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橡胶树品种热研88-13易碎胚性愈伤组织的诱导及其植株再生 被引量:9
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作者 李哲 孙爱花 +7 位作者 黄天带 周权男 戴雪梅 黄华孙 林位夫 Ludovic Lardet Pascal Montoro Marc-Philippe Carron 《热带作物学报》 CSCD 2010年第12期2166-2173,共8页
以高产优质橡胶品种热研88-13的幼嫩种子内珠被为外植体材料,对愈伤组织诱导培养基和继代培养基中的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究。经过连续6个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织,适宜... 以高产优质橡胶品种热研88-13的幼嫩种子内珠被为外植体材料,对愈伤组织诱导培养基和继代培养基中的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究。经过连续6个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织,适宜的易碎胚性愈伤组织诱导培养基为:MH基本成分,添加0.5 mg/L KT,2.0 mg/L 2,4-D,11.0 mmol/L CaCl2,80.0 g/L蔗糖和2.0 g/L Phytagel。组织学切片证明长期继代培养的易碎胚性愈伤组织维持了胚性的状态。取继代培养2 a多的易碎胚性愈伤组织诱导体细胞胚的形成,得到了16 000多个体细胞胚。将这些胚进行进一步的转移培养,得到了115株再生植株。 展开更多
关键词 橡胶树 易碎胚性愈伤组织 体细胞胚 继代培养 植株再生
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龙眼松散型胚性愈伤组织发生过程中相关蛋白的表达分析 被引量:6
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作者 李然 赖钟雄 +5 位作者 赖呈纯 方智振 林玉玲 刘生财 陈裕坤 张梓浩 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期107-117,共11页
以龙眼‘红核子’品种(Dimocarpus longan Lour.cv.Honghezi)松散型胚性愈伤组织(FEC)为材料,采用固相双向凝胶电泳技术和质谱鉴定技术,对其生长过程中相关蛋白的表达变化进行研究。结果表明:(1)龙眼FEC生长过程中,总蛋白点数在4... 以龙眼‘红核子’品种(Dimocarpus longan Lour.cv.Honghezi)松散型胚性愈伤组织(FEC)为材料,采用固相双向凝胶电泳技术和质谱鉴定技术,对其生长过程中相关蛋白的表达变化进行研究。结果表明:(1)龙眼FEC生长过程中,总蛋白点数在400-800之间,蛋白点数变化虽有升降起伏,但总体呈上升趋势;蛋白质pI集中在4-7之间;蛋白质分子量在14-97kD之间,表达量相对较高的是分子量在30-66kD的蛋白质,且30-45kD的蛋白点逐渐增多,45-66kD的逐渐减少。(2)龙眼FEC生长过程中质谱鉴定66个蛋白,其中28.79%为功能未知蛋白,30.30%涉及胁迫应答和抗氧化,10.61%涉及能量和糖代谢,10.61%涉及蛋白代谢和修复,6.06%涉及细胞骨架重构,4.55%蛋白是调控蛋白,3.03%是核酸代谢相关蛋白,而所占比例最少的为信号转导与细胞凋亡相关蛋白、氨基酸代谢相关蛋白、脂类代谢相关蛋白,以及维生素代谢相关蛋白均为1.52%。(3)龙眼FEC生长过程中,胁迫反应/氧化还原相关蛋白(抗坏血酸类过氧化物酶R147、R158和HC21,苄基醚还原酶同系物TH6、谷胱甘肽过氧化酶以及过氧化物酶L26)表达高峰出现在前期10-20d,而过氧化物酶4多在后期40-50d表达;蛋白质合成及修复的相关蛋白,只有蛋白质异形体1在10-30d表达量高,其他蛋白的表达高峰出现在前期10-20d之间,能量与糖代谢相关酶在整个过程中都有较大量的表达。 展开更多
关键词 龙眼 松散型胚性愈伤组织 蛋白质组 质谱
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大蕉幼雄花易碎胚性愈伤组织长期继代培养及其植株再生 被引量:4
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作者 李哲 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页
大蕉未成熟雄花接种到胚性愈伤组织诱导培养基中,4~5个月后可诱导出胚性愈伤组织,并可在继代培养基上长期增殖。这些继代培养了6年多的松软易碎的胚性愈伤组织转移到含有0.2mg/L6-BA的分化培养基中,可诱导出芽,得到了53株再生植株,这... 大蕉未成熟雄花接种到胚性愈伤组织诱导培养基中,4~5个月后可诱导出胚性愈伤组织,并可在继代培养基上长期增殖。这些继代培养了6年多的松软易碎的胚性愈伤组织转移到含有0.2mg/L6-BA的分化培养基中,可诱导出芽,得到了53株再生植株,这些再生植株可进一步扩大繁殖。组织学切片证明长期继代培养的愈伤组织维持了胚性的状态。 展开更多
关键词 大蕉 易碎胚性愈伤组织 组织培养 长期继代培养 植株再生
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橡胶树热垦525胚性悬浮细胞系的建立及其胚性能力的维持
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作者 戴雪梅 彭素娜 +2 位作者 成镜 顾晓川 黄天带 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第7期1385-1392,共8页
易碎胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系都是基因工程和细胞工程的理想受体材料。然而橡胶树(Hevea brasil-iensis)易碎胚性愈伤组织诱导频率低、耗时长,且其胚性能力通常随继代次数的增加而下降甚至完全丧失,限制了相关研究的持续开展。因此... 易碎胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系都是基因工程和细胞工程的理想受体材料。然而橡胶树(Hevea brasil-iensis)易碎胚性愈伤组织诱导频率低、耗时长,且其胚性能力通常随继代次数的增加而下降甚至完全丧失,限制了相关研究的持续开展。因此,快速获得易碎胚性愈伤组织,建立具有高效体胚发生能力的胚性悬浮细胞系,并尽可能较长时间维持其胚性能力是当前橡胶树基因工程和细胞工程研究的重要内容。本研究以橡胶树热垦525未成熟花药为外植体进行愈伤组织的诱导和胚性悬浮细胞系的建立,分析比较固液2种长期继代方式对维持其胚性能力的影响。结果表明:花药外植体在愈伤诱导培养基中获得的黄色致密初代愈伤组织体胚发生能力低,分散性差,不适合进行悬浮培养。将初代愈伤组织转移至胚性愈伤组织诱导培养基中培养70~80 d后,可观察到有胚性结构的形成和早期体细胞胚发生,同时周围长出鲜黄色小颗粒状易碎胚性愈伤组织。通过常规方法建立的Ⅰ型胚性悬浮细胞系具备胚性细胞的典型特征,体胚发生能力显著高于胚性愈伤组织,但在体胚发生过程中容易重新愈伤化;而通过筛选特定形态的胚性愈伤组织低密度启动悬浮培养建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系,在显微镜下可观察到细胞处在有序的胚性结构中,其体胚发生频率可达100%。在含2 mg/L2,4-D的液体培养中持续继代2 a后细胞明显老化且增殖缓慢,体胚发生能力几近丧失;而在去除2,4-D并添加低浓度脱落酸(0.1 mg/L)和水解酪蛋白(0.5 g/L)的固体培养基上持续继代2 a后,体胚发生能力仍能维持在较高水平。所建立的Ⅱ型胚性悬浮细胞系可为橡胶树遗传转化及原生质体培养等相关研究长期提供优质充足且状态相对稳定的材料来源。 展开更多
关键词 橡胶树 易碎胚性愈伤组织 胚性悬浮细胞系 体胚发生 胚性维持
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橡胶树热研88-13品种珠心易碎愈伤组织诱导及其胚状体发生 被引量:4
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作者 李哲 戴雪梅 +7 位作者 孙爱花 黄天带 周权男 黄华孙 林位夫 Ludovic Lardet Pascal Montoro Marc-Philippe Carron 《热带生物学报》 2010年第4期307-313,共7页
以橡胶树热研88-13品种的幼嫩种子的珠心组织为材料,诱导出胚性愈伤组织。对胚性愈伤组织诱导培养基、继代培养基中不同的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究,筛选到了合适的影响因素。经过连续5个月的继代... 以橡胶树热研88-13品种的幼嫩种子的珠心组织为材料,诱导出胚性愈伤组织。对胚性愈伤组织诱导培养基、继代培养基中不同的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究,筛选到了合适的影响因素。经过连续5个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织。对易碎胚性愈伤组织进行了长期继代培养。组织学切片证明长期继代培养的愈伤组织维持了胚性的状态。取继代培养了2年多的橡胶树热研88-13品种的珠心易碎胚性愈伤组织诱导胚状体,得到了186个胚状体,正在诱导植株再生。 展开更多
关键词 橡胶树 珠心 易碎胚性愈伤组织 长期继代培养 胚状体
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外源褪黑素对木薯脆性胚性愈伤组织增殖的影响 被引量:1
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作者 程露 郑偲葶 +2 位作者 陆新露 张鹏 马秋香 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1881-1889,共9页
以木薯(Manihot esculenta)‘TMS60444’脆性胚性愈伤组织(FEC)为材料,研究了在GD基础培养基中添加不同浓度外源褪黑素(melatonin)对FEC增殖的影响。结果表明:在不含氨氯吡啶酸(4-氨基-3,5,6-三氯吡啶-2-羧酸)的GD培养基(GD0)中加入不... 以木薯(Manihot esculenta)‘TMS60444’脆性胚性愈伤组织(FEC)为材料,研究了在GD基础培养基中添加不同浓度外源褪黑素(melatonin)对FEC增殖的影响。结果表明:在不含氨氯吡啶酸(4-氨基-3,5,6-三氯吡啶-2-羧酸)的GD培养基(GD0)中加入不同浓度褪黑素,其中低浓度(<100μmol·L^(-1))褪黑素可以促进FEC增殖,但高浓度褪黑素使FEC生长缓慢并褐化。在含有12 mg·L^(-1)氨氯吡啶酸的GD培养基(GD1)中添加不同浓度褪黑素(0、0.1、1、10、100μmol·L^(-1))进行培养,FEC鲜重增长率明显不同;以添加10μmol·L^(-1)褪黑素效果最佳,可使FEC保持较好的增殖状态,并显著提高木薯FEC鲜重的增长率,比不加褪黑素的GD1-1培养基中增加了2.57倍。用10μmol·L^(-1)褪黑素处理木薯FEC,其内源褪黑素代谢通路相关基因表达发生改变,抗氧化相关基因明显上调表达;并且抗氧化酶活性显著增强,抗氧化能力明显提高。本研究为木薯遗传转化中延长木薯FEC使用周期和提高增殖效率提供思路和技术。 展开更多
关键词 木薯 褪黑素 脆性胚性愈伤 增殖 抗氧化
原文传递
影响木薯原生质体再生植株的因素
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作者 文峰 《农业研究与应用》 2018年第2期37-39,共3页
原生质体培养和植株再生技术是植物细胞工程、基因工程的基础。木薯是一种重要的粮食作物和工业原料作物。木薯原生质体再生植株是一种重要的组织培养再生手段。本文是在已建立的木薯原生质体再生体系的基础上,总结归纳了原生质体再生... 原生质体培养和植株再生技术是植物细胞工程、基因工程的基础。木薯是一种重要的粮食作物和工业原料作物。木薯原生质体再生植株是一种重要的组织培养再生手段。本文是在已建立的木薯原生质体再生体系的基础上,总结归纳了原生质体再生过程中的重要影响因素,也是木薯原生质体整个再生过程中的重点和难点,分享了原生质体再生过程中的一些经验和小技巧,为木薯原生质体再生提供技术指导,为木薯组织培养提供有益的启发与参考,也为生物技术改良木薯品种奠定基础。 展开更多
关键词 木薯 脆性胚性愈伤组织(FEC) 原生质体 胚状体发生
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木薯脆性胚性愈伤组织原生质体培养与植株再生 被引量:16
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作者 文峰 肖诗鑫 +3 位作者 聂扬眉 马秋香 张鹏 郭文武 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期4050-4056,共7页
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G... 【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结果】在5×105个/mL的原生质体培养密度下,长出的都是致密型愈伤组织(能分化胚状体),而在2×105个/mL的密度下培养长出的有致密型愈伤组织,也有空泡型愈伤组织(不能分化胚状体)。本试验共挑出1 479个致密细胞团,分化获得757个子叶胚,已再生完整植株186棵。【结论】本研究分离的原生质体产量和活性有较大提高,对前人所指出的瓶颈问题有所改进,原生质体再生植株效率有较大提高。 展开更多
关键词 木薯 脆性胚性愈伤组织(FEC) 原生质体 植株再生
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木薯再生体系建立的研究进展 被引量:2
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作者 文峰 苏文潘 +3 位作者 黄建祺 郑华 俞奔驰 付海天 《安徽农业科学》 CAS 2017年第8期156-158,共3页
木薯是一种重要的粮食和工业原料作物。随着细胞工程和基因工程的发展,生物技术育种要求一种高效的再生体系。从木薯的器官发生途径、体细胞胚发生途径、脆性胚性愈伤组织(FEC)再生和原生质体再生4个方面阐述了木薯再生体系的发展与建立... 木薯是一种重要的粮食和工业原料作物。随着细胞工程和基因工程的发展,生物技术育种要求一种高效的再生体系。从木薯的器官发生途径、体细胞胚发生途径、脆性胚性愈伤组织(FEC)再生和原生质体再生4个方面阐述了木薯再生体系的发展与建立,以期为木薯组织培养和基于木薯再生体系的技术进步提供参考。 展开更多
关键词 木薯 器官发生 体细胞胚发生 脆性胚性愈伤组织(FEC) 原生质体 再生
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