNase基因,将它命名为S19RNase基因(AY250987)。与S基因型已确定的梨品种的杂交坐果率也说明了该基因是一个新的S-RNase基因。 展开更多
关键词 梨 自交不亲和性 S-RNASE基因 基因分离
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大豆C3HC4型RING锌指蛋白基因GmRZFP1克隆与表达分析 被引量：16
10
作者 吴学闯 曹新有 +5 位作者 陈明 张晓科 刘阳娜 徐兆师 李连城 马有志 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期343-348,359,共7页
锌指蛋白在调节植物防卫基因表达和抗性反应上起关键作用。目前,对大豆中C3HC4型RING锌指蛋白基因的研究不多。本研究利用核蛋白筛选系统(NTT)筛选大豆(铁丰8号)干旱处理5h的cDNA文库,获得一个RING锌指蛋白基因。该基因全长927bp,编码30... 锌指蛋白在调节植物防卫基因表达和抗性反应上起关键作用。目前,对大豆中C3HC4型RING锌指蛋白基因的研究不多。本研究利用核蛋白筛选系统(NTT)筛选大豆(铁丰8号)干旱处理5h的cDNA文库,获得一个RING锌指蛋白基因。该基因全长927bp,编码308个氨基酸,含有C3HC4-type RING锌指结构域,命名为GmRZFP1。系统进化树分析显示,Gm-RZFP1属于C3HC4-type锌指亚家族。Real-time PCR结果表明,GmRZFP1基因受干旱、高盐、高温、低温、乙烯和ABA等胁迫诱导表达,表明该蛋白涉及多种胁迫相关的信号传导途径。亚细胞定位结果表明,163hGFP-GmRZFP1融合蛋白定位于细胞核中。本研究结果有助于研究该类基因在大豆逆境应答反应中的作用,阐明大豆抗逆分子机制。 展开更多
关键词 大豆 锌指蛋白 REAL-TIME PCR 基因克隆
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植物抗病相关基因分离策略 被引量：2
11
作者 于玲 王莱 +1 位作者 牛吉山 陈佩度 《西北植物学报》 CAS CSCD 2002年第6期1494-1503,共10页
近年来植物基因克隆技术已经取得了很大进展。文章对分离植物抗病相关基因的一系列策略及其研究进展进行了综述 ,并对这些技术的异同、各自的优缺点 ,以及它们在植物中的应用现状及前景作了评述。
关键词 植物 抗病相关基因 基因克隆 转座子标签技术 图位克隆 基因分离
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烟草苯丙烷代谢途径关键酶肉桂酸-4-羟化酶、4-香豆酸-辅酶A基因的分离及表达特性分析 被引量：15
12
作者 于利 张彦 +4 位作者 陈爱国 梁洪波 Qamaruddin Jogi 徐文玲 许娜 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1067-1073,共7页
肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸-辅酶A(4CL)是烟草苯丙烷代谢途径的关键酶,其多酚类产物与烟草品质密切相关。本研究以酚类物质含量合成差异较大的2个烤烟品种红花大金元(HD)和K326为试验材料,利用同源克隆技术获得这2种烟草Ntc4h和Nt... 肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸-辅酶A(4CL)是烟草苯丙烷代谢途径的关键酶,其多酚类产物与烟草品质密切相关。本研究以酚类物质含量合成差异较大的2个烤烟品种红花大金元(HD)和K326为试验材料,利用同源克隆技术获得这2种烟草Ntc4h和Nt4cl基因的cDNA序列并进行表达特性分析。结果表明,在2个品种中Ntc4h和Nt4cl各有2个同源基因,Ntc4h1、Ntc4h2、Nt4cl1和Nt4cl2的ORF长度分别为1518 bp、1518 bp、1644 bp和1629 bp。Nt4cl1、Ntc4h1和Ntc4h2在编码序列上存在品种间差异。实时荧光定量PCR分析结果表明,该2种酶的基因在烟草中具有明显的时空表达特异性,2种酶基因在根、茎、叶、花和萼片中都有表达,在茎的木质部和韧皮部中的表达量均显著高于其他组织;在圆顶期和适熟期表达水平较高,在适熟期达到最高;且两品种中的表达模式存在差异。 展开更多
关键词 烟草 肉桂酸-4-羟化酶(C4H) 4-香豆酸-辅酶A(4CL) 基因分离 表达分析
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响应镉胁迫的水稻WRKY15转录因子基因的分离与表达特征 被引量：14
13
作者 彭喜旭 白宁宁 王海华 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期103-110,共8页
【目的】镉(Cd)是一种对植物生长发育和人类健康均具有很强毒害效应的重金属元素。WRKY转录因子在抗逆生理过程中起重要的调节作用。为了研究WRKY基因在镉胁迫响应和抗性反应中的作用,【方法】基于基因注释,采用RT-PCR策略从一氧化氮(NO... 【目的】镉(Cd)是一种对植物生长发育和人类健康均具有很强毒害效应的重金属元素。WRKY转录因子在抗逆生理过程中起重要的调节作用。为了研究WRKY基因在镉胁迫响应和抗性反应中的作用,【方法】基于基因注释,采用RT-PCR策略从一氧化氮(NO)处理的水稻叶片中分离完整的Os WRKY15编码序列,运用生物信息学软件分析其编码蛋白的结构特征,采用q RT-PCR分析其基因的空间(器官)特异性及诱导表达模式;运用酵母单杂交方法检测其转录激活活性。【结果】克隆了Os WRKY15 c DNA序列,长988 bp,包含一个长825 bp的完整开放读码框,编码274个氨基酸。Os WRKY15具有1个典型的WRKY保守结构域,锌指类型为C2HC,归类于WRKY第3组;拥有一个核定位信号,因此推测为一种核蛋白。酵母单杂交分析表明,它具有转录激活活性。Os WRKY15在根中的表达丰度最高,其次是叶和茎,在颖果、花和干种子中的表达丰度较低;受Cd、NO和脱落酸(ABA)快速且显著诱导,且在根中被诱导的程度比叶中大,而水杨酸、茉莉酸和乙烯对其表达无明显影响。【结论】Os WRKY15是一个具有功能的核蛋白,推测其可能通过NO、ABA介导的信号途径参与水稻对Cd胁迫的抗性反应。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 镉 基因分离 基因表达模式 水稻
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单酶切cDNA-AFLP改良法分离草菇冷诱导基因 被引量：8
14
作者 郭丽琼 林俊芳 +1 位作者 杨丽卿 刘瑞瑞 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期241-247,共7页
采用单酶切cDNA-AFLP改良法克隆分离了十条草菇冷诱导基因片段VC7、VC8、VC9、VC10、VC11、VC12、VC13、VC14、VC15、VC16。DNA序列测定结果表明,克隆分离的十条DNA片段分别为504bp、549bp、555bp、301bp、189bp、602bp、605bp、834bp、... 采用单酶切cDNA-AFLP改良法克隆分离了十条草菇冷诱导基因片段VC7、VC8、VC9、VC10、VC11、VC12、VC13、VC14、VC15、VC16。DNA序列测定结果表明,克隆分离的十条DNA片段分别为504bp、549bp、555bp、301bp、189bp、602bp、605bp、834bp、703bp、1085bp。同源性BLAST程序搜索结果显示,除VC14与粗糙脉孢菌Neurosporacrassa的钙磷型ATP酶基因有较高的同源性外,其余九条DNA片段目前都没有搜索到同源的核酸序列;而其翻译的蛋白质序列,除了VC11和VC15目前未能搜索到同源的蛋白质序列外,其余八条DNA片段翻译的蛋白质序列与粗糙脉孢菌Neurosporacrassa、裂殖酵母Schizosaccharomycespombe、链霉菌Streptomycesavermitilis等的有关蛋白质序列具有较高的同源性。 展开更多
关键词 草菇 冷胁迫基因 分离 单酶切cDNA-AFLP改良法 蛋白质序列 食用菌
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水稻白叶枯病抗性基因的鉴定、定位、克隆与育种应用 被引量：13
15
作者 夏春 陈红旗 朱旭东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期761-771,共11页
水稻白叶枯病是由黄单胞杆菌水稻变种(Xanthomonas oryzaepv.oryzae Xoo)引起的细菌性病害,发掘、鉴定和利用新抗源是控制水稻白叶枯病的有效途径。白叶枯抗性基因定位和克隆,使分子标记辅助选择和转基因技术在白叶枯抗病育种中发挥了... 水稻白叶枯病是由黄单胞杆菌水稻变种(Xanthomonas oryzaepv.oryzae Xoo)引起的细菌性病害,发掘、鉴定和利用新抗源是控制水稻白叶枯病的有效途径。白叶枯抗性基因定位和克隆,使分子标记辅助选择和转基因技术在白叶枯抗病育种中发挥了重大作用,也使人们在分子水平对白叶枯病抗性机制有了深刻认识。文章综述了白叶枯病抗性基因定位,克隆以及在育种方面的应用,并对如何利用抗病育种减轻白叶枯病的危害提出了几点建议。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 基因定位 基因克隆 抗病育种
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副溶血性弧菌快速检测方法研究 被引量：13
16
作者 程苏云 罗芸 +1 位作者 叶菊莲 杨婷婷 《疾病监测》 CAS 2007年第9期642-645,共4页
目的以检测toxR基因作为副溶血性弧菌种水平上的特异性基因鉴定,建立一种快速、准确、简便的副溶血性弧菌(VP)筛选方法。方法根据toxR基因序列设计合成引物,扩增被检VP所含的相应基因。分别用标准株及地方株做对照,同时与常规鉴定方法... 目的以检测toxR基因作为副溶血性弧菌种水平上的特异性基因鉴定,建立一种快速、准确、简便的副溶血性弧菌(VP)筛选方法。方法根据toxR基因序列设计合成引物,扩增被检VP所含的相应基因。分别用标准株及地方株做对照,同时与常规鉴定方法比较。结果对浙江省2005年收集的286株来自临床病人和海产品的可疑VP鉴定,用常规方法鉴定出VP占总数的62.24%;用toxR基因检测,鉴定率占所有菌株的61.54%;两者差异无统计学意义(χ2=0.03,P>0.05),对40份海产品增菌液直接检测toxR基因与常规增菌分离鉴定法,均有37份标本检出VP,检出率为92.5%。结论该检测方法快捷、特异性好、敏感性高,可以作为VP快速筛选方法。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 toxR基因 分离培养 PCR
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芜菁NAC转录因子BcNAC2基因的分离及其表达 被引量：12
17
作者 张海娟 吴剑锋 +1 位作者 胡帅 余小林 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1089-1096,共8页
根据拟南芥NAC2的全长序列设计引物,从芜菁中成功分离了NAC转录因子BcNAC2基因,该基因最大开放阅读框为1683bp,编码560个氨基酸,共包含6个外显子和5个内含子。将BcNAC2与其他30个NACs蛋白进行序列比对以及重构系统进化树分析发现,BcNAC... 根据拟南芥NAC2的全长序列设计引物,从芜菁中成功分离了NAC转录因子BcNAC2基因,该基因最大开放阅读框为1683bp,编码560个氨基酸,共包含6个外显子和5个内含子。将BcNAC2与其他30个NACs蛋白进行序列比对以及重构系统进化树分析发现,BcNAC2与十字花科的拟南芥的同源性最高,芜菁BcNAC2与拟南芥NAC2蛋白功能结构域内的特征序列有显著的差异。半定量RT-PCR的结果表明,BcNAC2呈部分组成型表达特征,在授粉8d的嫩角果中表达丰度最高,而且组织原位杂交结果显示,BcNAC2在胚囊中有较高的表达,由此推测,BcNAC2与芜菁的种子或胚的发育相关。 展开更多
关键词 芜菁 NAC转录因子 基因分离 半定量RT-PCR 组织原位杂交
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猪伪狂犬病病毒GXBB株的分离鉴定及gE基因的克隆分析 被引量：10
18
作者 王仰杰 刘芳 +6 位作者 华俊 马玲 陈忠伟 张伟 黄红梅 陈凤莲 吴健敏 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第11期32-35,共4页
从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出... 从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出约947bp的特异性片段，将扩增出的目的片段进行克隆、测序，并与国内外不同PRV毒株进行分析比较，发现该毒株与国内MinA株、Ea株、SH株、LA株、GXB株、GXW株核苷酸同源性在98．7％～99．4％之间，氨基酸同源性在98．1％～99．1％之间，上述结果证实该分离毒株为伪狂犬病病毒，命名为GXBB株。GXBB株与国内流行毒株同源性很高，说明目前广西PRV流行株变异不大。这为下一步广西伪狂犬病的预防和净化工作提供科学的理论基础。 展开更多
关键词 猪 伪狂犬病病毒 PK-15细胞 gE胞外区基因 分离鉴定 序列分析
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转基因作物的生物安全:基因漂移及其潜在生态风险的研究和管控 被引量：10
19
作者 郭利磊 朱家林 +1 位作者 孙世贤 闫硕 《作物杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期8-14,共7页
转基因作物品种在商业化推广的20多年间发展迅猛,在保障食品供应、拓展农业功能、缓解资源约束、保护生态环境等方面做出了卓越贡献。在创造巨大经济、环境和社会效益的同时,转基因作物的生物安全问题也引起了全球的广泛关注和讨论。其... 转基因作物品种在商业化推广的20多年间发展迅猛,在保障食品供应、拓展农业功能、缓解资源约束、保护生态环境等方面做出了卓越贡献。在创造巨大经济、环境和社会效益的同时,转基因作物的生物安全问题也引起了全球的广泛关注和讨论。其中,难以准确预见的外源基因通过基因漂移逃逸至非转基因作物及其野生近缘种,进而导致潜在的生态风险就是国内外学者的研究热点。围绕基因漂移的机制及其生态风险、风险评估、控制措施等问题进行介绍和讨论,并展望转基因生物技术的发展趋势。 展开更多
关键词 转基因作物 基因漂移 生态安全 安全性评价 物理隔离
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十字花科植物SAMDC基因同源序列的克隆与进化分析 被引量：9
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作者 丁淑丽 卢钢 +2 位作者 李建勇 任彦 曹家树 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期109-117,共9页
腺苷甲硫氨酸脱羧酶（SAMDC）是参与植物多胺合成的一个关键酶。根据GenBank中已报道的SAMDC基因编码序列保守区域设计特异引物，运用PCR技术分另4从十字花科6属14个物种中新克隆分离了SAMDC基因的同源序列。比较分析结果表明：这些同... 腺苷甲硫氨酸脱羧酶（SAMDC）是参与植物多胺合成的一个关键酶。根据GenBank中已报道的SAMDC基因编码序列保守区域设计特异引物，运用PCR技术分另4从十字花科6属14个物种中新克隆分离了SAMDC基因的同源序列。比较分析结果表明：这些同源序列的相似性达87％以上，所推导的氨基酸序列相似性达90％以上，且两者种间差异分别为0．2％～10．1％和0．3％～6．6％，属间差异除“圆白”萝卜外分别是4．9％。13．6％和3．1％～10.3％；SAMDC基因的核苷酸及其可能编码的氨基酸序列差异属间较种间大，可用于属间的分类等级研究；且氨基酸序列间的差异比核苷酸序列间的差异小的多，因而根据核苷酸序列构建了NJ与ME分子系统树．进化树直观地表明在亲缘进化关系上芸薹属与萝卜属较近，其他依次为山芥属、萍菜属、拟南芥属，与荠菜属最远。研究结果有助于从分子水平阐明十字花科植物间的亲缘进化关系，可为其种质资源利用提供理论依据。 展开更多
关键词 十字花科植物 SAMDC基因 克隆 进化分析
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