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二黄方对EAE大鼠外周血NK细胞和细胞因子的影响 被引量：16
1
作者 樊永平 刘秀贞 +2 位作者 王蕾 王雅杰 龚海洋 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期165-168,共4页
目的观察二黄方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型大鼠外周血NK细胞和细胞因子的影响。方法70只Lewis大鼠随机分为4组正常组、模型组、西药组和中药组。模型组、中药组和西药组用完全福氏佐剂(CFA)与豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)制成的混合... 目的观察二黄方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型大鼠外周血NK细胞和细胞因子的影响。方法70只Lewis大鼠随机分为4组正常组、模型组、西药组和中药组。模型组、中药组和西药组用完全福氏佐剂(CFA)与豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)制成的混合乳剂注射Lewis大鼠两后足掌皮下建立EAE模型;正常组和模型组灌服生理盐水;中药组灌服二黄方;西药组灌服醋酸泼尼松。每天记录各组临床症状评分,造模后第14天和第28天分别采集外周血,用液体芯片技术测定细胞因子;用流式细胞仪检测NK细胞。结果大鼠造模后第20天和第28天中药组和西药组临床评分平均值比模型组显著降低(P<0.05);造模后第28天中药组和西药组外周血NK细胞比模型组均显著降低(P<0.05);造模后第28天中药组外周血白细胞介素-6(IL-6)比模型组显著降低(P<0.05);西药组造模后第14天外周血IL-18比模型组升高(P<0.05);第28天干扰素-γ(IFN-γ)比模型组降低(P<0.05)。结论二黄方和激素均可明显改善EAE大鼠临床症状,二黄方可能通过调节NK细胞、IL-6发挥治疗作用。激素可能通过调节NK细胞、IL-18和IFN-γ来治疗EAE。 展开更多
关键词 二黄方 多发性硬化 自身免疫性脑脊髓炎模型 NK细胞 细胞因子 大鼠
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黄芪总皂苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的神经保护及修复机制研究 被引量：14
2
作者 刘建春 张红珍 +7 位作者 李俊莲 樊慧杰 柴智 尉杰忠 于婧文 康东坤 肖保国 马存根 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期6700-6704,共5页
目的:探讨黄芪总皂苷(AST)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的保护作用,并探讨其神经修复的机制。方法:将18只C57BL/6雌性小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(MOG35-55)诱导建立EAE模型,随机分为3组:EAE对照组,AST高、低剂量... 目的:探讨黄芪总皂苷(AST)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的保护作用,并探讨其神经修复的机制。方法:将18只C57BL/6雌性小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(MOG35-55)诱导建立EAE模型,随机分为3组:EAE对照组,AST高、低剂量组。造模的第3天起,进行注射用药,持续25d。EAE对照组腹腔注射PBS;AST高、低剂量组分别腹腔注射黄芪总皂苷溶液80、40mg·kg^(-1)·d^(-1);各组小鼠每次给药0.2mL/只,持续记录体质量变化、临床评分和小鼠症状体征。HE染色检测脊髓炎性细胞浸润,髓鞘染色观察髓鞘脱失情况。ELISA法检测外周血和脾中白细胞介素(IL)-1β和IL-10的表达量。Western Blot法检测中枢神经组织中神经营养因子BDNF、GDNF和GAP-43的表达。结果:AST高、低剂量组均能明显推迟EAE起病时间,缓解EAE发病程度,AST高剂量的治疗效果优于低剂量;AST可抑制脊髓炎性细胞浸润,减少髓鞘脱失;血清和脾上清中IL-1β表达降低(P<0.01),IL-10表达升高(P<0.05);AST治疗可上调BDNF和GAP-43的表达。结论:AST干预可减轻EAE的发病程度,作用机制可能为调节细胞因子的表达和改善局部神经组织生长的微环境,促进神经营养类物质的表达。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 黄芪总皂苷 细胞因子 神经营养因子 神经保护 神经修复
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髓磷脂碱性蛋白的提纯及其对PBMC产生TNF和IFN的影响 被引量：6
3
作者 刘红岩 杨贵贞 王立岩 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2001年第3期148-150,共3页
目的　探讨髓磷脂碱性蛋白 (MBP)诱导 EAE产生的可能原因。方法　通过酸抽提和 CM-Sephadex50层析 ,分离提取牛 MBP,观察其致 EAE活性 ,用生物活性法检测 MBP刺激的 PBMC上清中 TNF和 IFN的活性。结果　分离纯化得到电泳 1条主带的 MBP... 目的　探讨髓磷脂碱性蛋白 (MBP)诱导 EAE产生的可能原因。方法　通过酸抽提和 CM-Sephadex50层析 ,分离提取牛 MBP,观察其致 EAE活性 ,用生物活性法检测 MBP刺激的 PBMC上清中 TNF和 IFN的活性。结果　分离纯化得到电泳 1条主带的 MBP,证明其具有致 EAE活性 ,MBP刺激的 PBMC可产生 TNF和IFN。结论　MBP可通过在外周刺激 PBMC产生炎性因子 TNF和 IFN诱导 展开更多
关键词 髓磷脂碱性蛋白 肿瘤坏死因子 干扰素 实验性自身免疫性脑脊髓炎
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实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的比较 被引量：8
4
作者 焦卓敏 富羽弘 王维治 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2005年第5期258-261,276,共5页
目的比较两种不同品系大鼠及不同免疫原诱发的EAE模型特点。方法应用MOG35-55、同种脊髓匀浆(DA-SCH)、MBP68-86、豚鼠-MBP为免疫原,分别免疫DA大鼠或Lewis大鼠制备EAE动物模型。观察比较大鼠发病过程、临床评分及病理变化。结果应用MOG... 目的比较两种不同品系大鼠及不同免疫原诱发的EAE模型特点。方法应用MOG35-55、同种脊髓匀浆(DA-SCH)、MBP68-86、豚鼠-MBP为免疫原,分别免疫DA大鼠或Lewis大鼠制备EAE动物模型。观察比较大鼠发病过程、临床评分及病理变化。结果应用MOG35-55或DA-SCH为免疫原致敏的DA大鼠病程呈现缓解-复发的双相病程,应用MBP68-86、豚鼠-MBP致敏Lewis大鼠而诱发的EAE模型为急性单相病程。豚鼠-MBP诱发的EAE模型发病时间匀齐、发病率最高、病情也最重,应用DA-SCH诱发的EAE模型病情其次重但发病时间不匀齐,MOG及MBP肽段引发的病情相对较轻。各实验组在发病高峰期组织病理变化以炎症反应为主。DA大鼠两个实验组第二次发病期炎症反应相对较轻而脱髓鞘较明显。结论不同免疫原制备的EAE模型具有不同的特点,可根据研究目的不同选取所需模型。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 同种脊髓匀浆 髓少突胶质细胞糖蛋白 髓鞘素碱性蛋白
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基于β-arrestin1沉默探讨益肾达络饮对EAE小鼠Rho/ROCK信号通路的影响 被引量：3
5
作者 丁文婧 王忠敏 +2 位作者 任嘉彦 王响 尚晓玲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期110-116,共7页
目的:基于β-抑制蛋白(β-arrestin1)基因沉默,研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠Ras同源基因家族蛋白(Rho)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法:60只C57BL/6雌性小鼠随机平均分为空白组、模型组、病... 目的:基于β-抑制蛋白(β-arrestin1)基因沉默,研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠Ras同源基因家族蛋白(Rho)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法:60只C57BL/6雌性小鼠随机平均分为空白组、模型组、病毒组、益肾达络饮组(中药组)、病毒加益肾达络饮组(病毒加中药组)、醋酸泼尼松组(激素组)6组。除空白组外,每只小鼠均制备EAE模型,于免疫第4天病毒组、病毒加中药组每只小鼠尾静脉注射腺相关病毒(AAV)病毒溶液150μL(1×10^(11) vg·m L^(-1))。造模的第8天给药,空白组、模型组、病毒组给予生理盐水10 m L·kg^(-1),激素组给予醋酸泼尼松混悬液(3.9 g·kg^(-1)),其他组给予益肾达络饮(20 g·kg^(-1)),连续给药14 d并每日进行称重评分。免疫后每天记录各组小鼠的神经功能评分;苏木素-伊红(HE)染色测定小鼠脑组织、脊髓组织的炎症反应和病变位置;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定EAE小鼠脊髓组织及脑组织中β-arrestin1、RhoA、ROCKⅠ的蛋白表达。结果:与模型组比较,病毒组、病毒加中药组的神经功能评分显著降低(P<0.01),中药组明显降低(P<0.05)。HE结果显示,模型组中枢神经系统(CNS)存在明显炎症反应,其他各组与模型组比较均有不同程度的减轻。Western blot结果显示,与空白组比较,模型组小鼠脊髓组织中β-arrestin1、RhoA及ROCKⅠ蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,病毒组、中药组、病毒加中药组、激素组小鼠脊髓组织中β-arrestin1、RhoA及ROCKⅠ蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠脑组织中β-arrestin1、RhoA、ROCKⅠ蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,病毒组、中药组、病毒加中药组、激素组小鼠脑组织中β-arrestin1蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);病毒组、中药组小鼠脑组织中RhoA、ROCKⅠ蛋白表达水平均明显降低(P<0.05 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) 多发性硬化症(MS) 益肾达络饮 β-arrestin1 Ras同源基因家族蛋白A(RhoA) Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶Ⅰ(ROCKⅠ) 地黄饮子
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基于HPLC探讨升降散通过IL-6/JAK2/STAT3信号通路对EAE小鼠的防治作用 被引量：5
6
作者 吕保江 郑泽泉 +6 位作者 郑可男 吴璐璐 许浩游 童培珍 吴文平 吴智兵 招远祺 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期3361-3371,共11页
建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析升降散(Shengjiang Powder,SJP)中大黄素和姜黄素类等化合物成分,探讨其对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的防治作... 建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析升降散(Shengjiang Powder,SJP)中大黄素和姜黄素类等化合物成分,探讨其对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的防治作用。采用HPLC测定升降散中大黄素和姜黄素类化合物含量;SPF级雌性C57BL/6小鼠72只,随机分为对照组、模型组、升降散低剂量组、升降散中剂量组、升降散高剂量组、阳性对照组。每组12只。除对照组外,其余组小鼠均构造EAE模型。免疫后第1天起,升降散组小鼠分别以升降散灌胃,阳性对照组给予醋酸泼尼松灌胃,对照组和模型组给予等体积超纯水灌胃。记录小鼠一般情况、症状评分及体质量。第21天,取小鼠脑组织,分别采用苏木素-伊红(HE)染色和劳克坚牢蓝(LFB)染色检查脑组织病理变化、免疫组化(IHC)测定髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测闭合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白(claudin-5)表达,以及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、酪氨酸蛋白激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路蛋白及其磷酸化水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qPCR)检测IL-6、JAK2和STAT3的信使核糖核酸(mRNA)表达水平;最后对SJP中以大黄素、姜黄素为首的6种主要有效成分,采用分子对接验证,评价各化合物分别与IL-6、JAK2和STAT3蛋白的结合效能。结果显示,建立了SJP的HPLC分析方法,其精密度、重复性、稳定性和回收率试验均符合要求。与模型组比较,SJP能降低EAE小鼠Konoz临床症状评分,减轻小鼠脑白质炎症浸润以及髓鞘脱失;同时,提高occludin和claudin-5蛋白的表达;qPCR显示SJP治疗后下调了IL-6、JAK2和STAT3 mRNA表达,Western blot表明SJP组IL-6/JAK/STAT3蛋白及其磷酸化水平与模型组比较明显下调,差异有统� 展开更多
关键词 升降散 高效液相色谱 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) IL-6/JAK2/STAT3通路
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多发性硬化症的治疗展望 被引量：6
7
作者 仁富亮 宋少伟 李恩东 《中国卫生产业》 2013年第24期178-179,181,共3页
多发性硬化症(MS)的发病原因到目前为止尚不清楚,同时也没有发现行之有效的治疗方法。但是,有几个关于它的发病机理已被阐明,围绕这些机理研发一些治疗方法。目前,国际上已被公认有效的药物仅仅有干扰素β(IFN-β)一种。最近,在我们的... 多发性硬化症(MS)的发病原因到目前为止尚不清楚,同时也没有发现行之有效的治疗方法。但是,有几个关于它的发病机理已被阐明,围绕这些机理研发一些治疗方法。目前,国际上已被公认有效的药物仅仅有干扰素β(IFN-β)一种。最近,在我们的研究中,T细胞入侵时与重要的α-整合蛋白相对应的单克隆抗体,和与B细胞上抗原CD52相对应的单克隆抗体,阿仑单抗等等都作为新型药物来用于治疗。我们期待这些药物能使预期复发次数变少,以减少患者的门诊复诊次数[1]。这种治疗方法,是从根本上起到治疗的效果,用于抑制多发性硬化症(MS)的发病机制,这些正是我们所期待的。另外,最近多发性硬化症(MS)可以引起轴突损伤的研究也被关注,与炎症性脱髓鞘相比较,如何抑制轴突变性显得更为重要。在本次讨论中,调节性自体免疫功能的T细胞在免疫系统中具有很强的防御功能,它将作为一种新的尝试,抑制多发性硬化症(MS)疾病的发生,同时我们还要讨论如何抑制轴突变性来尝试开发多发性硬化症(MS)的药物治疗。 展开更多
关键词 多发性硬化症(MS) 先天性免疫 调节性T细胞 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) 轴突变性 小胶质细胞
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益肾达络饮抑制β-arrestin1对多发性硬化小鼠Th17/Treg细胞的影响 被引量：4
8
作者 王响 丁文婧 +4 位作者 谢名宗 王忠敏 何静文 任嘉彦 尚晓玲 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期2893-2897,共5页
目的:从β-arrestin1基因探讨益肾达络饮治疗多发性硬化(MS)的作用机制。方法:72只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组、β-arrestin1基因沉默(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组12只。除空白组外,其余组均制作EAE模... 目的:从β-arrestin1基因探讨益肾达络饮治疗多发性硬化(MS)的作用机制。方法:72只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组、β-arrestin1基因沉默(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组12只。除空白组外,其余组均制作EAE模型。造模第8天,空白组、模型组、AAV-β组予0.9%氯化钠溶液灌胃,中药组、AAV-β+中药组予益肾达络饮干预,西药组予醋酸泼尼松治疗,共治疗2周。每天对小鼠进行神经功能评分,治疗结束后HE染色观察脑、脊髓组织的病理变化,流式细胞术分析脾脏Th17/Treg细胞比例,ELISA法检测血清中IL-6、IL-17、IL-27、IL-35的浓度变化。结果:与模型组比较,各干预组从第15天开始神经功能评分显著降低(P<0.05,P<0.01),中药组、西药组与AAV-β+中药组第21天的神经功能评分显著降低(P<0.01)。HE染色显示益肾达络饮可减轻中枢神经系统炎性细胞浸润。与模型组比较,其他各组Th17细胞数量显著减少(P<0.05);与AAV-β组比较,AAV-β+中药组Th17细胞数量显著减少(P<0.05)。与空白组比较,模型组Treg细胞数量显著降低(P<0.01);与空白组、模型组、AAV-β组比较,西药组与AAV-β+中药组Treg细胞数量显著升高(P<0.01)。与模型组、AAV-β组比较,西药组与AAV-β+中药组Th17/Treg比值显著降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组和AAV-β血清IL-6、IL-17、IL-27的浓度显著升高(P<0.01),模型组IL-35的浓度显著下降(P<0.01);与模型组比较,各干预组血清IL-6、IL-17、IL-27的浓度显著降低(P<0.05,P<0.01),中药组、西药组、AAV-β组IL-35的浓度显著升高(P<0.05,P<0.01);与AAV-β组比较,中药组、西药组、AAV-β+中药组IL-6、IL-17、IL-27浓度显著降低(P<0.01),中药组与AAV-β+中药组IL-35浓度显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:益肾达络饮治疗EAE的机制可能与抑制β-arrestin1表达,影响细胞因子的分泌,调节Th17/Treg细胞失衡有关。 展开更多
关键词 β-arrestin1 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 Th17/Treg细胞平衡 白细胞介素 益肾达络饮 中枢神经系统自身免疫性疾病 CD_(4)^(+)T细胞
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miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β干预实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响 被引量：5
9
作者 金书欣 吴婷 +3 位作者 蔡飞扬 雷蕴轩 席晔斌 陈广洁 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期834-842,共9页
目的·探讨miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β(interferon-β,IFN-β)干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法·建立EAE小鼠模型,设IFN-β干预组和PBS对照组。流式... 目的·探讨miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β(interferon-β,IFN-β)干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法·建立EAE小鼠模型,设IFN-β干预组和PBS对照组。流式染色比较2组Th17的比例变化;RNA芯片检测2组小鼠miRNA的差异表达,筛选出miR-322-5p做进一步研究;软件预测miR-322-5p的靶基因为Akt3;IFN-β干预后和过表达miR-322-5p后检测Akt3的表达水平;双荧光素酶报告实验验证miR-322-5p和Akt3的直接靶向关系;体外实验观察Akt3对Th17细胞分化的影响。结果·IFN-β干预组的EAE小鼠Th17比例均显著降低,miR-322-5p的表达显著升高,而Akt3的表达明显降低;过表达miR-322-5p能显著抑制Akt3的表达,双荧光素酶报告实验显示Akt3是miR-322-5p的直接靶基因,且Akt3对Th17的体外分化有明显促进作用。结论·IFN-β可通过影响miR-322-5p靶向Akt3,进而抑制Th17分化来缓解EAE的疾病进程。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 干扰素Β MIRNA Th17分化
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黄芪多糖抑制小鼠EAE及调控BV-2神经小胶质细胞活化的实验研究 被引量：5
10
作者 马金昀 王金英 +2 位作者 孙宇 李国陵 程晓东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期381-387,共7页
目的:研究黄芪多糖(APS)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用以及对参与EAE发病机制的神经小胶质细胞活化的调控作用及其可能的作用机制。方法:动物实验:MOG_(35-55)诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,予APS给药干预,通过5级临床症... 目的:研究黄芪多糖(APS)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用以及对参与EAE发病机制的神经小胶质细胞活化的调控作用及其可能的作用机制。方法:动物实验:MOG_(35-55)诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,予APS给药干预,通过5级临床症状评分观察APS对小鼠EAE的治疗作用。细胞实验:MTT法检测脂多糖(LPS)对于BV-2神经小胶质细胞的增殖抑制作用,筛选合适的LPS刺激浓度活化神经小胶质细胞,构建BV-2神经小胶质细胞活化的模型;倒置显微镜观察BV-2神经小胶质细胞形态学的改变;ELISA法检测BV-2神经小胶质细胞IFN-γ、TNF-α的分泌水平变化;观察不同浓度的APS对BV-2神经小胶质细胞活化的调控作用;APS干预后,Western blot、Real-time PCR方法分别检测BV-2神经小胶质细胞PD-L1蛋白和mRNA表达水平的变化。结果:APS能够有效治疗小鼠EAE的临床症状,成功建立了体外BV-2神经小胶质细胞活化模型,一定浓度的APS能够抑制BV-2神经小胶质细胞的活化,提高活化的BV-2细胞的生存活性,降低IFN-γ、TNF-α的分泌水平,促进活化的BV-2神经小胶质细胞PD-L1基因及蛋白表达上调。结论:APS对小鼠EAE具有明显的治疗作用,其发挥作用的机制可能是APS能够有效抑制神经小胶质细胞的活化,降低炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α的分泌,对神经小胶质细胞有抗炎保护作用,PD-1/PD-L1通路可能是APS发挥抗炎作用的重要途径。 展开更多
关键词 黄芪多糖 实验性自身免疫性脑脊髓膜炎 BV-2神经小胶质细胞 程序性细胞死亡配体1 脂多糖
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骨化三醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用及相关机制 被引量：4
11
作者 汪占文 杨金凤 +9 位作者 孔庆飞 詹晓霞 穆莉莉 李乐乐 孙博 张瑶 王广友 李呼伦 张迎庆 周明言 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第11期1325-1328,共4页
目的探讨骨化三醇(Calcitriol)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用及相关机制。方法用含200μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(Myelin oligodendrocyte glycoprotein 33-35,MOG33-... 目的探讨骨化三醇(Calcitriol)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用及相关机制。方法用含200μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(Myelin oligodendrocyte glycoprotein 33-35,MOG33-35)、250μg结核菌素的50μl弗氏不完全佐剂(IFA)皮内免疫C57BL/6小鼠,并分别于免疫当天和第2天注射百日咳毒素,建立EAE实验性动物模型(EAE组);骨化三醇组从免疫当天起隔日腹腔注射骨化三醇100 ng进行治疗,观察两组小鼠临床评分的差异;于EAE发病高峰期处死小鼠,取脊髓及淋巴结,通过HE及LFB染色观察脊髓中炎细胞浸润及髓鞘脱失;采用流式细胞术检测两组淋巴细胞CD4+T细胞亚型的分布。结果与EAE组比较,骨化三醇组发病延缓且发病较轻,临床评分差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001);骨化三醇组较EAE组小鼠脊髓白质炎性细胞浸润明显减少,脱髓鞘斑块明显减轻;骨化三醇组与EAE组相比,Th17细胞亚群明显受到抑制(P<0.05),而Th2和Treg细胞水平明显升高(P均<0.05)。结论骨化三醇可以延缓EAE发病,减轻临床症状及病理改变,并能够通过调节CD4+T细胞亚群平衡,即抑制Th17细胞,上调Th2和Treg细胞水平发挥对EAE的预防和治疗作用。 展开更多
关键词 骨化三醇 实验性自身免疫性脑脊髓炎 治疗 抗原 CD4
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益肾达络饮对MRS2179干预下实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响及机制
12
作者 王响 王诗洋 +5 位作者 谢名宗 何静文 张登峰 李丹 王泰愚 尚晓玲 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期3086-3092,共7页
目的:从P2Y1受体探讨益肾达络饮治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的机制。方法:60只C57BL/6J雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、P2Y1受体拮抗剂(MRS2179)组、中药组、MRS2179+中药组、激素组。除空白组外均制作EAE模型,每日记录各... 目的:从P2Y1受体探讨益肾达络饮治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的机制。方法:60只C57BL/6J雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、P2Y1受体拮抗剂(MRS2179)组、中药组、MRS2179+中药组、激素组。除空白组外均制作EAE模型,每日记录各组小鼠的体质量与神经功能评分。造模第4天,MRS2179组与MRS2179+中药组腹腔注射MRS2179,造模第8天开始给予相应药物连续干预14 d取材。HE染色观察各组小鼠脑与脊髓的病理改变;ELISA测定各组小鼠血清中白介素(IL)-6、IL-17、IL-23、γ干扰素(IFN-γ)的浓度;Western Blot检测各组小鼠脑及脊髓中P2Y1、细胞外信号调节激酶(ERK)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)蛋白的表达变化。结果:益肾达络饮可以减缓EAE小鼠体质量下降,降低神经功能评分,缓解脑与脊髓中的炎性浸润。与空白组比较,模型组血清中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ浓度显著升高,脑与脊髓中P2Y1、ERK、GFAP、PKA表达显著升高,GDNF、CREB、PKC表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。中药组明显逆转上述变化,MRS2179+中药组进一步逆转上述变化。结论:益肾达络饮的作用机制可能是通过影响中枢神经系统中的P2Y1受体活性,抑制神经炎症反应,抑制GFAP分泌,影响PKA/PKC平衡,促进GDNF的生成,从而抑制星形胶质细胞过度活化、缓解炎症、促进神经修复,缓解EAE的疾病状态。 展开更多
关键词 多发性硬化 实验性自身免疫性脑脊髓炎 P2Y1 益肾达络饮 MRS2179 神经胶质细胞源性神经营养因子 胶质纤维酸性蛋白 蛋白激酶A 蛋白激酶C
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小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎性别差异研究 被引量：3
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作者 邢广羽 张金涛 +1 位作者 宋春杰 尹岭 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第5期345-346,共2页
目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)性别差异的原因。方法应用髓鞘脂质蛋白139 151 (PLP139 151)免疫诱导建立EAE模型,观察雌雄小鼠病情的差异,采用MTT、ELISA法,检测外周淋巴细胞对自身抗原反应的性别差异。结果雌性小鼠的平... 目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)性别差异的原因。方法应用髓鞘脂质蛋白139 151 (PLP139 151)免疫诱导建立EAE模型,观察雌雄小鼠病情的差异,采用MTT、ELISA法,检测外周淋巴细胞对自身抗原反应的性别差异。结果雌性小鼠的平均发病时间(15±2.1)d,早于雄性的(22±4.3)d,病程有复发-缓解的特点,而雄性则多呈一过性发病;EAE雌雄小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应和γ-干扰素分泌无显著性差异( P >0.05),雄性小鼠白细胞介素4(IL- 4)分泌明显高于雌性小鼠( P <0.01)。结论PLP139 151诱发小鼠EAE性别差异可能与雄性小鼠外周淋巴细胞分泌IL- 4水平较高,具有保护作用有关。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) SL/J小鼠 性别差异 T淋巴细胞增殖 γ-干扰素 白细胞介素-4(IL-4)
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PPAR-γ激动剂对急性EAE大鼠脑白质TNF-αmRNA表达的影响 被引量：1
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作者 袁宝玉 秦新月 彭国光 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第1期18-21,共4页
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferator-activedreceptors-γ,PPAR-γ)激动剂罗格列酮和非甾体类抗炎药布洛芬对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)大鼠肿瘤坏死因子-α(... 目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferator-activedreceptors-γ,PPAR-γ)激动剂罗格列酮和非甾体类抗炎药布洛芬对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)大鼠肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达的影响。方法:建立大鼠EAE模型,分别给予罗格列酮和布洛芬预处理,通过各组间临床表现评分评价药物疗效,RT-PCR法检测TNF-αmRNA的表达。结果:与EAE模型组大鼠相比,罗格列酮和布洛芬治疗组的症状明显改善,罗格列酮和布洛芬治疗组TNF-αmRNA表达较EAE模型组明显下调(P<0.01)。两个治疗组间的各项指标间比较无明显差异(P>0.05)。结论:罗格列酮和布洛芬明显改善EAE大鼠的临床表现,下调前炎症细胞因子TNF-αmRNA的表达。提示PPAR-γ激动剂对EAE或多发性硬化(multiplesclerosis,MS)具有抗炎的神经保护作用,布洛芬在EAE中的抗炎作用可能与激活PPAR-γ有关。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 肿瘤坏死因子 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ 非甾体类抗炎药
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新型重组免疫毒素DT390-mRantes治疗小鼠EAE的初步研究 被引量：2
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作者 贾怡 李虹 +4 位作者 陈文捷 吕梅励 李明远 蒋忠华 张林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期236-239,共4页
目的:构建一种含有重组免疫毒素DT390-mRantes(白喉杆菌外毒素390片段-活化T细胞表达与分泌调节因子)的真核表达质粒,并用于治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)。方法:利用自提的MBP诱导C57BL/6小鼠产生EAE,将mRantes导入含有DT390... 目的:构建一种含有重组免疫毒素DT390-mRantes(白喉杆菌外毒素390片段-活化T细胞表达与分泌调节因子)的真核表达质粒,并用于治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)。方法:利用自提的MBP诱导C57BL/6小鼠产生EAE,将mRantes导入含有DT390的真核表达质粒SRα中,经阳离子纳米脂质体包被后,治疗小鼠EAE,同时对其临床症状、脑部病理改变、外周血相关细胞因子及T/B细胞比例进行检测,了解该重组免疫毒素的治疗效果。结果:成功构建真核表达质粒DT390-mRantes-SRα,治疗组小鼠临床症状减轻,脑部特异性淋巴细胞浸润减少,外周T细胞相关细胞因子表达降低,T/B细胞比例降低。结论:新型重组免疫毒素DT390-mRantes治疗小鼠EAE有较为明显的效果,为治疗人的多发性硬化(MS)提供有益的借鉴。 展开更多
关键词 实验性变态性脑脊髓炎 DT390 mRantes 重组免疫毒素
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自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑血管内皮细胞VCAM-1和MHCⅡ类分子表达 被引量：1
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作者 刘红岩 杨贵贞 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期215-218,共4页
目的　探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)大鼠脑血管内皮细胞表面分子的改变。　方法　用免疫组织化学方法检测EAE大鼠脑血管内皮细胞上血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)和主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅱ类分子的表达。用MTT(四甲基偶氮唑... 目的　探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)大鼠脑血管内皮细胞表面分子的改变。　方法　用免疫组织化学方法检测EAE大鼠脑血管内皮细胞上血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)和主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅱ类分子的表达。用MTT(四甲基偶氮唑盐 )法检测不同发病级别大鼠血清TNF和IFN γ的水平。　结果　EAE大鼠脑血管内皮细胞较对照有诱导表达的VCAM 1和MHCⅡ类分子 ,血清中存在TNF和IFN γ活性。　结论　中枢神经系统炎症状态下 ,脑血管内皮细胞表面分子发生改变 。 展开更多
关键词 血管细胞粘附分子-1 相容性复合体Ⅱ类分子 自身免疫性脑脊髓炎 动物实验
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Irgm1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠CD4^+ T细胞亚群的影响 被引量：2
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作者 王彩红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期180-184,共5页
目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠CD4+T细胞的影响。方法:C57BL/6纯系小鼠与Irgm1基因敲除杂合小鼠(Irgm1+/-)回交十代繁殖C57BL/6背景下Irgm1+/... 目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠CD4+T细胞的影响。方法:C57BL/6纯系小鼠与Irgm1基因敲除杂合小鼠(Irgm1+/-)回交十代繁殖C57BL/6背景下Irgm1+/-小鼠,用C57BL/6 Irgm1+/-小鼠杂交获取Irgm1-/-、Irgm1+/-、Irgm1+/+三种基因型小鼠,PCR扩增DNA检测基因型。用髓鞘少突胶质糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG33-55)多肽与弗氏完全佐剂等量混合制成乳剂,免疫C57BL/6野生型(Wt.)和Irgm1基因敲除(Irgm1-/-)小鼠,建立EAE模型,并进行临床评分。MTT法测定MOG33-55免疫后7 d的EAE小鼠淋巴结细胞中MOG33-55特异性T细胞增殖分化水平。取MOG33-55免疫后14 d EAE小鼠脊髓切片,HE染色检测炎细胞浸润情况。取MOG33-55免疫后16 d的EAE-小鼠淋巴结、脊髓和脑组织,提取单个核细胞,用MOG33-55(20μg/ml)体外刺激培养7 d,收集细胞,用流式细胞仪分析EAE小鼠淋巴结、中枢神经系统浸润细胞中Th1、Th17的改变。结果:成功诱导了EAE小鼠模型;HE染色结果显示Wt.小鼠脊髓周围出现明显炎细胞浸润,而Irgm1-/-小鼠则无明显变化;MTT实验表明Irgm1-/-小鼠与Wt.小鼠相比,淋巴结中T细胞对MOG33-55特异性增殖能力降低;流式细胞分析表明相对于Wt.小鼠,Irgm1-/-小鼠EAE模型在淋巴结及中枢神经系统浸润细胞中Th1细胞亚群比例明显增高而Th17细胞亚群比例下降。结论:Irgm1基因敲除可部分保护EAE小鼠的脊髓功能及临床症状。在EAE发病早期,Irgm1可能起到了关键性的作用,因此Irgm1有可能成为EAE治疗的重要分子靶点。 展开更多
关键词 多发性硬化(MS) 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) 免疫相关GTP酶1(Irgm1) CD4+T细胞亚群
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CM-DiI标记的BMSCs在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的体内示踪分布 被引量：2
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作者 于欢 郝飞 +1 位作者 刘美辰 梁战华 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第9期1270-1276,共7页
目的观察并探讨CM-DiI标记骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植到实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠体内的示踪分布。方法全骨髓培养法分离培养大鼠BMSCs;用CM-DiI荧光染料进行体外标记;将标记后的BMSCs移植到EAE大鼠体内,观察移植后细胞的形... 目的观察并探讨CM-DiI标记骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植到实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠体内的示踪分布。方法全骨髓培养法分离培养大鼠BMSCs;用CM-DiI荧光染料进行体外标记;将标记后的BMSCs移植到EAE大鼠体内,观察移植后细胞的形态及分布。结果荧光显微镜下可在移植BMSCs的EAE大鼠大脑、小脑和脊髓切片内检测到发出红色荧光的细胞,疾病高峰期数量较多,主要位于软膜下和血管周围,形状为圆形或椭圆形;疾病缓解期大部分细胞仍存在,荧光强度略有减弱。结论CM-DiI是一种短中期标记、示踪BMSCs的良好染料,CM-DiI标记的BMSCs在EAE大鼠体内主要分布在血管周围,少量向脑实质内迁移。 展开更多
关键词 CM-DiI 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) 示踪
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从神经科学角度分析脱髓性疾病—免疫细胞,神经胶质细胞,神经细胞三者之间的相互作用 被引量：2
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作者 姜威 宋文斌 +1 位作者 李月玲 薛鹏 《中国卫生产业》 2014年第15期196-198,共3页
小胶质细胞(Microglia)对炎症性脱髓鞘性病变—多发性硬化症(MS)的发展起到至关重要的作用。作为抗原呈递细胞,小胶质细胞会对炎性淋巴细胞发挥作用,并产生炎性细胞因子,谷氨酸和活性氧。现在大家普遍认为神经退行性疾病是一种脱髓鞘病... 小胶质细胞(Microglia)对炎症性脱髓鞘性病变—多发性硬化症(MS)的发展起到至关重要的作用。作为抗原呈递细胞,小胶质细胞会对炎性淋巴细胞发挥作用,并产生炎性细胞因子,谷氨酸和活性氧。现在大家普遍认为神经退行性疾病是一种脱髓鞘病变,它会影响到多发性硬化症的预后表现。在神经退行性疾病—多发性硬化症的早期阶段,神经树突和轴突的串珠状肿胀的出现是神经病理学的标志。由小胶质细胞产生的谷氨酸和活性氧能启动串珠形成。最近我们的研究表明,当多发性硬化症发症时,小神经胶质细胞能减少细胞死亡及诱导神经营养因子分泌,而且产生抗炎症细胞因子和抗氧化剂酶来发挥神经保护作用。神经细胞被认为是小胶质细胞的被动目标,同时它也能够通过各种通路来控制小胶质细胞的活性,包括:细胞因子和趋化因子。受损的神经细胞一方面能分泌可溶性不规则趋化因子(sFKN;CX3CR1)并促进小胶质细胞吞噬神经细胞的碎片,同时也诱导小胶质细胞产生抗氧化血红素加氧酶-1(HO-1)。另外,我们还发现神经细胞分泌的IL-34可以诱导小胶质细胞的神经保护作用,同时也发现星形细胞也具有神经保护作用。由星形细胞产生的IL-33能诱导小胶质细胞的活化,但是,星形细胞的受体—Toll样受体却会诱导神经毒性分子分泌。因此,进一步探讨神经胶质细胞和神经细胞之间的良性互动的平衡关系,将来对于探讨神经退行性疾病的治疗策略来说是至关重要的。 展开更多
关键词 多发性硬化症(MS) 实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae) 串珠状肿胀 轴突变性 小胶质细胞 谷氨酸 星型细胞
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雌激素对实验性自身免疫性脑脊髓炎免疫性保护机制的研究进展 被引量：2
20
作者 李娜 王仁喜 肖鹤 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期323-325,350,共4页
实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是一种主要由特异性致敏CD4+T细胞介导的自身免疫性疾病,其主要特征是中枢神经系统(CNS)单个核细胞浸润以及脱髓鞘。由于与多发性硬化(MS)有着极其相似的组织病理学特征和免疫学特征,EAE动物模型作为经典... 实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是一种主要由特异性致敏CD4+T细胞介导的自身免疫性疾病,其主要特征是中枢神经系统(CNS)单个核细胞浸润以及脱髓鞘。由于与多发性硬化(MS)有着极其相似的组织病理学特征和免疫学特征,EAE动物模型作为经典模型已被广泛用于MS的相关研究。近年来,雌激素作为免疫调节剂用于治疗复发-缓解型MS已进入Ⅱ期临床试验。大量前期动物实验研究证实,高浓度雌激素能缓解EAE,但其具体的作用机制有待进一步阐明。本文主要就雌激素对EAE的免疫性保护机制做简要综述。 展开更多
关键词 雌激素 实验性自身免疫性脑脊髓炎 雌激素受体 T细胞 B细胞
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