白芍总苷下调果糖-高脂诱导大鼠非酒精性脂肪性肝病ERK1/2,TLR4和TRL9蛋白表达的作用 被引量：20

1

作者 郑琳颖 潘竞锵 +5 位作者 杨以琳 吕俊华 赵汝霞 肖瑛 周永标 潘卫松 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2168-2172,共5页

目的观察白芍总苷对果糖-高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏组织胞外信号调节激酶-1/2(p-ERK1/2)、Toll样受体-4(TLR4)和Toll样受体-9(TLR9)蛋白的表达。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和果... 目的观察白芍总苷对果糖-高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏组织胞外信号调节激酶-1/2(p-ERK1/2)、Toll样受体-4(TLR4)和Toll样受体-9(TLR9)蛋白的表达。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和果糖-高脂诱导造模组,后者连续10周果糖-高脂喂饲;第6周末建立疾病模型后,病鼠随机分为模型组、二甲双胍组(200mg·kg-1)、白芍总苷低剂量组(100 mg·kg-1)和高剂量组(200 mg·kg-1),每组均为10只。用药4周后处死所有实验大鼠,观察上述药物对血清空腹血糖(FBG),胰岛素含量(FIns),胰岛素敏感指数(ISI),胆固醇(TC),低密度脂蛋白-胆固醇(LDLC),高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),三酰甘油(TG),游离脂肪酸(FFA)含量,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胱甘肽转移酶(GST)活性和肝脏指数(liver index),以及采用蛋白质印迹法检测肝脏组织p-ERK1/2、Toll样受体-4、TLR9蛋白表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠血糖、胰岛素、胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、三酰甘油及游离脂肪酸含量、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和谷胱甘肽转移酶的活性单位、肝脏指数、p-ERK1/2、Toll样受体-4和TLR9蛋白表达明显上调(P<0.01或P<0.05),胰岛素敏感指数水平及高密度脂蛋白-胆固醇含量明显降低(P<0.01),二甲双胍和白芍总苷低、高剂量组均能改善此现象(P<0.01或P<0.05),但对丙氨酸氨基转移酶的含量改变没有统计学差异(P>0.05)。结论白芍总苷能改善果糖-高脂诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠糖脂代谢异常及拮抗胰岛素抵抗,增强胰岛素敏感性,改善肝功能;其作用机制与白芍总苷下调肝脏组织p-ERK1/2、Toll样受体-4、TLR9蛋白表达作用有关。 展开更多

关键词 白芍总苷 果糖 非酒精性脂肪性肝病 胰岛素抵抗 二甲双胍 胞外信号调节激酶-1/2 TOLL样受体-4 TOLL样受体-9

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疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响 被引量：10

2

作者 房丹 《吉林中医药》 2021年第4期505-509,共5页

目的探讨疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响。方法选择SPF级雄性大鼠48只,随机选取8只作为空白组(A组),给予标准饲料饲养;其余40只则为造模组,给予高糖高脂饲料饲养。造模组所... 目的探讨疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响。方法选择SPF级雄性大鼠48只,随机选取8只作为空白组(A组),给予标准饲料饲养;其余40只则为造模组,给予高糖高脂饲料饲养。造模组所有大鼠通过腹腔内注射STZ溶液、慢性孤养和不可预见性中等刺激造模,建立糖尿病合并抑郁大鼠模型,并将其随机分为5组,分别为模型组(B组)、阳性对照组(C组)、针刺组(D组)、疏肝解郁方组(E组)和疏肝解郁方联合针刺组(F组)。A组与B组给予等剂量生理盐水灌胃;C组给予临床等效剂量二甲双胍(0.18 g/kg)加百忧解(1.8 mg/kg)灌胃治疗;D组统一于每天早上10点进针刺百会、后三里、三阴交;E组给予疏肝解郁方(柴胡6 g,陈皮6 g,川芎6 g,党参8 g,白术8 g,茯苓8 g,香附5 g,白芍5 g,甘草3 g)临床等效剂量3.5 g/kg标准灌胃;F组治疗方法为针刺加疏肝解郁方。治疗7 d后测定空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),RT-PCR法检测胰岛素受体(IR)、胰岛素底物-1(IRS-1)mRNA表达,Western-bloting法检测大鼠海马组织CaM、CaMKⅡ、ERK1/2表达。结果与A组比较,B组FBG、HbA1c、HOMA-IR均明显升高(P<0.05),肝组织IR、IRS-1 mRNA和海马组织CaM、CaMKⅡ、ERK1/2明显降低(P<0.05);与B组比较,C、D、E、F组FBG、HbA1c、HOMA-IR、IR、IRS-1 mRNA、CaM、CaMKⅡ、ERK1/2明显统计学差异(P<0.05);F组FBG、HbA1c、HOMA-IR、IR、IRS-1 mRNA、CaM、CaMKⅡ、ERK1/2与D、E组比较有显著差异(P<0.05),除CaMKⅡ表达外与C组比较无明显差异(P>0.05)。结论疏肝解郁法联合针刺治疗糖尿病合并抑郁大鼠的机制可能与改善血糖异常,提高肝组织IR、IRS-1的基因表达从而改善胰岛素的信号传导,激活ERK1/2、CaMK信号通路调节大鼠海马神经元再生有关。 展开更多

关键词 疏肝解郁法 针刺 糖尿病合并抑郁 大鼠 血糖 胰岛素受体 erk1/2 CAMK

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IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制人脐带间充质干细胞CD200表达抑制巨噬细胞M2极化

3

作者 朱永朝 李莉 +5 位作者 王拯 谭希鹏 陶金 丁璐 董辉 叶鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期193-198,共6页

目的探究白细胞介素1β(IL-1β)调控人脐带间充质干细胞CD200表达及其对巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法无血清培养基分离培养获得人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),形态学观察及流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、... 目的探究白细胞介素1β(IL-1β)调控人脐带间充质干细胞CD200表达及其对巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法无血清培养基分离培养获得人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),形态学观察及流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、人类白细胞抗原DR(HLA-DR)的表达,确定间充质干细胞属性;20 ng/mL IL-1β处理hUC-MSC 24 h,流式细胞术检测CD200阳性细胞率,实时定量PCR和Western blot法检测CD200 mRNA和蛋白表达水平;佛波酯(PMA)诱导THP-1巨噬细胞活化,并与IL-1β处理感染CD200过表达慢病毒的hUC-MSC共培养,流式细胞术检测CD11c和CD206阳性细胞比例;IL-1β联合细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂PD98059处理hUC-MSC,Western blot法检测细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号分子与CD200的表达。结果IL-1β显著下调hUC-MSC CD200蛋白表达与CD200阳性细胞率;过表达CD200显著上调hUC-MSC CD200表达,且CD200过表达hUC-MSC提高巨噬细胞CD206阳性细胞比率;IL-1β激活hUC-MSC的ERK1/2信号通路,PD98059上调IL-1β处理后hUC-MSC中CD200的蛋白表达。结论IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制CD200的表达,进而抑制hUC-MSC对巨噬细胞向M2型极化的促进作用。 展开更多

关键词 白细胞介素1β(IL-1β) 人脐带间充质干细胞(hUC-MSC) CD200 巨噬细胞极化 细胞外信号调节激酶1/2(erk1/2)

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microRNA125a-3p对滋养层细胞功能的调控作用及机制 被引量：1

4

作者 刘倩 张琦 谢青贞 《生殖医学杂志》 CAS 2023年第2期260-268,共9页

目的观察microRNA125a-3p(miR-125a-3p)在滋养层细胞中的表达,探讨其对滋养层细胞增殖、侵袭和凋亡的调控及机制。方法荧光实时定量PCR检测人滋养层细胞系HTR-8/SVneo、绒癌细胞系JAR和JEG-3中miR-125a-3p的表达情况。以HTR-8/SVneo和JE... 目的观察microRNA125a-3p(miR-125a-3p)在滋养层细胞中的表达,探讨其对滋养层细胞增殖、侵袭和凋亡的调控及机制。方法荧光实时定量PCR检测人滋养层细胞系HTR-8/SVneo、绒癌细胞系JAR和JEG-3中miR-125a-3p的表达情况。以HTR-8/SVneo和JEG-3细胞为实验对象,分为3组:空白对照组(CK组),未做任何处理;阴性对照组(NC组),转染NC-inhibitor;实验组(inhibitor组),转染miR-125a-3p inhibitor。以Transwell、流式细胞仪、CCK8法分别检测细胞的侵袭、凋亡及增殖能力。Western blot检测Fyn蛋白表达情况及ERK1/2、STAT3磷酸化水平。荧光实时定量PCR检测Fyn mRNA水平,免疫共沉淀法检测Fyn活性水平。结果miR-125a-3p mRNA表达水平在HTR-8/SVneo、JAR和JEG-3细胞中依次降低,两两比较均有统计学差异(P<0.01)。抑制HTR-8/SVneo和JEG-3中miR-125a-3p后,细胞的凋亡水平明显降低,侵袭和增殖能力均明显升高(P<0.05);Fyn mRNA和蛋白的表达及活性水平均明显升高(P<0.05);ERK1/2及STAT3的磷酸化水平均不同程度增加(P<0.05)。结论本研究首次在滋养层细胞中检测到miR-125a-3p的表达。miR-125a-3p通过作用于Fyn和ERK1/2-STAT3信号通路可抑制滋养层细胞的增殖、侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 miR-125a-3p 滋养层细胞 酪氨酸激酶 细胞外信号调节激酶(erk1/2) 信号传导和转录激活因子3(STAT3)

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髁突软骨诱导外源性骨髓间充质干细胞成软骨分化的实验研究 被引量：4

5

作者 张赵一淳 鹿蕾 +3 位作者 于世宾 杨鸿旭 叶涛 冯剑颖 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期417-421,共5页

目的:研究正常和骨关节炎髁突软骨诱导外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化能力的差别及调节机制。方法:采用单侧前牙反[牙合](UAC)诱导的颞下颌关节骨关节炎动物模型。BMSCs分别与正常髁突软骨(对照组)和UAC髁突软骨(实验组)在tra... 目的:研究正常和骨关节炎髁突软骨诱导外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化能力的差别及调节机制。方法:采用单侧前牙反[牙合](UAC)诱导的颞下颌关节骨关节炎动物模型。BMSCs分别与正常髁突软骨(对照组)和UAC髁突软骨(实验组)在transwell系统中共培养48 h,用realtime-PCR检测BMSCs中Col2a1基因表达情况,用甲苯胺蓝染色及免疫荧光染色观察BMSCs软骨基质表达情况和c-myc和ERK1/2表达情况。结果:BMSCs与对照组和UAC组细胞培养后,甲苯胺蓝染色均为阳性,Col2a1的mRNA表达水平均升高,UAC组BMSCs比对照组共培养的BMSCs表达低。共培养的BMSCs的c-myc和ERK1/2均为阳性,但与UAC组共培养的BMSCs的c-myc和ERK1/2表达水平较对照组共培养的低。结论:骨关节炎软骨较正常软骨诱导BMSCs成软骨分化能力弱,c-myc和ERK1/2可能参与了髁突软骨诱导的BMSCs成软骨分化。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 成软骨分化 髁突软骨 Ⅱ型胶原(Col2a1) c-myc 细胞外信号调节激酶1和2(erk1/2)

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丹参素对肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响 被引量：4

6

作者 李智 戴立里 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1679-1682,共4页

目的:观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB(Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(Phosphorylated extracellular signal-regulat... 目的:观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB(Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(Phosphorylated extracellular signal-regulated kinase1/2,P-ERK1/2)表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制。方法:四甲基偶氮唑盐法检测大鼠HSC增殖活性;免疫细胞化学染色法测定大鼠HSCⅠ型胶原合成的表达;Western blot测定大鼠肝星状细胞P-ERK1/2的表达。结果:丹参素有抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原表达,P-ERK1/2表达的作用。结论:丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关。 展开更多

关键词 丹参素 肝星状细胞 血小板衍生生长因子-BB 细胞外信号转导激酶1/2

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健脾理气法对功能性消化不良大鼠的治疗作用及其机制的研究 被引量：3

7

作者 王霄娜 王贝贝 +3 位作者 周滔 张红 张声生 谷利 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2012年第7期297-300,共4页

[目的]观察健脾理气法对脾虚气滞型功能性消化不良(FD)大鼠的治疗作用及其分子生物学机制。[方法]60只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常组,治疗组,对照组,模型组。后3组采用夹尾刺激法制备FD模型,各组分别以0.85%氯化钠、健脾理气中药、... [目的]观察健脾理气法对脾虚气滞型功能性消化不良(FD)大鼠的治疗作用及其分子生物学机制。[方法]60只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常组,治疗组,对照组,模型组。后3组采用夹尾刺激法制备FD模型,各组分别以0.85%氯化钠、健脾理气中药、0.85%氯化钠、安慰剂灌胃,1周后检测大鼠胃动力,胃窦及血清中钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的含量以及胃窦细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平。[结果]与正常组相比,模型组大鼠胃动力降低,血清及胃窦中CaMKⅡ含量降低,胃窦ERK1/2磷酸化水平降低;经健脾理气中药治疗后,大鼠胃动力明显改善,血清及胃窦中CaMKⅡ含量有所恢复。[结论]CaMKⅡ的表达及ERK1/2的活性与FD存在一定的关系,二者含量和活性的降低可能是FD发病的机制之一;健脾理气法不影响ERK1/2的活性,但可能通过增加CaMKⅡ表达,促进胃动力,达到治疗FD目的。 展开更多

关键词 消化不良 功能性 健脾理气法 钙调蛋白激酶Ⅱ 细胞外信号调节激酶1/2

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AcSDKP经由PDGF介导的细胞外信号调节激酶1/2的调节通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用 被引量：2

8

作者 罗玲 杨奕 +4 位作者 徐洪 李倩 张丽娟 魏中秋 杨方 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期106-110,F0003,共6页

探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型... 探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养。HE染色观察肺组织形态学变化,Western blot法检测肺组织、肺成纤维组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白的表达以及肺组织PDGF及其受体蛋白的表达。与对照比较,矽肺大鼠肺内PDGF及其受体蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白以及磷酸化-ERK1/2蛋白表达均增强,而AcSDKP治疗组则见上述蛋白表达减弱;在培养的肺成纤维细胞,PDGF能够刺激其Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,同时上调磷酸化-ERK1/2蛋白的表达,而AcSDKP则显示出与PD98059(细胞外信号调节激酶通路特异性抑制剂)相同的作用,即能够抑制PDGF刺激成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达和上调磷酸化-ERK1/2蛋白表达。提示AcSDKP可能通过阻断PDGF介导的ERK1/2信号转导通路抑制矽肺纤维化的形成与发展。 展开更多

关键词 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP) 血小板源性生长因子(PDGF) 肺成纤维细胞 细胞外信号调节激酶1/2(erk1/2) 矽肺

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碱性成纤维细胞生长因子对卵巢癌的影响 被引量：2

9

作者 刘萍 李新鸣 +4 位作者 孙黎光 文涛 侯伟健 于卉影 赵晓光 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期702-703,共2页

目的观察Ras-Raf-ERK 1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖和凋亡影响,探讨bFGF及其信号转导途径与卵巢癌发生发展关系。方法以bFGF和促细胞分裂剂激活性蛋白激酶1(MEK1)抑制剂PD98059处理CAOV3细胞... 目的观察Ras-Raf-ERK 1/2途径介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖和凋亡影响,探讨bFGF及其信号转导途径与卵巢癌发生发展关系。方法以bFGF和促细胞分裂剂激活性蛋白激酶1(MEK1)抑制剂PD98059处理CAOV3细胞,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白印迹(Western blot)检测细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的活性。结果bFGF处理后细胞增殖比明显增加,且与bFGF水平呈剂量依赖关系,bFGF浓度为75 ng/ml时细胞增殖比最高为140%;bFGF使无血清诱导的凋亡细胞比例下降[(33.20±5.32)%^(2.38±3.36)%];bFGF诱导ERK1/2活性增高。PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论bFGF通过Ras-Raf-ERK 1/2途径介导,促进卵巢癌CAOV3细胞增殖,抵抗无血清诱导凋亡。在卵巢癌发生发展过程中,bFGF信号传递发挥了重要作用。 展开更多

关键词 卵巢癌 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 细胞外信号调节蛋白激酶1/2(erk1/2)增殖 凋亡

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脑啡肽乙酸酯对大鼠急性全脑缺血－再灌注后海马区神经元保护的机制研究 被引量：2

10

作者 梁庆 梁子敬 +6 位作者 林俊敏 郭伟 郭锻强 韩洁韵 黄伟青 邝素华 杨志华 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期539-543,I0002,共6页

目的：研究脑啡肽乙酸酯（ DADLE）是否通过调控胞外信号调控激酶（ ERK）信号转导通路而抑制大鼠急性全脑缺血－再灌注后海马区神经细胞凋亡。方法健康雌性SD大鼠50只（180～220 g）随机分为五组，建立大鼠急性全脑缺血－再灌注模型：... 目的：研究脑啡肽乙酸酯（ DADLE）是否通过调控胞外信号调控激酶（ ERK）信号转导通路而抑制大鼠急性全脑缺血－再灌注后海马区神经细胞凋亡。方法健康雌性SD大鼠50只（180～220 g）随机分为五组，建立大鼠急性全脑缺血－再灌注模型：假手术组（ Sham组，n＝10），只行手术分离血管，不予结扎血管及再灌注；缺血－再灌注组（I／R组，n＝10），缺血15 min，再灌注120 min；DADLE＋PD98059组（DA＋PD组，n＝10），缺血15 min后再灌注开始前静脉注射DADLE（3 mg／kg）及PD98059（0．3 mg／kg），然后行再灌注120 min； PD98059组（PD组，n＝10），缺血15 min后再灌注开始前静脉注射PD98059（0．3 mg／kg）；DADLE处理组（DA组，n＝10），缺血15 min后再灌注开始前静脉注射DADLE（3 mg／kg），然后行再灌注120 min。 HE染色观察各组海马CA1区神经元病理变化情况，TUNEL法检测大鼠海马凋亡细胞，Western blot检测脑组织磷酸化ERK1／2（P－ERK1／2）的表达状况。结果 HE染色显示，I／R组、DA＋PD组、PD组、DA组较Sham组正常神经元细胞计数显著减少（P＜0．01）；DA组神经元的损伤、脱失、细胞肿胀均较I／R组轻，正常神经元细胞计数较I／R组显著增多（P＜0．01）；PD组、DA＋PD组及I／R组正常神经元细胞计数组间两两比较差异无统计学意义。 TUNEL法检测显示，I／R组、DA＋PD组、PD组、DA组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡指数均较Sham组显著升高（P＜0．01）；与I／R组比较，DA＋PD组及DA组凋亡指数显著下降（P＜0．01），PD组凋亡指数则升高（P＜0．05）；DA＋PD组、PD组及DA组组间两两比较差异有统计学意义（ P＜0．01）。Western blot检测显示，I／R组（0．69±0．07）、DA＋PD组（0．59±0．03）及DA组（0．83±0．06）的P－ERK1／2表达较Sham组（0．42±0．06）增多（P＜0．01），而PD组（0．41±0．05）则无显著� 展开更多

关键词 脑啡肽乙酸酯( DADLE) 全脑 缺血-再灌注 胞内细胞外信号调节激酶1/2(erk1/2) 神经细胞凋亡 大鼠

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细胞外信号调节激酶1/2在白介素-1β抑制胰岛β细胞葡萄糖刺激下胰岛素分泌中的作用 被引量：2

11

作者 李超 合湫 +4 位作者 王敏 苏恒 李清竹 沈涛 薛元明 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期558-561,共4页

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在人IL-1β抑制小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC-6)葡萄糖刺激下胰岛素分泌反应(GSIS)中的作用。方法 (1)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60m... 目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在人IL-1β抑制小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC-6)葡萄糖刺激下胰岛素分泌反应(GSIS)中的作用。方法 (1)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度;(2)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5 mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5min,蛋白质免疫印迹法检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平;(3)βTC-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15ng/ml)培养24h后于含1.38mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,检测上清液中胰岛素浓度;(4)βTC-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15ng/ml)培养24h后于含1.38mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5min,检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平。结果 (1)βTC-6细胞在1.38mmol/L葡萄糖刺激时胰岛素分泌及ERK1/2磷酸化水平均达到高峰;(2)IL-1β可抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的ERK1/2磷酸化及胰岛素分泌,作用与剂量呈正相关。结论 ERK1/2信号转导通路可能在IL-1β抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的胰岛素分泌反应中发挥重要作用。 展开更多

关键词 细胞外信号调节激酶1/2 信号转导通路 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞 糖尿病

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非酶糖基化终末产物介导的ERK1/2信号转导通路在大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌中的作用 被引量：1

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作者 戚亚伟 胡传银 +2 位作者 陈绍红 赵云涛 刘铀 《海南医学》 CAS 2017年第1期1-5,共5页

目的探讨非酶糖基化终末产物(AGEs)对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其潜在机制。方法首先,原代培养大鼠睾丸间质细胞,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定;其次,MTT法测定不同浓度的AGEs(25μg/m L、50μg/m L、100μg/... 目的探讨非酶糖基化终末产物(AGEs)对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其潜在机制。方法首先,原代培养大鼠睾丸间质细胞,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定;其次,MTT法测定不同浓度的AGEs(25μg/m L、50μg/m L、100μg/m L、200μg/m L)及200μg/m L BSA作用Leydig细胞后的细胞活力;最后,用不同浓度的AGEs及200μg/m L BSA预处理Leydig细胞12 h,之后更换含相应浓度AGEs或BSA的培养基并加入终浓度为4 U/m L的h CG,其中对照组不含AGEs和BSA,ELISA法和Western blot分别检测睾酮分泌量和p-ERK1/2的表达量。结果 MTT法表明AGEs(≤200μg/m L)对Leydig细胞的活力在本实验所研究的时间内没有影响;ELISA法和Western blot结果显示,不同浓度AGEs处理后,h CG诱导的Leydig细胞睾酮合成量和ERK1/2蛋白的磷酸化都呈现浓度依赖性下降,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 AGEs通过抑制ERK1/2的磷酸化降低大鼠Leydig cells睾酮的分泌。 展开更多

关键词 非酶糖基化终产物 睾丸间质细胞细胞 细胞外调节蛋白激酶 睾酮

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ERK1/2在三倍体湘云鲫组织及胚胎中的表达分析

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作者 罗仲文 蒋明贵 +4 位作者 周勇华 文胜 汪妹 刘少军 肖亚梅 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期11-13,42,共4页

在细胞信号网络中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传递途径起着极为重要的作用,控制着细胞多种生理过程,如细胞生长、发育、分裂、死亡等.ERK是MAPK家族重要的成员,通过检测三倍体湘云鲫胚胎和成体组织... 在细胞信号网络中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传递途径起着极为重要的作用,控制着细胞多种生理过程,如细胞生长、发育、分裂、死亡等.ERK是MAPK家族重要的成员,通过检测三倍体湘云鲫胚胎和成体组织中ERK1/2的表达情况,初步研究ERK在鱼类发育中的作用.蛋白免疫杂交结果显示ERK1/2在三倍体湘云鲫的胚胎发育各个时期和组织中均有较高的表达,该结果表明ERK在鱼类发育的过程中发挥重要的作用. 展开更多

关键词 湘云鲫 细胞外调节激酶1 2(erk1 2) 蛋白免疫印迹杂交

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siRNA干扰ERK1/2表达对食管癌细胞ezrin基因的转录调控作用

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作者 高书颖 李恩民 +2 位作者 陆晓峰 杜则澎 许丽艳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-494,共4页

目的检测siRNA干扰细胞外信号调节激酶ERK1/2基因表达对ezrin基因的转录调控作用,探讨食管癌细胞ezrin基因的表达调控机制。方法采用定量RT-PCR技术,检测转染ERK1/2siRNA对食管癌EC109细胞ERK1/2和ezrin基因mRNA表达水平的影响;采用双... 目的检测siRNA干扰细胞外信号调节激酶ERK1/2基因表达对ezrin基因的转录调控作用,探讨食管癌细胞ezrin基因的表达调控机制。方法采用定量RT-PCR技术,检测转染ERK1/2siRNA对食管癌EC109细胞ERK1/2和ezrin基因mRNA表达水平的影响;采用双荧光素酶报告基因分析系统,检测siRNA干扰ERK1/2表达对EC109细胞ezrin基因启动子活性的影响。结果在食管癌EC109细胞中,转染ERK1/2siRNA,降低ERK1/2和ezrin基因的mRNA表达水平以及ezrin基因启动子活性。结论 ERK1/2对食管癌细胞ezrin基因的转录具有调控作用。 展开更多

关键词 EZRIN基因 食管癌细胞 定量RT-PCR 细胞外信号调节激酶1/2 荧光素酶活性检测

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从脑肠轴探讨黄芪建中汤对胃溃疡大鼠肝细胞生长因子及ERK1/2和TFF3蛋白表达的影响 被引量：3

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作者 陈思清 韩运宗 +2 位作者 刘琴 周姝 周赛男 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第12期1651-1655,1728,共6页

目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠胃组织中肝细胞生长因子(HGF)及下丘脑和海马区中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及肠三叶因子3(TFF3)蛋白表达的影响,探究黄芪建中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用及可能机制。方法用随... 目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠胃组织中肝细胞生长因子(HGF)及下丘脑和海马区中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及肠三叶因子3(TFF3)蛋白表达的影响,探究黄芪建中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用及可能机制。方法用随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、奥美拉唑组和黄芪建中汤组,每组15只。正常组隔日蒸馏水灌胃,每日不限饮食;其余组大鼠先以小承气汤结合饥饱失常法复制脾胃虚寒证模型,实验第11天采用冰醋酸法建立胃溃疡模型。之后模型组继续隔日上午给予小承气汤并当日禁食,次日恢复饮食,共持续20 d;奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠除同模型组的每日处理外,每日下午分别给予4.2 mg/(kg·d)奥美拉唑和6.8 g/(kg·d)黄芪建中汤灌胃;正常组隔日上午及每日下午给予蒸馏水灌胃。实验结束后摘取各组大鼠胃,记录溃疡大小并计算胃溃疡指数,HE染色观察胃组织病理形态,免疫组化染色检测胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白阳性表达情况。结果正常组大鼠胃黏膜正常,未见溃疡点及糜烂斑等;模型组大鼠胃黏膜皱襞存在中断,有点状溃疡、糜烂及大量炎性细胞浸润;黄芪建中汤组与奥美拉唑组胃黏膜损伤较模型组轻,有少量炎性细胞浸润,未见明显溃疡。奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠的胃溃疡指数均明显低于模型组(P均<0.05),胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白表达平均光密度均明显高于模型组(P均<0.05)。结论黄芪建中汤能促进脾胃虚寒型胃溃疡大鼠溃疡愈合,上调HGF、ERK1/2及TFF3的表达可能是其基于脑肠轴治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用机制之一。 展开更多

关键词 胃溃疡 脑肠轴 脾胃虚寒证 黄芪建中汤 肝细胞生长因子 细胞外信号调节激酶1/2 肠三叶因子3

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细胞外调节蛋白激酶1/2在小鼠胰岛瘤βTC-6细胞胰岛素分泌功能中的作用探讨 被引量：2

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作者 刘丽娟 合湫 +2 位作者 苏恒 薛元明 严新民 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-168,共4页

目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2信号转导通路在βTC-6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)反应中的作用。方法采用不同浓度葡萄糖刺激βTC-6细胞,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度,Western blot检测细胞裂解物ERK1/2磷酸化水平。... 目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2信号转导通路在βTC-6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)反应中的作用。方法采用不同浓度葡萄糖刺激βTC-6细胞,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度,Western blot检测细胞裂解物ERK1/2磷酸化水平。采用MEK抑制剂PD98059处理βTC-6细胞,放射免疫法检测葡萄糖刺激后上清液中胰岛素浓度,Western blot检测葡萄糖刺激后ERK1/2磷酸化水平。结果βTC-6细胞在1.38mmol/L葡萄糖刺激时,胰岛素分泌和ERK1/2磷酸化水平达高峰。PD98059可抑制葡萄糖刺激下ERK1/2磷酸化及胰岛素分泌,作用与剂量呈正相关。结论ERK1/2信号转导通路可能在βTC-6细胞GSIS中发挥作用。 展开更多

关键词 细胞外调节蛋白激酶1/2信号转导通路 βTC-6细胞 糖尿病

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金粉蕨素拮抗氧化损伤所抑制的内皮细胞增殖的作用及其机制 被引量：6

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作者 郭玉 朱炳阳 +1 位作者 严奉祥 廖端芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期401-403,共3页

目的　探讨金粉蕨素拮抗Menadione氧化损伤所抑制的内皮细胞增殖的作用及其机制。方法　以Menadione(O- 2 )损伤人脐静脉内皮细胞作为氧化损伤模型 ,采用MTT法和细胞计数法 ,观察不同浓度金粉蕨素对Menadione损伤内皮细胞生长抑制率的影... 目的　探讨金粉蕨素拮抗Menadione氧化损伤所抑制的内皮细胞增殖的作用及其机制。方法　以Menadione(O- 2 )损伤人脐静脉内皮细胞作为氧化损伤模型 ,采用MTT法和细胞计数法 ,观察不同浓度金粉蕨素对Menadione损伤内皮细胞生长抑制率的影响 ;利用硝酸还原酶法测定培养液中NO含量 ;以Westernblot检测细胞eNOS活性及磷酸化ERK1 / 2的表达。结果　金粉蕨素保护组与损伤组相比 ,内皮细胞的生长抑制率明显降低 ,培养液中NO含量增高 ,eNOS活性增强 ,磷酸化ERK1 / 2表达上调。结论　NO和ERK1 / 展开更多

关键词 金粉蕨素 内皮细胞 一氧化氮合酶 细胞外信号调节激酶

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磷酸化ERK1/2与Cyclin D1、VEGF在非小细胞肺癌中表达的关系 被引量：5

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作者 聂蓉 朱润庆 +4 位作者 姚飞 柯尊富 夏东 王敏 刘铭球 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期276-279,i004,共5页

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)中磷酸化细胞外信号调节激酶(PERK1/2)及靶基因产物CyclinD1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达关系,探讨PERK1/2在NSCLC发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学技术检测10例正常肺组织和64例NSCLC组织中P... 目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)中磷酸化细胞外信号调节激酶(PERK1/2)及靶基因产物CyclinD1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达关系,探讨PERK1/2在NSCLC发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学技术检测10例正常肺组织和64例NSCLC组织中PERK1/2、CyclinD1和VEGF的表达情况,并与临床病理特征进行统计学分析。结果:NSCLC组织中PERK1/2、CyclinD1和VEGF的阳性表达率分别为57.8%、60.9%和71.9%,正常肺组织均为阴性表达;PERK1/2的核内表达和VEGF的表达率与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05),CyclinD1的阳性表达率与肿瘤的分化程度及淋巴结转移相关(P<0.05);PERK1/2的核内表达与CyclinD1在NSCLC中的表达呈线性相关(P<0.05)。结论:PERK1/2介导的信号转导事件可能在NSCLC发生、发展过程中起重要促进作用。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 细胞外信号调节激酶 磷酸化 免疫组织化学

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人肺癌细胞的肿胀应激及其信号通路分析 被引量：1

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作者 蒋润民 孙淳 +3 位作者 谭嘉毅 周波言 张丰 姜涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期542-547,共6页

目的通过比较肺癌与对应癌旁组织的含水量、细胞核大小以及丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)磷酸化激活情况以明确肺癌细胞是否存在肿胀应激。方法采用干湿质量比较法检测10例人肺腺癌、12例肺鳞癌以及对应的癌旁正常肺组织新鲜标本的含水量差... 目的通过比较肺癌与对应癌旁组织的含水量、细胞核大小以及丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)磷酸化激活情况以明确肺癌细胞是否存在肿胀应激。方法采用干湿质量比较法检测10例人肺腺癌、12例肺鳞癌以及对应的癌旁正常肺组织新鲜标本的含水量差别。用磷酸化和非磷酸化抗体结合免疫组织化学染色方法,检测30例肺腺癌、32例肺鳞癌、10例正常肺泡上皮细胞和10例正常肺支气管上皮细胞c-Jun氨基末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38 MAPK的表达及磷酸化激活情况。最后采用HE染色结合图像分析软件估算肺腺癌和肺鳞癌的癌细胞和对应癌旁正常肺泡上皮细胞及支气管上皮细胞的细胞核大小差别。结果干湿质量比较法发现肺鳞癌和肺腺癌的平均含水量均显著高于其对应的癌旁正常组织。免疫组织化学染色发现p38 MAPK在肺腺癌和肺鳞癌及癌旁组织均高表达。ERK在肺腺癌和鳞癌组织均弱表达,但是在肺癌旁组织高表达。JNK在肺腺癌及癌旁组织均弱表达。在肺泡上皮组织和支气管上皮组织中JNK、p38 MAPK、ERK1/2均未被磷酸化激活。但是,肺腺癌、肺鳞癌组织中JNK被磷酸化激活,而p38 MAPK及ERK1/2未被磷酸化激活。肺癌细胞的细胞核明显大于对应的正常肺上皮细胞的细胞核。结论肺癌细胞存在肿胀应激,不同组织类型肺癌细胞肿胀的信号通路存在差异。 展开更多

关键词 肿胀应激 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK) c-Jun氨基末端激酶(JNK) 胞外信号调节激酶1/2(erk1/2) 肺鳞癌 肺腺癌

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哺乳动物黄体生成素(LH)峰效应由颗粒细胞向卵母细胞传递的分子通路 被引量：2

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作者 刘洋 徐晋 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期624-630,共7页

血液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)在排卵前形成一个极大的峰值,LH与壁层颗粒细胞中的LH受体(LHR)结合诱导类表皮生长因子(EGF)的表达,通过自分泌和旁分泌的作用激活颗粒细胞与卵丘细胞中的EGF受体(EGFR)、大鼠肉瘤病毒致癌基因... 血液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)在排卵前形成一个极大的峰值,LH与壁层颗粒细胞中的LH受体(LHR)结合诱导类表皮生长因子(EGF)的表达,通过自分泌和旁分泌的作用激活颗粒细胞与卵丘细胞中的EGF受体(EGFR)、大鼠肉瘤病毒致癌基因(KRAS)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),激活的ERK1/2诱导表达前列腺素合成酶2(PTGS2)、类固醇合成快速调节蛋白(STAR)、透明质酸合成酶2(HAS2)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白6(TNFAIP6)产生的前列腺素又和卵丘细胞上的PTGER2结合,激活p38MAPK,这一LH作用的信号转导通路最终刺激卵丘扩展卵母细胞成熟并最终排卵。 展开更多

关键词 排卵 黄体生成素(LH) 分子机制 细胞外信号调节激酶1/2(erk1/2)

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