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活性大豆粉对馒头感官品质的影响 被引量:2
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作者 田晓会 韩小贤 郑学玲 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第15期49-52,共4页
活性大豆粉中含有脂肪氧化酶,它对面粉及面制品品质有良好的改良效果。本试验将两种大豆粉按不同的比例分别添加到面粉中,研究两种大豆粉对混合粉、面糊的亮度以及馒头的亮度和体积的影响。混合粉、面糊以及馒头的亮度随着两种大豆粉添... 活性大豆粉中含有脂肪氧化酶,它对面粉及面制品品质有良好的改良效果。本试验将两种大豆粉按不同的比例分别添加到面粉中,研究两种大豆粉对混合粉、面糊的亮度以及馒头的亮度和体积的影响。混合粉、面糊以及馒头的亮度随着两种大豆粉添加量的增加均呈现先增加后降低的趋势,馒头的体积均比空白组大。大豆粉的添加量为0.4%时馒头的亮度较高,体积较大,营养价值较高。 展开更多
关键词 大豆粉 脂肪氧化酶 馒头 亮度 体积
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小檗碱对实验性2型糖尿病心肌病大鼠模型心脏保护作用研究 被引量:22
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作者 董世芬 洪缨 +3 位作者 汪瑞祺 于海食 刘明 孙建宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1216-1221,共6页
目的研究小檗碱(berberine)对实验性2型糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DC)大鼠模型心脏的保护作用,并探讨作用机制。方法高糖高脂膳食负荷小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导实验性2型DC大鼠模型,观察小檗碱对模型动物... 目的研究小檗碱(berberine)对实验性2型糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DC)大鼠模型心脏的保护作用,并探讨作用机制。方法高糖高脂膳食负荷小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导实验性2型DC大鼠模型,观察小檗碱对模型动物心脏功能、结构变化以及血浆、心肌组织糖脂代谢相关指标的作用。结果小檗碱治疗6周后,可明显改善DC大鼠模型心脏收缩和舒张功能,降低左心室前壁厚度、室间隔厚度以及心肌组织胶原含量;另外,小檗碱可减少模型动物血糖、血脂以及心脏游离脂肪酸(nonesterified fatty acids,NEFA)含量,增加心肌组织脂肪酸跨膜转运载体蛋白(fatty acid transporters,FATPs)和脂肪酸β氧化酶(fatty acidβoxidase,FA-β-oxidase)含量。结论小檗碱可改善糖尿病心肌病心脏舒张和收缩功能,抑制心肌肥厚和心室重构,作用机制可能与降低高血糖和高血脂状态、以及增加FATPs和FA-β-oxidase改善心肌内脂肪酸代谢紊乱有关。 展开更多
关键词 小檗碱 糖尿病心肌病 血糖 血脂 游离脂肪酸 脂肪酸跨膜转运载体蛋白 脂肪酸β氧化酶
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Candida cloacae长链脂肪酸醇氧化酶基因的克隆与表达 被引量:3
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作者 葛正龙 Antoni R.SLABAS 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期264-267,共4页
The cDNA encoding long-chain fatty-acid alcohol oxidase(FAO) was isolated by using RT-PCR method from Candida cloacae grown in a medium containing oleic acid. The cDNA of fatty-acid alcohol oxidase was cloned into exp... The cDNA encoding long-chain fatty-acid alcohol oxidase(FAO) was isolated by using RT-PCR method from Candida cloacae grown in a medium containing oleic acid. The cDNA of fatty-acid alcohol oxidase was cloned into expression plasmid pET17b under T7 promoter and then transformed into E.coli BL21/DE3. The molecular weight of the expressed protein was estimated to be approximately 64 kD by SDS-PAGE. The expressed protein had a specific catalytic activity of fatty-acid alcohol oxidase and its activity was 1090±116 U/ml medium. Northern blotting revealed that there was high expression of fao mRNA in Candida cloacae yeast grown in a medium containing oleic acid. 展开更多
关键词 工业酵母 Candida-cloacae 长链脂肪酸醇氧化酶 基因克隆 基因表达 ω氧化通路
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含铁蛋白FAO1融合基因的衣藻核转化表达和分析 被引量:4
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作者 李明泽 程奇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期4515-4522,共8页
【目的】fao1编码Candida cloacae中一种含铁辅基的长链脂肪醇氧化酶。通过构建该基因的衣藻核转化表达载体进行转化,根据表达蛋白的生物活性判断fao1能否充分利用衣藻叶绿体中的铁元素行使功能;同时也为需铁固氮酶基因的研究提供方向... 【目的】fao1编码Candida cloacae中一种含铁辅基的长链脂肪醇氧化酶。通过构建该基因的衣藻核转化表达载体进行转化,根据表达蛋白的生物活性判断fao1能否充分利用衣藻叶绿体中的铁元素行使功能;同时也为需铁固氮酶基因的研究提供方向。【方法】通过PCR把PsaD信号肽、fao1、His-tag标签融合,连接到pDBle载体上;采用玻璃珠转化法,将重组子导入莱茵衣藻(CW15)中;经博来霉素筛选后,获得转基因植株。运用PCR和RT-PCR法检测了转化衣藻,并且用亲和层析柱纯化蛋白,同时进行FAO1活性检测。【结果】重组质粒测序完全正确;PCR和RT-PCR检测转化衣藻基因组DNA和RNA,扩增片段与预期相符;转化衣藻FAO1蛋白纯化洗脱液使ABTS(2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐)底物反应变色。【结论】成功构建了信号肽、FAO1和His-tag融合基因的衣藻核转化表达载体,重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中,并成功转录,纯化的蛋白检测有活性。 展开更多
关键词 长链脂肪醇氧化酶 信号肽 His—tag标签 衣藻核转化 RT—PCR
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H_2O_2对热带假丝酵母醇氧化酶的影响及其作用机理分析 被引量:2
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作者 张剑 李春 +1 位作者 高弘 曹竹安 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第1期62-65,共4页
考察了H2 O2 对热带假丝酵母代谢烷烃生产二元酸过程中醇氧化酶 (fattyalcoholoxidase ,AOX)的影响。研究表明 :2mmol L和 5mmol L的H2 O2 对AOX的比酶活有明显的促进作用 ,分别比对照提高了 68 2 %和 82 9%。研究还发现 ,H2 O2 是以... 考察了H2 O2 对热带假丝酵母代谢烷烃生产二元酸过程中醇氧化酶 (fattyalcoholoxidase ,AOX)的影响。研究表明 :2mmol L和 5mmol L的H2 O2 对AOX的比酶活有明显的促进作用 ,分别比对照提高了 68 2 %和 82 9%。研究还发现 ,H2 O2 是以超氧阴离子自由基等形式在胞内存在 ,并对H2 O2 在代谢过程中的作用机理进行了分析。 展开更多
关键词 H2O2 热带假丝酵母 醇氧化酶 作用机理 生物法生产 长链二元酸
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脂肪醇氧化酶基因缺失对热带假丝酵母生理功能的影响 被引量:1
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作者 张海冰 张利华 +2 位作者 陈献忠 沈微 樊游 《生物加工过程》 CAS 2021年第1期23-31,73,共10页
为考察热带假丝酵母(Candida tropicalis)脂肪醇氧化酶(FAO)基因缺失对菌株自身的影响,利用同源重组的方法敲除或回补FAO1和FAO2基因,研究突变株的生长情况和胞内脂肪醇氧化酶活性变化,并进一步评价细胞利用烷烃合成脂肪醇的能力。结果... 为考察热带假丝酵母(Candida tropicalis)脂肪醇氧化酶(FAO)基因缺失对菌株自身的影响,利用同源重组的方法敲除或回补FAO1和FAO2基因,研究突变株的生长情况和胞内脂肪醇氧化酶活性变化,并进一步评价细胞利用烷烃合成脂肪醇的能力。结果表明:成功构建了基因缺失突变株FTYT(ΔFAO11/ΔFAO12)、2aT2bT(ΔFAO2a/ΔFAO2b)、F3YT(ΔFAO11/ΔFAO12ΔFAO2a/ΔFAO2b)和基因回补菌株UCF1和UCF2。在以葡萄糖为碳源的培养基中,各菌株的生长情况没有显著差异;在以烷烃(C12~C14)为碳源的培养基中,FTYT菌株生长速度快于其他菌株,F3YT菌株的生长速度显著受到抑制,表明组合删除FAO1和FAO2基因降低了细胞对烷烃的利用,影响了细胞生长。与出发菌株相比,同时删除FAO1和FAO2基因后突变株能够转化烷烃合成正十二烷醇,摇瓶发酵水平达到59.63 mg/L,是出发菌株的近460倍。FAO1和FAO2基因在细胞利用烷烃中有重要作用且功能存在差异,并且可以作为代谢工程改造热带假丝酵母生产脂肪醇的潜在靶点。 展开更多
关键词 热带假丝酵母 脂肪醇氧化酶 基因敲除 脂肪醇 同源重组 正十二烷醇
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水稻长链脂肪醇氧化酶基因OsFAO结构分析及其进化研究 被引量:1
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作者 赵仕兰 林志新 +3 位作者 王曦 杨继 程奇 罗达 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第2期215-223,共9页
我们通过多年来的研究已证实在高等植物中也存在编码类似于工业酵母中长链脂肪醇氧化酶(FAO)的基因。本文对单子叶植物水稻FAO基因的结构、起源和进化进行了分析。利用拟南芥中FAO蛋白的氨基酸序列对水稻基因组进行tblastn及blastp搜索... 我们通过多年来的研究已证实在高等植物中也存在编码类似于工业酵母中长链脂肪醇氧化酶(FAO)的基因。本文对单子叶植物水稻FAO基因的结构、起源和进化进行了分析。利用拟南芥中FAO蛋白的氨基酸序列对水稻基因组进行tblastn及blastp搜索,结果显示在水稻基因组中存在4个FAO基因,1个位于2号染色体,命名为OsFAO1;另外3个在10号染色体上,分别命名为OsFAO2、OsFAO3和OsFAO4。其中位于2号染色体上的OsFAO1基因由3个外显子和2个内含子组成;10号染色体上的3个FAO基因中,OsFAO3和OsFAO4为2个外显子和1个内含子组成,OsFAO2是由4个外显子和3个内含子组成。序列预测结果显示,OsFAO1编码跨膜蛋白的可能性更大。我们进一步对已知序列的各类原核(874种)和各类真核(包括20种真菌)的基因组进行了分析,发现FAO基因主要存在于真菌和陆生植物基因组中,而不存在于原核和藻类的基因组中。对陆生植物基因组中的FAO基因的分析结果表明水稻中OsFAO1基因序列相对原始。 展开更多
关键词 长链脂肪醇氧化酶 水稻 基因结构
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Candida Cloacae长链脂肪酸醇氧化酶的结构域谱分析(英文)
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作者 葛正龙 《遵义医学院学报》 2004年第2期101-105,共5页
目的 分析酵母CandidaCloacae中长链脂肪酸醇氧化酶的酶活性结构域。方法 利用RT PCR技术 ,从酵母Candidacloacae细胞中克隆长链脂肪酸醇氧化酶的 5个不同长度的cDNA片段。扩增这些片段的上游引物5’端引入了NheI限制性内切酶位点和... 目的 分析酵母CandidaCloacae中长链脂肪酸醇氧化酶的酶活性结构域。方法 利用RT PCR技术 ,从酵母Candidacloacae细胞中克隆长链脂肪酸醇氧化酶的 5个不同长度的cDNA片段。扩增这些片段的上游引物5’端引入了NheI限制性内切酶位点和起始密码ATG ,下游引物 5’端引入了NheI限制性内切酶位点。扩增产物经NheI消化后 ,被克隆进T7启动子控制下的表达质粒pET 17b中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株。结果 转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株表达出 5个不同长度的长链脂肪酸醇氧化酶的羧基端肽段 ,其氨基酸残基数分别为5 35AA(5 0KD)、4 73AA(43KD)、4 11AA(38KD)、30 6AA(2 6KD)和 2 16AA(18KD)。与完整的长链脂肪酸醇氧化酶(6 97AA)相比较 ,相当于它们分别从氨基端被切除 16 2、2 2 4、2 88、391和 4 81个氨基酸 ,其酶活性分别下降了 18.8%、2 0 .6 %、88.6 %、91.4 %和 99.7%。结论 结果表明随着长链脂肪酸醇氧化酶的氨基端被切除的氨基酸数增加 ,其酶活性下降 ,尤其是切除 2 2 4 2 88氨基酸序时 ,酶活性下降更明显 。 展开更多
关键词 CANDIDA CLOACAE 长链脂肪酸醇氧化酶 基因表达 结构域
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重组长链脂肪酸醇氧化酶的分离纯化及特性研究
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作者 葛正龙 王建华 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2005年第4期277-279,284,共4页
目的:从fao基因转化的E.coliBL21/DE3菌分离纯化重组酿酒酵母长链脂肪酸醇氧化酶,并对其理化性质进行研究。方法:应用硫酸铵分级沉淀、phenyl-sepharose HR 5/5层析等方法分离纯化长链脂肪酸醇氧化酶,应用SDS-PAGE电泳测定其相对分子量... 目的:从fao基因转化的E.coliBL21/DE3菌分离纯化重组酿酒酵母长链脂肪酸醇氧化酶,并对其理化性质进行研究。方法:应用硫酸铵分级沉淀、phenyl-sepharose HR 5/5层析等方法分离纯化长链脂肪酸醇氧化酶,应用SDS-PAGE电泳测定其相对分子量,并对其Km、酸碱稳定性及其底物特异性进行分析。结果:应用上述分离方法得到电泳呈单一条带的酶蛋白,相对分子量大约为64 000,得率为17.6%以上;该酶对十二烷醇的Km在2.5和3.0μmol/L之间,最适pH值为8.5,在pH 7.0环境中,酶活性为pH 8.5时的60%;对十二烷醇催化的相对活性较其它一些长链的二醇和脂肪酸醇为高。结论:从fao基因转化的E.coliBL21/DE3菌分离出重组酿酒酵母长链脂肪酸醇氧化酶,该酶为碱性酶,其最适底物为十二烷醇,但也可氧化一些长链的二醇和脂肪酸醇。 展开更多
关键词 脂肪酸醇氧化酶 底物特异性 分离纯化 性质
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