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新疆无苞芥Na＋/H＋逆向转运蛋白基因OpNHX1的克隆、表达分析与功能验证 被引量：10
1
作者 赵云霞 郭丹丽 +1 位作者 魏艳玲 黄先忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期74-80,共7页
从耐盐植物无苞芥中克隆获得了1个Na+/H+逆向转运蛋白基因NHX1,命名为OpNHX1(GenBank登录号:KC200248)。OpNHX1基因cDNA全长2 153 bp,包含一个1 605 bp的开放阅读框,编码534个氨基酸。系统进化树分析表明,OpNHX1编码产物与拟南芥、小盐... 从耐盐植物无苞芥中克隆获得了1个Na+/H+逆向转运蛋白基因NHX1,命名为OpNHX1(GenBank登录号:KC200248)。OpNHX1基因cDNA全长2 153 bp,包含一个1 605 bp的开放阅读框,编码534个氨基酸。系统进化树分析表明,OpNHX1编码产物与拟南芥、小盐芥亲缘关系较近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR分析表明,该蛋白基因在无苞芥根、茎、叶、花和荚果中均有表达,其中茎中表达量最高。半定量RT-PCR分析表明,该基因受高盐、干旱、低温及ABA的诱导上调表达。进一步将该基因在拟南芥中过量表达,显著提高了转基因植株在盐胁迫下的存活率,说明OpNHX1基因参与了植物的耐盐性。酵母功能互补试验结果显示,该基因转化酵母Δnhx1后可以补充NHX1的缺失,表明OpNHX1参与Na+/H+的转运。 展开更多
关键词 Na+ H+逆向转运蛋白 无苞芥 抗逆 酵母功能互补
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黄瓜质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白基因(SOS1)的克隆与序列分析 被引量：4
2
作者 王澍 任晴雯 樊国盛 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2012年第3期6-10,共5页
采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从黄瓜Cucumis sativusL.中克隆出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(CsSOS1),该cDNA全长3 638bp,其中开放阅读框为3 435bp,编码1 145个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,CsSOS1氨基酸序列... 采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从黄瓜Cucumis sativusL.中克隆出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(CsSOS1),该cDNA全长3 638bp,其中开放阅读框为3 435bp,编码1 145个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,CsSOS1氨基酸序列与水稻OsSOS1和拟南芥AtSOS1的氨基酸序列同源性较高,分别为64%和58%,而与液泡型的Na+/H+逆向转运蛋白氨基酸序列亲缘关系较远。蛋白质跨膜结构分析表明CsSOS1包含11个完全跨膜片段。激光共聚焦显微镜显示CsSOS1基因的编码区与YFP基因融合后,定位在细胞膜上。酵母功能互补试验结果显示CsSOS1参与Na+与H+的转运,表明该基因转化酵母后可以补充酵母SOS1的缺失。 展开更多
关键词 黄瓜 质膜型Na+/H+逆向转运蛋白基因(SOS1) CDNA克隆 亚细胞定位 酵母功能互补
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拟南芥谷氨酸-tRNA合成酶(AtGluRS)不能取代酵母GluRS(英文)
3
作者 唐玉林 Grill Erwin 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS 北大核心 2006年第3期237-241,共5页
将拟南芥细胞质谷氨酸-tRNA合成酶(AtGluRS)引入酵母细胞,研究其与酵母GluRS进行功能互补的可能性.无功能的酵母GluRS会导致酵母细胞死亡.将携带AtGluRS的pACT2-AtGluRS或pBridge(dNLS)-AtGluRS表达载体转化到含有能表达酵母谷氨酸-tRN... 将拟南芥细胞质谷氨酸-tRNA合成酶(AtGluRS)引入酵母细胞,研究其与酵母GluRS进行功能互补的可能性.无功能的酵母GluRS会导致酵母细胞死亡.将携带AtGluRS的pACT2-AtGluRS或pBridge(dNLS)-AtGluRS表达载体转化到含有能表达酵母谷氨酸-tRNA合成酶的pRS316-yGluRS载体的gluRS缺陷型酵母菌株中,若拟南芥GluRS能取代酵母中的该同源蛋白,酵母细胞中的载体pRS316-yGluRS在非选择性培养条件下将会很快丢失.然而,在经过3 d的非选择性培养后,发现酵母细胞没有因拥有AtGluRS而失去提供GluRS功能的载体pRS316-yGluRS.可见,不同物种的GluRS之间,即使其具有很高的同源性,它们在演化过程中可能已形成了各自不同的特性,导致了拟南芥AtGluRS不能对酵母GluRS起功能互补作用.提示一些同源蛋白在异源生物体中不能发挥其正常功能. 展开更多
关键词 谷氨酸-tRNA合成酶(GluRS) 基因功能互补 拟南芥 酵母
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酵母异源功能互补在植物基因克隆中的应用 被引量：2
4
作者 张怡 李成伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期14-21,共8页
酵母作为研究高等真核生物的一种重要的模式生物,不仅在生物信息学方面发挥着重要的作用,其丰富的突变体在其他生物基因克隆和功能验证等方面也发挥着重要的作用。酵母异源互补方法是利用酵母突变体验证相应性状异源基因功能,或通过文... 酵母作为研究高等真核生物的一种重要的模式生物,不仅在生物信息学方面发挥着重要的作用,其丰富的突变体在其他生物基因克隆和功能验证等方面也发挥着重要的作用。酵母异源互补方法是利用酵母突变体验证相应性状异源基因功能,或通过文库筛选克隆相应性状异源基因,为高等真核生物的基因克隆和功能验证提供了一种捷径。主要对酵母异源功能互补法在研究植物基因方面的进展做一概述。 展开更多
关键词 酵母 生物信息 酵母异源功能互补 基因克隆 功能验证
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