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酶解法分离犬肺静脉肌袖和心房肌细胞
被引量：
3
1
作者
黄焰
侯月梅
《新疆医科大学学报》
CAS
2008年第11期1513-1515,共3页
目的:探索简单实用重复性好的犬肺静脉肌袖和心房肌细胞的分离方法。方法:采用两步酶解法,分离得到犬肺静脉肌袖细胞和心房肌细胞,用形态学和台盼蓝染色鉴别分离的心肌细胞,使用倒置显微镜观察和摄像记录。结果:分离心肌细胞的存活率为...
目的:探索简单实用重复性好的犬肺静脉肌袖和心房肌细胞的分离方法。方法:采用两步酶解法,分离得到犬肺静脉肌袖细胞和心房肌细胞,用形态学和台盼蓝染色鉴别分离的心肌细胞,使用倒置显微镜观察和摄像记录。结果:分离心肌细胞的存活率为30%～60%,形态呈杆状、折光性好、横纹清晰,膜状态良好。结论:使用两步酶解法能获得存活率高,数量较多的心肌细胞,是一种简单实用的分离心肌细胞的方法。
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关键词
犬
酶解法
肌袖
心房肌细胞
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职称材料
机械分离与胰酶消化分离对长期培养的神经干细胞神经发生能力的影响
被引量：
2
2
作者
李峰
刘玉光
+3 位作者
朱树干
张良文
张泽立
张学广
《山东医药》
CAS
北大核心
2008年第21期22-25,共4页
目的探讨神经干细胞（NSCs）培养的分离传代技术及其在长期培养条件下的神经发生能力。方法取孕14d的Wistar胎鼠大脑皮层，消化分离后，以1×10^5／ml浓度进行NSCs原代培养。分别采用机械分离与胰酶消化法进行NSCs传代培养，台盼蓝...
目的探讨神经干细胞（NSCs）培养的分离传代技术及其在长期培养条件下的神经发生能力。方法取孕14d的Wistar胎鼠大脑皮层，消化分离后，以1×10^5／ml浓度进行NSCs原代培养。分别采用机械分离与胰酶消化法进行NSCs传代培养，台盼蓝活细胞计数测定分离后细胞存活率，计算细胞倍增时间和细胞增殖率。取第4、8、12、20、30代机械分离传代培养的NSCs球接种到24孔培养板中的盖玻片上，加入分化培养液，观察长期培养条件下NSCs的神经发生能力的变化。结果与胰酶消化法进行的NSCs球传代相比，机械分离的NSCs球为小细胞球和单细胞传代，传代后细胞存活率高，细胞倍增时间短，增殖能力强（P均〈0．05）。体外长期培养条件下，随着培养时间的延长，NSCs分化为神经元的比例逐渐降低，星形胶质细胞的比例逐渐增高；在4—12代NSCs分化为神经元的能力表现出下降的趋势，但仍较为稳定；12代后，神经元的分化比例迅速下降，星形胶质细胞的比例迅速上升。结论与胰酶消化法相比，逐步减小吸管口径的机械分离传代法，减少了传代对细胞的损伤，保证了大部分细胞间连接的完整性，显著增强了NSCs的增殖能力。体外长期扩增的NSCs，由于微环境和（或）自身基因的调控，随着传代的延续，其神经发生能力逐渐降低，分化为神经元的比例逐渐减少，分化为星形胶质细胞的比例逐渐增加。
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关键词
机械分离法
胰酶消化分离法
神经干细胞
连续性传代
神经发生
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职称材料
香蕉皮中水溶性膳食纤维的酶法提取
被引量：
5
3
作者
王海娟
姜雨和
+1 位作者
石荣花
孙晓培
《农产品加工》
2020年第5期43-45,共3页
以香蕉皮为原料,利用酶解法通过单因素试验和正交试验探讨料液比、α-淀粉酶用量、胃蛋白酶用量对香蕉皮中水溶性膳食纤维(SDF)提取率的影响。结果表明,在料液比1∶20,α-淀粉酶用量0.28 g,胃蛋白酶用量0.22 g的条件下水溶性膳食纤维的...
以香蕉皮为原料,利用酶解法通过单因素试验和正交试验探讨料液比、α-淀粉酶用量、胃蛋白酶用量对香蕉皮中水溶性膳食纤维(SDF)提取率的影响。结果表明,在料液比1∶20,α-淀粉酶用量0.28 g,胃蛋白酶用量0.22 g的条件下水溶性膳食纤维的提取率为17.5%。
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关键词
香蕉皮
水溶性膳食纤维(SDF)
酶解法
Α-淀粉酶
胃蛋白酶
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职称材料
动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术
被引量：
1
4
作者
崔文玉
陈玉萍
汪海
《军事医学科学院院刊》
CSCD
北大核心
2003年第6期452-456,共5页
目的 :介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法 ,并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法 :采用胶原酶Ⅰ (1mg ml)、木瓜蛋白酶 (5mg ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E...
目的 :介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法 ,并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法 :采用胶原酶Ⅰ (1mg ml)、木瓜蛋白酶 (5mg ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(1mg ml)、胶原酶Ⅰ (1mg ml)消化分离大鼠尾动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(0 .5mg ml)灌流消化、分离得到豚鼠心室肌细胞。结果 :以上分离的细胞数量多 ,形态正常 ,胞壁光滑完整 ,活性好。于4℃无钙液中保存 ,8h内可用于膜片钳全细胞记录。记录出的外向电流可被钾通道阻断剂CsCl及TEA所阻断。结论 :用酶急性分离的动脉平滑肌和心室肌细胞应用于膜片钳研究中具有快速、经济、简便易行等优点。
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关键词
肌
平滑
血管
动脉平滑肌细胞
心室肌细胞
急性酶分离
膜片钳术
钾通道
原文传递
题名
酶解法分离犬肺静脉肌袖和心房肌细胞
被引量：
3
1
作者
黄焰
侯月梅
机构
新疆医科大学第一附属医院心脏中心
出处
《新疆医科大学学报》
CAS
2008年第11期1513-1515,共3页
基金
国家自然科学基金资助(30360033)
文摘
目的:探索简单实用重复性好的犬肺静脉肌袖和心房肌细胞的分离方法。方法:采用两步酶解法,分离得到犬肺静脉肌袖细胞和心房肌细胞,用形态学和台盼蓝染色鉴别分离的心肌细胞,使用倒置显微镜观察和摄像记录。结果:分离心肌细胞的存活率为30%～60%,形态呈杆状、折光性好、横纹清晰,膜状态良好。结论:使用两步酶解法能获得存活率高,数量较多的心肌细胞,是一种简单实用的分离心肌细胞的方法。
关键词
犬
酶解法
肌袖
心房肌细胞
Keywords
canine
enzymatic
dissociation
myocardial
sleeves
atrial
myocytes
分类号
R-332 [医药卫生]
R542.2
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职称材料
题名
机械分离与胰酶消化分离对长期培养的神经干细胞神经发生能力的影响
被引量：
2
2
作者
李峰
刘玉光
朱树干
张良文
张泽立
张学广
机构
山东大学齐鲁医院
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2008年第21期22-25,共4页
基金
山东省优秀中青年科学家奖励基金资助项目(03BS017)
山东省卫生系统1020人才工程项目(022130157)
文摘
目的探讨神经干细胞（NSCs）培养的分离传代技术及其在长期培养条件下的神经发生能力。方法取孕14d的Wistar胎鼠大脑皮层，消化分离后，以1×10^5／ml浓度进行NSCs原代培养。分别采用机械分离与胰酶消化法进行NSCs传代培养，台盼蓝活细胞计数测定分离后细胞存活率，计算细胞倍增时间和细胞增殖率。取第4、8、12、20、30代机械分离传代培养的NSCs球接种到24孔培养板中的盖玻片上，加入分化培养液，观察长期培养条件下NSCs的神经发生能力的变化。结果与胰酶消化法进行的NSCs球传代相比，机械分离的NSCs球为小细胞球和单细胞传代，传代后细胞存活率高，细胞倍增时间短，增殖能力强（P均〈0．05）。体外长期培养条件下，随着培养时间的延长，NSCs分化为神经元的比例逐渐降低，星形胶质细胞的比例逐渐增高；在4—12代NSCs分化为神经元的能力表现出下降的趋势，但仍较为稳定；12代后，神经元的分化比例迅速下降，星形胶质细胞的比例迅速上升。结论与胰酶消化法相比，逐步减小吸管口径的机械分离传代法，减少了传代对细胞的损伤，保证了大部分细胞间连接的完整性，显著增强了NSCs的增殖能力。体外长期扩增的NSCs，由于微环境和（或）自身基因的调控，随着传代的延续，其神经发生能力逐渐降低，分化为神经元的比例逐渐减少，分化为星形胶质细胞的比例逐渐增加。
关键词
机械分离法
胰酶消化分离法
神经干细胞
连续性传代
神经发生
Keywords
mechanical
dissociation
enzymatic
dissociation
neural
stem
cells
serial
passaging
neurogenesis
分类号
R651 [医药卫生—外科学]
下载PDF
职称材料
题名
香蕉皮中水溶性膳食纤维的酶法提取
被引量：
5
3
作者
王海娟
姜雨和
石荣花
孙晓培
机构
青岛农业大学海都学院
出处
《农产品加工》
2020年第5期43-45,共3页
基金
青岛农业大学海都学院院级研究课题“食品科学与工程专业生物化学综合性实验的开发”(JY201734Z)。
文摘
以香蕉皮为原料,利用酶解法通过单因素试验和正交试验探讨料液比、α-淀粉酶用量、胃蛋白酶用量对香蕉皮中水溶性膳食纤维(SDF)提取率的影响。结果表明,在料液比1∶20,α-淀粉酶用量0.28 g,胃蛋白酶用量0.22 g的条件下水溶性膳食纤维的提取率为17.5%。
关键词
香蕉皮
水溶性膳食纤维(SDF)
酶解法
Α-淀粉酶
胃蛋白酶
Keywords
banana
peel
water-soluble
dietary
fiber(SDF)
enzymatic
dissociation
method.
amylase
pepsin
分类号
TS202.3 [轻工技术与工程—食品科学]
下载PDF
职称材料
题名
动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术
被引量：
1
4
作者
崔文玉
陈玉萍
汪海
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
出处
《军事医学科学院院刊》
CSCD
北大核心
2003年第6期452-456,共5页
基金
国家"十五"重大科技专项课题 ( 2 0 0 2AA2Z3 13 7)
文摘
目的 :介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法 ,并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法 :采用胶原酶Ⅰ (1mg ml)、木瓜蛋白酶 (5mg ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(1mg ml)、胶原酶Ⅰ (1mg ml)消化分离大鼠尾动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(0 .5mg ml)灌流消化、分离得到豚鼠心室肌细胞。结果 :以上分离的细胞数量多 ,形态正常 ,胞壁光滑完整 ,活性好。于4℃无钙液中保存 ,8h内可用于膜片钳全细胞记录。记录出的外向电流可被钾通道阻断剂CsCl及TEA所阻断。结论 :用酶急性分离的动脉平滑肌和心室肌细胞应用于膜片钳研究中具有快速、经济、简便易行等优点。
关键词
肌
平滑
血管
动脉平滑肌细胞
心室肌细胞
急性酶分离
膜片钳术
钾通道
Keywords
muscle,smooth,vascular
arterial
smooth
muscle
cells
ventricular
myocytes
acutely
enzymatic
dissociation
patch-clamp
technique
potassium
channel
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酶解法分离犬肺静脉肌袖和心房肌细胞
黄焰
侯月梅
《新疆医科大学学报》
CAS
2008
3
下载PDF
职称材料
2
机械分离与胰酶消化分离对长期培养的神经干细胞神经发生能力的影响
李峰
刘玉光
朱树干
张良文
张泽立
张学广
《山东医药》
CAS
北大核心
2008
2
下载PDF
职称材料
3
香蕉皮中水溶性膳食纤维的酶法提取
王海娟
姜雨和
石荣花
孙晓培
《农产品加工》
2020
5
下载PDF
职称材料
4
动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术
崔文玉
陈玉萍
汪海
《军事医学科学院院刊》
CSCD
北大核心
2003
1
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