期刊文献+
共找到43篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
Genetic Relationship between Francisella Tularensis Strains from China and from Other Countries 被引量:7
1
作者 WANG YanHua HAI Rong ZHANG ZhiKai XIA LianXu CAI Hong LIANG Ying SHEN XiaoNa YU DongZheng 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期310-314,共5页
Objective To study the types of subspecies of Francisella tularensis from China and to investigate the genetic relationships between F. tularensis strains from China and from other countries. Methods Ten strains of F.... Objective To study the types of subspecies of Francisella tularensis from China and to investigate the genetic relationships between F. tularensis strains from China and from other countries. Methods Ten strains of F. tulorensis isolated from China were amplified by using typing primers Cl/C4 and RD1. On the basis of the lengths of the polymerase chain reaction (PCR) products, it was concluded that these strains of F. tularensis belonged to the same subspecies. At the same time, thefopA, tul4, and 16S rRNA genes of the I0 strains were amplified, and a three-gene based phylogenetic analysis was performed using the Molecular Evolutionary Genetics Analysis software version 4.0. Results The 10 strains of F. tularensis from China were all identified as belonging to subspecies holarctica (type B). We found no direct relationship between the genotypes of F. tulurensis subsp. holarctica and the geographical area from where they were isolated. Conclusion The F. tularensis strains isolated from North China mainly belong to subspecies holorctica (type B). The strains of F. tularensis subsp, holarctico from China may have evolved earlier than those from Europe and North America. 展开更多
关键词 francisella tularensis TULAREMIA Phylogenetic analysis Genotyping PCR
下载PDF
糖尿病足合并土拉菌感染患者行截肢术的护理 被引量:9
2
作者 王新玲 武忠炎 丁清 《中华护理杂志》 CSCD 北大核心 2012年第10期939-940,共2页
报告5例糖尿病足合并土拉菌感染患者行截肢术的护理。护理要点包括:术前重视患者的心理疏导,冲洗患肢感染创面、监测体温和控制血糖。术后重点观察并保持封闭式负压引流(VSD)的密闭和通畅,通过VSD引流管行臭氧治疗液密闭式灌洗,严密监... 报告5例糖尿病足合并土拉菌感染患者行截肢术的护理。护理要点包括:术前重视患者的心理疏导,冲洗患肢感染创面、监测体温和控制血糖。术后重点观察并保持封闭式负压引流(VSD)的密闭和通畅,通过VSD引流管行臭氧治疗液密闭式灌洗,严密监测控制血糖;同时加强基础护理,协助患者康复,指导糖尿病饮食和按时复查。本组4例康复,1例死于肺栓塞。 展开更多
关键词 糖尿病足 弗朗西斯菌 土拉热 截肢术 护理
原文传递
陕西省部分地区土拉弗朗西斯菌病自然疫源地调查研究 被引量:9
3
作者 郑龙 《西北国防医学杂志》 CAS 2018年第7期426-431,共6页
目的:调查陕西省是否存在土拉弗朗西斯菌病的自然疫源地。方法:蜱类调查采用布旗法;小型啮齿动物调查采用夜夹法,病例采用回顾性流行病学调查;血清学检测采用酶联免疫吸附实验;病原分子生物学检测采用巢式-PCR法;统计学处理应用SPSS 9.... 目的:调查陕西省是否存在土拉弗朗西斯菌病的自然疫源地。方法:蜱类调查采用布旗法;小型啮齿动物调查采用夜夹法,病例采用回顾性流行病学调查;血清学检测采用酶联免疫吸附实验;病原分子生物学检测采用巢式-PCR法;统计学处理应用SPSS 9.0统计学软件。结果:调查发现富县、陇县和南郑县硬蜱科(ixodidae)5属15种蜱类,即硬蜱属(ixodes)1种、革蜱属(dermacentor)5种、血蜱属(haemaphysalis)4种、璃眼蜱属(hyalomma)3种和扇头蜱属(rhipicephalus)2种,以革蜱和血蜱种类较多。啮齿目7科16属24种,即松鼠科(sciuridae)2属2种,鼯鼠科(pteromyidae)2属2种,跳鼠科(dipididae)1属1种,鼹形鼠科(spalacidae)1属2种,仓鼠科(cricetidae)4属5种,鼠科(muridae)5属11种,豪猪科(hystricidae)1属1种,以鼠科种类最多。检测富县、陇县和南郑县部分林区居民血清样本707份,其中土拉弗朗西斯菌病血清IgG抗体阳性49份,总阳性率为6.93%,说明当地人群中存在土拉弗朗西斯菌病的自然感染。检测蜱标本1 117只,从达吉斯坦革蜱(D.daghestanicus)、日本血蜱(H.japonica)、嗜群血蜱(H.concinna)等3个蜱种中检测出25只蜱为土拉弗朗西斯菌标本阳性,总阳性率为2.24%。其中以日本血蜱的阳性率最高,为15.39%(χ2=20.91,P=0.01),说明当地蜱体中存在土拉弗朗西斯菌的自然感染。当地分布的达乌尔黄鼠(S.dauricus)、花鼠(T.sibiricus)、黑线姬鼠(A.agrarius)、小家鼠(M.musculus)和褐家鼠(R.norvegicus)等小型兽类,在周边省区已被学者证实为土拉弗朗西斯菌病的保菌宿主和传播者,提示富县、陇县和南郑县部分林区存在土拉弗朗西斯菌的保菌宿主啮齿目小型兽类。从25份阳性标本中选取10份进行序列测序,获得核酸序列与土拉弗朗西斯菌B亚种菌株序列AF247690.2 100%同源;对阳性标本进行SSTR9区域扩增,共有6种不同的拷贝数,其中拷贝数为9的居多(40.00%);利用MEGA 4.0软件进行聚类分� 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌病 土拉弗朗西斯菌 自然疫源地 陕西省
下载PDF
应用TaqMan荧光定量PCR检测土拉弗朗西斯菌 被引量:8
4
作者 史清海 曲识 +3 位作者 周冬生 郭兆彪 翟俊辉 杨瑞馥 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期806-809,共4页
目的:利用Roche LightCycler实时定量PCR系统建立一种快速、灵敏、特异的检测土拉弗朗西斯菌的方法。方法:基于TaqMan荧光探针实时定量PCR技术,选择土拉弗朗西斯菌染色体上的特异序列[醇醛酮还原酶(AKR)和外膜蛋白FopA基因]作为检测靶序... 目的:利用Roche LightCycler实时定量PCR系统建立一种快速、灵敏、特异的检测土拉弗朗西斯菌的方法。方法:基于TaqMan荧光探针实时定量PCR技术,选择土拉弗朗西斯菌染色体上的特异序列[醇醛酮还原酶(AKR)和外膜蛋白FopA基因]作为检测靶序列,建立土拉弗朗西斯菌实时定量PCR检测方法;评价该检测方法的特异性和灵敏性;采用克隆菌株污染环境土壤来模拟实际样品,评价该检测方法在快速检测与现场检测等实际应用中的表现。结果:优化筛选基因组中的FT-AKR和FT-fopA片段作为检测靶序列,所建立的土拉弗朗西斯菌实时定量PCR检测方法检测克隆菌株质粒的灵敏度均为10个拷贝/每个反应体系;以其他非土拉弗朗西斯菌为模板未出现非特异扩增;模拟环境土壤样品检测灵敏度2个引物对分别为440和960CFU/g土壤;盲测实验结果显示对于灵敏度范围内的阳性样本均能正确识别,并能正确检测出不同浓度的阳性样本。以FT-fopA片段为靶序列的扩增效率不及基于FT-AKR引物对的扩增。结论:基于FT-AKR片段的引物对扩增效率高,检测土拉弗朗西斯菌具有特异、灵敏的特点,对临床诊断、环境污染监测、防治生物突发事件等具有重要意义。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 荧光定量PCR TAQMAN探针 定量检测
下载PDF
我国西北地区蜱土拉弗菌感染的检测与基因分型研究 被引量:8
5
作者 贾蕾 张芳 刘增加 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第3期179-182,共4页
目的了解我国西北部分地区蜱土拉弗菌自然感染状况及基因型别特征。方法采用布旗法收集蜱标本,鉴定种属后采用巢式PCR检测土拉弗菌的fopA基因,阳性标本用型特异性引物鉴定细菌种,通过两短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)位点扩增进行基因... 目的了解我国西北部分地区蜱土拉弗菌自然感染状况及基因型别特征。方法采用布旗法收集蜱标本,鉴定种属后采用巢式PCR检测土拉弗菌的fopA基因,阳性标本用型特异性引物鉴定细菌种,通过两短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)位点扩增进行基因型分析,用生物学软件对序列进行比较。结果共捕获11个蜱种、2 460只蜱标本,PCR扩增土拉弗菌fopA基因7个蜱种75只阳性,总阳性率为3.05%,不同蜱种阳性率差异有统计学意义(χ2=20.91,P<0.01),以日本血蜱的阳性率最高,为17.39%。所有阳性标本均属于B亚种。75份阳性蜱标本在SSTR9区共有9种不同的基因型,其中拷贝数为9的基因型在阳性蜱标本中占40.00%(30/75);不同地区的阳性标本在SSTR9区基因型别存在明显交叉,而在SSTR16区有完全相同的序列及重复序列的拷贝数。结论我国西北部分地区存在蜱土拉弗菌感染,且细菌的基因型丰富、复杂。 展开更多
关键词 土拉弗菌 短串联重复序列 巢式PCR 基因型别
原文传递
侧流层析–重组酶聚合酶扩增技术快速检测土拉弗朗西斯菌 被引量:7
6
作者 彭遥 阚飙 +4 位作者 夏连续 李伟 张雯 秦爱平 卢金星 《疾病监测》 CAS 2019年第5期455-459,共5页
目的利用侧流层析–重组酶聚合酶扩增(LF-RPA)技术建立快速、敏感、特异的土拉弗朗西斯菌(土拉菌)检测方法。方法基于土拉菌特异性基因(tul4)设计重组聚合酶恒温扩增方法的引物及探针,优化反应时间和温度,同时评价该方法的灵敏度及特异... 目的利用侧流层析–重组酶聚合酶扩增(LF-RPA)技术建立快速、敏感、特异的土拉弗朗西斯菌(土拉菌)检测方法。方法基于土拉菌特异性基因(tul4)设计重组聚合酶恒温扩增方法的引物及探针,优化反应时间和温度,同时评价该方法的灵敏度及特异性,并通过模拟血液样品评估此方法的实用性。结果该方法最佳反应条件是40℃,20 min,可检测核酸浓度最低为20fg/μl,与实时荧光定量PCR(qPCR)方法相近,且不与7种非土拉菌发生交叉反应。土拉菌模拟样本最低检测浓度为460CFU/ml。结论该检测方法操作简单,特异性良好,敏感度高且无需大型精密实验设备,在临床及现场检测土拉菌中具有应用前景。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 重组酶 重组酶聚合酶扩增 侧流层析
原文传递
我国北方部分地区土拉弗菌感染宿主动物的分子流行病学研究 被引量:7
7
作者 张芳 刘玮 +6 位作者 何君 端青 吴晓明 赵秋敏 张泮河 杨红 曹务春 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2006年第2期131-134,共4页
目的:了解我国北方部分地区宿主动物感染土拉弗菌状况和基因型别。方法:鼠夹诱捕鼠,从鼠脾组织提取DNA,应用巢式PCR检测土拉弗菌,计算并比较各地区及各鼠种阳性率。阳性标本用型特异性引物及短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)引物扩增两区... 目的:了解我国北方部分地区宿主动物感染土拉弗菌状况和基因型别。方法:鼠夹诱捕鼠,从鼠脾组织提取DNA,应用巢式PCR检测土拉弗菌,计算并比较各地区及各鼠种阳性率。阳性标本用型特异性引物及短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)引物扩增两区域并测序,用C lustalX(5.0)和DNA C lub软件对序列进行比较分析。结果:共捕获鼠421只,分属14种鼠种,其中7个鼠种20份标本PCR检测阳性,总阳性率为4.75%。吉林、新疆、黑龙江、内蒙古和浙江的阳性率分别为11.65%,10.00%,6.54%,1.76%和0%。地区间阳性率差异显著(χ2=20.90,P=0.0003);不同鼠种间阳性率未见差异(χ2=11.82,P=0.066)。对20份扩增阳性标本进行型特异性扩增及SSTR9、SSTR16序列测定并对比分析,结果显示均为土拉弗菌B亚型,但型内差别较大,标本及菌株相互比较均显示基因多态性程度高且地区间有交叉。结论:我国北方部分地区可能依然存在B亚型土拉弗菌型感染(宿主动物)情况,且其基因型内差异较大。 展开更多
关键词 土拉弗菌感染 短串联重复序列 巢式PCR 啮齿类动物 分子流行病学
原文传递
土拉菌单克隆抗体的制备及其特性的研究 被引量:6
8
作者 端青 赵忠利 +1 位作者 田青 张国珍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期3-4,共2页
用土拉弗朗西斯菌疫苗株作为抗原获得了2株单克隆抗体Ftg和Ft44,其抗体亚类分别为IgC2b和IgM,Ft9单抗识别的抗原位点是土拉菌的外膜蛋白,Ft44识别的是脂多糖。2株单抗均可在酶联免疫吸附试验中检出土拉菌,Ft9单抗还可在凝集和免疫... 用土拉弗朗西斯菌疫苗株作为抗原获得了2株单克隆抗体Ftg和Ft44,其抗体亚类分别为IgC2b和IgM,Ft9单抗识别的抗原位点是土拉菌的外膜蛋白,Ft44识别的是脂多糖。2株单抗均可在酶联免疫吸附试验中检出土拉菌,Ft9单抗还可在凝集和免疫荧光试验中与土拉菌发生特异性反应,并不与相关细菌交叉。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 单克隆抗体 抗体亚类
下载PDF
在辽宁省长角血蜱中检测出土拉弗朗西斯菌 被引量:4
9
作者 王艳华 毛玲玲 +5 位作者 彭遥 孙英伟 王子江 张家勇 张稷博 田疆 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2016年第6期529-532,共4页
目的检测辽宁省长角血蜱中弗朗西斯菌属及其内共生体的携带情况。方法 2013年7月,在辽宁省采集长角血蜱357只共分成38组,进行土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的特异培养和弗朗西斯菌属及其共生体16S r RNA的巢式PCR检测。对有目的片段扩增的PCR... 目的检测辽宁省长角血蜱中弗朗西斯菌属及其内共生体的携带情况。方法 2013年7月,在辽宁省采集长角血蜱357只共分成38组,进行土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的特异培养和弗朗西斯菌属及其共生体16S r RNA的巢式PCR检测。对有目的片段扩增的PCR产物进行测序和同源性比对,并与网上已公布的弗朗西斯菌属和弗朗西斯菌属(类)内共生体的序列进行系统进化分析。结果有测序结果的13组蜱中,5组为土拉菌,8组为弗朗西斯菌属(类)内共生体。由此推算,河栏镇长角血蜱对于土拉菌的最小携带率为2.12%。系统进化分析显示,5组蜱和土拉菌聚在一个分支上,其余8组和弗朗西斯菌属(类)内共生体聚在一个主干分支上。结论首次发现辽宁省长角血蜱携带土拉菌及弗朗西斯菌属(类)内共生体,对于提醒当地卫生部门做好土拉热防控具有一定意义。 展开更多
关键词 弗朗西斯菌属 土拉弗朗西斯菌 长角血蜱 聚合酶链反应
原文传递
巢式-PCR检测蜱体中土拉弗氏菌的fopA基因及血清学调查 被引量:5
10
作者 李志清 刘增加 +5 位作者 上官改珍 何莹 巨敏 李旭光 胡良煜 徐燕 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2014年第3期160-164,共5页
为调查陕西省部分地区是否存在土拉弗氏菌病,采集子午岭山区的的蜱标本及人群血标本.蜱标本提取体内细菌DNA,采用巢式PCR法进行检测并对阳性标本进行基因分型;对人群血清采用免疫吸附实验进行血清学抗体检测;统计处理应用SPSS软件.结果... 为调查陕西省部分地区是否存在土拉弗氏菌病,采集子午岭山区的的蜱标本及人群血标本.蜱标本提取体内细菌DNA,采用巢式PCR法进行检测并对阳性标本进行基因分型;对人群血清采用免疫吸附实验进行血清学抗体检测;统计处理应用SPSS软件.结果在富县、陇县共采集3个蜱种1 116只蜱标本,其中达吉斯坦革蜱、日本血蜱、嗜群血蜱3个蜱种25只蜱标本检测到土拉弗氏菌的fopA基因,总阳性率为2.24%;不同蜱种阳性率存在差异,以日本血蜱的阳性率最高(15.39%).从25份阳性标本中选取10份进行序列测序,获得核酸序列与土拉弗氏菌B亚种菌株序列AF247690.2 100%同源.对阳性标本进行SSTR9区域扩增,共有6种不同的拷贝数,其中以拷贝数9的占多数(40.00%).利用MEGA (4.0)软件进行聚类分析显示主要分为两大群.检测当地居民血清标本725份,检测出土拉弗氏菌病血清IgG抗体阳性者37份,阳性率5.10%.本文首次证实陕西省土拉弗氏菌病的存在,对预防控制具有重要指导意义. 展开更多
关键词 土拉弗氏菌 基因型别 血清流行病学
下载PDF
西北地区重要蜱媒疾病的调查研究 被引量:4
11
作者 李依萍 庞众多 刘增加 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2016年第2期180-183,共4页
目的了解西北地区存在的及可能存在的蜱媒疾病。方法采用布旗法收集地区内的蜱标本进行分子生物学检测;收集当地居民的血清标本,运用血清学方法检测莱姆病、Q热、土拉菌病及无形体病等相关疾病的抗体;收集西北地区内所有相关蜱媒疾病的... 目的了解西北地区存在的及可能存在的蜱媒疾病。方法采用布旗法收集地区内的蜱标本进行分子生物学检测;收集当地居民的血清标本,运用血清学方法检测莱姆病、Q热、土拉菌病及无形体病等相关疾病的抗体;收集西北地区内所有相关蜱媒疾病的发病资料,分类整理。结果文献调研显示,西北地区已报道的蜱媒疾病共有7种。在西北地区内共采集蜱标本2 460只,分属11个蜱种;其中304只蜱标本检测发现莱姆病螺旋体、207只感染无形体,75只感染土拉弗菌,200只感染Q热立克次体。除无形体外,其他3种病原体在4个调查点内均存在。采集当地人群血清725份,其中185份血清存在目标抗体,进一步证实调查疾病的存在。结论首次对西北地区内蜱媒疾病进行了较系统的调查,证实多种蜱媒疾病的存在,对西北地区蜱媒疾病的预防控制具有重要意义。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 Q热立克次体 土拉弗氏菌 流行病学调查
下载PDF
土拉弗朗西斯菌致病机制研究进展
12
作者 董译滟 王聪 +2 位作者 任晨洋 文雪霞 张莹 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期108-112,共5页
土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,Ft)是一种可引起人畜共患的胞内病原菌,属于革兰氏阴性菌,具有多形性,无芽孢,无鞭毛,可感染多种类型的细胞。在体内,Ft主要感染巨噬细胞并在其中复制。为了在宿主体内建立有效感染,Ft已进化出多... 土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,Ft)是一种可引起人畜共患的胞内病原菌,属于革兰氏阴性菌,具有多形性,无芽孢,无鞭毛,可感染多种类型的细胞。在体内,Ft主要感染巨噬细胞并在其中复制。为了在宿主体内建立有效感染,Ft已进化出多种策略以拮抗宿主的免疫机制,适应宿主巨噬细胞质的环境并延缓细胞凋亡。这些策略主要包括增强机体对菌体的摄取、菌体从吞噬小体中逃逸、拮抗宿主的氧化防御、抑制宿主的炎症反应和维持菌体自身的稳定等。论文主要从这些方面对Ft的致病机制研究进展进行综述,以期为该病原的研究提供参考。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 病原特征 致病机制
下载PDF
长白山部分地区啮齿动物土拉杆菌感染调查
13
作者 王卓 黄冠鹏 +5 位作者 吴琼 黄潇扬 马悠馨 毛恩荣 李兵 吴益民 《中国热带医学》 CAS 2023年第9期994-997,共4页
目的 研究我国长白山地区啮齿动物土拉杆菌感染情况和细菌种型,进一步了解该地区土拉杆菌感染分子流行病学特征。方法 收集2012—2014年长白山地区宽甸县、集安市林区及林缘耕地捕获的啮齿动物,从鼠脾组织提取DNA,采用巢式PCR方法检测... 目的 研究我国长白山地区啮齿动物土拉杆菌感染情况和细菌种型,进一步了解该地区土拉杆菌感染分子流行病学特征。方法 收集2012—2014年长白山地区宽甸县、集安市林区及林缘耕地捕获的啮齿动物,从鼠脾组织提取DNA,采用巢式PCR方法检测土拉杆菌fopA基因,计算不同地区和鼠种土拉杆菌阳性率。阳性样本用特异性引物(C1/C4)鉴定细菌亚种,并进行测序和比较分析。结果 共捕获野鼠133只,分属6个鼠种。3个鼠种(黑线姬鼠、林姬鼠、大仓鼠)8份样本PCR检测阳性,总阳性率为6.01%。集安市、宽甸县阳性率分别为7.46%、4.54%,不同地区阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=0.117,P=0.732)。不同鼠种间阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=0.641,P=0.986)。对8份阳性样本进行亚种鉴定,表明均属于土拉杆菌B亚种。选择3份阳性样本的序列(JA56、JA33和JA38)作遗传进化分析,fopA基因序列与土拉杆菌B亚种俄罗斯分离株(CP009694.1,CP044004.1)及我国分离株(HM371344.1,HM371343.1)同聚一个分支,序列相似性在99.21%~99.47%。结论 我国长白山部分地区野鼠存在土拉杆菌(B亚种)感染,提示该地区存在土拉杆菌感染风险。 展开更多
关键词 啮齿动物 土拉杆菌 聚合酶链反应 长白山地区
原文传递
应用短串联重复序列分析技术对我国土拉弗菌的分型研究 被引量:4
14
作者 刘玮 何君 +5 位作者 端青 赵秋敏 张泮河 吴晓明 杨红 曹务春 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期826-828,共3页
目的 对我国土拉弗菌进行基因分型研究。方法 应用短串联重复序列 (SSTR)分析技术对我国不同地区分离出的 5株土拉弗菌菌株进行分型。SSTR9和SSTR16两个区域扩增后测序 ,并将结果与国外其它分离株进行比较。结果  5株菌在SSTR9区重... 目的 对我国土拉弗菌进行基因分型研究。方法 应用短串联重复序列 (SSTR)分析技术对我国不同地区分离出的 5株土拉弗菌菌株进行分型。SSTR9和SSTR16两个区域扩增后测序 ,并将结果与国外其它分离株进行比较。结果  5株菌在SSTR9区重复序列的个数分别为 2 1、9、12、9、15 ,片段长度分别为 396bp、2 88bp、315bp、2 88bp和 342bp。在SSTR16区域扩增序列完全相同 ,拷贝数为 2 ,片段长度为 36 1bp。其中 4株菌重复序列多态性与瑞典、芬兰等欧洲株接近 ,而分离自新疆的114菌株在SSTR9区存在独特的重复序列多态性 ,可能是我国特有的基因型。结论  5个分离株均属于B型土拉弗菌 ,与型特异性引物分型结果一致。PCR SSTR分析可作为国内土拉弗菌分型及进行个体菌株区分的可靠方法。 展开更多
关键词 短串联重复序列分析技 中国 土拉弗菌 基因分型 土拉菌病 野兔热
原文传递
土拉弗朗西斯氏菌LAMP快速检测方法的应用 被引量:4
15
作者 李子微 邓仲良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期212-217,共6页
旨在应用环介导恒温扩增技术(LAMP)检测土拉弗朗西斯氏菌。针对土拉弗朗西斯氏的FopA基因设计LAMP引物,优化LAMP反应条件,并对其特异性、灵敏度进行评价。结果显示,(1)对12种细菌和蜱的DNA(含大量假单胞菌属细菌)进行LAMP扩增,仅土拉弗... 旨在应用环介导恒温扩增技术(LAMP)检测土拉弗朗西斯氏菌。针对土拉弗朗西斯氏的FopA基因设计LAMP引物,优化LAMP反应条件,并对其特异性、灵敏度进行评价。结果显示,(1)对12种细菌和蜱的DNA(含大量假单胞菌属细菌)进行LAMP扩增,仅土拉弗朗西斯氏菌发生了扩增反应;(2)土拉弗朗西斯氏菌纯培养物检出限为4.9×102 pg/mL;克隆株质粒检出限为10 copies/μL,低于普通PCR的最低检出值1×103 copies/μL;(3)土壤模拟样本检出限为44 CFU/g;(4)和进口荧光定量PCR试剂对比检测24份(8个稀释度)土拉弗朗西斯氏菌污染土壤样本,在灵敏度范围内,均能准确检测。LAMP技术检测土拉弗朗西斯氏菌特异性强、灵敏度高、高效,对土拉热的病原学诊断具有应用价值。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯氏菌 FopA基因 环介导恒温扩增技术 快速检测
下载PDF
土拉弗朗西斯菌FopA单抗阻断ELISA抗体检测方法的建立
16
作者 崔国林 戚心怡 +4 位作者 吴村 蔡梦雷 张政钢 赵东旭 翟新国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期850-856,共7页
目的建立一种基于FopA单抗的阻断ELISA抗体检测方法。方法以pET-32a为载体表达土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白,并以其免疫BALB/c小鼠制备单抗,以LVS超声裂解液为包被抗原、HRP标记FopA单抗为阻断抗体,建立直接阻断ELISA方法,利用阴性血清平均... 目的建立一种基于FopA单抗的阻断ELISA抗体检测方法。方法以pET-32a为载体表达土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白,并以其免疫BALB/c小鼠制备单抗,以LVS超声裂解液为包被抗原、HRP标记FopA单抗为阻断抗体,建立直接阻断ELISA方法,利用阴性血清平均值+2SD或3SD确定该方法临界值,测定该方法特异性、敏感性、重复性及其与平板凝集试验的符合率,并利用该方法检测攻毒小鼠血清抗体变化趋势。结果筛选获得1株稳定分泌IgG1(κ型)单抗的杂交瘤细胞,并基于该单抗建立阻断ELISA方法,包被抗原最优浓度为3μg/mL、HRP标记FopA单抗最优稀释度为1∶4000、待检血清最优稀释度为1∶10,阴性临界值为27%、阳性临界值为41%、可疑区间为27%~41%,该方法的特异性、敏感性、重复性和符合率均良好,可检出攻毒9 d后小鼠血清抗体。结论成功制备FopA单抗,并基于该单抗建立一种快速、准确和高通量抗体检测的阻断ELISA方法,为我国土拉弗朗西斯菌流调和防控提供技术支撑。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 FopA 阻断ELISA 单抗 原核表达
下载PDF
我国部分地区蜱体弗朗西斯菌属和弗类共生体的检测研究 被引量:2
17
作者 王艳华 孙英伟 +5 位作者 毛玲玲 王子江 张家勇 张稷博 彭遥 夏连续 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期756-762,共7页
目的了解弗朗西斯菌属和弗朗西斯菌属(类)内共生体(弗类共生体)在我国蜱中的携带情况。方法在我国东北、西北和中南地区,分别选取辽宁省、新疆维吾尔自治区(新疆)和湖北省作为采样点,共采蜱715只,包括长角血蜱627只和亚洲璃眼蜱88只。... 目的了解弗朗西斯菌属和弗朗西斯菌属(类)内共生体(弗类共生体)在我国蜱中的携带情况。方法在我国东北、西北和中南地区,分别选取辽宁省、新疆维吾尔自治区(新疆)和湖北省作为采样点,共采蜱715只,包括长角血蜱627只和亚洲璃眼蜱88只。对所有采集蜱,首先通过扩增16S rRNA基因和tul4基因来检测弗朗西斯菌属和弗类共生体。然后,对有目的片段扩增的PCR产物进行测序和同源性比对,并与网上已公布的弗朗西斯菌属和弗类共生体的序列进行系统进化分析。结果在辽阳市采获的24组长角血蜱中有5组土拉弗朗西斯菌(土拉菌)阳性,土拉菌的最小携带率为2.12%(5/236)。辽阳、沈阳和武汉市的长角血蜱、以及新疆博乐市的亚洲璃眼蜱,弗类共生体的携带率分别为3.39%(8/236)、32.95%(58/176)、41.86%(90/215)和100%(88/88)。16S rRNA基因和tul4基因的系统进化分析均显示,中国弗类共生体具有高度的遗传多样性,和世界其他已知弗类共生体有显著差异。结论首次在长角血蜱中发现弗类共生体。我国长角血蜱和亚洲璃眼蜱中的弗类共生体形成单独的谱系,提示这些弗类共生体可能是新发现的。 展开更多
关键词 弗类共生体 土拉弗朗西斯菌 长角血蜱 亚洲璃眼蜱 系统进化
原文传递
中朝中俄边境地区蜱携带土拉弗菌的调查 被引量:2
18
作者 王卓 吴琼 +5 位作者 黄冠鹏 黄潇杨 马悠馨 毛恩荣 吴益民 李兵 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2022年第5期447-450,共4页
目的调查中朝中俄边境地区蜱感染土拉弗菌情况。方法2012—2014年5—6月在中朝中俄边境地区9个市县和1岛采集蜱并鉴定;采用PCR检测土拉弗菌fopA基因,阳性样本进行测序和序列分析。结果288组蜱样本检出土拉弗菌2组,密山嗜群血蜱和黑河森... 目的调查中朝中俄边境地区蜱感染土拉弗菌情况。方法2012—2014年5—6月在中朝中俄边境地区9个市县和1岛采集蜱并鉴定;采用PCR检测土拉弗菌fopA基因,阳性样本进行测序和序列分析。结果288组蜱样本检出土拉弗菌2组,密山嗜群血蜱和黑河森林革蜱各检出1组,组阳性率为0.69%。分型鉴定,2组阳性样本属于B亚种,与F.tularensis holarctica聚为一支,同源性为99.51%。结论我国中朝中俄边境地区蜱存在土拉弗菌感染,提示土拉弗菌感染风险。 展开更多
关键词 土拉弗菌 PCR 边境地区
下载PDF
西北4省区蜱虫自然感染3种病原体的分子流行病学研究 被引量:3
19
作者 李依萍 周小平 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第16期1966-1967,共2页
目的了解西北4省区蜱虫自然感染莱姆病螺旋体、土拉弗氏菌和Q热立克次体的情况。方法采用布旗法收集西北地区内的蜱标本进行分子生物学检测。结果文献调研显示:西北地区已报道的虫媒疾病共有15种。西北地区内共采集蜱标本2460只,涉及11... 目的了解西北4省区蜱虫自然感染莱姆病螺旋体、土拉弗氏菌和Q热立克次体的情况。方法采用布旗法收集西北地区内的蜱标本进行分子生物学检测。结果文献调研显示:西北地区已报道的虫媒疾病共有15种。西北地区内共采集蜱标本2460只,涉及11个不同蜱种。共有304只蜱标本检测发现莱姆病螺旋体,75只感染土拉弗菌,200只感染Q热立克次体,3种病原体在4个调查点内均存在。共采集到西北地区内当地人群血清725份,共有183份血清存在目标抗体,进一步证实调查疾病的存在。结论证实西北四省区存在3种蜱媒疾病在,对预防控制具有重要意义。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 弗朗西丝菌 土拉热 考克斯体 伯内特
下载PDF
金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌 被引量:3
20
作者 张宏刚 陈苏红 +2 位作者 张敏丽 赵素莲 王升启 《生物技术通讯》 CAS 2011年第3期415-418,共4页
目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用。方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银... 目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用。方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银染技术放大检测信号,建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌体系;评价该方法的灵敏度、特异性和重复性;以经荧光定量PCR定量的土拉弗朗西斯菌为检测对象,比较金标银染免疫渗滤法和免疫层析法。结果:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌的最小检出量为1.0×103 CFU/mL,灵敏度高于免疫层析法;检测大肠杆菌、炭疽芽孢杆菌、布鲁菌和鼠疫耶尔森菌的结果均为阴性;密封保存的检测卡80 d内重复性良好,100 d后反应强度略有降低。结论:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌敏感性高、特异性强、重复性好,且方便快捷,不需要仪器设备,可作为快速检测土拉弗朗西斯菌的首选方法。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 免疫渗滤法 金标银染
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部