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飞蝗总DNA的抽提及其RAPD分析条件的摸索 被引量：54
1
作者 张民照 康乐 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期20-26,共7页
通过试验寻求得到一种快速、简便抽提飞蝗 (Locustasp .)总DNA的方法 ,使每头雄性和雌性成虫分别可以得到 5 0和 10 0 μg的总DNA。所得到的总DNAOD2 60 /OD2 80 为 1 5～ 2 2 ,分子量 45kb。为了获得高分子量的DNA产品 ,使RPAD结果具... 通过试验寻求得到一种快速、简便抽提飞蝗 (Locustasp .)总DNA的方法 ,使每头雄性和雌性成虫分别可以得到 5 0和 10 0 μg的总DNA。所得到的总DNAOD2 60 /OD2 80 为 1 5～ 2 2 ,分子量 45kb。为了获得高分子量的DNA产品 ,使RPAD结果具重复性 ,酚氯仿抽提后的DNA沉淀用灭菌Tip头挑出 ,而不用离心收集。对各种分析条件如模板、Taq酶、dNTP及引物的浓度、不同的PCR仪、反应管进行了比较试验 ,发现在一定的范围内 ,它们对RAPD结果影响不大。用优化的试验条件对我国 3个飞蝗亚种 5个地理种群进行RAPD分析 ,结果在 3个亚种UPGMA聚类图中 ,东亚飞蝗和西藏飞蝗的 2个种群以 10 0 %Bootstrap分别聚类在一起 ,亚洲飞蝗与东亚飞蝗的 2个种群以 6 6 %的Bootstrap聚类在一起。在 3个亚种所有个体的UPGMA聚类图中 ,亚种内的所有个体都聚类在一起 ,各自形成独立分支 ,说明 3个飞蝗亚种有明显的区别。西藏飞蝗的 2个种群之间 ,群居型与散居型东亚飞蝗之间在聚类图中混合聚类 。 展开更多
关键词 飞蝗 dna提取 RAPD优化 种群遗传 蝗科
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忍冬科部分植物DNA提取方法的研究 被引量：18
2
作者 郝朝运 刘鹏 +1 位作者 郭卫东 徐根娣 《浙江师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2006年第1期92-98,共7页
应用改进的高盐低pH法、改良高盐法、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法和改良十二烷基硫酸钠(SDS)法,对七子花不同器官的总DNA进行了提取.结果显示,4种方法均有较好的提取效果,产率由大到小依次为改良SDS法、CTAB法、高盐低pH法、改良高盐... 应用改进的高盐低pH法、改良高盐法、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法和改良十二烷基硫酸钠(SDS)法,对七子花不同器官的总DNA进行了提取.结果显示,4种方法均有较好的提取效果,产率由大到小依次为改良SDS法、CTAB法、高盐低pH法、改良高盐法,纯度依次为改良高盐法、高盐低pH法、CTAB法、改良SDS法,其中高盐低pH法提取的综合效果最好.对七子花不同组织DNA的提取显示,产率由高到低依次是嫩叶、茎和老叶,质量以嫩叶和茎抽提的较高.以冰冻茎为材料应用筛选出的高盐低pH法对9种忍冬科植物的总DNA进行了提取,结果发现多糖、酚或胶类物质含量较高植物的DNA沉淀中有一定量的次生物质;对方法进行了少许改进,可以有效去除这些物质对DNA提取的干扰. 展开更多
关键词 总dna提取 RAPD分析 七子花 忍冬科
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中国淡水涡虫RAPD分析条件的优化(简报) 被引量：5
3
作者 张合彩 陈广文 +1 位作者 李玉昌 徐存拴 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第4期333-336,共4页
涡虫是动物界最早出现两侧对称、三胚层、营自由生活的扁形动物,也是由水生向陆生过渡的重要类群,因而在动物系统演化中占有重要地位.由于涡虫再生能力极强,因此成为研究细胞分化与去分化分子机理的理想材料,近百年来一直是国际动物学... 涡虫是动物界最早出现两侧对称、三胚层、营自由生活的扁形动物,也是由水生向陆生过渡的重要类群,因而在动物系统演化中占有重要地位.由于涡虫再生能力极强,因此成为研究细胞分化与去分化分子机理的理想材料,近百年来一直是国际动物学界热衷探索的研究领域之一.然而遗憾的是,我国动物学界从事涡虫研究者甚少,属于基础十分薄弱的学科.中国涡虫资源丰富,分布广泛,近年来在淡水三肠目(Tricladida)研究领域有较大突破[1]. 展开更多
关键词 涡虫 中国 dna提取 RAPD 系统演化
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台湾牛樟总DNA提取方法研究及其PCR验证 被引量：6
4
作者 林雪玲 郑蓉 +2 位作者 何天友 杨杰 郑郁善 《安徽农学通报》 2019年第2期7-9,共3页
采用Biospin(Cat#BSC13S1、Cat#BSC13S1B)和"TIANGEN"(Cat#DP305-03)植物基因组DNA提取试剂盒,对台湾牛樟总DNA的提取方法进行了研究。结果表明:Cat#BSC13S1普通试剂盒比专门提取多糖多酚植物DNA的Cat#BSC13S1B试剂盒的效果更... 采用Biospin(Cat#BSC13S1、Cat#BSC13S1B)和"TIANGEN"(Cat#DP305-03)植物基因组DNA提取试剂盒,对台湾牛樟总DNA的提取方法进行了研究。结果表明:Cat#BSC13S1普通试剂盒比专门提取多糖多酚植物DNA的Cat#BSC13S1B试剂盒的效果更好,且博日Cat#BSC13S1试剂盒的DNA提取效果优于天根Cat#DP305-03试剂盒。经PCR验证,试剂盒法提取的牛樟叶总DNA可满足后续分子生物学实验的要求。 展开更多
关键词 牛樟 dna提取 改良试剂盒法
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体外培养瘤胃微生物总DNA的提取与纯化 被引量：2
5
作者 田晓娟 张志红 +4 位作者 黄江丽 黄黄 张国华 王东升 丁建南 《江西科学》 2012年第1期44-46,102,共4页
主要目的是寻找一种能最大限度获取所有类型的瘤胃微生物大片段DNA的提取方法,为后期分子生物学技术研究瘤胃微生物奠定基础。采用液氮冻融+溶菌酶+CTAB和SDS相结合的方法处理瘤胃样品并充分破壁,再采用酚/氯仿/异戊醇抽提、异丙醇沉淀... 主要目的是寻找一种能最大限度获取所有类型的瘤胃微生物大片段DNA的提取方法,为后期分子生物学技术研究瘤胃微生物奠定基础。采用液氮冻融+溶菌酶+CTAB和SDS相结合的方法处理瘤胃样品并充分破壁,再采用酚/氯仿/异戊醇抽提、异丙醇沉淀获得DNA粗提物,经过试剂盒纯化后得到瘤胃微生物DNA样品。经特异性引物PCR检测,本方法所提取的DNA包含细菌、古细菌、真菌及原虫四类微生物信息。因此,采用该方法提取的DNA可用于后期实时定量PCR或DGGE等研究。 展开更多
关键词 瘤胃微生物 总dna提取 PCR
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三种提取蓝猪耳总DNA方法的比较
6
作者 魏琦超 周岩 畅丽萍 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期88-90,共3页
针对蓝猪耳(Torenia fournieri L.)叶片中多糖、色素等物质严重干扰总DNA提取质量的问题,以蓝猪耳叶片为试验材料,分别采用高盐低pH值法、SDS法、CTAB法提取总DNA,并从样品电泳图谱、纯度、得率等方面对三种方法进行评价。结果表明,CTA... 针对蓝猪耳(Torenia fournieri L.)叶片中多糖、色素等物质严重干扰总DNA提取质量的问题,以蓝猪耳叶片为试验材料,分别采用高盐低pH值法、SDS法、CTAB法提取总DNA,并从样品电泳图谱、纯度、得率等方面对三种方法进行评价。结果表明,CTAB法提取总DNA的产率较高、纯度最好,是蓝猪耳总DNA提取的最佳方法。 展开更多
关键词 蓝猪耳 总dna提取 高盐低pH值法 SDS法 CTAB法
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