二甲双胍改善多囊卵巢综合征并激活雌性生殖干细胞 被引量：6

1

作者 王春红 王强强 +7 位作者 苏亚珊 孙亚群 孙苗 刘心蕊 马会明 李广永 杜小利 何瑞 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期370-380,共11页

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是生育年龄妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,是女性不孕的重要因素。二甲双胍是临床应用最广泛的经典口服降糖药物,近年来被应用于PCOS治疗,但其作用机制尚不明确。本... 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是生育年龄妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,是女性不孕的重要因素。二甲双胍是临床应用最广泛的经典口服降糖药物,近年来被应用于PCOS治疗,但其作用机制尚不明确。本研究通过建立小鼠PCOS模型,论证二甲双胍对PCOS的改善作用及其机制。4~5周龄雌性C57BL/6J小鼠连续21天给予来曲唑(每天灌胃1 mg/kg)联合高脂饮食,建立PCOS模型。成模后灌胃给予二甲双胍(每天200 mg/kg),1个月后取材,期间检测体重并进行糖耐量试验。取材后行苏木素-伊红(H&E)染色检测卵巢病理改变;ELISA法测定血清中抗缪勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(E_(2))、睾酮等激素水平;免疫组织化学及免疫荧光染色法检测雌性生殖干细胞(female germline stem cells,FGSCs)标志物DDX4/MVH及PCNA表达及定位;Western blot检测小鼠卵巢中DDX4/MVH、PCNA、cyclin D2以及AMPK/mTOR通路蛋白。结果显示,PCOS小鼠在接受二甲双胍治疗后,体重逐渐恢复正常,糖耐量试验显示糖耐量明显改善,血清E 2水平升高,AMH、LH、睾酮水平及LH/FSH比值下降,卵巢多囊病变减轻,闭锁卵泡减少,且具有增殖性的FGSCs数目明显增多,卵巢组织PCNA、cyclin D2等增殖相关蛋白增加,p-mTOR、p-AMPK等蛋白明显上调。以上结果提示,二甲双胍在改善PCOS高雄激素血症、糖耐量异常及卵巢多囊病变的同时,还可以促进FGSCs增殖并激活其功能,其作用可能与AMPK、mTOR磷酸化有关。这些发现为二甲双胍治疗PCOS以及改善卵泡发育提供了新的科学依据和方向。 展开更多

关键词 二甲双胍 多囊卵巢综合征 雌性生殖干细胞 AMPK/mTOR

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葛根素通过上调Wnt/β-catenin信号通路改善化疗诱导的雌性生殖干细胞的氧化应激损伤和凋亡 被引量：2

2

作者 迪丽努尔·安外尔 热孜宛古丽·约麦尔 陆萍 《中国医院用药评价与分析》 2023年第4期420-426,430,共8页

目的:探讨葛根素(PUE)对化疗诱导的雌性生殖干细胞(FGSCs)氧化应激损伤和凋亡的影响及相关机制。方法:分离并鉴定乳鼠卵巢表层上皮的原代FGSCs,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测PUE对FGSCs增殖活力的影响。将FGSCs分为对照组(Control... 目的:探讨葛根素(PUE)对化疗诱导的雌性生殖干细胞(FGSCs)氧化应激损伤和凋亡的影响及相关机制。方法:分离并鉴定乳鼠卵巢表层上皮的原代FGSCs,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测PUE对FGSCs增殖活力的影响。将FGSCs分为对照组(Control)、白消安(BU)组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组;采用CCK-8法检测各组FGSCs的增殖活性;采用2,7-二氯荧光素法与试剂盒检测各组FGSCs中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶2(SOD2)活性;采用线粒体膜电位检测JC-1染色法检测各组FGSCs中线粒体膜电位水平;采用细胞凋亡检测试剂盒检测各组FGSCs的凋亡率;采用蛋白质印迹法检测各组FGSCs中生殖干性相关蛋白小鼠Vasa同源体(Mvh)、八聚体结合转录因子4(Oct4)及Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白和凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)的表达水平。结果:成功分离了符合条件的FGSCs,且PUE能促进细胞的增殖活力。与Control组相比,BU组、BU+PUE组和BU+PUE+DKK-1组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力,线粒体膜电位,细胞中GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与BU组相比,BU+PUE组细胞中ROS、MDA和cleaved caspase-3的表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞的增殖活力,线粒体膜电位,GPx、SOD2、Mvh、Oct4、β-catenin及Bcl-2的表达水平却明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),BU+PUE+DKK-1组与BU组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PUE可通过Wnt/β-catenin途径减轻BU诱导的氧化应激损伤和细胞凋亡,并恢复FGSCs的增殖活性及干性。 展开更多

关键词 葛根素 雌性生殖干细胞 氧化应激 凋亡

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三种干细胞向雌性生殖细胞诱导的可行性探讨 被引量：1

3

作者 周桦 何志旭 +3 位作者 范安然 周从容 赵淑云 黄官友 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期800-805,820,共7页

雌性生殖细胞缺乏所致的不孕症目前尚无根本的治疗方法,干细胞的研究为这类患者带来了希望。随着胚胎干细胞(ESCs)/诱导性多能干细胞(iPSCs)建系技术的日趋成熟,体外诱导ESCs/iPSCs生成雌性生殖细胞的研究也取得了一定进展,目前已经有... 雌性生殖细胞缺乏所致的不孕症目前尚无根本的治疗方法,干细胞的研究为这类患者带来了希望。随着胚胎干细胞(ESCs)/诱导性多能干细胞(iPSCs)建系技术的日趋成熟,体外诱导ESCs/iPSCs生成雌性生殖细胞的研究也取得了一定进展,目前已经有卵母细胞样细胞的形成,但所生成细胞的生殖生物学功能还有待进一步证实。近年来雌性生殖干细胞的发现及对其进一步的了解使获取更接近生理状态的卵子成为可能。本文对近年几种干细胞及其在生殖领域的研究进行综述,以探讨其临床应用的可行性。 展开更多

关键词 雌性生殖细胞 胚胎干细胞(ESCs) 诱导性多能干细胞(iPSCs) 雌性生殖干细胞 分化

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雌性生殖干细胞的研究进展 被引量：2

4

作者 黎婷 张海燕 《芜湖职业技术学院学报》 2019年第2期27-29,64,共4页

生殖干细胞在雄性生物终生的配子形成过程中发挥作用,但只在部分无脊椎雌性生物(如果蝇)和低等脊椎雌性动物(如硬骨鱼和部分猿猴亚目的猴)中的配子形成过程中可见。多年来传统的生殖生物学观念认为,雌性哺乳动物出生后卵巢中并没有卵子... 生殖干细胞在雄性生物终生的配子形成过程中发挥作用,但只在部分无脊椎雌性生物(如果蝇)和低等脊椎雌性动物(如硬骨鱼和部分猿猴亚目的猴)中的配子形成过程中可见。多年来传统的生殖生物学观念认为,雌性哺乳动物出生后卵巢中并没有卵子发生的能力,出生时卵泡的数量和其随后不断减少的速率决定了雌性生殖动物的生殖寿命。然而近期研究显示,在小鼠、大鼠等多种哺乳动物出生后的卵巢中成功分离和培养了雌性生殖干细胞(Femle Germline Stem Cells,FGSCs)。更有科研团队,利用FGSCs诱导不孕母鼠怀孕并产生正常后代,或者将人的FGSCs移植到小鼠后获得了原始卵泡。如果成年女性卵巢中确实存在FGSCs,那么更年期的发生并不是因为有限数目的卵子的耗尽,而是因为FGSCs和体细胞的老化。因此,FGSCs在基础研究和临床治疗中有巨大的研究价值和应用前景,将为治疗卵巢功能衰退、不孕不育以及延缓女性衰老发挥重要作用。 展开更多

关键词 哺乳动物 雌性 生殖干细胞

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雌性哺乳动物生殖干细胞:在争议中前进 被引量：1

5

作者 陈忠良 杨世华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1081-1087,共7页

100多年以来,雌性哺乳动物出生后是否存在生殖干细胞的争议尚无定论.2004年,研究人员从出生后的小鼠卵巢中发现并分离到雌性生殖干细胞(female germline stem cells,FGSCs),挑战了存在近半个世纪的理论:哺乳动物出生后不会对卵母细胞库... 100多年以来,雌性哺乳动物出生后是否存在生殖干细胞的争议尚无定论.2004年,研究人员从出生后的小鼠卵巢中发现并分离到雌性生殖干细胞(female germline stem cells,FGSCs),挑战了存在近半个世纪的理论:哺乳动物出生后不会对卵母细胞库进行更新.随后很多研究不仅指出哺乳动物出生后卵巢中新生成的卵母细胞源自FGSCs,而且发现如果将FGSCs移植回受体卵巢,它们能够产生功能性的卵母细胞并由此得到健康的后代.可是,有的研究小组重复实验或者精心设计实验,却未得到相同的结果,甚至得出相反的结果.最近,有研究者从育龄女性卵巢中分离到了在体内外都能够分化出功能性卵母细胞的FGSCs,不过这些卵母细胞的受精能力还有待证实.本文回顾了哺乳动物FGSCs的研究历程,并对这一存在已久的争论以及FGSCs研究方向和将来的运用前景展开了评述. 展开更多

关键词 雌性生殖干细胞 卵巢 骨髓 哺乳动物

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雌性生殖干细胞衰老相关因素及延缓措施的研究进展 被引量：1

6

作者 钟志胜 洪雯丽 +4 位作者 曹秀萍 聂坤 唐子娟 谢奇 李佳 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第11期1546-1550,共5页

哺乳动物雌性生殖干细胞(FGSCs)因其在卵泡更新及生育能力维持/恢复中的重要作用备受关注,但其衰老机制及其预防措施尚不明确。有研究显示,FGSCs巢内的微环境改变如免疫紊乱、炎性反应和氧化应激等能在相关信号通路和基因的介导下导致FG... 哺乳动物雌性生殖干细胞(FGSCs)因其在卵泡更新及生育能力维持/恢复中的重要作用备受关注,但其衰老机制及其预防措施尚不明确。有研究显示,FGSCs巢内的微环境改变如免疫紊乱、炎性反应和氧化应激等能在相关信号通路和基因的介导下导致FGSCs衰老及数量骤降。故而,调节免疫功能紊乱、抗炎性反应和氧化应激以及调控相关信号通路和基因,有望能延缓FGSCs的衰老。 展开更多

关键词 雌性生殖干细胞 衰老因素 延缓策略

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雌性生殖干细胞全基因组范围选择性多聚腺苷酸化位点分析

7

作者 沈挺挺 张晓丽 +3 位作者 张盼 康亚妮 田静 赵小东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期157-162,共6页

目的描绘小鼠雌性生殖干细胞(FGSCs)和胚胎干细胞(ESCs)全基因组范围内选择性多聚腺苷酸化(APA)位点,通过细胞间的比较,分析生殖干细胞特异性的APA位点对其生物学特性的影响。方法利用本实验室之前建立的基于高通量测序的转录本3’末端p... 目的描绘小鼠雌性生殖干细胞(FGSCs)和胚胎干细胞(ESCs)全基因组范围内选择性多聚腺苷酸化(APA)位点,通过细胞间的比较,分析生殖干细胞特异性的APA位点对其生物学特性的影响。方法利用本实验室之前建立的基于高通量测序的转录本3’末端poly(A)位点捕获方法3T-seq确定并比较两个细胞系中所有APA位点,通过DAVID对具有APA位点差异的基因进行Gene Ontology分析。结果在两种细胞系中共确定16 973个基因的50 243个APA位点,发现FGSCs中相较于ESCs 3’UTR发生长度变化的基因1148个,其中795个(66%)3’UTR变短,353个(34%)基因3’UTR变长,与生殖发育密切相关的基因3’UTR存在显著的缩短现象。结论 FGSCs存在与ESCs不同的APA谱,APA介导的3’UTR变化参与生殖发育相关的生物学过程,揭示了生殖干细胞的基因转录后调控机制。 展开更多

关键词 雌性生殖干细胞 小鼠胚胎干细胞 全基因组APA谱

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小鼠雌性生殖干细胞体内分化鉴定方法

8

作者 卢智勇 熊家强 +2 位作者 吴梦 张金金 王世宣 《生殖医学杂志》 CAS 2017年第12期1238-1242,共5页

目的建立一种小鼠卵巢雌性生殖干细胞(FGSCs)体内分化鉴定方法。方法从6周龄C57BL/6小鼠卵巢利用Fragilis抗体基于免疫磁珠分选(MACS)分离FGSCs细胞,并置于STO饲养层细胞上扩增培养,采用RT-PCR法检测生殖干性基因包括Fragilis、MVH、Pr... 目的建立一种小鼠卵巢雌性生殖干细胞(FGSCs)体内分化鉴定方法。方法从6周龄C57BL/6小鼠卵巢利用Fragilis抗体基于免疫磁珠分选(MACS)分离FGSCs细胞,并置于STO饲养层细胞上扩增培养,采用RT-PCR法检测生殖干性基因包括Fragilis、MVH、Prdm1和Tert,细胞免疫荧光法检测Fragilis和MVH蛋白表达,利用绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒载体荧光标记FGSCs后将其植入受体鼠卵巢,在体内环境下促其分化发育为卵母细胞,至少12d后取卵巢置于载玻片上并压上盖玻片,直接置于荧光显微镜下观察。结果 RT-PCR结果显示FGSCs生殖干性基因包括Fragilis、MVH、Prdm1和Tert为阳性表达,而卵母细胞特异表达基因中Nobox为阴性,GDF9和ZP3为弱阳性;细胞免疫荧光结果显示FGSCs的MVH和Fragilis蛋白表达阳性,而且呈明显的膜表达。GFP-FGSCs植入6周龄雌性C57BL/6的卵巢中,至少12d以后将卵巢取出,压片后置于荧光显微镜下观测,结果显示有荧光阳性的卵母细胞。结论该鉴定方法简单直观,可作为FGSCs体内分化鉴定的可选方法。 展开更多

关键词 雌性生殖干细胞 分化 鉴定

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温中补肾方对多囊卵巢综合征改善作用及对雌性生殖干细胞增殖的影响 被引量：5

9

作者 王春红 于普光 +7 位作者 孙亚群 彭庆杰 李雪 吴昕 马会明 李广永 杜小利 何瑞 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期3564-3568,共5页

目的:探究温中补肾方对多囊卵巢综合征(PCOS)的改善作用及机制。方法:4~6周龄C57BL/6J雌性小鼠,连续灌胃来曲唑联合高脂饲料喂养,建立PCOS模型。成模后给予不同剂量的温中补肾方,期间测体质量及糖耐量试验(OGTT)等。取材后ELISA检测睾酮... 目的:探究温中补肾方对多囊卵巢综合征(PCOS)的改善作用及机制。方法:4~6周龄C57BL/6J雌性小鼠,连续灌胃来曲唑联合高脂饲料喂养,建立PCOS模型。成模后给予不同剂量的温中补肾方,期间测体质量及糖耐量试验(OGTT)等。取材后ELISA检测睾酮(T)等激素水平;HE染色检测卵巢形态改变;免疫组化法检测MVH、AMH蛋白表达;免疫荧光法共染雌性生殖干细胞(FGSCs)标志物;Western Blot法检测卵巢组织中MVH、PCNA、p-mTOR、p-AMPK等蛋白。结果:与PCOS模型组比较,温中补肾方干预后,PCOS小鼠体质量、OGTT及T等水平显著改善(P<0.05,P<0.01),卵巢多囊病变减轻,具有增殖性的FGSCs数目显著增多(P<0.05),p-mTOR、p-AMPK显著上调(P<0.01,P<0.05)。结论:温中补肾方不仅可以改善PCOS糖脂代谢异常及卵巢多囊病变,还可以激活FGSCs增殖并激活其功能,其作用可能与AMPK、mTOR磷酸化有关。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 温中补肾方 雌性生殖干细胞 AMPK MTOR 磷酸化 机制 动物模型

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小熊猫卵巢肥大细胞与雌性生殖干细胞的初步观察 被引量：2

10

作者 修云芳 王全溪 +3 位作者 邵良平 李碧春 徐素慧 陈玉村 《动物医学进展》 北大核心 2015年第6期96-99,共4页

为了解小熊猫卵巢肥大细胞分布情况,收集15只成体小熊猫的卵巢,按常规组织学技术制作组织切片。根据甲苯胺蓝染色结果,肥大细胞主要分布于血管壁与卵泡动脉外膜的结缔组织中,其数量随着发情周期呈规律性变化,发情期最高,乏情期次之,妊... 为了解小熊猫卵巢肥大细胞分布情况,收集15只成体小熊猫的卵巢,按常规组织学技术制作组织切片。根据甲苯胺蓝染色结果,肥大细胞主要分布于血管壁与卵泡动脉外膜的结缔组织中,其数量随着发情周期呈规律性变化,发情期最高,乏情期次之,妊娠期数量最少,不同时期之间肥大细胞数量差异极显著(P<0.01);阿尔新蓝-番红花红(AB-S)染色将肥大细胞可分为黏膜型、结缔组织型与混合型。肥大细胞可能对小熊猫的受精,胚胎着床,妊娠有调节作用。免疫组化染色显示,小熊猫卵巢有组胺阳性细胞,这些细胞分布也是随着发情周期呈规律性变化,卵母细胞和生殖上皮细胞呈现小鼠脉管同系物(MVH)阳性反应,说明小熊猫卵巢内存在生殖干细胞。 展开更多

关键词 小熊猫 卵巢 肥大细胞 生殖干细胞

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卵巢源雌性生殖干细胞增殖分化及其通路的研究进展

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作者 崔艺蕾 王伟 +2 位作者 郑拓晨 梁夏 郑月慧 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期392-399,共8页

雌性生殖干细胞的发现打破了传统的"固定卵泡理论"。研究表明,在人和小鼠卵巢中,该类细胞定位于卵巢表面上皮,并可在其中检测到Oct4、Sox-2、Nanog、Vasa等生殖细胞和干细胞特异性标志物的存在;且2条重要的信号途径——Notch... 雌性生殖干细胞的发现打破了传统的"固定卵泡理论"。研究表明,在人和小鼠卵巢中,该类细胞定位于卵巢表面上皮,并可在其中检测到Oct4、Sox-2、Nanog、Vasa等生殖细胞和干细胞特异性标志物的存在;且2条重要的信号途径——Notch和Hippo在雌性生殖干细胞增殖与分化的过程中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 雌性生殖干细胞 Hippo信号通路 NOTCH信号通路

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