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禽流感病毒流式微球量子点探针免疫诊断新方法 被引量:8
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作者 王楠 邹明强 +3 位作者 汪明 李锦丰 薛强 张帆 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期764-768,共5页
采用微波法水相中合成羧基化的绿色量子点,通过羧基与禽流感单克隆抗体氨基的共价结合,制备了检测禽流感病毒的探针,并结合流式微球技术,建立了量子点生物探针流式微球免疫检测禽流感病毒的新方法。以聚苯乙烯微球为蛋白质载体,将多克... 采用微波法水相中合成羧基化的绿色量子点,通过羧基与禽流感单克隆抗体氨基的共价结合,制备了检测禽流感病毒的探针,并结合流式微球技术,建立了量子点生物探针流式微球免疫检测禽流感病毒的新方法。以聚苯乙烯微球为蛋白质载体,将多克隆抗体包被到荧光微球上,依次加入待测抗原和量子点生物探针,形成双抗体夹心复合物,用流式细胞仪进行检测。实验结果表明,多抗和单抗的最佳质量浓度分别为92和4 mg/L,检测禽流感病毒比双抗体夹心ELISA灵敏16倍,比FITC标记单抗检测方法灵敏4倍。对阳性尿囊液的检测与ELISA呈现良好的相关性,不与鸡传染性支气管炎病毒、鸡马力克氏病毒、新城疫病毒等发生交叉反应。 展开更多
关键词 量子点探针 流式微球 禽流感病毒 免疫诊断
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流式微球捕获芯片技术检测血浆细胞因子方法学性能验证
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作者 张黎 赖骞 +2 位作者 王彩燕 林锋 徐兵 《现代医药卫生》 2024年第19期3271-3275,3280,共6页
目的对流式微球捕获芯片技术检测血浆中多种细胞因子方法学的性能进行验证。方法依据中华人民共和国卫生行业及美国临床和实验室标准协会的标准文件,应用流式微球捕获芯片技术检测血浆中的白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-2R、IL-6、IL-8、I... 目的对流式微球捕获芯片技术检测血浆中多种细胞因子方法学的性能进行验证。方法依据中华人民共和国卫生行业及美国临床和实验室标准协会的标准文件,应用流式微球捕获芯片技术检测血浆中的白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)6种细胞因子,并对其精密度、准确度、线性范围、参考区间、最低检测限、抗干扰能力进行评价。结果6项细胞因子批内精密度变异系数(CV)为1.50%~8.83%,批间精密度CV为2.48%~6.75%,准确度相对偏差≤±15%,IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α在2.5~5000.0 pg/mL的浓度范围内,IL-2R在5~7500 U/mL的浓度范围内,线性范围良好。生物参考区间验证结果显示,90%的结果在厂家提供的生物参考区间范围内。IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的最低检出限为≤2.5 pg/mL,IL-2R最低检出限为≤5 U/mL,干扰物质(甘油三酯10 mmol/L、血红蛋白5 mg/L和胆红素258μmol/L)对试剂盒检测结果无影响。结论在mindray Bricyte E6流式细胞仪上应用流式微球捕获芯片技术检测血浆细胞因子的方法性能较好,可为临床提供准确可靠的6种细胞因子的定量检测结果。 展开更多
关键词 白细胞介素-1β 白细胞介素-2R 白细胞介素-6 白细胞介素-8 白细胞介素-10 肿瘤坏死因子α 流式微球捕获芯片技术 性能验证
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THE EFFECT OF PROSTAGLANDIN E1 ON PULMONARY BLOOD FLOW AFTER RETROGRADE FLUSH AND COLD STORAGE OF LUNGS
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作者 陈长志 赵洪 陆佩中 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 2000年第2期110-112,140,共4页
Objective To determine the effects of prostaglandin El (PGEl ) on the pulmonary bind flow by using retrograde flush (RF) in lung preservation. Methods Twelve canine donor lungs were treated with RF with UW solution. ... Objective To determine the effects of prostaglandin El (PGEl ) on the pulmonary bind flow by using retrograde flush (RF) in lung preservation. Methods Twelve canine donor lungs were treated with RF with UW solution. In group A (n = 6 ), 250μg of PGE1 wes infused into the pulmonary artery (PA ) before RF and another 250μg wes mixed with UW solution. No PGE1 wes used in group B (n = 6 ). After storage in the mine solution at 4℃ for 22 ~ 25h, the left lung wus transplanted to a recipient followed by 120min reperfusion. Pulmonary bind flow was determined by a microsphere technique. Colored microspheres were infused into the right atrium at the following time: before RF and donor lungs procurement (red ), prior to resecting the recipient left lung (red, served as vaseline), and 120min after donor lung implantation (yellow). Micro- sphere distribution was expressed by optical density per gram lung tissue (OD/g). Results The red microsphere distribution after transplantation in group A wus reduced as compered with baseline (P < 0. 05 ). And more bind flew to the right lung (P < 0. 05 ). The yellow microsphere distribution was also significantly reduced in group A when compered with that of group B (P < 0. 01 ). The hemodynamic bata and bind gases for the two groups were not significantly different. Conclusion After single left lung transplantation, more bind flows to the right side. Pretreatment with PGEl further reduces the flow distribution in the left side. 展开更多
关键词 lung preservation PGEl blood flow microsphere
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不同流式微球分析法多重细胞因子检测试剂对比与分析
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作者 高丽丽 赵仁彬 +3 位作者 王娅婕 李增政 撒亚莲 杨同华 《检验医学与临床》 CAS 2022年第23期3185-3188,3194,共5页
目的比较3种不同品牌的流式微球分析法多重细胞因子检测试剂(A、B、C试剂)检测结果。方法选取2020年1月至2021年12月在云南省第一人民医院确诊为急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓系白血病(AML)、慢性髓系白血病(CML)、噬血细胞综合征(H... 目的比较3种不同品牌的流式微球分析法多重细胞因子检测试剂(A、B、C试剂)检测结果。方法选取2020年1月至2021年12月在云南省第一人民医院确诊为急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓系白血病(AML)、慢性髓系白血病(CML)、噬血细胞综合征(HPS)和多发性骨髓瘤(MM)的50例患者(病例组)分别作为ALL组、AML组、CML组、HPS组和MM组,每组10例。另选取同期健康体检者(健康组)12例。采集各组外周血,获取血清标本。采用A、B、C试剂检测健康组血清标本6种细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、γ干扰素(IFN-γ)]水平,分析检测结果有无可比性。采用筛选出的试剂检测健康组及病例组血清标本14种细胞因子(IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12P70、IL-1β、IL-2、IFN-γ、TNF-α、TNF-β、IL-17A、IL-17F、IL-22)水平,评估各试剂是否满足临床需求。结果A、B、C试剂分别检测健康组血清6种细胞因子的结果显示,A试剂和C试剂对IL-6、IL-10、IFN-γ的检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05);A试剂和B试剂对IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ的检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05);C试剂和B试剂对6种细胞因子的检测结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A试剂的检测值范围宽,高、低值差异明显,变异系数(CV)较均一。筛选的A试剂对各组14种细胞因子的检测结果显示,ALL组、AML组、CML组IL-6、IL-8检测结果明显高于正常参考值,HPS组IL-10检测结果明显高于正常参考值,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论不同品牌细胞因子检测试剂存在差异,3种细胞因子检测试剂盒在检测相同的标本时,A试剂的检测值范围宽,高、低值差异明显,可满足临床需求;B试剂和C试剂的检测值范围窄,且较集中。 展开更多
关键词 流式微球分析法 细胞因子 试剂 变异系数
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肺腺癌患者手术前后外周血清细胞因子动态变化研究
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作者 姚燕珍 方可欣 +2 位作者 鲍舟君 乐倩倩 竺王玉 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第21期2610-2612,共3页
目的阐述肺腺癌患者手术前后外周血清细胞因子的动态变化,评估手术前后机体免疫状态的变化。方法选择在舟山医院就诊的55例肺腺癌患者,应用多因子流式细胞术对其手术前和手术后外周血清13种细胞因子进行检测,并应用统计学方法分析手术... 目的阐述肺腺癌患者手术前后外周血清细胞因子的动态变化,评估手术前后机体免疫状态的变化。方法选择在舟山医院就诊的55例肺腺癌患者,应用多因子流式细胞术对其手术前和手术后外周血清13种细胞因子进行检测,并应用统计学方法分析手术前后细胞因子的动态变化情况。结果白细胞介素5(IL-5)在手术后的肺腺癌患者中为3.56(2.89,5.79)pg/ml,高于手术前的2.47(2.09,2.95)pg/ml(P<0.001),白细胞介素9(IL-9)和白细胞介素17A(IL-17A)手术后分别为2.87(2.20,4.83)pg/ml和2.19(2.19,14.69)pg/ml,低于手术前的3.15(2.31,5.55)pg/ml和2.19(2.19,17.56)pg/ml,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肺腺癌患者手术后外周血清细胞因子IL-5增高,IL-9和IL-17A减低。肺腺癌患者手术后机体免疫状态发生改变,检测手术前后细胞因子对手术患者免疫状态评估具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 肺腺癌 细胞因子 多因子流式细胞术 手术
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猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立
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作者 刘助红 王静 +4 位作者 李秀珍 尹雪琴 张钰 郭鹏举 黄韧 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第9期17-23,共7页
目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间... 目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 猴D型逆转录病毒 P27基因 原核表达 流式免疫荧光微球检测技术
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应用流式微球技术检测人泪液表皮生长因子 被引量:5
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作者 张艳莉 马璇 +2 位作者 黄强 李兵 吴开力 《中国实用眼科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第11期1158-1161,共4页
目的将xMAP(flexiblemulti-analyteprofiling)技术和ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay)应用到人泪液中的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)检测中,探讨xMAP技术在泪液检测中的应用前景。方法选取24例正常人(年龄18~33岁)... 目的将xMAP(flexiblemulti-analyteprofiling)技术和ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay)应用到人泪液中的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)检测中,探讨xMAP技术在泪液检测中的应用前景。方法选取24例正常人(年龄18~33岁),在裂隙灯下取无刺激性泪液,用xMAP法检测泪液中EGF的浓度,与ELISA测定的结果比较,进行统计学分析。结果xMAP法检测泪液中EGF浓度为(4.32±2.57)ng/ml(范围0.96~9.76ng/ml),同一批样本经ELISA检测为(8.78±5.35)ng/ml(范围2.45~20.39ng/ml),两种方法的结果相关系数R2=0.8508(p=0.000)。结论xMAP法与ELISA法相关性良好,可以用于泪液中多种微量蛋白的检测。 展开更多
关键词 表皮生长因子 泪液 酶联免疫吸附测定 流式微球技术
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血清中细胞因子的检测在胃癌中的意义 被引量:3
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作者 王军海 《中国实用医药》 2016年第19期5-7,共3页
目的探讨胃癌患者血清中细胞因子水平的变化情况,为胃癌免疫治疗提供参考。方法 53例胃癌患者作为胃癌组,其中Ⅰ~Ⅱ期17例,Ⅲ期23例,Ⅳ期13例,30例体检健康者作为对照组,采用流式细胞学方法检测细胞因子γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素... 目的探讨胃癌患者血清中细胞因子水平的变化情况,为胃癌免疫治疗提供参考。方法 53例胃癌患者作为胃癌组,其中Ⅰ~Ⅱ期17例,Ⅲ期23例,Ⅳ期13例,30例体检健康者作为对照组,采用流式细胞学方法检测细胞因子γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-10、IL-17水平。结果胃癌组INF-γ、IL-6、IL-10、IL-17水平[(6.02±2.13)、(7.11±1.53)、(4.82±1.02)、(20.83±2.89)pg/ml]明显高于对照组[(4.38±0.93)、(4.92±1.23)、(3.93±1.29)、(12.67±3.28)pg/ml](P〈0.05);胃癌组IL-2水平(2.27±1.86)pg/ml明显低于对照组(3.12±0.56)pg/ml(P〈0.05);不同TNM分期胃癌患者细胞因子水平比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论胃癌患者血清细胞因子水平已发生显著的改变,表现出明显的免疫抑制状态。 展开更多
关键词 胃癌 细胞因子 免疫 流式细胞微球阵列术
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房水病毒载量和细胞因子检测在急性视网膜坏死诊断与治疗中应用的临床研究 被引量:3
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作者 刘夕瑶 毛菲菲 +3 位作者 李丹 鲁丹 王胜男 孙挥宇 《中华眼科医学杂志(电子版)》 2022年第2期76-81,共6页
目的探讨房水病毒载量和细胞因子检测在急性视网膜坏死(ARN)诊断治疗中的作用。方法回顾性分析2017年3月至2021年7月于北京地坛医院眼科就诊ARN患者10例(13只眼)的病例资料。其中,男性8例(10只眼),女性2例(3只眼);年龄24~66岁,平均年龄(... 目的探讨房水病毒载量和细胞因子检测在急性视网膜坏死(ARN)诊断治疗中的作用。方法回顾性分析2017年3月至2021年7月于北京地坛医院眼科就诊ARN患者10例(13只眼)的病例资料。其中,男性8例(10只眼),女性2例(3只眼);年龄24~66岁,平均年龄(35.1±10.2)岁。采集所有患者的房水,明确病毒种类。将患者治疗前房水中病毒载量高于10^(5)拷贝/ml定义为高载量组,低于者定义为低载量组。对所有患者均行静脉和玻璃体腔注射更昔洛韦治疗;对视网膜脱离者行玻璃体切除视网膜复位术或视网膜激光光凝术。检查所有患者治疗前后的最佳矫正视力、眼前节及眼底情况。采用聚合酶链式反应检测所有患者治疗前和每次随访时房水的病毒载量;采用流式细胞微球捕获芯片技术检测患者治疗前和随访时房水白细胞介素(IL)-6及IL-8的含量。房水病毒载量的下降速度以log(病毒载量)拷贝/ml表示。最佳矫正视力以例数和百分比表示;注射次数、房水病毒载量、IL-6及IL-8以中位数和四分位数表示。结果ARN患者10例(13只眼)均为感染水痘带状疱疹病毒(VZV)导致,治疗后视网膜病变均得到有效控制,玻璃体腔注射次数为2~9次,平均中位数和四分位数6(5,9)次。继发视网膜脱离者4例(5只眼),占38.46%(5/13)。其中,行玻璃体切除术者3例(3只眼),占60.00%(3/5);行视网膜激光光凝术1例(2只眼),占40.00%(2/5)。患者治疗前房水VZV平均载量的中位数和四分位数为2.69×10^(5)(4.27×10^(4),9.26×10^(7))拷贝/ml;治疗2周后病毒载量开始下降,logVZV平均每周下降(0.67±0.30)拷贝/ml;治疗6周后升高者3例(5只眼),占38.46%(5/13)。患者治疗前房水IL-6和IL-8平均含量的中位数和四分位数分别为2993.3(1655.9,18751.3)pg/ml和253.6(195.8,1682.2)pg/ml;治疗2周后分别为398.1(251.2,2511.8)pg/ml和63.1(15.8,125.9)pg/ml,较治疗前明显下降。高载量组和低载量组患者的病程分别为(1 展开更多
关键词 急性视网膜坏死 聚合酶链式反应 流式细胞微球捕获芯片技术 玻璃体注药术 更昔洛韦
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流式免疫微球技术定量检测人血清胰岛素方法学研究和评价 被引量:3
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作者 王占科 何丹 +3 位作者 祝仲珍 胡晓璐 潘小清 常津 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期341-343,348,共4页
目的建立流式免疫微球定量检测人血清胰岛素的方法并对其重复性实验和线性实验以及最低检测限进行评价。方法将兔抗人胰岛素单克隆抗体标记在微球表面制备免疫诊断微球,与血清中胰岛素结合后,加入荧光标记的鼠抗人胰岛素单克隆抗体,使... 目的建立流式免疫微球定量检测人血清胰岛素的方法并对其重复性实验和线性实验以及最低检测限进行评价。方法将兔抗人胰岛素单克隆抗体标记在微球表面制备免疫诊断微球,与血清中胰岛素结合后,加入荧光标记的鼠抗人胰岛素单克隆抗体,使微球表面呈现荧光,并通过流式细胞仪检测其平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI)并记录。结果微球表面MFI与人血清胰岛素浓度呈正比,流式免疫微球技术检测同一标本的重复性实验变异系数以及最低检测限均低于酶联免疫吸附试验,流式免疫微球技术线性范围大于酶联免疫吸附实验。结论流式免疫诊断微球技术可用于人血清胰岛素定量检测,其测定重复性,线性范围和灵敏度均优于酶联免疫吸附试验。 展开更多
关键词 流式免疫微球技术 平均荧光强度 定量测定 胰岛素
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An Experimental Study of Myocardial Viability with Myocardial Contrast Echocardiography
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作者 张稳柱 查道刚 +2 位作者 成官迅 杨绍青 刘伊丽 《South China Journal of Cardiology》 CAS 2001年第2期95-100,共6页
Background Myocardial blood flow(MBF) can be quantified with myocardial contrast echocardiography (MCE) during a venous infusion of microbubble. A minimal MBF is required to maintain cell membrane integrity and myocar... Background Myocardial blood flow(MBF) can be quantified with myocardial contrast echocardiography (MCE) during a venous infusion of microbubble. A minimal MBF is required to maintain cell membrane integrity and myocardial viability in ischemic condition. Thus, we hypothesized that MCE could be used to assess myocardial viability by the determination of MBF. Methods and ResultsMCE was performed at 4 hours after ligation of proximal left anterior descending coronary artery in 7 dogs with constant venous infusions of microbubbles. The video intensity versus pulsing interval plots derived from each myocardial pixel were fitted to an exponential function: y=A(1-e-βt), where y is Ⅵ at pulsing interval t, A reflects microvascular cross - sectional area (or myocardial blood volume), and βreflects mean myocardial microbubble velocity. The product of A·β represents MBF. MBF was also obtained by ra-diolabeled microsphere method servered as reference. MBF derived by radiolabeled microsphere - method in the regions of normal, ischemia and infarction was 1.5+0.3, 0.7+0.3, 0. 3+0. 2 mL @ min-1@ g-1 respectively. The product of A·β obtained by MCE in those regions was 52. 46±15. 09, 24. 36±3. 89, 3. 74 ±3. 80 respectively. There was good correlation between normalized MBF and the normalized A·β ( r = 0. 81, P=0. 001). Conclusions MCE has an ability to determine myocardial viability in myocardial infarction canine model. 展开更多
关键词 Myocardial contrast echocardiography Myocardial viability Myocardial blood flow Radiolabeled microsphere
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