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羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建
被引量：
6
1
作者
刘爱红
关贵全
+6 位作者
刘军龙
李有全
马米玲
牛庆丽
任巧云
殷宏
罗建勋
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第12期17-20,共4页
提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切,与毕赤酵母分泌性表...
提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-MPSP-P32,转化大肠埃希菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确。
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关键词
羊泰勒虫
表面蛋白P32基因
真核表达载体
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职称材料
草莓抗除草剂bar基因工程菌的构建及其检验
被引量：
3
2
作者
朱秀蕾
叶振风
朱立武
《中国农学通报》
CSCD
2008年第2期63-66,共4页
为探索草莓抗除草剂bar基因转化高效方法,试验利用三亲杂交法,将构建的真核表达载体pBI121-bar转入根癌农杆菌菌株LBA4404,对菌落PCR、质粒PCR和质粒双酶切产物进行电泳检测,用构建的工程菌转化草莓试管苗。研究结果表明,真核表达载体pB...
为探索草莓抗除草剂bar基因转化高效方法,试验利用三亲杂交法,将构建的真核表达载体pBI121-bar转入根癌农杆菌菌株LBA4404,对菌落PCR、质粒PCR和质粒双酶切产物进行电泳检测,用构建的工程菌转化草莓试管苗。研究结果表明,真核表达载体pBI121-bar被成功转入根癌农杆菌LBA4404;草莓试管苗工程菌侵染最佳浓度菌液OD600值为0.5,脱菌Cef适宜浓度200mg/L;已筛选出草莓抗除草剂bar基因抗性芽。
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关键词
真核表达载体
根癌农杆菌
工程菌
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职称材料
靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
2
3
作者
陈岐辉
卢绩
+2 位作者
王小庆
王春喜
姚子明
《中国实验诊断学》
2008年第1期42-46,共5页
目的构建靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索HIWI基因的作用的研究做准备。方法根据HIWI mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的...
目的构建靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索HIWI基因的作用的研究做准备。方法根据HIWI mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体中,经测序证明与设计相同。结论成功构靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究HIWI基因在干细胞和肿瘤细胞中的作用机制及后续的体内外RNAi实验研究奠定了基础。
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关键词
HIWI基因
RNA干扰
SHRNA
真核表达载体
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职称材料
HBsAg真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达
被引量：
1
4
作者
张艳
时成波
+1 位作者
郭丽
范洪学
《中国实验诊断学》
2007年第10期1287-1289,共3页
目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-α...
目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-αS-dhfr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO(dhfr-)细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1-αS-dhfr经酶切鉴定与预期一致。转染重组质粒后的CHO细胞成功表达了HBsAg。结论已成功构建了真核表达载体pEF1-αS-dhfr,为研究高效表达HBsAg奠定了良好的实验基础。
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关键词
真核表达载体
CHO细胞
人延伸因子启动子
乙肝表面抗原
二氢叶酸还原酶基因
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职称材料
AnnexinⅡ基因克隆及真核表达载体的构建
5
作者
刘亚伟
戴兵
+1 位作者
蔡厚安
梅长林
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期12-14,共3页
目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到p...
目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到pcDNA3.1载体中,并进行序列测定。结果DNA测序证实该片段序列与Genbank完全一致。结论成功克隆人Annexin II全长cDNA序列,并构建出pcDNA3.1—Annexin II真核表达载体,为进一步研究其在肾脏疾病中的作用和机制奠定基础。
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关键词
克隆
AnnexinⅡ
真核表达载体
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职称材料
题名
羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建
被引量：
6
1
作者
刘爱红
关贵全
刘军龙
李有全
马米玲
牛庆丽
任巧云
殷宏
罗建勋
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第12期17-20,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30571397)
国家863计划项目(2006AA10A206)
国家"十一五"科技支撑计划项目(2006AA10A207)
文摘
提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-MPSP-P32,转化大肠埃希菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确。
关键词
羊泰勒虫
表面蛋白P32基因
真核表达载体
Keywords
ovine
Theileria
surface
protein
P32
gene
eukaryofic
expression
vector
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S852.723 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
草莓抗除草剂bar基因工程菌的构建及其检验
被引量：
3
2
作者
朱秀蕾
叶振风
朱立武
机构
安徽农业大学果树学重点实验室
出处
《中国农学通报》
CSCD
2008年第2期63-66,共4页
基金
安徽省高等学校优秀人才计划(040508011)
文摘
为探索草莓抗除草剂bar基因转化高效方法,试验利用三亲杂交法,将构建的真核表达载体pBI121-bar转入根癌农杆菌菌株LBA4404,对菌落PCR、质粒PCR和质粒双酶切产物进行电泳检测,用构建的工程菌转化草莓试管苗。研究结果表明,真核表达载体pBI121-bar被成功转入根癌农杆菌LBA4404;草莓试管苗工程菌侵染最佳浓度菌液OD600值为0.5,脱菌Cef适宜浓度200mg/L;已筛选出草莓抗除草剂bar基因抗性芽。
关键词
真核表达载体
根癌农杆菌
工程菌
Keywords
eukaryofic
expression
vector
,
Agrobacterium
tumefaciens,
project
agrobacterium
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
2
3
作者
陈岐辉
卢绩
王小庆
王春喜
姚子明
机构
吉林大学第一医院泌尿外科
舒兰市医院外科
出处
《中国实验诊断学》
2008年第1期42-46,共5页
文摘
目的构建靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索HIWI基因的作用的研究做准备。方法根据HIWI mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体中,经测序证明与设计相同。结论成功构靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究HIWI基因在干细胞和肿瘤细胞中的作用机制及后续的体内外RNAi实验研究奠定了基础。
关键词
HIWI基因
RNA干扰
SHRNA
真核表达载体
Keywords
HIWI
gene
RNA
interference
shRNA
eukaryofic
expression
vector
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
HBsAg真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达
被引量：
1
4
作者
张艳
时成波
郭丽
范洪学
机构
吉林大学公共卫生学院
长春生物制品研究所
出处
《中国实验诊断学》
2007年第10期1287-1289,共3页
文摘
目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-αS-dhfr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO(dhfr-)细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1-αS-dhfr经酶切鉴定与预期一致。转染重组质粒后的CHO细胞成功表达了HBsAg。结论已成功构建了真核表达载体pEF1-αS-dhfr,为研究高效表达HBsAg奠定了良好的实验基础。
关键词
真核表达载体
CHO细胞
人延伸因子启动子
乙肝表面抗原
二氢叶酸还原酶基因
Keywords
eukaryofic
expression
vector
CHO
cell
hEF-1α
HBsAg
dhfr
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
AnnexinⅡ基因克隆及真核表达载体的构建
5
作者
刘亚伟
戴兵
蔡厚安
梅长林
机构
第二军医大学长征医院肾内科解放军肾脏病中心
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期12-14,共3页
基金
国家自然科学基金面上项目(30271523
30576867)
国家自然科学基金重点项目(30330640)
文摘
目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到pcDNA3.1载体中,并进行序列测定。结果DNA测序证实该片段序列与Genbank完全一致。结论成功克隆人Annexin II全长cDNA序列,并构建出pcDNA3.1—Annexin II真核表达载体,为进一步研究其在肾脏疾病中的作用和机制奠定基础。
关键词
克隆
AnnexinⅡ
真核表达载体
Keywords
cloning
annexin
Ⅱ
eukaryofic
expression
vector
分类号
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建
刘爱红
关贵全
刘军龙
李有全
马米玲
牛庆丽
任巧云
殷宏
罗建勋
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009
6
下载PDF
职称材料
2
草莓抗除草剂bar基因工程菌的构建及其检验
朱秀蕾
叶振风
朱立武
《中国农学通报》
CSCD
2008
3
下载PDF
职称材料
3
靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定
陈岐辉
卢绩
王小庆
王春喜
姚子明
《中国实验诊断学》
2008
2
下载PDF
职称材料
4
HBsAg真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达
张艳
时成波
郭丽
范洪学
《中国实验诊断学》
2007
1
下载PDF
职称材料
5
AnnexinⅡ基因克隆及真核表达载体的构建
刘亚伟
戴兵
蔡厚安
梅长林
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006
0
下载PDF
职称材料
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