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蝴蝶兰外植体褐变发生与总酚含量、PPO、POD和PAL的关系 被引量:37
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作者 许传俊 李玲 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期671-674,共4页
蝴蝶兰外植体在褐变发生前期PPO和POD活力皆升高,褐变发生后酶活力下降。同工酶谱分析发现,培养0d的蝴蝶兰外植体PPO没有酶带出现,而POD有1条弱带。离体培养2d POD出现3条酶带,第4天有新酶带Ⅰ发生,随后消失,其余3条带,随培养天数的延长... 蝴蝶兰外植体在褐变发生前期PPO和POD活力皆升高,褐变发生后酶活力下降。同工酶谱分析发现,培养0d的蝴蝶兰外植体PPO没有酶带出现,而POD有1条弱带。离体培养2d POD出现3条酶带,第4天有新酶带Ⅰ发生,随后消失,其余3条带,随培养天数的延长,酶带活性渐弱。PPO同工酶谱在培养2d出现3条酶带,迁移率为0·28的酶带Ⅲ在培养4d活性较强,随后3条酶带减弱。总酚含量和PAL活力随外植体褐变增强而逐渐增加,两者呈现极显著正相关。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 PPO POD PAL 外植体褐变 总酚
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蝴蝶兰叶片外植体褐变过程中PAL基因的表达变化 被引量:9
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作者 许传俊 李红 李玲 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期50-54,共5页
研究了蝴蝶兰(Phalaenopsis sp.)叶片外植体褐变过程中PAL基因表达的变化。结果表明,在整个褐变过程中,外植体的PAL基因表达出现差异,离体培养第3天的表达明显提高,一直到第8天还维持较高表达水平,以后随着外植体褐变的加重,PAL基因表... 研究了蝴蝶兰(Phalaenopsis sp.)叶片外植体褐变过程中PAL基因表达的变化。结果表明,在整个褐变过程中,外植体的PAL基因表达出现差异,离体培养第3天的表达明显提高,一直到第8天还维持较高表达水平,以后随着外植体褐变的加重,PAL基因表达水平逐渐降低。与对照相比,在Fe盐浓度加倍为55.6 mg L-1培养基中培养的外植体PAL基因表达水平提高发生的时间比对照早,培养第2天就明显增强,随培养天数的延长,一直维持较高的表达水平;其PAL活性也高于对照,两种培养条件下,外植体总酚含量都随着其褐变加重而增加,说明PAL基因表达与蝴蝶兰外植体褐变过程相关。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 外植体褐变 苯丙氨酸解氨酶 半定量RT-PCR
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The Effects of Polyphenol Oxidase and Cycloheximide on the Early Stage of Browning in Phalaenopsis Explants 被引量:5
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作者 XU Chuanjun RU Zhiwei +4 位作者 LI Ling ZENG Biyu HUANG Junmei HUANG Wen HU Ou 《Horticultural Plant Journal》 SCIE 2015年第3期172-180,共9页
Explant browning is one of the major problems in the tissue culture process, and polyphenol oxidase(PPO), is the major proteases involved in plant tissue browning. We investigated the effects of polyphenol oxidase on ... Explant browning is one of the major problems in the tissue culture process, and polyphenol oxidase(PPO), is the major proteases involved in plant tissue browning. We investigated the effects of polyphenol oxidase on the early stage of browning in explants of the orchid Phalaenopsis. Our results show that PPO activity was significantly higher in explants cultured for 3 d than in the 0 h control. The levels of PPO transcripts and PPO protein were significantly higher in explants cultured for 6 h compared to the 0 h control; these high expression levels were maintained over increasing cultivation time. Cycloheximide(CHX) treatment reduced PPO transcript levels, PPO protein levels, and PPO enzyme activity. High levels of PPO m RNA and PPO protein were detected in the cytoplasm and vascular bundles of Phalaenopsis explants cultured for 6 h compared to explants cultured for 0 h, 24 h, and 3 d. CHX treatment did not significantly affect the distribution of PPO m RNA and PPO protein in explant tissues, but their levels were significantly lower than those of the untreated control. 展开更多
关键词 PHALAENOPSIS PPO explant browning CHX gene expression
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3种抗褐化剂影响水曲柳体胚发生的生理分析 被引量:7
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作者 彭春雪 崔雪梅 +3 位作者 刘春苹 杨玲 王秋水 沈海龙 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期252-258,共7页
水曲柳体胚发生过程中往往伴随褐化现象的产生,并且大多体胚生长在褐化的外植体上,为解析外植体褐化和体胚发生之间的联系,本研究通过在培养基中添加PVP(聚乙烯毗咯烷酮)、L-Glu(L-谷氨酸)和AgNO_3(硝酸银),探究其对外植体褐化、体胚发... 水曲柳体胚发生过程中往往伴随褐化现象的产生,并且大多体胚生长在褐化的外植体上,为解析外植体褐化和体胚发生之间的联系,本研究通过在培养基中添加PVP(聚乙烯毗咯烷酮)、L-Glu(L-谷氨酸)和AgNO_3(硝酸银),探究其对外植体褐化、体胚发生和生理生化的影响。研究结果表明:(1)低浓度(0. 1、0. 5 g·L^(-1)) PVP和100 mg·L^(-1)L-Glu处理加剧了外植体褐化,但显著促进了体胚发生,并且体胚发生率高达60%以上(分别比对照组提高了6. 59%、24. 08%和22. 88%);(2) 200 mg·L^(-1)L-Glu处理有效降低了外植体褐化,褐化率为68. 11%(相比对照组降低了5. 83%),但是体胚发生率降低,其发生率为46. 32%(相较于对照组降低了22. 8%);(3) 3种抗褐化剂处理后外植体细胞内的多酚氧化酶活性(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均低于对照组,过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量均高于对照组。因此,研究表明低浓度的抗褐化剂可以促进体胚发生,在这个过程中涉及到POD活性升高和MDA含量增加。本研究为解析水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生物学机理以及水曲柳体胚高频发生提供理论依据。 展开更多
关键词 水曲柳 体胚发生 外植体褐化 抗氧化酶活性
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PPO处理对水曲柳合子胚子叶外植体褐化和体胚发生的影响 被引量:6
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作者 孙倩 杨玲 +2 位作者 沈海龙 李玉花 黄剑 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1-5,9,共6页
以水曲柳合子胚子叶为外植体诱导体胚发生,通过在液体培养基中加入不同质量浓度的多酚氧化酶(PPO),研究其对外植体褐化和体胚发生的影响。结果表明:在培养30 d后,发生体胚的外植体基本上都是褐化的,且这些发生体胚的外植体具有活细胞的... 以水曲柳合子胚子叶为外植体诱导体胚发生,通过在液体培养基中加入不同质量浓度的多酚氧化酶(PPO),研究其对外植体褐化和体胚发生的影响。结果表明:在培养30 d后,发生体胚的外植体基本上都是褐化的,且这些发生体胚的外植体具有活细胞的脆性和弹性,证明了前期研究中"水曲柳体胚发生伴随外植体褐化现象是稳定的"的结论;50 mg·L-1的PPO处理,可以显著促进水曲柳未成熟合子胚子叶外植体的褐化进程,相应地显著提高了其体胚发生率,培养第10天时外植体褐化率、总的体胚发生率和培养10 d时褐化外植体的体胚发生率,均显著高于对照和其他质量浓度的PPO处理;50 mg·L-1的PPO处理,也显著促进了水曲柳成熟合子胚子叶外植体的褐化进程,体胚发生率高于其他处理和对照,但差异未达显著水平;体胚发生前期,50 mg·L-1外源PPO处理的未成熟水曲柳,其外植体内源的PPO活性大于对照,POD和CAT活性低于对照。 展开更多
关键词 水曲柳 体胚发生 外植体褐化 多酚氧化酶处理
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5-氮胞苷对水曲柳合子胚外植体状态及体胚发生的影响 被引量:6
6
作者 刘艳 沈海龙 丛建民 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期25-27,32,共4页
通过在培养基中添加5-氮胞苷,研究了其对水曲柳合子胚外植体状态和体胚发生的影响。在培养开始时加入不同浓度的5-氮胞苷会抑制水曲柳愈伤组织发生和水曲柳体胚发生。各浓度处理的愈伤组织诱导率均低于未添加5-氮胞苷的对照,且差异显著... 通过在培养基中添加5-氮胞苷,研究了其对水曲柳合子胚外植体状态和体胚发生的影响。在培养开始时加入不同浓度的5-氮胞苷会抑制水曲柳愈伤组织发生和水曲柳体胚发生。各浓度处理的愈伤组织诱导率均低于未添加5-氮胞苷的对照,且差异显著。除了50.0和100.0μmol/L处理的体胚发生率与未添加5-氮胞苷的对照差异不显著外,其余的处理均与对照存在显著差异,0.5μmol/L 5-氮胞苷完全抑制了体胚的发生。在不同的培养时间段加入20.0μmol/L 5-氮胞苷对水曲柳体胚发生状态有不同的影响,第1天加入明显抑制体胚发生,第15~21天加入显著促进体胚发生。以上结果的产生可能与5-氮胞苷处理后调节了外植体的DNA甲基化水平有关。添加5-氮胞苷对外植体褐化的作用趋势与对体胚发生的影响趋势几乎相同,再一次证明了水曲柳体胚发生必然伴随着外植体褐化这一结论。这种与现有关于外植体褐化与体胚发生关系相悖的现象值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 水曲柳 5-氮胞苷 体胚发生 合子胚子叶外植体 褐化
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板栗愈伤组织诱导及外植体褐化研究 被引量:6
7
作者 刘杜玲 吕平会 +2 位作者 彭少兵 杨艳 何佳林 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期26-30,共5页
以‘泰山1号’板栗新梢茎段为试材,采用正交试验设计和单因素试验法,研究了不同培养基、消毒时间、外植体、激素、蔗糖含量、抗氧化剂及光照条件对愈伤组织诱导及外植体褐化的影响。结果表明:‘泰山1号’板栗愈伤组织诱导的最佳培养基是... 以‘泰山1号’板栗新梢茎段为试材,采用正交试验设计和单因素试验法,研究了不同培养基、消毒时间、外植体、激素、蔗糖含量、抗氧化剂及光照条件对愈伤组织诱导及外植体褐化的影响。结果表明:‘泰山1号’板栗愈伤组织诱导的最佳培养基是WPM培养基;用0.1%Hg Cl2消毒13~15 min,外植体褐化率明显降低;以茎段(带顶芽)为外植体,蔗糖浓度为30 g·^(-1),愈伤组织诱导率最高;愈伤组织诱导最佳激素组合为:6-BA1.0mg·L^(-1)+NAA0.2 mg·L^(-1);100 mg·L^(-1)VC和6 g·L^(-1) PVP能有效抑制外植体褐化;先暗培养两周再进行光培养,可显著降低外植体褐化率。 展开更多
关键词 板栗 愈伤组织诱导 外植体褐化 培养基筛选
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抗坏血酸调控水曲柳成熟胚褐化和体胚发生的适宜浓度
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作者 谢添伊 程雪 +2 位作者 王秋水 杨玲 沈海龙 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第2期552-560,共9页
抗坏血酸(ascorbic acid,ASA)可以调节水曲柳(Fraxinus mandshurica)体胚发生外植体的褐化和体细胞胚发生(somatic embryogenesis,SE)的诱导率。为了确定体胚发生最佳的处理浓度,本研究基于前期基础细化ASA处理的浓度梯度,检验来自不同... 抗坏血酸(ascorbic acid,ASA)可以调节水曲柳(Fraxinus mandshurica)体胚发生外植体的褐化和体细胞胚发生(somatic embryogenesis,SE)的诱导率。为了确定体胚发生最佳的处理浓度,本研究基于前期基础细化ASA处理的浓度梯度,检验来自不同地点不同母树的水曲柳成熟合子胚外植体对处理的响应。结果表明,低浓度(5~20 mg/L)和高浓度(150~200 mg/L)的ASA会抑制外植体的褐化和体胚发生,90~120 mg/L的ASA会促进外植体的褐化和体胚发生;110 mg/L的ASA为诱导水曲柳成熟合子胚子叶外植体体胚发生的最佳处理浓度,体胚发生率比对照提高65.05%,褐化发生时间比对照缩短5 d,体胚发生时间比对照缩短9 d;体胚大部分发生于3/4褐化的外植体上,占总体胚发生数的65.17%;未褐化外植体的体胚发生数仅占总体胚发生数的0.67%;来源于不同地点和同一地点不同母树的外植体的体胚发生率差异较大,不同地点外植体体胚发生率排序为东北林业大学哈尔滨实验林场>韦河青山种子园>临江金山种子园;同一地点不同母树来源外植体的体胚发生率最高可相差4.08倍。由此可以推断,水曲柳成熟合子胚外植体褐化和体胚发生对抗坏血酸处理有明显的浓度效应和基因型效应,适当浓度的ASA处理可以提高外植体褐化率、加快褐化速度的同时有效提高体胚发生率和加快体胚发生速度。 展开更多
关键词 水曲柳(Fraxinus mandshurica) 体胚发生 抗坏血酸 外植体褐化 基因型
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抗褐化剂对水曲柳成熟胚外植体褐化及体胚发生的影响 被引量:2
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作者 王秋水 刘春苹 +5 位作者 沈海龙 杨玲 刘洋 谢添伊 程雪 张鹏 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期32-37,共6页
利用抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)、硝酸银(AgNO3)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等抗褐化剂处理,检验水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)外植体褐化与体胚发生的响应格局及其相互关系。结果表明:①10 mg·L^-1的ASA处理显著降低了植体褐... 利用抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)、硝酸银(AgNO3)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等抗褐化剂处理,检验水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)外植体褐化与体胚发生的响应格局及其相互关系。结果表明:①10 mg·L^-1的ASA处理显著降低了植体褐化指数(代表外植体褐化面积比值)、褐化率和体胚发生率;随着ASA质量浓度的增加,褐化指数、褐化率和体胚发生率不断增加;在100 mg·L^-1时,褐化率达到98%(等同于对照),褐化面积和体胚发生率分别达到0.734和73%,均显著高于对照(P<0.05);200 mg·L^-1对外植体致死;协方差与相关性分析表明,ASA处理对水曲柳外植体褐化与体胚发生的影响格局之间具有显著相关性。②GSH对水曲柳外植体褐化指数和褐化率的影响较小,无规律性变化格局;10、20 mg·L^-1的低质量浓度处理显著降低体胚发生率,但随质量浓度增加体胚发生率增加,在200 mg·L^-1处理时显著高于对照,与100 mg·L^-1以下ASA处理的体胚发生影响趋势一致。③AgNO3在显著降低水曲柳外植体褐化指数和褐化率的同时也显著降低了体胚发生率;PVP处理对水曲柳外植体褐化影响不大,各处理体胚发生率虽均高于对照,但无规律性变化格局。④GSH、PVP和AgNO3这3种抗褐化剂对水曲柳外植体褐化与体胚发生的影响格局之间不具有显著相关性。综上,ASA可以用来进行水曲柳体胚发生伴随外植体褐化现象生物学机制解析的优选试剂。 展开更多
关键词 水曲柳 抗氧化剂 外植体褐化 体胚发生
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BA和NAA对水曲柳(Fraxinus mandshurica)未成熟胚子叶外植体褐化及体胚发生的影响 被引量:2
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作者 沈海龙 王秋水 +3 位作者 刘洋 刘春苹 杨玲 张鹏 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1266-1273,共8页
为了解析植物生长调节剂与水曲柳体细胞胚胎发生普遍伴随外植体褐化现象的关系,本研究以水曲柳未成熟合子胚子叶为外植体进行体胚发生,对细胞分裂素BA和生长素NAA的影响效应进行了探讨。结果表明,(1)当培养基中添加0.5mg/LBA和1.5mg/LNA... 为了解析植物生长调节剂与水曲柳体细胞胚胎发生普遍伴随外植体褐化现象的关系,本研究以水曲柳未成熟合子胚子叶为外植体进行体胚发生,对细胞分裂素BA和生长素NAA的影响效应进行了探讨。结果表明,(1)当培养基中添加0.5mg/LBA和1.5mg/LNAA时,产生体胚的外植体褐化率达到91.5%;褐化外植体的体胚发生率达50.8%,而未褐化外植体的体胚发生率仅为9.6%;(2)添加NAA是水曲柳未成熟合子胚子叶外植体褐化的充分必要条件,即:无NAA存在时,未成熟合子胚子叶外植体不发生褐化,有NAA存在时才会发生褐化;只添加NAA外植体会产生褐化,但褐化程度低于同时添加BA,说明BA是促进褐化的条件;(3)添加NAA与BA是水曲柳未成熟合子胚外植体发生体胚的必要条件,即不添加生长素和细胞分裂素时无体胚发生;(4)NAA与BA的交互作用对褐化率的影响差异显著,但对体胚发生率的影响差异不显著,说明BA和NAA处理对外植体褐化的作用与对体胚发生的作用不同。由此可知:水曲柳未成熟合子胚子叶外植体的褐化和体细胞胚胎发生均受细胞分裂素BA和生长素NAA的影响,但BA和NAA分别调控了外植体的褐化和体胚的发生,与二者伴随的现象没有关系。本研究结果对进一步深入解析水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生物学机理提供了科学依据。 展开更多
关键词 水曲柳(Fraxinus mandshurica) 细胞分裂素 生长素 外植体褐化 体细胞胚胎发生
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木榄愈伤组织诱导影响因子研究 被引量:1
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作者 鲁彦君 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第15期92-96,共5页
以木榄幼叶为外植体,进行其愈伤组织诱导的影响因子研究,通过灭菌条件、培养基成分、添加剂种类、外源植物激素浓度试验,比较外植体褐化率与愈伤组织诱导率。结果表明:75%乙醇灭菌30s后在2%(体积分数v/v)NaClO溶液灭菌20min是木榄幼叶... 以木榄幼叶为外植体,进行其愈伤组织诱导的影响因子研究,通过灭菌条件、培养基成分、添加剂种类、外源植物激素浓度试验,比较外植体褐化率与愈伤组织诱导率。结果表明:75%乙醇灭菌30s后在2%(体积分数v/v)NaClO溶液灭菌20min是木榄幼叶表面消毒适宜条件;氨基酸培养基是基础培养基;45℃热激与添加1.0mmol·L^(-1)抗坏血酸均可降低褐化率;AA培养基+0.50mg·L^(-1) 2,4-D+0.50mg·L^(-1) TDZ+1.00mmol·L~(^(-1))维生素C或AA培养基+0.50mg·L^(-1) 2,4-D+0.50mg·L^(-1) CPPU+1.00mmol·L^(-1)维生素C均可得大于50%的愈伤诱导率。因此,克服外植体褐化与应用CPPU或TDZ作为细胞分裂素是木榄愈伤组织诱导成功的关键。 展开更多
关键词 木榄 愈伤组织诱导 外植体褐化 细胞分裂素
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香蕉转化中的抗褐化及再生研究 被引量:5
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作者 李敬阳 张建斌 +1 位作者 徐碧玉 金志强 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期115-117,144,共4页
香蕉在进行遗传转化过程中,外植体容易褐化,从而降低了再生频率,影响到遗传转化的效率。为降低香蕉转化过程中外植体的褐化率,采用香蕉(Musa AAA group cv.Brazilian)未成熟雄花作为外植体,以农杆菌介导法进行遗传转化。结果表明,当改良... 香蕉在进行遗传转化过程中,外植体容易褐化,从而降低了再生频率,影响到遗传转化的效率。为降低香蕉转化过程中外植体的褐化率,采用香蕉(Musa AAA group cv.Brazilian)未成熟雄花作为外植体,以农杆菌介导法进行遗传转化。结果表明,当改良的MS培养基中铵态氮与硝态氮(NH4+/NO3-)的摩尔比为20.6:67.6时,具有较强的抗褐化能力。当6-BA浓度为1.0mg/L时,外植体易于诱导出胚状体。 展开更多
关键词 香蕉 褐化 氮源 激素
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抗坏血酸预处理阻止香蕉吸芽外植体褐变的研究初报 被引量:40
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作者 何琼英 张东方 王润华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1995年第3期79-82,共4页
研究了抗坏血酸预处理对防止香蕉吸芽外植体褐变的可能性及其作用方式。结果表明:用抗坏血酸处理吸芽,能减轻外植体褐变,提高芽丛诱导率。验证了抗坏血酸对香蕉吸芽褐变抑制作用是通过对将多元酚氧化酶作用下形成的醌类物质,重新还... 研究了抗坏血酸预处理对防止香蕉吸芽外植体褐变的可能性及其作用方式。结果表明:用抗坏血酸处理吸芽,能减轻外植体褐变,提高芽丛诱导率。验证了抗坏血酸对香蕉吸芽褐变抑制作用是通过对将多元酚氧化酶作用下形成的醌类物质,重新还原为酚,因此是消耗性的。讨论了香蕉快繁中有关阻止褐变经验的生理基础。 展开更多
关键词 香蕉 抗坏血酸 外植体褐变 良种繁育
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