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老年性白内障的不同类型与晶状体上皮细胞密度的改变 被引量：8
1
作者 柳夏林 刘奕志 +1 位作者 刘欣华 郑湖玲 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期50-52,共3页
【目的】探讨晶状体上皮细胞密度的改变与不同类型老年性白内障的关系。【方法】选取超声乳化白内障摘除手术病人的晶状体前囊膜标本 ,其中白内障的类型被分为皮质型 (成熟期 )、核硬化型 (≥NⅢ 级 )、后囊下型和混合型。健康成年人透... 【目的】探讨晶状体上皮细胞密度的改变与不同类型老年性白内障的关系。【方法】选取超声乳化白内障摘除手术病人的晶状体前囊膜标本 ,其中白内障的类型被分为皮质型 (成熟期 )、核硬化型 (≥NⅢ 级 )、后囊下型和混合型。健康成年人透明晶状体的前囊膜标本来源于眼库的供体眼球。所有前囊膜标本经铺片、固定染色后 ,细胞计数测定前囊膜中央区晶状体上皮细胞密度 (LECD)。【结果】健康成年男性透明晶状体LECD为 (4 15 2± 75 0 )个 /mm2 ,女性为 (4 874± 5 5 0 )个 /mm2 (P<0 0 1) ;核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )的LECD为 (5 12 0± 45 0 )个 /mm2 ,核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )晶状体上皮细胞密度高于其他各组及正常对照 (P <0 0 1) ,其中男性与女性的LECD分别为 (5 15 0± 35 0 )个 /mm2 和 (5 0 0 5± 480 )个 /mm2 (P >0 0 1)。【结论】健康成年女性的透明晶状体上皮细胞密度高于男性 ;核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )中男女晶状体上皮细胞密度无显著差异 ;以上结果结合当前流行病学的研究资料提示晶状体上皮细胞密度高可能是核硬化型白内障发生的易感因素 。 展开更多
关键词 晶状体 白内障 细胞计数 上皮细胞 细胞密度 老年人
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NDRG4通过Wnt/β-catenin信号转导通路抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力 被引量：9
2
作者 李委佳 贾朝阳 +4 位作者 冯书君 刘巍 张顺今 王瑞雪 谭文华 《实用肿瘤杂志》 CAS 2019年第6期497-502,共6页
目的探讨N-myc downstream regulated gene 4(NDRG4)对卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法应用脂质体转染法将NDRG4过表达载体pcDNA3.1-NDRG4质粒(pcDNA3.1-NDRG4质粒组)和空白pcDNA3.1质粒(空白质粒组)转染至SKOV... 目的探讨N-myc downstream regulated gene 4(NDRG4)对卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法应用脂质体转染法将NDRG4过表达载体pcDNA3.1-NDRG4质粒(pcDNA3.1-NDRG4质粒组)和空白pcDNA3.1质粒(空白质粒组)转染至SKOV3细胞中。采用实时荧光定量PCR和Western blot法验证NDRG4过表达效果,应用transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力的变化,Western blot法检测卵巢癌细胞中上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白(β-catenin和c-myc)的表达水平。结果转染48 h后,与空白质粒组比较,pcDNA3.1-NDRG4质粒组细胞迁移和侵袭能力均下降(P=0.006,P=0.023)。转染72 h后,与空白质粒组比较,pcDNA3.1-NDRG4质粒组E-cadherin表达水平上升(P=0.023),N-cadherin和Vimentin的表达水平均下降(P=0.013,P=0.021)。转染72 h后,与空白质粒组比较,pcDNA3.1-NDRG4质粒组β-catenin和c-myc的表达水平均下降(P=0.035,P=0.006)。结论NDRG4蛋白抑制卵巢癌细胞迁移和侵袭能力,并抑制上皮间质转化过程。该作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin细胞信号通路实现。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤/病理生理学 基因 肿瘤抑制 上皮细胞/细胞学 信号传导 WNT蛋白质类 肿瘤侵润 细胞运动 肿瘤细胞 培养的
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液相色谱—质谱联用导向的黄葵胶囊肾保护活性物质研究 被引量：4
3
作者 马婷婷 王毅 +1 位作者 陈晓倩 赵筱萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期66-73,共8页
目的:本研究旨在发现黄葵胶囊肾保护活性物质。方法:采用组分制备结合液相色谱—质谱联用(LC/MS)导向筛选技术,快速发现黄葵胶囊中具有肾保护活性的物质,在盐酸阿霉素损伤HK-2细胞模型上验证其活性,并检测这些活性物质对损伤HK-2细胞中... 目的:本研究旨在发现黄葵胶囊肾保护活性物质。方法:采用组分制备结合液相色谱—质谱联用(LC/MS)导向筛选技术,快速发现黄葵胶囊中具有肾保护活性的物质,在盐酸阿霉素损伤HK-2细胞模型上验证其活性,并检测这些活性物质对损伤HK-2细胞中丙二醛(MDA)含量、ATP含量、线粒体耗氧率的影响。结果:筛选发现黄葵胶囊中四个组分具有肾保护活性,运用LC/MS分析推测出15个黄酮类化合物,其中鉴定出金丝桃苷、杨梅素、槲皮素、芦丁和异槲皮素五个化合物。验证结果表明,金丝桃苷、杨梅素、槲皮素、芦丁对损伤HK-2细胞的保护作用呈一定的量效关系,均能降低损伤细胞MDA含量、升高ATP含量、提高线粒体耗氧率,其中金丝桃苷能降低MDA含量,槲皮素和芦丁能升高ATP含量,杨梅素能提高线粒体耗氧率。结论:金丝桃苷、杨梅素、槲皮素、芦丁可能是黄葵胶囊中潜在的肾保护活性物质,其保护作用可能与抗脂质过氧化、减轻线粒体损伤有关。 展开更多
关键词 黄葵属/药物作用 胶囊 上皮细肜细胞学 肾小管 近端/细胞学 肾/损伤 质谱分析法 色谱法 液相 疾病模型 动物
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色素上皮衍生因子对晶状体上皮细胞生长的促进作用及其机制 被引量：3
4
作者 刘恬 刘奕志 +1 位作者 钟惟德 项道满 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期342-346,共5页
背景 晶状体上皮细胞（LECs）是研究晶状体生理病理的基础,色素上皮衍生因子（PEDF）是存在于房水和晶状体中的多效能因子,但PEDF对LECs的生物学效应及其机制尚需深入探讨.目的 探讨PEDF在体内及体外对人LECs生长的调节作用及其机制.方... 背景 晶状体上皮细胞（LECs）是研究晶状体生理病理的基础,色素上皮衍生因子（PEDF）是存在于房水和晶状体中的多效能因子,但PEDF对LECs的生物学效应及其机制尚需深入探讨.目的 探讨PEDF在体内及体外对人LECs生长的调节作用及其机制.方法 在体内研究部分,纳入年龄相关性白内障患者181例181眼,在白内障手术过程中取患眼晶状体中央区5.0～5.5 mm直径的前囊膜标本,检测LECs密度并依此选择其中60份分为低密度组和高密度组各30例.采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测并比较2个组LECs中PEDF mRNA相对表达量的差异.在体外研究部分,PEDF培养组在培养液中加入50 ng/ml PEDF培养人LECs株（HLE-B3）72 h,正常培养的细胞作为对照组,采用流式细胞仪通过AnnexinV-FITC/7-AAD双染法检测并比较各组细胞周期的细胞比例和细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测细胞中VEGF mRNA的相对表达量.结果 低密度组晶状体中央区前囊下LECs密度为（3 672±326）/mm2,PEDFmRNA相对表达量为0.43±0.05,明显低于高密度组的（4 857±350）/mm2和0.55±0.04,差异均有统计学意义（t=4.16,P＜0.05;t=3.82,P＜0.05）.PEDF培养组G2 ＋S期细胞比例为（54.05±4.98）％,明显高于对照组的（28.54±4.27）％,差异有统计学意义（t=-6.32,P＜0.01）;PEDF培养组细胞凋亡率为（2.08±0.48）％,明显低于对照组的（13.50±0.72）％,差异有统计学意义（t=7.90,P＜0.01）.PEDF培养组细胞内VEGF mRNA相对表达量为6.1±2.2,明显低于对照组的27.4±4.8,差异有统计学意义（t=5.48,P＜0.01）.结论 人眼内PEDF可通过抗凋亡及抑制VEGF表达等机制发挥促LECs增生的作用,LECs中PEDF的变化可能与晶状体的老化及白内障的发生和发展有关. 展开更多
关键词 人 晶状体/细胞学 上皮细胞/细胞学 眼蛋白/代谢 细胞培养 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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关注结膜杯状细胞在维持眼表完整性中的作用 被引量：4
5
作者 李志杰 王嫦君 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期97-101,共5页
眼表组织易受到外界环境中的各种刺激而发生异常，包括微生物侵袭、机械性损伤、化学性刺激、粉尘、紫外线和变态反应原的刺激等。结膜杯状细胞在维持眼表自稳态和健康方面发挥着重要作用，尤其是结膜杯状细胞在眼表黏膜免疫调控中的作... 眼表组织易受到外界环境中的各种刺激而发生异常，包括微生物侵袭、机械性损伤、化学性刺激、粉尘、紫外线和变态反应原的刺激等。结膜杯状细胞在维持眼表自稳态和健康方面发挥着重要作用，尤其是结膜杯状细胞在眼表黏膜免疫调控中的作用近年来受到了更多的重视。杯状细胞是人和哺乳动物唯一的单细胞腺，主要分布于消化道、呼吸道和眼表等器官的上皮层，是一种典型的黏液细胞，其发育和分化受许多因素的影响，特别是最近发现的ETS家族中的转录因子Spdef。结膜杯状细胞散在分布于结膜上皮细胞间，是结膜上皮层的重要组成部分，主要功能是分泌黏蛋白保护和润滑眼表，还分泌其他多种生物活性物质。近年来发现杯状细胞还参与抗原递呈，调控树突状细胞表型的分化，诱导免疫耐受，参与多种眼表疾病的发生和发展。许多眼表疾病，例如干眼，可造成结膜杯状细胞密度和功能的改变。因此，眼科医师应关注结膜杯状细胞的生物学行为与眼表疾病的关系。 展开更多
关键词 杯状细胞/生理 上皮细胞/细胞学 眼表 稳态 黏膜/生理 黏蛋白 免疫 眼病
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大鼠肾小管上皮细胞分离及其体外原代培养 被引量：1
6
作者 张元元 郭艳 王光明 《现代医药卫生》 2012年第24期3742-3744,共3页
目的探讨大鼠肾小管上皮细胞的原代培养方法。方法在原有肾小管细胞培养方法的基础上进行改良,采用机械研磨过筛、Ⅰ型胶原酶消化法分离出肾小管节段,在DMEM/F12[含5%胎牛血清(FBS)和胰岛素-转铁蛋白-硒]培养基中培养,并进行ZO-1免疫荧... 目的探讨大鼠肾小管上皮细胞的原代培养方法。方法在原有肾小管细胞培养方法的基础上进行改良,采用机械研磨过筛、Ⅰ型胶原酶消化法分离出肾小管节段,在DMEM/F12[含5%胎牛血清(FBS)和胰岛素-转铁蛋白-硒]培养基中培养,并进行ZO-1免疫荧光染色鉴定。结果细胞培养至第3天完全贴壁,为多边鹅卵石样;免疫荧光染色显示90%以上的细胞为ZO-1表达阳性。结论采用机械研磨过筛、Ⅰ型胶原酶消化、DMEM/F12(含5%FBS和胰岛素-转铁蛋白-硒)培养基中培养的方法可以获得纯度达90%以上的肾小管上皮细胞,可满足对肾小管上皮细胞的研究。 展开更多
关键词 肾小管 细胞学 上皮细胞 细胞学 细胞 培养的 原代培养 大鼠
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CD146-siRNA对卵巢癌细胞A2780上皮-间质转化的影响
7
作者 田辉 吴佳捷 《中国医师杂志》 CAS 2014年第10期1374-1376,共3页
目的 探讨CD146-siRNA对卵巢癌细胞A2780上皮-间质转化的影响.方法 采用western blot和RT-PCR方法,检测低表达CD146对卵巢癌细胞E-cadherin、vimentin和fibronectin mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 相对于空白对照组和RNA干扰阴性对照组... 目的 探讨CD146-siRNA对卵巢癌细胞A2780上皮-间质转化的影响.方法 采用western blot和RT-PCR方法,检测低表达CD146对卵巢癌细胞E-cadherin、vimentin和fibronectin mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 相对于空白对照组和RNA干扰阴性对照组,CD146-siRNA组E-cadherin mRNA和蛋白表达上调,而vimentin和fibronectin mRNA和蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 CD146-siRNA抑制卵巢癌细胞A2780的上皮-间质转化. 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 上皮细胞/细胞学 生物转化 卵巢肿瘤/病理学
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