耐氟康唑白念珠菌ERG11的基因突变 被引量：14

1

作者 龙丰 张永信 +3 位作者 兰和魁 王荫榆 朱德妹 任大明 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期211-214,共4页

目的　研究国内临床耐氟康唑白念珠菌的吡咯类药物作用靶酶———细胞色素P 45 0羊毛固醇 14 α脱甲基酶的基因ERG11突变。方法　用酶消化和碱裂解法抽提基因组DNA ,PCR扩增ERG11基因的读码框片段 ,将目的片段与PBS载体 (BluscriptM 13... 目的　研究国内临床耐氟康唑白念珠菌的吡咯类药物作用靶酶———细胞色素P 45 0羊毛固醇 14 α脱甲基酶的基因ERG11突变。方法　用酶消化和碱裂解法抽提基因组DNA ,PCR扩增ERG11基因的读码框片段 ,将目的片段与PBS载体 (BluscriptM 13)连接 ,重组体转入DH5α中 ,从而测定序列。结果　在 15株耐药菌中共发现了 12个有义点突变、17个无义点突变和一个菌株的部分移码。 12个有义点突变的氨基酸变异是F72L、D81G、D116E、K12 8T、Y132H、E2 6 6D、D2 94G、S36 1P、M 374V、P386L、H40 0R和Q474K ,突变主要靠近羧基端 ;而敏感株的氨基酸变异为F72L、K12 8T和E2 6 6D ,靠近氨基端。耐药株的D2 94G、S36 1P、M374V、P386L、H40 0R和Q474K氨基酸变异与文献报道不同。结论　耐药株和敏感株的点突变不同 ,D2 94G、S36 1P、M374V、P386L、H40 0R和Q474K变异位点可能与耐药性有关 ,做整段编码基因的功能表达 。 展开更多

关键词 氟康唑 白念珠菌 erg11 耐药性 基因突变 细胞色素P-450

原文传递

白假丝酵母ERG11基因突变分析 被引量：9

2

作者 王应斌 王宏 +2 位作者 郭辉玉 赵永忠 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第11期1390-1393,共4页

目的探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系。方法选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11... 目的探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系。方法选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11基因序列进行PCR扩增,PCR产物直接DNA序列测定,最后应用BLAST和ClustalW软件对测序结果进行比较。结果13株白假丝酵母菌的ERG11基因序列(以已知序列第1个ATG起始密码的A作为第1个记数单位)共有21个位点发生突变,其中17个同义突变位点和4个错义突变位点;在第348bp位点和第383bp位点,耐药菌株和药物敏感株均可发生D116E和K128T变异;在靶酶活性中心血色素结合区和疏水端螺旋区的对应基因片段,耐药株在第1309bp位点可致V437I变化;在第1320bp位点耐药菌株发生碱基突变,形成A、C基因杂合子,有可能导致N440K变化。结论(1)ERG11基因的D116E和K128T位点变异可能与白假丝酵母菌耐药无关;(2)ERG11基因的V437I和N440K位点的改变,可能与耐药形成有关。 展开更多

关键词 白假丝酵母菌 erg11基因 耐药性 氟康唑 基因突变

下载PDF 职称材料

白色假丝酵母菌ERG11基因突变与高表达在唑类药物交叉耐药中的作用 被引量：7

3

作者 乔祖莎 冯文莉 +3 位作者 杨静 奚志琴 马彦 张谨宇 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期4594-4597,共4页

目的初步探讨白色假丝酵母菌ERG11基因突变、高表达对唑类药物交叉耐药的作用,为临床合理用药提供理论依据。方法自2014年9月-2015年10月收集43株白色假丝酵母菌临床菌株进行体外药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ERG11基因并测序... 目的初步探讨白色假丝酵母菌ERG11基因突变、高表达对唑类药物交叉耐药的作用,为临床合理用药提供理论依据。方法自2014年9月-2015年10月收集43株白色假丝酵母菌临床菌株进行体外药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ERG11基因并测序、分析其突变情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测ERG11基因mRNA的表达水平。结果 43株实验菌株中有药物敏感菌株15株、单药耐药菌株13株、交叉耐药菌株15株,其中9株交叉耐药菌株出现5个错义突变,分别为T123I、Y132H、E174A、G450E、G464S,交叉耐药菌株ERG11基因突变概率显著高于单药耐药菌株及药物敏感菌株(P<0.05);交叉耐药菌株ERG11基因mRNA的表达量(4.00±2.06)显著高于药物敏感菌株(0.93±0.21)(P<0.05),但与单药耐药菌株(3.92±1.01)相比无统计学差异。结论 ERG11基因突变及高表达均为白色假丝酵母菌耐药的机制,其交叉耐药的产生与基因突变相关,与高表达关系尚待进一步研究。 展开更多

关键词 白色假丝酵母菌 交叉耐药 erg11基因 基因突变 基因高表达

原文传递

白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变分析 被引量：7

4

作者 王明永 翟晶晶 +10 位作者 左萌洁 薛宁 刘萌萌 凌明智 高继娟 邢骏 田文倩 胡亚会 于凤婷 谭耀鹏 王凡平 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2401-2404,共4页

目的分析白色假丝酵母菌临床分离株对氟康唑的耐药性,阐明耐氟康唑白色假丝酵母菌Erg11基因突变。方法回顾性分析2011年6月-2012年12月医院患者送检各类标本分离的287株假丝酵母菌属,采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)M27-A3推荐的... 目的分析白色假丝酵母菌临床分离株对氟康唑的耐药性,阐明耐氟康唑白色假丝酵母菌Erg11基因突变。方法回顾性分析2011年6月-2012年12月医院患者送检各类标本分离的287株假丝酵母菌属,采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)M27-A3推荐的微量稀释法进行体外药敏试验,从177株白色假丝酵母菌中筛选出7株对氟康唑耐药株,对氟康唑靶酶基因Erg11进行PCR扩增、测序,与Genbank上标准序列(X13296)比对分析。结果在7株白色假丝酵母菌氟康唑耐药株和1株敏感株中共发现25个点突变,其中15个同义突变,10个错义突变,10个错义突变分别为V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G、D116E、K119N、K128T、D153E、E266D,其中V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G是新发现的。结论成功分析了白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变。 展开更多

关键词 白色假丝酵母菌 氟康唑 耐药性 erg11基因 突变 序列分析

原文传递

白色假丝酵母菌ERG11基因突变与唑类抗真菌药物耐药的关系 被引量：6

5

作者 李莉 苏维奇 《中华实用诊断与治疗杂志》 2011年第9期870-872,875,共4页

目的探讨白色假丝酵母菌ERG11基因突变与唑类抗真菌药物耐药的关系。方法纸片扩散法初步筛选临床分离的耐唑类抗真菌药物的白色假丝酵母菌,测定初筛耐药株对氟康唑和伊曲康唑的最低抑菌浓度,随机选择10株白色假丝酵母耐药株,提取基因组... 目的探讨白色假丝酵母菌ERG11基因突变与唑类抗真菌药物耐药的关系。方法纸片扩散法初步筛选临床分离的耐唑类抗真菌药物的白色假丝酵母菌,测定初筛耐药株对氟康唑和伊曲康唑的最低抑菌浓度,随机选择10株白色假丝酵母耐药株,提取基因组DNA。利用DNASTAR软件辅助设计3对PCR引物,以提取的目的 DNA为模板,分别从前(P1)、中(P2)、后(P3)3段扩增ERG11基因全序列。扩增后的PCR产物经纯化后测序,将测序结果与GenBank中已知标准序列(X13296)进行比较分析。结果电泳结果显示,获得的3段PCR产物大小与预期结果一致。测序结果显示成功获得10株白色假丝酵母菌ERG11全基因序列。与GenBank中标准株序列(X13296)比较,耐药株均存在同义突变和错义突变,共27个碱基突变位点。15个位点是错义突变,其中F126LI、166N、H183Q、V437I、S453F和N490K为新发现的突变位点。结论耐唑类抗真菌药物的白色假丝酵母菌ERG11基因有多个发生错义突变的位点,且为多点突变,可能与其耐药有关。 展开更多

关键词 白色假丝酵母菌 erg11基因 唑类抗真菌药物 耐药机制

原文传递

白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因PCR-RFLP比较分析 被引量：5

6

作者 张宏 董正蓉 +1 位作者 谢明 易敏 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期71-74,共4页

目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERGIl基因限制性片段长度多态性分析，比较两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提来自同一亲本、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌（CA-1，CA-2，CA-4，CA-6，CA-7，CA-9，CA-11，CA-13～CA-17）菌丝相... 目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERGIl基因限制性片段长度多态性分析，比较两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提来自同一亲本、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌（CA-1，CA-2，CA-4，CA-6，CA-7，CA-9，CA-11，CA-13～CA-17）菌丝相与酵母相基因组DNA，根据ERG11基因序列设计一对引物，对其进行PCR扩增（包括部分上游和下游非编码区），扩增产物分别用AccⅠ和MunⅠ消化、琼脂糖凝胶电泳后观察。结果各株白念珠菌菌丝相与酵母相均能扩增出约1734bp大小的目的片段，CA-7，CA-14，CA．16和CA-17株两相细胞ERG11基因RFLP图谱存在差异，其余受试菌株未见差异。结论从DNA全貌来看，白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因存在差异。 展开更多

关键词 白念珠菌 茼丝相 酵母相 erg11基因 差异 限制性片段长度多态性

下载PDF 职称材料

菌丝相和酵母相白念珠菌ERG1 1基因部分序列差异性的研究(英文) 被引量：5

7

作者 石婧 张宏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期44-46,49,共4页

目的　研究白念珠菌菌丝相和酵母细胞氟康唑作用的靶酶编码基因 (ERG11)碱基序列上的差异 ,从而探讨两相细胞之间的差异性。方法　分别抽提 7株来自同一母体、依次对氟康唑逐渐耐药的白念珠菌菌丝和酵母相的基因组DNA ,根据ERG11编码序... 目的　研究白念珠菌菌丝相和酵母细胞氟康唑作用的靶酶编码基因 (ERG11)碱基序列上的差异 ,从而探讨两相细胞之间的差异性。方法　分别抽提 7株来自同一母体、依次对氟康唑逐渐耐药的白念珠菌菌丝和酵母相的基因组DNA ,根据ERG11编码序列设计一对引物 ,对ERG11基因的第 4 0 3位点至第 70 1位点的 2 98的碱基序列进行PCR扩增 ,经PCR产物直接测序比较两相ERG11基因碱基序列上的差异。结果　 7株白念珠菌的菌丝相与酵母相细胞间的ERG11基因碱基序列在该片断上无差异。结论　菌丝相和在酵母相白念珠菌ERG11基因的部分碱基序列是无差异的。 展开更多

关键词 白念珠菌 菌丝相 酵母相 差异 erg11基因

下载PDF 职称材料

无菌部位侵袭性念珠菌感染的临床特征、药物敏感性及风险因素分析 被引量：3

8

作者 夏金星 鲁凡博 +1 位作者 黄玮 徐元宏 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第7期1-7,共7页

目的探讨住院患者无菌部位侵袭性念珠菌感染的菌株分布、临床特征、药物敏感性及风险因素。方法跟踪收集116例住院患者无菌部位样本,通过真菌培养、分离与MALDI-TOF MS全自动生物质谱鉴定系统共获80株念珠菌;采用真菌药敏试验检验抗菌... 目的探讨住院患者无菌部位侵袭性念珠菌感染的菌株分布、临床特征、药物敏感性及风险因素。方法跟踪收集116例住院患者无菌部位样本,通过真菌培养、分离与MALDI-TOF MS全自动生物质谱鉴定系统共获80株念珠菌;采用真菌药敏试验检验抗菌药物敏感性,结合患者临床资料分析念珠菌菌株分布、临床特征及药敏特点;对唑类耐药热带念珠菌进行ERG3和ERG11基因测序,以探讨其唑类耐药可能分子机制。结果白色念珠菌是侵袭性念珠菌感染最常见致病菌(45.00%),其次为光滑念珠菌(32.50%)和热带念珠菌(13.75%)。分离标本以尿液(50.00%)为主,分泌物(22.75%)和血液(5.00%)次之。患者年龄、住院时间、相关侵袭性操作及癌症与侵袭性念珠菌感染显著相关(P<0.05)。两性霉素B和5-氟胞嘧啶对念珠菌均有良好的体外抑菌活性。唑类药物对大多数念珠菌体外敏感性较好;而热带念珠菌对唑类药物敏感性普遍较低(54.50%~81.80%),且唑类耐药性热带念珠菌ERG11基因测序显示皆存在2处错义突变(A395T和C461T)。结论白色念珠菌为住院患者侵袭性念珠菌感染主要致病菌;患者特征性自身因素和临床有创性干预应考虑作为侵袭性念珠菌无菌部位感染主要危险因子;临床常用抗真菌药物对非热带念珠菌呈现良好体外抑菌活性,而热带念珠菌ERG11基因突变蛋白产物(Y132F和S154F)或与其唑类耐药相关。 展开更多

关键词 侵袭性念珠菌 菌种分布 药物敏感性 热带念珠菌 erg11基因 erg3基因 风险因素

下载PDF 职称材料

ERG11基因与热带念珠菌唑类药物耐药关系的研究 被引量：4

9

作者 王影 项明洁 +2 位作者 刘锦燕 叶书来 周馨 《中国真菌学杂志》 CSCD 2019年第6期332-337,共6页

目的探讨临床唑类药物耐药热带念珠菌菌株ERG11基因突变及表达情况。方法连续收集临床分离的热带念珠菌菌株,采用微量肉汤稀释法检测其对氟康唑、伏立康唑及伊曲康唑的药物敏感性,对唑类药物耐药菌株及部分敏感菌株进行ERG11基因测序,... 目的探讨临床唑类药物耐药热带念珠菌菌株ERG11基因突变及表达情况。方法连续收集临床分离的热带念珠菌菌株,采用微量肉汤稀释法检测其对氟康唑、伏立康唑及伊曲康唑的药物敏感性,对唑类药物耐药菌株及部分敏感菌株进行ERG11基因测序,同时采用RT-PCR测定ERG11基因表达量。结果临床共分离92株热带念珠菌菌株,其中有29株为唑类药物耐药菌株,耐药率31.52%。40株热带念珠菌(29株耐药菌株和11株敏感菌株)ERG11基因序列共发现2个错义突变(S154F、Y132F)和5个同义突变,其中24株唑类药物耐药菌株同时出现上述两个错义突变位点。实时荧光定量PCR结果显示,在29株唑类药物耐药菌株中有19株其ERG11基因表达量较敏感菌株增高。分析16株对3种唑类药物全耐药菌株及其余13株仅对一种或两种药物耐药菌株,显示前者ERG11基因表达水平高于后者,差异有统计学意义。结论临床热带念珠菌唑类药物耐药与ERG11基因突变及过表达有关,有关热带念珠菌唑类药物的耐药机制还需进一步研究。 展开更多

关键词 热带念珠菌 唑类药物耐药 erg11基因

下载PDF 职称材料

白念珠菌14-α脱甲基酶K143Q氨基酸置换与氟康唑耐药形成的相关性研究 被引量：4

10

作者 刘锦燕 倪培华 +2 位作者 史册 魏冰 项明洁 《检验医学》 CAS 2014年第7期750-754,共5页

目的研究临床耐氟康唑白念珠菌14-α脱甲基酶的K143Q氨基酸置换与氟康唑耐药形成的关系。方法运用体外定点突变技术构建ERG11基因A427C突变型重组质粒,并利用酶切、连接构建YES2/CT酵母表达质粒。通过构建成的表达质粒在酿酒酵母中的异... 目的研究临床耐氟康唑白念珠菌14-α脱甲基酶的K143Q氨基酸置换与氟康唑耐药形成的关系。方法运用体外定点突变技术构建ERG11基因A427C突变型重组质粒,并利用酶切、连接构建YES2/CT酵母表达质粒。通过构建成的表达质粒在酿酒酵母中的异源性表达及体外药物敏感性表型的检测,分析其致K143Q氨基酸置换与白念珠菌对氟康唑产生耐药的关系。结果真菌体外药物敏感性表型检测显示,含氨基酸置换的表达质粒转染于酿酒酵母INVSc1后,氟康唑最低抑菌浓度(MIC)增加16倍。结论 K143Q可增强白念珠菌对氟康唑的耐药性。 展开更多

关键词 白念珠菌 氟康唑 erg11基因 错义突变 定点突变技术 酿酒酵母 异源性表达

下载PDF 职称材料

白念珠菌ERG11基因突变及高表达对耐药的影响 被引量：3

11

作者 王一如 冯文莉 +2 位作者 杨静 奚志琴 乔祖莎 《国际医药卫生导报》 2014年第16期2417-2421,共5页

目的 探讨白念珠菌ERG11基因突变、高表达及二者的相互作用在氟康唑耐药中的作用.方法 采用PCR法扩增实验菌株的ERG11基因,并进行测序及生物信息学分析,筛查突变位点;抽提实验菌株总RNA,并逆转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR（FQ-RT-PC... 目的 探讨白念珠菌ERG11基因突变、高表达及二者的相互作用在氟康唑耐药中的作用.方法 采用PCR法扩增实验菌株的ERG11基因,并进行测序及生物信息学分析,筛查突变位点;抽提实验菌株总RNA,并逆转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR（FQ-RT-PCR）法检测ERG11基因的表达水平.结果 24株临床菌株中,共检测出ERG 11基因存在24个同义突变位点和5个错义突变位点,其中,E174A、T123I、V234F为新发位点;白念珠菌ERG11基因在耐药组中的表达量高于敏感组,差异具有统计学意义未发生错义突变的白念珠菌耐药株ERG11基因的表达量高于发生错义突变的,差异具有统计学意义.结论 白念珠菌ERG 11基因的5个错义突变A114V、E174A、T123I、Y132H、V234F可能与氟康唑耐药形成有关;ERG11基因的高表达可能与氟康唑耐药有关;ERG11基因的错义突变可能对该基因的高表达存在抑制作用. 展开更多

关键词 白念珠菌 erg11基因 耐药性 基因突变 高表达

下载PDF 职称材料

热带念珠菌的分布特征及其耐药性与ERG11和UPC2表达的关系 被引量：3

12

作者 王丹 俸家富 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1686-1689,共4页

目的分析2016年至2018年成都医学院第一附属医院临床分离热带念珠菌的分布特征和耐药性,以及ERG11和UPC2基因表达与唑类药物耐药的关系。方法用沙保罗培养基、科玛嘉念珠菌显色培养基及法国ATB微生物鉴定和药敏分析仪对该院临床分离的... 目的分析2016年至2018年成都医学院第一附属医院临床分离热带念珠菌的分布特征和耐药性,以及ERG11和UPC2基因表达与唑类药物耐药的关系。方法用沙保罗培养基、科玛嘉念珠菌显色培养基及法国ATB微生物鉴定和药敏分析仪对该院临床分离的热带念珠菌进行培养、鉴定及药敏试验,再提取收集菌株的总RNA,用实时荧光定量聚合酶链反应对热带念珠菌ERG11和UPC2基因mRNA进行相对定量检测。结果2016年至2018年临床分离的念珠菌共2276株,其中热带念珠菌238株,科室主要分布于呼吸内科和重症监护室,样本类型以气道分泌物为主。热带念珠菌对氟康唑、伊曲康唑及伏立康唑的耐药率逐年增加。耐药组的ERG11和UPC2 mRNA相对表达水平分别为1.58±0.90和1.40±0.92,均显著高于敏感组的0.48±0.26和0.45±0.27,差异均有统计学意义(均P<0.001),且耐药组两基因表达呈线性正相关(r=0.571,P<0.05)。结论热带念珠菌ERG11和UPC2基因的过度表达能够增加抗真菌药物的耐药性。针对临床的高危患者,若能够常规检测ERG11和UPC2基因,可及时为临床合理应用抗真菌药物提供理论依据。 展开更多

关键词 热带念珠菌 耐药性 erg11基因 UPC2基因

原文传递

光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的分子机制 被引量：2

13

作者 沈银忠 卢洪洲 张永信 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期245-249,共5页

目的明确光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。方法采用实时荧光定量RT—PCR技术对光滑念珠菌临床分离株ERG11、CDR1和CDR2基因表达的mRNA进行相对定量，比较氟康唑耐药株与敏感株基因表达水平的差异。结果在光滑念珠菌氟... 目的明确光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。方法采用实时荧光定量RT—PCR技术对光滑念珠菌临床分离株ERG11、CDR1和CDR2基因表达的mRNA进行相对定量，比较氟康唑耐药株与敏感株基因表达水平的差异。结果在光滑念珠菌氟康唑耐药株、剂量依赖性敏感株及敏感株中，ERG11基因mRNA相对表达量分别为：121．4±96．8、102．9±78．8、51．2±20．7；CDR1基因mRNA相对表达量分别为：3．1±1．4、1．9±0．7、1．1±0．4；CDR2基因mRNA相对表达量分别为：3．7±2．2、3．4．4-2．4、1．9±0．9。耐药株ERG11基因mRNA表达量高于敏感株（P=0．041）；耐药株（P〈0．001）和剂量依赖性敏感株（P=0．009）CDRl基因mRNA表达量均高于敏感株；耐药株CDR2基因mRNA表达量高于敏感株（P=0．018）。随着光滑念珠菌对氟康唑敏感性的降低，ERG11、CDR1及CDR2基因mRNA的表达量均不同程度上升。结论ERG11、CDR1及CDR2基因mRNA的上调表达与光滑念珠菌临床分离株对氟康唑的耐药性有关，ERG11、CDR1及CDR2基因上调表达是光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。 展开更多

关键词 念珠菌 光滑 氟康唑 erg11基因 CDR1基因 CDR2基因

原文传递

新疆某医院侵袭性念珠菌感染的菌种分布、药物敏感性及耐药基因初步分析 被引量：1

14

作者 张松迪 王晓东 +2 位作者 艾柯代·玉苏甫 哈地利亚·哈斯木 帕丽达·阿布利孜 《中国真菌学杂志》 CSCD 2023年第6期493-500,共8页

目的了解新疆某医院侵袭性念珠菌感染的菌株分布、药敏特征,探讨菌株对唑类抗真菌药的耐药机制。方法对分离自临床诊断深部真菌病患者的125株菌行形态学和分子生物学鉴定,分析念珠菌菌种分布特点、对9种抗真菌药的体外敏感性以及对唑类... 目的了解新疆某医院侵袭性念珠菌感染的菌株分布、药敏特征,探讨菌株对唑类抗真菌药的耐药机制。方法对分离自临床诊断深部真菌病患者的125株菌行形态学和分子生物学鉴定,分析念珠菌菌种分布特点、对9种抗真菌药的体外敏感性以及对唑类药物耐药菌株行ERG11和PDR1基因测序分析。结果鉴定成功的111株酵母菌株中,分离率在前三位的菌种次为白念珠菌(50.45%)、光滑念珠菌(18.02%)和热带念珠菌(15.32%)。药敏结果显示多数菌株对两性霉素B、5-氟胞嘧啶和棘白菌素类药物敏感,2株光滑念珠菌菌株对棘白菌素类药物耐药。白念珠菌对唑类药物体外敏感性较好,泊沙康唑和伏立康唑对光滑念珠菌和热带念珠菌的体外抑菌活性较低(<60%)。33株唑类耐药念珠菌(6株白念珠菌、14株光滑念珠菌、11株热带念珠菌、1株克柔念珠菌和1株近平滑念珠菌)中有9株存在ERG11基因错义突变,所有唑类耐药光滑念珠菌均存在PDR1基因错义突变。结论侵袭性念珠菌感染的主要致病菌为白念珠菌;棘白菌素类、两性霉素B、5-氟胞嘧啶对念珠菌整体的体外抑菌活性较好,唑类药物对光滑念珠菌和热带念珠菌的抑菌活性较低;念珠菌ERG11和PDR1基因突变可能与唑类耐药相关。 展开更多

关键词 念珠菌 菌种分布 药敏特征 erg11基因 PDR1基因 突变

下载PDF 职称材料

阴道白假丝酵母菌的耐药性和ERG11基因突变关系研究 被引量：3

15

作者 谭皓妍 李倩珺 +1 位作者 冯浩华 何艳屏 《热带医学杂志》 CAS 2014年第11期1438-1441,共4页

目的探讨ERG11基因突变与白假丝酵母菌对吡咯类药物敏感性下降的关系。方法收集VVC患者的白假丝酵母菌60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验,选取所有中度敏感株和耐药株用聚合酶链反应扩增(PCR)ERG11基因,... 目的探讨ERG11基因突变与白假丝酵母菌对吡咯类药物敏感性下降的关系。方法收集VVC患者的白假丝酵母菌60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验,选取所有中度敏感株和耐药株用聚合酶链反应扩增(PCR)ERG11基因,将PCR产物进行测序分析和比对分析。结果 60株白假丝酵母菌对咪康唑、酮康唑和氟康唑敏感率分别为36.7%、56.1%和80%;将38株中度敏感株和耐药株进行ERG11基因分析后共发现29个有义突变和25个同义突变,其中,有义突变中发现多个新突变位点。结论有些新发现的突变位点可能与耐药相关;多位点有义突变可能降低菌株对药物的敏感性。 展开更多

关键词 白假丝酵母菌 吡咯类药物 耐药 erg11基因 突变

原文传递

5种常见念珠菌反向斑点杂交技术的研究 被引量：2

16

作者 武学成 龚文胜 +2 位作者 吴长洪 钟宝辉 郝夏琼 《中国热带医学》 CAS 2011年第5期595-597,共3页

目的建立白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌的反向斑点杂交诊断技术。方法针对念珠菌ERG11保守基因设计引物和杂交探针,对探针进行标记然后固定在尼龙膜形成一种杂交膜,将PCR产物点样在杂交膜进行斑点杂交... 目的建立白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌的反向斑点杂交诊断技术。方法针对念珠菌ERG11保守基因设计引物和杂交探针,对探针进行标记然后固定在尼龙膜形成一种杂交膜,将PCR产物点样在杂交膜进行斑点杂交,显色。结果通过通用引物扩增五种常见念珠菌DNA片段,大小为350bp。构建了5种念珠菌的反向斑点杂交膜,与其PCR产物反应特异性好,灵敏度高。结论本研究建立的反向斑点杂交技术可快速、准确地鉴定临床常见念珠菌,有望在临床微生物诊断中广泛应用。 展开更多

关键词 念珠菌 反向斑点杂交 erg11基因

原文传递

侵袭性感染白假丝酵母ERG11突变分析与氟康唑耐药关系研究 被引量：2

17

作者 敖家富 石秀芳 +2 位作者 孙峰 昝丽娜 佘亚辉 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1296-1299,共4页

目的明确医院侵袭性感染的白假丝酵母氟康唑耐药的主要分子机制及其与ERG11突变的关系,以指导临床抗真菌的治疗。方法收集2015年1月-2017年6月医院临床住院患者分离的50株侵袭性感染白假丝酵母,采用VITEK-2COMPACT进行检测及药敏分析,... 目的明确医院侵袭性感染的白假丝酵母氟康唑耐药的主要分子机制及其与ERG11突变的关系,以指导临床抗真菌的治疗。方法收集2015年1月-2017年6月医院临床住院患者分离的50株侵袭性感染白假丝酵母,采用VITEK-2COMPACT进行检测及药敏分析,提取其真菌基因组DNA,采用PCR检测ERG11基因并测序分析,同时采用实时荧光定量RT-PCR检测ERG11基因mRNA相对表达量,并采用SPSS19.0统计软件分析氟康唑耐药与ERG11突变及相对表达量之间关系。结果 50株侵袭性白假丝酵母主要来自尿液、伤口分泌物和腹水标本,其中对氟康唑耐药11株,氟康唑剂量依赖性耐药10株,氟康唑敏感29株;ERG11基因扩增及测序分析发现15个突变位点,其中11个为同义突变,无氨基酸改变,4个为错义突变;白假丝酵母氟康唑耐药株、剂量依赖性敏感株和氟康唑敏感菌株ERG11基因的mRNA表达水平之间比较差异有统计学意义(F=78.30,P=0.002);随着白假丝酵母对氟康唑敏感性的降低,ERG11基因mRNA的表达量均有不同程度的上升。结论侵袭性感染白假丝酵母氟康唑耐药严重,耐药水平与ERG11基因的错义突变及表达量密切相关。 展开更多

关键词 侵袭性白假丝酵母 氟康唑 耐药 erg11基因

原文传递

基于PCR-LIS-SSCP的白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因比较研究 被引量：2

18

作者 张宏 杨敏 +1 位作者 易敏 谢明 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期377-380,共4页

目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因PCR-LIS-SSCP图谱的比较,探讨两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提16株来自同一亲本且对氟康唑敏感性不同的白念珠菌菌丝相与酵母相基因组DNA,根据ERG11基因序列设计7对引物,对其进行分段... 目的通过对白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因PCR-LIS-SSCP图谱的比较,探讨两相细胞在DNA水平的差异。方法分别抽提16株来自同一亲本且对氟康唑敏感性不同的白念珠菌菌丝相与酵母相基因组DNA,根据ERG11基因序列设计7对引物,对其进行分段PCR扩增,扩增产物经单链变性后,以非变性聚丙烯酰胺凝胶进行SSCP分析。结果16株白念珠菌菌丝相与酵母相均能扩增出目的片段,SSCP图谱显示两相细胞的ERG11基因序列存在多位点差异。结论白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11,基因存在着差异。 展开更多

关键词 念珠菌 白色 菌丝相 酵母相 erg11基因

原文传递

白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11基因分析 被引量：2

19

作者 徐韫健 谭皓妍 +1 位作者 李倩珺 岑志炜 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第4期36-39,42,共5页

目的 研究白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11的变异情况.方法 将93例诊断为真菌性阴道炎的患者的阴道分泌物标本进行真菌培养,筛选白假丝酵母菌菌株,利用纸片扩散法进行氟康唑、酮康唑、咪康唑药敏试验,用加热裂解法提取菌株DNA,扩增ERG1... 目的 研究白假丝酵母菌耐吡咯类药物的ERG11的变异情况.方法 将93例诊断为真菌性阴道炎的患者的阴道分泌物标本进行真菌培养,筛选白假丝酵母菌菌株,利用纸片扩散法进行氟康唑、酮康唑、咪康唑药敏试验,用加热裂解法提取菌株DNA,扩增ERG11基因,扩增后的PCR产物进行双向测序,测序结果与GenBank中的标准序列（SC5314）比较分析.结果 93例均培养出假丝酵母菌,包括60株白假丝酵母菌,19株热带假丝酵母菌,9株克柔假丝酵母菌和5株光滑假丝酵母菌;白假丝酵母菌对氟康唑、酮康唑、咪康唑耐药率分别为13.33%,20.00％和51.67％;对白假丝酵母菌的ERG11基因测序发现存在25个碱基突变位点,其中13个同义突变,12个错义突变,其中有6个是新变异：V36F,V51L,T123I,E194K,Y257H和K344N.结论 耐吡咯类药物白假丝酵母菌ERG11基因有多个错义突变位点,其中某些位点突变导致的氨基酸变异可能与其耐药性产生有关. 展开更多

关键词 白假丝酵母菌 erg11基因 吡咯类药物 突变

下载PDF 职称材料

热带假丝酵母菌ERG11基因突变与氟康唑耐药性的关系 被引量：2

20

作者 甘雪华 罗永慧 +1 位作者 汤翔群 段颖卿 《实验与检验医学》 CAS 2008年第6期585-586,共2页

目的探讨热带假丝酵母菌氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与耐药性的关系。方法根据ERG11序列设计引物,对氟康唑靶酶基因ERG11进行PCR扩增,DNA测序后对比分析耐药株与敏感株及标准株的碱基差异,确定耐药株基因一级结构上的突变点,... 目的探讨热带假丝酵母菌氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与耐药性的关系。方法根据ERG11序列设计引物,对氟康唑靶酶基因ERG11进行PCR扩增,DNA测序后对比分析耐药株与敏感株及标准株的碱基差异,确定耐药株基因一级结构上的突变点,并推测分析靶酶蛋白的氨基酸改变及与氟康唑耐药的关系。结果氟康唑敏感株的ERG11基因DNA序列与氟康唑敏感标准株ATCC750完全一致,耐药株出现+395、+513、+783处点突变,导致132位氨基酸改变。结论ERG11基因突变所编码的氨基酸改变与氟康唑耐药有关。 展开更多

关键词 热带假丝酵母菌 erg11基因 氟康唑耐药 基因突变

下载PDF 职称材料