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HPLC和UPLC法测定复方黄连素片中吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量的方法比较 被引量:10
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作者 张敏娟 黄秀梅 姜世贤 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2077-2081,共5页
目的:比较测定复方黄连素片中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的高效液相色谱法(HPLC)与超高效液相色谱法(UPLC)。方法:HPLC色谱条件:采用Atlantis C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以10 mmol.L-1醋酸铵(pH 3.5)为流动相A,乙腈为流动相B,... 目的:比较测定复方黄连素片中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的高效液相色谱法(HPLC)与超高效液相色谱法(UPLC)。方法:HPLC色谱条件:采用Atlantis C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以10 mmol.L-1醋酸铵(pH 3.5)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长240 nm,柱温35℃;UPLC色谱条件:Waters Acquity HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以10 mmol.L-1醋酸铵(pH 3.5)为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.5 mL.min-1,检测波长240 nm,柱温35℃。结果:HPLC测定,吴茱萸碱和吴茱萸次碱线性范围分别为0.425~5.30μg和0.409~5.110μg(r>0.999),平均回收率(n=9)分别为98.6%和99.0%;UPLC测定,吴茱萸碱和吴茱萸次碱线性范围分别为0.106~0.743μg和0.102~0.715μg(r>0.999),平均回收率(n=9)分别为99.1%和99.2%。结论:UPLC较HPLC更加简便迅速,既达到了分析的高通量,得到更高的分析灵敏度,又大大提高了分析速度,减少了有机溶剂的消耗。UPLC能够成功替代HPLC,为复方黄连素片中吴茱萸药材提供新的质量控制方法。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 超高效液相色谱法 中西药复方制剂 复方黄连素片 吴茱萸碱 吴茱萸次碱 方法比较 质量控制 质量评价
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吴茱萸碱抑制人结肠癌HCT-116细胞体外增殖和迁移 被引量:8
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作者 李海星 李晓朋 +5 位作者 刘泽洪 李科琼 石雪萍 熊伟 李静 陈地龙 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期3538-3544,共7页
吴茱萸碱(Evodiamine,Evo)对人结肠癌HCT-116细胞体外增殖和转移的影响及其可能机制初探。体外培养人结肠癌HCT-116细胞株,加入Evo1.5μmol/L、3μmol/L、6μmol/L、12μmol/L、24μmol/L、48μmol/L、96μmol/L继续培养48 h,CCK-8法检... 吴茱萸碱(Evodiamine,Evo)对人结肠癌HCT-116细胞体外增殖和转移的影响及其可能机制初探。体外培养人结肠癌HCT-116细胞株,加入Evo1.5μmol/L、3μmol/L、6μmol/L、12μmol/L、24μmol/L、48μmol/L、96μmol/L继续培养48 h,CCK-8法检测Evo对HCT-116细胞生存活性的影响;Transwell法和划痕法检测STF-118804、Evo对HCT-116细胞体外迁移的影响;RT-PCR和Western blotting检测不同浓度的Evo(0μmol/L,1.5μmol/L,3μmol/L,6μmol/L)和STF-118804(10μg/L)诱导HCT-116细胞48 h后,细胞中SIRT1、NF-кB、MMP-9蛋白的表达情况。不同浓度的Evo(1.5μmol/L,3μmol/L,6μmol/L,12μmol/L,24μmol/L,48μmol/L,96μmol/L)作用于HCT-116细胞48 h后,细胞的增殖均受到明显抑制(p<0.05),且在一定范围内呈浓度依赖性;且Evo能抑制HCT-116细胞的迁移。Evo可明显下调HCT-116细胞内SIRT1、MMP-9 m RNA和蛋白的表达,上调NF-кB m RNA和蛋白的表达。体外实验表明,Evo对结肠癌细胞增殖和迁移的抑制作用是通过抑制SIRT1的表达,激活NF-кB信号通路,进而抑制MMP-9来实现的。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 HCT-116细胞 增殖 迁移
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基于HK-2细胞的左金丸中生物碱类组分体外毒性筛选及机制初探 被引量:7
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作者 杨春启 连闻雨 +6 位作者 林毅 谢光辉 马增春 谭洪玲 肖成荣 王宇光 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期110-118,共9页
目的基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤。方法采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分。通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步... 目的基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤。方法采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分。通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步确定造成细胞损伤作用的生物碱,为组分中药配伍组方和配伍减毒提供体外毒理学依据。结果采用CCK-8法和高内涵技术初步筛选,表明吴茱萸碱(EVO)能够显著降低细胞数目,升高细胞膜通透性,降低线粒体膜电位。此外,细胞形态、细胞凋亡和细胞色素C表达与高内涵筛选结果一致,Western blot实验表明EVO能够诱导细胞凋亡造成肾细胞损伤。结论 EVO可明显导致肾细胞损伤,可能是通过影响线粒体、细胞色素C及细胞膜通透性诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 左金丸 吴茱萸碱 高内涵 肾毒性 凋亡 HK-2细胞
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基因芯片检测吴茱萸碱对小鼠DC细胞功能调控相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 祝绚 梁华平 鲍依稀 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期597-600,共4页
目的:利用基因芯片技术检测吴茱萸碱对小鼠骨髓来源DC功能调控相关基因表达的影响。方法:分离BALB/c小鼠骨髓细胞,经GM-CSF体外诱导培养10天的未成熟DC细胞(iDC)经不同因素处理并分为:对照组(Ⅰ)、吴茱萸碱组(EVO)(Ⅱ)、内毒素(LPS)组(... 目的:利用基因芯片技术检测吴茱萸碱对小鼠骨髓来源DC功能调控相关基因表达的影响。方法:分离BALB/c小鼠骨髓细胞,经GM-CSF体外诱导培养10天的未成熟DC细胞(iDC)经不同因素处理并分为:对照组(Ⅰ)、吴茱萸碱组(EVO)(Ⅱ)、内毒素(LPS)组(Ⅲ)、EVO+LPS组(Ⅳ),24小时后收集各组细胞,抽提总RNA,利用SuperArray公司小鼠DC与抗原提呈细胞基因芯片MM-604对细胞功能相关基因进行检测。结果:Ⅱ/Ⅰ上调≥2倍基因7个,下调≥2倍基因10个;Ⅲ/Ⅰ上调≥2倍基因37个,下调≥2倍基因12个;Ⅳ/Ⅱ上调≥2倍基因46个,下调≥2倍基因7个;Ⅳ/Ⅲ上调≥2倍基因24个,下调≥2基因2个,对这些基因功能进行检索分类,主要涉及细胞因子分泌及其受体表达、抗原摄取、抗原提呈、细胞表面受体、信号传导。结论:吴茱萸碱对DC作用涉及多个基因的表达调控,这些基因控制并影响着DC功能、分化和成熟,为进一步寻找药物靶点提供了线索。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 树突状细胞 基因芯片
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吴茱萸碱对小鼠树突状细胞分泌细胞因子的影响 被引量:3
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作者 赖思含 范霞 +4 位作者 魏强 杨雪 王希 鲍依稀 梁华平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期787-791,共5页
目的:利用抗体芯片技术和ELISA检测吴茱萸碱(EVO)对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)分泌相关细胞因子的影响,研究EVO的生物学调节功能。方法:体外诱导培养未成熟DC细胞(iDC),经LPS和EVO处理后,通过混合淋巴反应检测DC诱导异源T细胞的应答能... 目的:利用抗体芯片技术和ELISA检测吴茱萸碱(EVO)对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)分泌相关细胞因子的影响,研究EVO的生物学调节功能。方法:体外诱导培养未成熟DC细胞(iDC),经LPS和EVO处理后,通过混合淋巴反应检测DC诱导异源T细胞的应答能力,ELISA检测上清中IL-12p40、IL-12p70和IL-10,小鼠抗体芯片检测细胞上清中细胞因子。结果:EVO促进了iDC和成熟DC(mDC)抗原提呈功能(P<0.05),对iDC、mDC的细胞因子IL-10、IL-12分泌功能无影响(P>0.05),另外EVO处理iDC后上调大于2倍的细胞因子有7个(VEGF、DPPIV/CD26、IGF-Ⅰ、IL-17BR、MDC、Pro-MMP-9、Eotaxin-2),处理mDC后上调大于2倍的细胞因子有2个(Eotaxin-2、IL-13)。结论:EVO处理mDC和iDC后,细胞因子的分泌功能发生了明显改变,这些细胞因子影响着DC的抗原摄取、迁移、抗原提呈,为进一步寻找药物靶点提供了线索。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 树突状细胞 细胞因子 抗体芯片
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