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双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用
被引量：
2
1
作者
王宏芳
刘扬
+5 位作者
李金华
吴嘉慧
李艳博
王志成
刘威武
龚守良
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期308-312,共5页
目的构建并包装以人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控E1A(CR2区缺失)蛋白表达的肿瘤细胞双重靶向条件复制型腺病毒(conditionally replicating adenovirus,CRAd),并探讨其对肿瘤细胞的抑制作用...
目的构建并包装以人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控E1A(CR2区缺失)蛋白表达的肿瘤细胞双重靶向条件复制型腺病毒(conditionally replicating adenovirus,CRAd),并探讨其对肿瘤细胞的抑制作用。方法采用PCR技术扩增hTERT启动子序列,将其克隆至pShuttle-E1A-E1Bp-E1B55K载体(E1A基因CR2区缺失)中,构建重组腺病毒质粒,并转染HEK293细胞进行病毒包装,PCR鉴定;CCK-8法检测重组腺病毒(CRAd.p-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,简称CRAd.p)对肿瘤细胞的抑制作用。结果 hTERT启动子序列克隆正确;pShuttle-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K经KpnⅠ单酶切可见1 542bp和6 775bp两条电泳带,PCR鉴定得到250、1 148bp和298bp基因片段;CRAd.p经PCR扩增得到250、1 148bp和298bp基因片段,鉴定结果与预期完全相符;CRAd.p感染MCF-7、MDA-MB-231、HepG2和HTC-8细胞72h后与各自对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);CRAd.p感染MDA-MB-231细胞后10～250MOI组细胞吸光度值与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),随着感染时间延长,抑制作用越发明显。结论成功获得对肿瘤细胞具有双重靶向和溶瘤作用的条件复制型腺病毒,为基因治疗的靶向性和有效性提供了可能。
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关键词
条件复制型腺病毒
人端粒酶逆转录酶
基因治疗
抗肿瘤
下载PDF
职称材料
题名
双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用
被引量：
2
1
作者
王宏芳
刘扬
李金华
吴嘉慧
李艳博
王志成
刘威武
龚守良
机构
北京市疾病预防控制中心
吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室
首都医科大学公共卫生与家庭医学学院
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期308-312,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30870747
No.30970681)~~
文摘
目的构建并包装以人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控E1A(CR2区缺失)蛋白表达的肿瘤细胞双重靶向条件复制型腺病毒(conditionally replicating adenovirus,CRAd),并探讨其对肿瘤细胞的抑制作用。方法采用PCR技术扩增hTERT启动子序列,将其克隆至pShuttle-E1A-E1Bp-E1B55K载体(E1A基因CR2区缺失)中,构建重组腺病毒质粒,并转染HEK293细胞进行病毒包装,PCR鉴定;CCK-8法检测重组腺病毒(CRAd.p-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,简称CRAd.p)对肿瘤细胞的抑制作用。结果 hTERT启动子序列克隆正确;pShuttle-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K经KpnⅠ单酶切可见1 542bp和6 775bp两条电泳带,PCR鉴定得到250、1 148bp和298bp基因片段;CRAd.p经PCR扩增得到250、1 148bp和298bp基因片段,鉴定结果与预期完全相符;CRAd.p感染MCF-7、MDA-MB-231、HepG2和HTC-8细胞72h后与各自对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);CRAd.p感染MDA-MB-231细胞后10～250MOI组细胞吸光度值与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),随着感染时间延长,抑制作用越发明显。结论成功获得对肿瘤细胞具有双重靶向和溶瘤作用的条件复制型腺病毒,为基因治疗的靶向性和有效性提供了可能。
关键词
条件复制型腺病毒
人端粒酶逆转录酶
基因治疗
抗肿瘤
Keywords
conditionally
rcplicativc
adenovirus
（CRAd）
hTERT
gcnc
therapy
anti-tumor
分类号
R147 [医药卫生—公共卫生与预防医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用
王宏芳
刘扬
李金华
吴嘉慧
李艳博
王志成
刘威武
龚守良
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
已选择
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引用分析
参考文献
引证文献
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