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HPLC测定防己中防己诺林碱和粉防己碱的含量 被引量：21
1
作者 刘永刚 刘勇 +3 位作者 何瑞杰 赵保胜 韩静 马群 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期49-51,共3页
目的:建立防己药材中粉防己碱和防己诺林碱的含量测定方法。方法:色谱条件Agilent SB C18(4.6 mm×150mm,5μm),流动相甲醇-乙腈-水-三乙胺(55∶25∶20∶0.05),检测波长为282 nm。结果:粉防己碱和防己诺林碱线性范围分别为0.386～3... 目的:建立防己药材中粉防己碱和防己诺林碱的含量测定方法。方法:色谱条件Agilent SB C18(4.6 mm×150mm,5μm),流动相甲醇-乙腈-水-三乙胺(55∶25∶20∶0.05),检测波长为282 nm。结果:粉防己碱和防己诺林碱线性范围分别为0.386～3.86μg和0.366～3.66μg(r≥0.999 9)。粉防己碱和防己诺林碱总含量回收率为100.1%,RSD为1.79%。结论:本方法可为防己中防己诺林碱和粉防己碱的含量测定方法提供依据。 展开更多
关键词 防己 粉防己碱 防己诺林碱 高效液相色谱法
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防己诺林碱与牛血清白蛋白相互作用的研究 被引量：13
2
作者 吴秋华 王春 +3 位作者 王志 马晶军 臧晓欢 秦娜欣 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2498-2501,共4页
在不同温度下,用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,研究了防己诺林碱与BSA相互作用的光谱学行为。防己诺林碱对BSA有较强的荧光猝灭作用。根据不同温度下防己诺林碱对BSA的荧光猝灭作用,利用Stern-Volmer方程处理实验数据... 在不同温度下,用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,研究了防己诺林碱与BSA相互作用的光谱学行为。防己诺林碱对BSA有较强的荧光猝灭作用。根据不同温度下防己诺林碱对BSA的荧光猝灭作用,利用Stern-Volmer方程处理实验数据,表明防己诺林碱对BSA的荧光猝灭作用属于静态猝灭。根据F rster非辐射能量转移理论计算出了防己诺林碱与BSA间的结合距离R(27℃2.51 nm;37℃2.72 nm;47℃2.89 nm)、结合常数KA(27℃1.05×105L.mol-1;37℃3.31×105L.mol-1;47℃7.24×105L.mol-1)及对应温度下的热力学参数。热力学数据表明二者主要靠疏水作用力结合,同时用同步荧光光谱探讨了防己诺林碱对BSA构象的影响。 展开更多
关键词 防己诺林碱 BSA 荧光猝灭光谱 同步荧光光谱 紫外-可见吸收光谱
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HPLC法同时测定防己黄芪汤中5种成分 被引量：14
3
作者 刘书芬 梁倩倩 +3 位作者 陈岩 李金龙 施杞 王拥军 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2312-2315,共4页
目的 建立HPLC定量分析防己黄芪汤（防己、黄芪、白术和甘草）中防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸5种成分的方法.方法 采用HPLC外标法,样品经过50％甲醇提取,采用DIKMA DIAMONSIL （2）C18柱,甲醇-0.2 mol/L... 目的 建立HPLC定量分析防己黄芪汤（防己、黄芪、白术和甘草）中防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸5种成分的方法.方法 采用HPLC外标法,样品经过50％甲醇提取,采用DIKMA DIAMONSIL （2）C18柱,甲醇-0.2 mol/L乙酸铵0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,紫外检测波长254 nm和270 nm.结果 防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在4 ～ 50 μg/mL、3～ 222 μg/mL、7～111 μg/mL、15 ～ 244 μg/mL、14 ～ 222μg/mL范围内呈良好线性关系.结论 本方法准确,可同时测定防己黄芪汤的3种药材中的5种成分. 展开更多
关键词 防己黄芪汤 防己诺林碱 粉防己碱 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 甘草苷 甘草酸 HPLC
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汉防己乙素抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化缓解心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡和线粒体氧化损伤 被引量：13
4
作者 李昌 王爱玲 +3 位作者 肖跃红 张占海 张琮 曾宪峰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期336-342,共7页
目的探讨汉防己乙素(Fan)对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、模型(I/R)组、I/R+Fan 1,3和10 mg·kg^-1组,I/R+盐酸维拉帕米(VH)20 mg·kg^-1组,每组9只。模型大鼠结扎左... 目的探讨汉防己乙素(Fan)对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、模型(I/R)组、I/R+Fan 1,3和10 mg·kg^-1组,I/R+盐酸维拉帕米(VH)20 mg·kg^-1组,每组9只。模型大鼠结扎左前降支冠状动脉30 min后,松开结扎线再灌注90 min。给药大鼠分别在造模前20 min ip给予Fan 1,3,10 mg·kg^-1及VH 20 mg·kg^-1。记录平均动脉血压(MAP),左心室收缩压(LVSP);ELISA法测定血清中肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量;HE染色观察心肌组织病理损伤;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测心肌组织Bcl-2、Bax、原癌基因(c-Myc)、活化胱天蛋白酶3蛋白表达水平和P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平。结果与假手术组比较,I/R组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及c-Myc蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);Mb,CK-MB和MDA含量、心肌细胞凋亡率、活化胱天蛋白酶3和Bax蛋白表达水平及P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Fan 3和10 mg·kg^-1组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及Bcl-2和c-Myc蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Mb,CK-MB和MDA含量显著降低(P<0.05),心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.05),胱天蛋白酶3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),P38 MAPK和ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论Fan能够抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化,缓解心肌I/R大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤。 展开更多
关键词 汉防己乙素 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶 心肌缺血再灌注 细胞凋亡 线粒体损伤
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HPLC法测定防己黄芪颗粒剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量 被引量：10
5
作者 刘幸平 程康华 +3 位作者 毕肖林 崔小兵 李伟 文红梅 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2001年第4期230-231,共2页
目的　测定防己黄芪颗粒剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量。方法　采用反相高效液相色谱法。结果　防己黄芪颗粒剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量、平均加样回收率分别为防己诺林碱 :98.2 % ,RSD 0 .84 % ;粉防己碱 :96.9% ,RSD为 1 .4 5... 目的　测定防己黄芪颗粒剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量。方法　采用反相高效液相色谱法。结果　防己黄芪颗粒剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量、平均加样回收率分别为防己诺林碱 :98.2 % ,RSD 0 .84 % ;粉防己碱 :96.9% ,RSD为 1 .4 5%。结论　本法简单、灵敏、结果可靠 。 展开更多
关键词 防已黄芪颗粒剂 防已诺林碱 粉防已碱 反相高效液相色谱法 含量测定
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RP-HPLC测定轻身减肥片中粉防己碱与防己诺林碱的含量 被引量：9
6
作者 宋旭峰 余菁 胡晓炜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期405-407,共3页
目的:运用反相高效液相色谱法测定轻身减肥片(大黄、防己等)中粉防己碱及防己诺林碱的含量。方法:采用Zor baxC18柱,甲醇 0. 3 二乙胺溶液(75∶25)为流动相,检测波长为 242nm。结果:粉防己碱的回收率为 103. 65 、RSD为 1. 59 (n=6);... 目的:运用反相高效液相色谱法测定轻身减肥片(大黄、防己等)中粉防己碱及防己诺林碱的含量。方法:采用Zor baxC18柱,甲醇 0. 3 二乙胺溶液(75∶25)为流动相,检测波长为 242nm。结果:粉防己碱的回收率为 103. 65 、RSD为 1. 59 (n=6);防己诺林碱的回收率为 97. 11 、RSD为 1. 91 (n=6)。结论:本法简便、快速、重现性好,可作为产品的定量分析方法。 展开更多
关键词 粉防己碱 防己诺林碱 轻身减肥片 高效液相色谱
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基于化学成分、药理作用及网络药理学的防己质量标志物(Q-Marker)预测分析 被引量：8
7
作者 莫柳英 张帆 +7 位作者 郝二伟 邓家刚 陈锋 李瑞林 莫月密 张玲秋 侯小涛 杜正彩 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期6283-6295,共13页
防己Stephania tetrandra是一味使用历史悠久的中药,最早出现于《神农本草经》中。其味苦,性寒,归膀胱﹑肺经,具有祛风止痛、利水消肿之功效,用于治疗风湿痹痛、水肿脚气、小便不利、湿疹疮毒等病症。对防己的化学成分和现代药理研究进... 防己Stephania tetrandra是一味使用历史悠久的中药,最早出现于《神农本草经》中。其味苦,性寒,归膀胱﹑肺经,具有祛风止痛、利水消肿之功效,用于治疗风湿痹痛、水肿脚气、小便不利、湿疹疮毒等病症。对防己的化学成分和现代药理研究进行综述,从防己特有化学成分、药理活性的药效物质基础和网络药理学3个方面对防己的质量标志物(quality markers,Q-Marker)进行预测分析,为防己质量控制提供科学依据。 展开更多
关键词 防己 质量标志物 生物碱 粉防己碱 防己诺林碱 小檗碱 木兰碱
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HPLC测定中肺合剂中防己诺林碱和粉防己碱的含量 被引量：8
8
作者 林能明 张如松 +1 位作者 方罗 孔维月 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期1593-1595,共3页
目的测定中肺合剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量。方法样品经预处理后采用RP-HPLC同时测定它们的含量。色谱条件：色谱柱为Agilent Zorbax Elipse XDB—C18；流动相为0．06％三乙胺-乙腈溶液（44：56）；流速为1．0mL·min^-1；检... 目的测定中肺合剂中防己诺林碱、粉防己碱的含量。方法样品经预处理后采用RP-HPLC同时测定它们的含量。色谱条件：色谱柱为Agilent Zorbax Elipse XDB—C18；流动相为0．06％三乙胺-乙腈溶液（44：56）；流速为1．0mL·min^-1；检测波长设在240nm；柱温30℃。结果防已诺林碱在0．4375—17．5mg·L^-1与粉防己碱在0．875—35．0mg·L^-1内，峰面积与其浓度具有良好的线性关系。平均加样回收率分别为89．30％～94．35％（防己诺林碱），90．08％-95．74％（粉防己碱）。结论本方法简便、快速、准确，可同时测定中肺合剂中防己诺林碱和粉防己碱的含量。 展开更多
关键词 中肺合剂 防己诺林碱 粉防己碱 高效液相色谱法
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苦参碱、水苏碱和防己诺林碱抗细菌内毒素的作用研究 被引量：8
9
作者 胡屹屹 何孔旺 倪艳秀 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期129-133,共5页
拟探讨3种中药生物碱苦参碱、水苏碱和防己诺林碱对细菌内毒素(LPS)的治疗作用。ICR小鼠腹腔注射6 mg/kg的内毒素3 h后,根据分组情况分别腹腔注射高(10 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(1 mg/kg)3个剂量的苦参碱、水苏碱和防己诺林碱。同时设立... 拟探讨3种中药生物碱苦参碱、水苏碱和防己诺林碱对细菌内毒素(LPS)的治疗作用。ICR小鼠腹腔注射6 mg/kg的内毒素3 h后,根据分组情况分别腹腔注射高(10 mg/kg)、中(5 mg/kg)、低(1 mg/kg)3个剂量的苦参碱、水苏碱和防己诺林碱。同时设立LPS对照组、空白对照组和药物对照组。记录LPS攻毒后48 h内各组小鼠临床表现,测定体温、体重及器官指数,检测血清中LPS和炎症因子的含量。结果显示,苦参碱、水苏碱和防己诺林碱能显著改善体温升高、体重减轻、血清中LPS和炎症因子含量升高、内脏肿大等病变。表明以上3种中药生物碱具有明显的抗细菌内毒素作用,为其在兽医临床治疗细菌内毒素疾病提供理论依据。 展开更多
关键词 苦参碱 水苏碱 防己诺林碱 内毒素
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防己诺林碱对结肠癌细胞恶性生物学行为及HIF-1α/VEGF/Akt通路的相关性研究 被引量：8
10
作者 望永鼎 刘文华 +1 位作者 翟一飞 张涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期3042-3047,共6页
目的:研究防己诺林碱(FAN)对结肠癌的作用以及与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/蛋白激酶B(Akt)通路的相关性。方法:用5、10、20μg/ml的防己诺林碱分别处理结肠癌细胞HT-29 48 h,克隆形成实验检测细胞生长,蛋白印迹... 目的:研究防己诺林碱(FAN)对结肠癌的作用以及与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/蛋白激酶B(Akt)通路的相关性。方法:用5、10、20μg/ml的防己诺林碱分别处理结肠癌细胞HT-29 48 h,克隆形成实验检测细胞生长,蛋白印迹检测增殖标记蛋白Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经细胞钙黏蛋白(N-cadherin)、HIF-1α、VEGF和Akt的表达,Transwell检测细胞侵袭情况,显微镜观察上皮向间质的形态转变;采用皮下注射结肠癌细胞HT-29构建移植瘤模型,腹腔分别注射5、10、20μg/ml防己诺林碱,检测结肠癌移植瘤体积,免疫组化检测Ki67和VEGF,蛋白印迹检测HIF-1α、VEGF、Akt的表达,HE染色观察肝肾损伤。结果:与Blank cells相比较,FAN组的结肠癌细胞HT-29克隆形成率显著降低,Ki67和PCNA的表达量显著下调,侵袭细胞数目显著减少,VEGF和N-cadherin表达量显著下调,E-cadherin表达量显著上调,HIF-1α、VEGF和Akt表达量显著下调;与Blank组相比,FAN组的移植瘤体积明显小,Ki67和VEGF阳性比率显著降低,HIF-1α、VEGF和Akt表达量显著下调,肝肾无损伤。结论:防己诺林碱都可以抑制结肠癌细胞HT-29的生长和增殖、侵袭能力、上皮间质转化,并且抑制结肠癌细胞HIF-1α/VEGF/Akt信号通路,从而抑制结肠癌的发生和发展。 展开更多
关键词 防己诺林碱 结肠癌细胞HT-29 HIF-1Α VEGF Akt
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复方汉防己颗粒中防己的成分鉴别及含量测定 被引量：7
11
作者 张淑瑜 于燕莉 +2 位作者 刘世君 毕云生 倪晨明 《中国药事》 CAS 2013年第7期725-728,共4页
目的建立复方汉防己颗粒中主药防己有效成分粉防己碱和防己诺林碱的鉴别和含量测定方法。方法采用薄层色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对其进行定量检测。结果薄层鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰。含量测定... 目的建立复方汉防己颗粒中主药防己有效成分粉防己碱和防己诺林碱的鉴别和含量测定方法。方法采用薄层色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对其进行定量检测。结果薄层鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰。含量测定粉防己碱在5.4～43.2mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9998,n=5),平均加样回收率为98.43%,RSD为0.88%(n=9);防己诺林碱在3.0～24.0mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9996,n=5),平均加样回收率为98.68%,RSD为0.91%(n=9)。结论本方法操作简单、灵敏准确、重复性好,可用于复方汉防己颗粒中主药防己的成分鉴别及含量测定。 展开更多
关键词 复方汉防己颗粒 粉防己碱 防己诺林碱 薄层色谱法 高效液相色谱法
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防己诺林碱通过Nrf2/NLRP3途径对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构和成骨细胞凋亡的影响 被引量：7
12
作者 左远胜 何智圣 +3 位作者 付中明 李名武 孙法瑞 周强 《实用药物与临床》 CAS 2021年第10期881-886,共6页
目的探讨防己诺林碱通过Nrf2/NLRP3途径对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构和成骨细胞凋亡的影响及机制研究。方法SD大鼠分为假手术组(sham组)、骨质疏松症组(OP组)、防己诺林碱低剂量组(OP+FAN-L组)和防己诺林碱高剂量组(OP+FAN-H组)。μCT检... 目的探讨防己诺林碱通过Nrf2/NLRP3途径对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构和成骨细胞凋亡的影响及机制研究。方法SD大鼠分为假手术组(sham组)、骨质疏松症组(OP组)、防己诺林碱低剂量组(OP+FAN-L组)和防己诺林碱高剂量组(OP+FAN-H组)。μCT检测各组大鼠骨组织的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁分离距离(Tb.Sp);ELISA检测各组大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)的表达水平;ELISA检测各组大鼠骨组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;HE染色检测各组大鼠骨组织病理损伤;TUNEL染色检测各组大鼠成骨细胞的凋亡;Western blot检测各组大鼠骨组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白的表达。结果防己诺林碱使OP大鼠的BV/TV和Tb.Th指数上升(P<0.05),Tb.Sp指数下降(P<0.05);与OP组相比,OP+FAN-L组和OP+FAN-H组大鼠血清中ALP的表达水平下调(P<0.05),OC的表达水平上调(P<0.05),骨组织中IL-6和TNF-α的表达水平下调(P<0.05);防己诺林碱使OP大鼠骨组织中骨小梁面积增加(P<0.05);与OP组相比,OP+FAN-L组和OP+FAN-H组TUNEL阳性细胞数量减少(P<0.05),骨组织中Nrf2蛋白表达水平上调(P<0.05),NLRP3蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论防己诺林碱减少了炎症因子的表达和成骨细胞凋亡,增加了骨组织中骨小梁面积,其可能与上调Nrf2的表达和抑制NLRP3的表达有关。 展开更多
关键词 防己诺林碱 Nrf2/NLRP3途径 骨质疏松症 骨损伤 成骨细胞
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汉防己乙素对人肺癌95D细胞凋亡的诱导作用及机制 被引量：6
13
作者 于有江 罗雪 +2 位作者 叶记林 苏兰娣 彭建明 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第38期5-7,共3页
目的观察汉防己乙素对人肺癌95D细胞凋亡的诱导作用,并探讨其可能的作用机制。方法取人肺癌95D细胞分为4组,实验1、2、3组分别加入8、16、32μmol/L的汉防己乙素,溶剂对照组加入等体积0.1%的DMSO。采用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率,H_2... 目的观察汉防己乙素对人肺癌95D细胞凋亡的诱导作用,并探讨其可能的作用机制。方法取人肺癌95D细胞分为4组,实验1、2、3组分别加入8、16、32μmol/L的汉防己乙素,溶剂对照组加入等体积0.1%的DMSO。采用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率,H_2DCF-DA法测定细胞内活性氧(ROS)水平,Caspase-3活性测定试剂盒检测Caspase-3活性,半定量RT-PCR法检测BCL-2、BAX mRNA。结果实验1、2、3组及溶剂对照组细胞凋亡率分别为6.71%±1.26%、17.07%±1.88%、25.78%±0.44%、5.41%±1.40%,ROS水平分别为117.7%±5.5%、151.0%±4.6%、212.0%±5.6%、100.0%±0.0%,Caspase-3活性分别为119.3%±5.7%、175.0%±13.1%、251.3%±17.0%、100.0%±3.0%,BCL-2 mRNA相对表达量分别为0.93±0.02、0.75±0.04、0.61±0.04、1.00±0.03,BAX mRNA相对表达量分别为1.10±0.02、1.63±0.04、1.85±0.04、1.00±0.02,实验1、2、3组与溶剂对照组相比P<0.05或<0.01。结论汉防己乙素可诱导人肺癌95D细胞凋亡,这可能是通过升高细胞内ROS水平、活化Caspase-3、激活BAX、抑制BCL-2实现的。 展开更多
关键词 肺肿瘤 汉防己乙素 细胞凋亡 活性氧 半胱氨酸蛋白酶3 B淋巴细胞瘤-2 BCL-2相关X蛋白
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防己黄芪汤在大鼠体内的药动学研究及其对T淋巴细胞的调节作用
14
作者 吕春明 侯婷 +1 位作者 张宁 王冰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期861-871,共11页
目的比较防己黄芪汤中活性成分在大鼠体内的药动学行为,并研究防己黄芪汤及其主要入血成分粉防己碱抑制刀豆球蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导T淋巴细胞增殖的作用机制。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLCMS/MS)检测大鼠ig不同剂... 目的比较防己黄芪汤中活性成分在大鼠体内的药动学行为,并研究防己黄芪汤及其主要入血成分粉防己碱抑制刀豆球蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导T淋巴细胞增殖的作用机制。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLCMS/MS)检测大鼠ig不同剂量防己黄芪汤及粉防己碱后,入血成分在不同时间点的血药浓度,并分析其药动学行为。采用MTT法和3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测防己黄芪汤对T淋巴细胞毒性及增殖的抑制作用;采用ELISA法测定上清液中白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、IL-2、γ-干扰素(γ-interferon,IFN-γ)水平;采用流式细胞仪检测调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)数量。结果防己黄芪汤在大鼠体内主要入血成分为防己诺林碱、木兰花碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、黄芪甲苷、甘草次酸和粉防己碱。除防己诺林碱外,其他6个成分在体内的吸收具有剂量相关性。粉防己碱、防己诺林碱和甘草次酸在体内吸收速率慢,消除速率慢,驻留时间长[平均滞留时间(MRT)>10 h、清除率(CL)<8 L/(h·kg)];木兰花碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和甘草苷在体内具有吸收和消除速度快、体内驻留时间短的特点[达峰时间(tmax)<1 h、MRT<5.2 h、CL>50 L/(h·kg)]。与单一成分给药相比,防己黄芪汤中的粉防己碱的吸收程度明显增加,而消除速率明显降低。防己黄芪汤可以抑制T淋巴细胞的增殖,还可降低细胞上清液中促炎因子IL-2、IL-17和IFN-γ水平(P<0.05、0.01),增加Treg的分化数量(P<0.05、0.01),防己黄芪汤主要入血成分之一粉防己碱可降低细胞上清液中IL-17水平并增加Treg分化数量(P<0.05、0.01)。结论君药防己和黄芪的特征成分是防己黄芪汤的主要入血成分;君药防己含有的粉防己碱与防己黄芪汤中其他成分存在协同作用。防己黄芪汤可抑制T淋巴细胞的增殖,其作用机制可能是通过调节Treg的增殖分化过程,使� 展开更多
关键词 防己黄芪汤 药动学 T淋巴细胞 防己诺林碱 木兰花碱 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 甘草苷 黄芪甲苷 甘草次酸 粉防己碱
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高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 被引量：6
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作者 杨帆 吴梦丽 +3 位作者 高慧 闫国跃 何秋梅 谢阳姣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2545-2551,共7页
【目的】建立同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量的高效液相色谱方法(HPLC),为防己药材质量检测提供有效方法。【方法】用2%盐酸甲醇常温超声30 min提取粉防己碱和防己诺林碱,采用HPLC对江西、安徽、浙江、湖南、福建和广东等... 【目的】建立同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量的高效液相色谱方法(HPLC),为防己药材质量检测提供有效方法。【方法】用2%盐酸甲醇常温超声30 min提取粉防己碱和防己诺林碱,采用HPLC对江西、安徽、浙江、湖南、福建和广东等不同产地防己药材进行测定。色谱条件:色谱柱Agilent ZORBAX Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.08%三乙胺(75∶25),等度洗脱,进样量8μL,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长282 nm,运行时间20 min。【结果】粉防己碱和防己诺林碱的线性范围分别为0~6000μg/mL(R^2=1.0000)和0~3000μg/mL(R^2=0.9999),平均回收率分别为104.99%和90.13%,相对标准偏差(RSD)分别为1.75%和2.70%;粉防己碱和防己诺林碱的稳定性RSD分别为1.06%和0.62%、精密度RSD分别为1.57%和0.06%、重复性RSD分别为1.04%和1.45%。不同产地防己药材中粉防己碱的含量变化范围为0.836%~5.999%,最高的是江西金桥乡株系3,最低的是浙江苏庄株系4;防己诺林碱的含量变化范围为0.507%~2.993%,最高的是广东天子地株系4,最低的是湖南贯塘株系1,RSD均小于5%。【结论】建立的HPLC测定方法简单、稳定性好、精密度高且运行时间短,可同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量,可考虑作为防己药材质量检测的方法。 展开更多
关键词 防己 粉防己碱 防己诺林碱 含量 高效液相色谱法(HPLC)
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防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺优选 被引量：6
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作者 张建岭 张路 +2 位作者 李士栋 张淹 王林戈 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第24期10-12,共3页
目的:优选防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺条件。方法:采用HPLC测定粉防己碱、防己诺林碱及黄芪甲苷含量。以干燥物含水量、粉防己碱和防己诺林碱的总含量、黄芪甲苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察干燥温度、履带速度、进料速... 目的:优选防己黄芪颗粒的真空带式干燥工艺条件。方法:采用HPLC测定粉防己碱、防己诺林碱及黄芪甲苷含量。以干燥物含水量、粉防己碱和防己诺林碱的总含量、黄芪甲苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察干燥温度、履带速度、进料速度对防己黄芪颗粒真空带式干燥工艺的影响。结果:最佳真空带式干燥工艺条件为3个干燥区的温度依次为80,85,80℃,履带速度20 cm·min-1,进料速度12 L·h-1;含水量4.58%,粉防己碱和防己诺林碱总提取量11.97 mg·g-1,黄芪甲苷提取量0.54 mg·g-1。结论:优选的干燥工艺具有干燥速率高、产品质量好等优点,符合GMP要求,为防己黄芪颗粒的工业化生产提供实验依据。 展开更多
关键词 真空带式干燥 正交试验 防己黄芪颗粒 粉防己碱 防己诺林碱 黄芪甲苷
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防己诺林碱阻断自噬抑制H1N1病毒感染的研究
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作者 谢芳 禹艳丽 +5 位作者 王靳勇 李琪琪 孔令东 张美琦 成翠芹 王遥 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第4期711-719,共9页
目的探索防己诺林碱在细胞水平抗H1N1病毒的作用,阐明防己诺林碱调控细胞自噬抑制H1N1病毒复制的分子机制。方法CCK-8法检测0.3125、0.6250、1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000、40.0000、60.0000μmol·L^(−1)的防己诺林碱... 目的探索防己诺林碱在细胞水平抗H1N1病毒的作用,阐明防己诺林碱调控细胞自噬抑制H1N1病毒复制的分子机制。方法CCK-8法检测0.3125、0.6250、1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000、40.0000、60.0000μmol·L^(−1)的防己诺林碱对MDCK细胞活力的影响;MDCK细胞设置对照组、模型组和防己诺林碱(2.5、5.0、10.0μmol·L^(−1))组,除对照组外,以感染复数(MOI)为0.1的H1N1病毒感染MDCK细胞,加入防己诺林碱共同孵育12 h,同时设置防己诺林碱(10.0μmol·L^(−1))与病毒共同孵育4、8 h组,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR,检测HIN1 mRNA表达)和Western blotting[H1N1病毒核蛋白(NP)]检测防己诺林碱对病毒复制的抑制作用;PI/Hoechst 33342染色检测防己诺林碱(10.0μmol·L^(−1))对MDCK细胞死亡的影响;qRT-PCR法检测防己诺林碱检测防己诺林碱预处理、病毒感染早期药物处理、病毒感染晚期药物处理以及吸附和进入阶段给药对病毒复制的影响;MDCK细胞转染EGFP-LC3或EGFP-mCherry-LC3双荧光质粒,观察防己诺林碱对EGFP-LC3的荧光强度、EGFP-mCherry-LC3共定位的影响,设置自噬诱导剂雷帕霉素(0.5μmol·L^(−1))、自噬晚期抑制剂氯喹(10μmol·L^(−1))、巴佛洛霉素A1(100 nmol·L^(−1))对照。转染过EGFP-LC3质粒的MDCK细胞感染H1N1病毒,免疫荧光检测防己诺林碱对LC3与胞内的病毒NP蛋白共定位的影响;体外培养A549细胞,以MOI为0.1的H1N1病毒感染,Western blotting检测防己诺林碱对LC3II/LC3I蛋白表达的影响。结果防己诺林碱对MDCK细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为40.19μmol·L^(−1);与模型组比较,防己诺林碱以浓度相关性的方式抑制HIN1 mRNA表达,以浓度和时间相关性的方式抑制NP蛋白表达(P<0.01、0.001);显著减少H1N1诱导的细胞死亡(P<0.001);抑制H1N1病毒进入过程。与对照组比较,防己诺林碱处理诱导LC3荧光聚集,诱导EGFP-LC3和mCherry-LC3双荧光共定位显著增加(P<0.001)。与模型� 展开更多
关键词 防己诺林碱 甲型流感病毒 自噬 氯喹 巴佛洛霉素A1
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防己诺林碱对增生性瘢痕的抑制作用 被引量：6
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作者 宋英莉 王洪一 +2 位作者 马书丹 徐志山 陶凯 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2018年第5期297-300,共4页
目的探究防己诺林碱对增生性瘢痕的抑制作用。方法提取原代瘢痕组织成纤维细胞,分别用DMSO(对照组),10、20、40μmol/L的防己诺林碱处理成纤维细胞24 h后,通过MTT实验检测对其增殖能力的影响;通过流式细胞术及Hochest33258染色检测对其... 目的探究防己诺林碱对增生性瘢痕的抑制作用。方法提取原代瘢痕组织成纤维细胞,分别用DMSO(对照组),10、20、40μmol/L的防己诺林碱处理成纤维细胞24 h后,通过MTT实验检测对其增殖能力的影响;通过流式细胞术及Hochest33258染色检测对其增殖、凋亡能力的影响;通过western blot和real time PCR检测防己诺林碱对瘢痕组织成纤维细胞中Cyclin D1和Bcl-2表达水平的影响。结果 10、20、40μmol/L的防己诺林碱作用瘢痕组织成纤维细胞24 h后,细胞的抑制率分别为(21.32±4.87)%、(27.13±1.71)%和(29.86±5.59)%,与对照组相比差异均具有统计学意义;防己诺林碱还可抑制细胞周期进程,促进其凋亡;Western blot和real time PCR检测结果显示,防己诺林碱可抑制Cyclin D1和Bcl-2在瘢痕组织成纤维细胞中的表达。结论防己诺林碱可抑制瘢痕组织成纤维细胞的生长。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 防己诺林碱 增殖 凋亡 抑制
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防己诺林碱调控紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞模型中的跨膜转运研究 被引量：6
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作者 何丽 杨俊毅 胡丽娜 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1478-1481,共4页
目的:研究防己诺林碱对紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞跨膜转运的调控作用。方法:以外排转运蛋白P-gp底物紫杉醇为模型药物,盐酸维拉帕米为对照,考察防己诺林碱调控紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞模型的跨膜转运作用。采用RP-HPLC检测紫杉醇在转运... 目的:研究防己诺林碱对紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞跨膜转运的调控作用。方法:以外排转运蛋白P-gp底物紫杉醇为模型药物,盐酸维拉帕米为对照,考察防己诺林碱调控紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞模型的跨膜转运作用。采用RP-HPLC检测紫杉醇在转运介质中的药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:紫杉醇在P-gp高表达的MDR1-MDCKⅡ细胞模型中外排的速率明显快于吸收的速率。与紫杉醇单用相比,紫杉醇分别联用盐酸维拉帕米及防己诺林碱后,紫杉醇吸收速率均显著增加,而外排速率均显著降低,相同浓度的防己诺林碱抑制转运作用强于对照盐酸维拉帕米。结论:防己诺林碱能够明显降低紫杉醇在MDR1-MDCKⅡ细胞的外排作用,抑制由P-gp介导的多药耐药。 展开更多
关键词 紫杉醇 防己诺林碱 MDR1-MDCKⅡ细胞 P糖-蛋白
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基于线粒体凋亡通路探讨防己诺林碱对前列腺癌PC3细胞的生物学行为的影响 被引量：2
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作者 李冬 董明国 +2 位作者 房志科 黄林石 陈继英 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第7期1194-1200,共7页
目的 基于线粒体凋亡通路探究防己诺林碱(fangchinoline, FAN)对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法 将前列腺癌PC3细胞按照FAN处理浓度分为4组,分别为FAN 0μmol/L组、FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组,各组依次... 目的 基于线粒体凋亡通路探究防己诺林碱(fangchinoline, FAN)对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法 将前列腺癌PC3细胞按照FAN处理浓度分为4组,分别为FAN 0μmol/L组、FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组,各组依次采用FAN 0μmol/L (DMSO替代)、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L进行处理,孵育48 h后进行实验。CCK-8法检测PC3细胞增殖,平板克隆法检测PC3细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测PC3细胞凋亡,Transwell实验检测PC3细胞侵袭,划痕实验检测PC3细胞迁移,Western blot检测PC3细胞自噬相关蛋白和线粒体凋亡通路蛋白。结果 与FAN 0μmol/L组相比,FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组的PC3细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.001),凋亡率明显升高(P<0.001);与FAN 5μmol/L组和FAN 10μmol/L组相比,FAN 20μmol/L组的PC3细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.001);与FAN 0μmol/L组相比,FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组的PC3细胞中P62和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.001),LC3B、Bax和Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.001)。结论 FAN可能通过线粒体凋亡通路抑制细胞增殖、侵袭和迁移,促进其自噬和凋亡,并呈现剂量依赖性。 展开更多
关键词 前列腺癌 防己诺林碱 线粒体凋亡 PC3细胞 增殖 自噬
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