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猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白gD主要抗原表位区基因的克隆及原核表达
被引量:
5
1
作者
罗飞
李宇琴
+3 位作者
周洁
南文龙
陆明哲
陈义平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第11期83-86,共4页
本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游。构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3...
本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游。构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量约为45.2ku,主要以包涵体形式存在。表达产物用His亲和层析柱纯化。Western blotting结果显示,该纯化蛋白能与猪伪狂犬病病毒抗体阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原反应性,可以作为猪血清伪狂犬病病毒抗体诊断用抗原。
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关键词
伪狂犬病病毒
gd
糖蛋白
主要抗原表位
原核表达
下载PDF
职称材料
题名
猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白gD主要抗原表位区基因的克隆及原核表达
被引量:
5
1
作者
罗飞
李宇琴
周洁
南文龙
陆明哲
陈义平
机构
中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂研究室
扬州大学兽医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第11期83-86,共4页
基金
"十一五"国家科技支撑项目(2006BAD6A13)
文摘
本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游。构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量约为45.2ku,主要以包涵体形式存在。表达产物用His亲和层析柱纯化。Western blotting结果显示,该纯化蛋白能与猪伪狂犬病病毒抗体阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原反应性,可以作为猪血清伪狂犬病病毒抗体诊断用抗原。
关键词
伪狂犬病病毒
gd
糖蛋白
主要抗原表位
原核表达
Keywords
pseudorabies
virus
envelope
glycoprotein
gd
major
epitope
domain
prokaryotic
expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白gD主要抗原表位区基因的克隆及原核表达
罗飞
李宇琴
周洁
南文龙
陆明哲
陈义平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011
5
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职称材料
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引用分析
参考文献
引证文献
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