新疆北疆地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性 被引量：27

1

作者 郝彦龙 剡根强 +2 位作者 王静梅 刘振国 周林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期848-851,共4页

为研究确定新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛腹泻病原性大肠杆菌的优势血清型、致病性及毒力因子特征。采用细菌学、免疫学及分子生物学的方法对从新疆呼图壁、石河子、奎屯3个主要奶牛生产基地14个规模化奶牛场10日龄内腹泻犊牛直肠棉拭... 为研究确定新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛腹泻病原性大肠杆菌的优势血清型、致病性及毒力因子特征。采用细菌学、免疫学及分子生物学的方法对从新疆呼图壁、石河子、奎屯3个主要奶牛生产基地14个规模化奶牛场10日龄内腹泻犊牛直肠棉拭子样品进行了大肠杆菌的分离与鉴定、O血清群、黏附素及肠毒素的测定。结果从302份样品中分离并经生化鉴定获得180株呈β溶血的大肠埃希菌,其中94株对小鼠有致病性;对其中53株代表菌株的O血清型、黏附素及肠毒素测定,结果为8株携带K99菌毛及STa毒素基因,6株携带F41菌毛基因,6株产生LT毒素;28株分离株分布于16个O血清型,其中O101,O6,O114,O78为优势血清型,占被测菌株的50%。结果表明,新疆北疆主要奶牛养殖区致犊牛腹泻大肠杆菌是以携带K99、F41和产ST的溶血性大肠杆菌为主,其研究结果为犊牛大肠杆菌性腹泻的免疫防治提供病原学依据。 展开更多

关键词 犊牛腹泻 产肠毒素大肠杆菌(etec) 血清型 黏附素 肠毒素

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动物源产肠毒素大肠杆菌(ETEC)黏附素研究进展 被引量：18

2

作者 周虹 朱军 朱国强 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期679-686,共8页

动物源产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起动物(尤其是幼龄动物)腹泻的主要病原菌。已知黏附素和肠毒素是ETEC中两种重要的毒力因子,在致病性中两者缺一不可。其中黏附素结合到宿主易感肠上皮细胞是ETEC感... 动物源产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起动物(尤其是幼龄动物)腹泻的主要病原菌。已知黏附素和肠毒素是ETEC中两种重要的毒力因子,在致病性中两者缺一不可。其中黏附素结合到宿主易感肠上皮细胞是ETEC感染的第一步,也是最重要的关键步骤。动物源ETEC的菌毛黏附素主要包括K88、K99、987P、F18、F17和F41等。人们从20世纪60年代就开始了ETEC菌毛黏附素的相关研究,包括菌毛的基因、结构组成、生物合成、菌毛表达的调控机制以及黏附素和宿主受体相互作用等,这些研究基础有助于我们深入了解ETEC病原菌的感染机理;并且在疾病诊断和新疫苗的开发中具有重大意义。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) 黏附素 菌毛

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不耐热肠毒素和耐热肠毒素基因的融合 被引量：18

3

作者 张兆山 李淑琴 +1 位作者 董自正 黄翠芬 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期219-222,共4页

用重组基因技术将产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的耐热肠毒素（ＳＴａ）基因与不耐热肠毒素Ｂ亚单位（ＬＴ－Ｂ）基因融合。表达的ＬＴＢ／ＳＴａ融合蛋白，既有ＬＴ－Ｂ的抗原性又有ＳＴａ的抗原性。由于基因融合的方式不同，对ＳＴａ... 用重组基因技术将产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的耐热肠毒素（ＳＴａ）基因与不耐热肠毒素Ｂ亚单位（ＬＴ－Ｂ）基因融合。表达的ＬＴＢ／ＳＴａ融合蛋白，既有ＬＴ－Ｂ的抗原性又有ＳＴａ的抗原性。由于基因融合的方式不同，对ＳＴａ的抗原性影响很大，但对ＬＴ－Ｂ的抗原性没有影响。ＬＴ－Ｂ／ＳＴａ融合多肽保留了ＥＴＥｃ肠毒素结合ＧＭ－１神经节甙酯的能力，却仍具有ＳＴａ的生物毒性。 展开更多

关键词 产肠毒素 肠毒素 基因融合

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嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌K88所致腹泻的防治作用 被引量：17

4

作者 谷巍 王丽荣 +7 位作者 孙明杰 陈静 陈振 曾佳佳 李士栋 王春凤 单宝龙 徐海燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第3期798-806,共9页

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88所致腹泻小鼠的影响。选取6~8周龄巴比西小鼠(BALB/c)100只,分为4组,分别为空白对照组(Ⅰ组)、大肠杆菌感染模型组(Ⅱ组)、中药发酵组(... 本试验旨在研究嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88所致腹泻小鼠的影响。选取6~8周龄巴比西小鼠(BALB/c)100只,分为4组,分别为空白对照组(Ⅰ组)、大肠杆菌感染模型组(Ⅱ组)、中药发酵组(Ⅲ组)及中药水提组(Ⅳ组),其中Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组小鼠均用"抗生素+大肠杆菌"模式造模。Ⅰ、Ⅱ组饲喂不含任何药物的基础日粮,Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加10%中药发酵液、10%中药水提液。统计分析各组小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器官指数、肠道菌群及细胞因子IFN-γ、IL-4的含量。结果显示,ETEC K88感染小鼠36h后,与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组小鼠腹泻指数(P<0.05)与腹泻率降低,且Ⅲ组腹泻指数显著低于Ⅳ组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组盲肠内大肠杆菌数量较Ⅱ组降低,双歧杆菌及乳酸菌数量提高,且Ⅲ组效果更优;Ⅲ、Ⅳ组的免疫器官指数均高于Ⅰ和Ⅱ组,且与Ⅱ组相比,Ⅲ组的脾脏指数、胸腺指数及肝脏指数分别提高了48.37%、29.57%、36.88%,且差异均显著(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ组IFN-γ/IL-4比值较Ⅱ组提高,且Ⅲ组高于Ⅳ组。综上所述,乳酸菌发酵中药液具有降低腹泻小鼠腹泻率及腹泻指数,提高免疫器官指数,维持肠道菌群平衡及快速消除体内炎症反应等作用,可为开发防制ETEC所致的仔猪腹泻产品提供参考。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌 发酵中药 产肠毒素大肠杆菌 腹泻率

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抗仔猪腹泻产肠毒素大肠杆菌疫苗的研究进展 被引量：14

5

作者 张恒慧 尤建嵩 +2 位作者 徐永平 王晓丽 李晓宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第2期347-351,共5页

仔猪腹泻(piglet diarrhea)是国内外养猪业面临的一大难题,每年因此造成的经济损失十分巨大。导致仔猪腹泻的主要致病菌是产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC),其致病过程依赖黏附素和肠毒素的共同作用。随着研究... 仔猪腹泻(piglet diarrhea)是国内外养猪业面临的一大难题,每年因此造成的经济损失十分巨大。导致仔猪腹泻的主要致病菌是产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC),其致病过程依赖黏附素和肠毒素的共同作用。随着研究手段的创新,国内外学者在研制ETEC疫苗方面已取得了突破性进展。作者介绍了ETEC的致病特点,并对各类ETEC疫苗的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) 疫苗 仔猪腹泻 黏附素 肠毒素

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国内外猪源产肠毒素大肠杆菌疫苗研究进展 被引量：12

6

作者 杨德鸿 麦凯杰 +4 位作者 朱元军 刘洋洋 罗翠芬 周庆丰 刘军发 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期2119-2126,共8页

仔猪腹泻是全球规模化猪场最常见的疾病之一,给养猪业带来了巨大的损失。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原菌,黏附素和肠毒素是其重要的致病因子,ETEC通过黏附素定植于小肠上皮细胞,在增殖过程中不断产生肠毒素,引起大... 仔猪腹泻是全球规模化猪场最常见的疾病之一,给养猪业带来了巨大的损失。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原菌,黏附素和肠毒素是其重要的致病因子,ETEC通过黏附素定植于小肠上皮细胞,在增殖过程中不断产生肠毒素,引起大量水和电解质进入肠腔,导致仔猪腹泻。目前,疫苗免疫是预防ETEC最有效的方法,然而许多商品化大肠杆菌疫苗的临床免疫效果不佳,且地域局限性明显。因此,研制安全、高效、广谱的ETEC疫苗对养猪业具有重要意义。近年来,许多新型试验性ETEC疫苗被相继报道,如ETEC菌毛黏附素和肠毒素疫苗;一些新开发的疫苗,如亚单位疫苗、菌影疫苗、植物载体疫苗和囊泡疫苗等,具有不同的优势,在不同的动物试验中均表现出良好的免疫保护效果。文章简述了国内外学者在ETEC疫苗领域的研究进展,对猪源ETEC各类疫苗的优劣及应用研究情况进行了综述,以期为今后猪源ETEC疫苗的研究提供参考。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) 仔猪腹泻 免疫 疫苗

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集约化猪场PWD病原性大肠杆菌毒力因子分析 被引量：9

7

作者 姜中其 王娜 +2 位作者 方维焕 孙建华 李洪州 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期520-526,共7页

探索浙江省集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)病原性大肠杆菌血清型和毒力因子特征,为PWD防治及耐药性研究提供资料.从10个规模化猪场以直肠棉拭子采集PWD病料,经细菌分离纯化、革兰氏染色、生化试验和小鼠致病性试验等,对病原进行鉴定.采用1... 探索浙江省集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)病原性大肠杆菌血清型和毒力因子特征,为PWD防治及耐药性研究提供资料.从10个规模化猪场以直肠棉拭子采集PWD病料,经细菌分离纯化、革兰氏染色、生化试验和小鼠致病性试验等,对病原进行鉴定.采用11种猪源大肠埃希氏菌常见O型抗原血清、应用K88及F18菌毛单因子血清对分离菌进行玻板凝集试验和PCR方法分析黏附素及肠毒素类型.分离鉴定的56株病原性大肠杆菌O抗原定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.5%;菌毛单因子血清玻板凝集试验和PCR测得病原性大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)比例较高,占病原性大肠杆菌分离总数的67.92%(36/53),肠毒素中含STa、STb、STa+STb、LT和SLT-2 e分别占总检测菌株数的30.19%(16/53)、35.85%(19/53)、18.9%(10/53)、1.89%(1/53)和9.43%(5/53).黏附素类型主要有K88和F18两种,分别占总检测菌株数的24.53%(13/53)和28.30%(15/53).结果表明,浙江省PWD病原性大肠杆菌至少覆盖了包括优势血清型O149、O139、O8在内的11种血清型;大肠杆菌中以产肠毒素型为主,主要毒力因子包括黏附素F18及K88和肠毒素STa、STb、SLT-2 e等. 展开更多

关键词 仔猪断奶腹泻(PWD) 产肠毒素大肠杆菌(etec) 血清型 黏附素(菌毛) 肠毒素

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黑龙江地区断奶仔猪腹泻大肠杆菌种系类群、血清型和毒力基因分析 被引量：6

8

作者 佟春玉 呼锐 崔玉东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期823-827,共5页

揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征。采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、... 揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征。采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、SLT2e采用PCR方法检测。在123株分离菌株中,除21株未定型、10株自凝外,测定出92株分离的血清型,覆盖18个血清型,其中以O 8、O 9、O 149 3种血清型为主,共57株,占定型菌株的61.96%。环境共生的种系进化A群113株占91.87%,肠外强致病D种系进化群2株占1.63%。肠毒素检出菌株74,占分离株的60.16%,其中以STa、STb为主,共占肠毒素检出株的94.59%。结果显示黑龙江省PWD病原性大肠埃希菌优势血清型为O 8、O 9、O 149,大肠埃希菌肠毒素主要毒力因子为STa、STb,种系进化群为A。 展开更多

关键词 仔猪断奶腹泻(PWD) 产肠毒素大肠埃希菌(etec) 血清型 种系分类群 肠毒素

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产志贺样毒素和肠毒素大肠杆菌分子流行病学(英文) 被引量：5

9

作者 冉雪琴 林尖兵 王嘉福 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期796-799,共4页

【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪... 【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪、牛群中占优势,分别为:人群73(n=112),猪群82(n=106),牛群18(n=115)。在ETEC菌株中检测到热敏肠毒素(lt)和不耐热肠毒素(st)基因,还存在lt/st并存现象。从人、猪、牛群中还检测到产志贺样毒素大肠杆菌(STEC),其中源自猪的STEC的检出率最高。大部分STEC同时携带lt、st或lt和st同时并存。编码F18菌毛的主亚基由fedA基因编码。对所分离大肠杆菌F18菌毛进行的研究结果表明,fedA基因主要与肠毒素基因共存,与stx基因并存的类型较少,25份猪源STEC菌株中仅有4份检测到fedA基因。【结论】贵州省人群、猪群和牛群致腹泻病原菌中以带F18菌毛的ETEC为主,STEC主要分布在腹泻的猪群中。 展开更多

关键词 流行病学 产志贺样毒素大肠杆菌(STEC) 产肠毒素大肠杆菌(etec) fedA基因 毒素基因

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表达猪乳铁蛋白肽重组屎肠球菌对断奶仔猪生长性能的影响及其抗ETEC感染效果研究 被引量：5

10

作者 解伟纯 王玉峰 +9 位作者 皮若冰 赵东方 姜艳平 崔文 乔薪瑗 王丽 周晗 徐义刚 李一经 唐丽杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3408-3418,共11页

本试验以表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌(pNZ8112-PLFcin/Ef)饲喂断奶仔猪,研究其对仔猪生长性能的影响和抗产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染的效果。选取28日龄体重相近的健康断奶仔猪36头,随机分为3组(... 本试验以表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌(pNZ8112-PLFcin/Ef)饲喂断奶仔猪,研究其对仔猪生长性能的影响和抗产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染的效果。选取28日龄体重相近的健康断奶仔猪36头,随机分为3组(重组屎肠球菌组、空载体组和培养基组),每组3个重复,每个重复4头仔猪。重组屎肠球菌组和空载体组分别饲喂添加pNZ8112-PLFcin/Ef(6×1012 CFU/kg)和pNZ8112/Ef(6×1012 CFU/kg)的基础日粮,而培养基组饲喂含有相同体积的GM17液体培养基的基础日粮。试验期26d。结果显示,与培养基组相比,重组屎肠球菌组断奶仔猪的平均日增重极显著提高(P<0.01);料重比显著降低(P<0.05);腹泻率明显降低,肠道菌群的均匀度和多样性指数均下降。为进一步探究表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌对断奶仔猪抵抗ETEC感染的保护作用,在连续饲喂21d后,每个重复中随机挑选1头体况相近的断奶仔猪灌服ETEC。结果发现,与培养基组相比,攻菌后重组屎肠球菌组断奶仔猪血清白细胞介素-2(IL-2)、免疫球蛋白G(IgG)含量、肠黏液中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平均显著升高(P<0.05);脾脏指数显著提高(P<0.05),但胸腺指数、肠段长度及重量则均无显著差异(P>0.05)。综上所述,表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌能够起到促进断奶仔猪生长及抗ETEC感染的保护作用。 展开更多

关键词 猪乳铁蛋白肽 重组屎肠球菌 断乳仔猪 产肠毒素大肠杆菌(etec)

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人源产肠毒素大肠杆菌疫苗的研发进展 被引量：5

11

作者 夏芃芃 孟宪臣 朱国强 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期198-208,共11页

腹泻是全球范围内引起5岁以下幼童死亡的第二大病因,而产肠毒素大肠杆菌（ETEC）是引起腹泻的最常见病原菌,其产生的细菌定植因子（CFs）和肠毒素是关键的毒力因子。CFs介导细菌黏附宿主小肠上皮细胞并完成定植,产生热敏肠毒素（LT）和... 腹泻是全球范围内引起5岁以下幼童死亡的第二大病因,而产肠毒素大肠杆菌（ETEC）是引起腹泻的最常见病原菌,其产生的细菌定植因子（CFs）和肠毒素是关键的毒力因子。CFs介导细菌黏附宿主小肠上皮细胞并完成定植,产生热敏肠毒素（LT）和热稳定肠毒素（ST）破坏宿主上皮细胞内的体液平衡,使体液和电介质过量分泌从而导致腹泻。预防ETEC腹泻的首选方法是使用能激发宿主产生抗黏附素免疫力和抗肠毒素免疫力的疫苗,阻断ETEC黏附和定植并中和肠毒素。目前一种名为Dukoral（R）的霍乱疫苗因能刺激机体产生抗热敏毒素免疫,已经被一些国家批准用于短期保护和预防旅行者腹泻。新型试验性ETEC候选疫苗正在研发中,旨在提供保护期长、反应谱广的抗ETEC感染免疫保护力。本文针对疫苗研发的关键问题和研究现状作一综述,并对未来的研究作出展望。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) 腹泻 免疫 疫苗

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大肠杆菌肠毒素的基因融合及其免疫原性的研究 被引量：5

12

作者 徐兵 张兆山 +3 位作者 李淑琴 舒东 俞守义 黄翠芬 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期903-906,共4页

应用重组基因工程技术，将热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ）基因与含有部分前体的耐热肠毒素（ｐｒｏ－ＳＴ）基因融合在一起，构建了表达ＬＴ－Ｂ／ｐｒｏ－ＳＴ融合蛋白的重组质粒．该融合蛋白不仅保持结合神经节苷脂（ＧＭ１）的能力，... 应用重组基因工程技术，将热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ）基因与含有部分前体的耐热肠毒素（ｐｒｏ－ＳＴ）基因融合在一起，构建了表达ＬＴ－Ｂ／ｐｒｏ－ＳＴ融合蛋白的重组质粒．该融合蛋白不仅保持结合神经节苷脂（ＧＭ１）的能力，而且具有热敏肠毒素和耐热肠毒素的抗原性．乳鼠实验证明，融合蛋白虽然含有野生耐热肠毒素，但不具耐热肠毒素的生物毒性．腹腔免疫和鼻饲免疫均能激发产生抗ＥＴＥＣ两种肠毒素的抗体． 展开更多

关键词 肠毒素要基因融合 免疫原性 大肠杆菌 疫苗 腹泻

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苏北地区规模化猪场产肠毒素大肠杆菌的分离鉴定及灭活疫苗效果评估 被引量：6

13

作者 杨德鸿 张鹏 +6 位作者 于沛欣 任建鸾 李德志 王娟芳 孙建和 汤芳 戴建君 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期261-272,共12页

[目的]产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起仔猪腹泻的重要病原菌,本研究通过调查苏北地区规模化猪场ETEC的流行情况,分析其生物学特性,研制具有免疫保护效果的优势血清型菌株的灭活疫苗,以期对苏北地区ETE... [目的]产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起仔猪腹泻的重要病原菌,本研究通过调查苏北地区规模化猪场ETEC的流行情况,分析其生物学特性,研制具有免疫保护效果的优势血清型菌株的灭活疫苗,以期对苏北地区ETEC的防控提供参考。[方法]从苏北地区规模化猪场采集3-30日龄的仔猪新鲜粪样、肛拭子及小肠组织样,分离出ETEC,对分离菌株进行血清型鉴定、耐药性测定、小鼠致病力测定;最后通过动物免疫试验研究优势血清型菌株灭活疫苗对小鼠的免疫保护效果。[结果]从21个规模化猪场采集病料562份,通过PCR鉴定及测序得到141株ETEC;血清凝集试验鉴定出85株菌的O抗原血清型,其中08、0101和0128为优势血清型,占定型菌株的61.2%(52/85),其他血清型包括09、03、020、0148、0149等;分析141株ETEC对14种常见抗生素的耐药情况,得出分离株对新霉素、红霉素、四环素、庆大霉素、强力霉素、阿莫西林、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑高度耐药,耐药率均高达80%以上;对恩诺沙星敏感性较高,敏感率达50.4%(71/141);对多粘菌素B和头孢噻肟中介耐药,占比分别为66%(93/141)和51.8%(73/141);多重耐药现象严重,其中10重耐药的菌株占比最大,为19%(27/141);小鼠攻毒试验测得08血清型强毒株YC-6的半数致死量(median lethal dose,LD50)为1.4×10^7 CFU/只,最低致死量(minimum lethal dose,MLD)为3×10^7 CFU/只;08血清型强毒株YC-6和0101血清型强毒株LYG-3制备的单价灭活疫苗对小鼠的保护率均达到100%,因此利用08血清型强毒株YC-6和0101血清型强毒株LYG-3研制二价灭活疫苗,结果显示该二价疫苗对感染不同血清型ETEC小鼠的保护率在83%以上。[结论]本研究通过对苏北地区ETEC的流行病学调查,得出其优势血清型,并研制出针对对优势血清型免疫保护效果较好的二价灭活疫苗,给临床ETEC的监测和防控提供参考。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 分离鉴定 血清型 耐药性 灭活疫苗

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中药防控产肠毒素大肠杆菌感染仔猪腹泻的研究进展

14

作者 杨植 王煜轩 +4 位作者 王之文 芦烘德 王禄皓 何至远 董虹 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5507-5517,共11页

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)造成的仔猪腹泻严重影响仔猪健康,是造成仔猪死亡的重要病因,给生猪养殖行业带来巨大的经济损失。ETEC的主要毒力因子是肠毒素和黏附素,肠毒素主要分为耐热肠毒素和不耐热肠毒素,其通过不同方式作用于小肠上皮细... 产肠毒素大肠杆菌(ETEC)造成的仔猪腹泻严重影响仔猪健康,是造成仔猪死亡的重要病因,给生猪养殖行业带来巨大的经济损失。ETEC的主要毒力因子是肠毒素和黏附素,肠毒素主要分为耐热肠毒素和不耐热肠毒素,其通过不同方式作用于小肠上皮细胞表面,引起小肠内水和电解质积蓄及代谢紊乱,导致仔猪腹泻,而黏附素则促进ETEC在仔猪小肠上皮细胞定植。目前的疫苗只包括部分菌毛黏附素、肠毒素,免疫效果不全面、缺乏广谱性。现阶段在临床应用中中药效果良好,能大幅度提升感染仔猪存活率、抑制ETEC生长和毒力基因表达、缓解感染仔猪的炎症反应、减少肠道损伤、提升感染仔猪的免疫力及调控ETEC感染造成的仔猪肠道微生物的平衡、调控仔猪肠道化学屏障,从多方面防控ETEC感染。在饲料端全面禁抗背景下,消费者越来越青睐绿色、无抗的生猪产品,而兽用中药为仔猪腹泻病的临床防控提供了新思路和新策略。因此,笔者对ETEC入侵仔猪肠道的致病机理以及中药在该疾病治疗上的应用和治疗效果进行总结概括。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) 中药 腹泻 肠毒素

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天津地区规模化生猪场产肠毒素大肠杆菌的分离鉴定 被引量：4

15

作者 姜轩 刘梦月 +5 位作者 付超 马吉飞 赵瑞利 石青青 胡烨 崔君 《天津农学院学报》 CAS 2018年第3期52-56,共5页

具有特殊血清型的大肠杆菌对人与动物肠道有不同程度的致病性,其中以产肠毒素大肠杆菌(ETEC)危害较为严重。从天津地区规模化养猪场采集15例腹泻病猪的直肠拭子样品,接种到MH、麦康凯、伊红美蓝琼脂培养基进行细菌培养及革兰染色镜检。... 具有特殊血清型的大肠杆菌对人与动物肠道有不同程度的致病性,其中以产肠毒素大肠杆菌(ETEC)危害较为严重。从天津地区规模化养猪场采集15例腹泻病猪的直肠拭子样品,接种到MH、麦康凯、伊红美蓝琼脂培养基进行细菌培养及革兰染色镜检。选取培养基上形态不同的菌落进行生化试验,16S rRNA序列测定及BLAST分析,结果分离到的10株肠杆菌科细菌与大肠杆菌的同源率达99.6%。合成大肠杆菌肠毒素ST1、ST2、LT1、IR1特异性引物,PCR结果检测到产LT1毒素、产LT1和ST1毒素及产ST1肠毒素的3株大肠杆菌。对分离出的产肠毒素LTI、ST1的菌株进行药敏试验,结果表明产肠毒素大肠杆菌对新霉素、克林霉素、庆大霉素、青霉素、头孢曲松、丁胺卡那、头孢呋辛、氟苯尼考敏感,为临床产肠毒素大肠杆菌的监测与防控提供依据。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杄菌(etec) 腹泻 分离鉴定 16S RRNA

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ETEC F4-F5融合基因表达及间接ELISA方法建立 被引量：5

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作者 张强 张雪寒 +1 位作者 何孔旺 王春凤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1312-1317,共6页

表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入... 表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入原核表达载体,表达重组蛋白His-F4-F5。以纯化的His-F4-F5蛋白作为检测抗原,建立检测ETEC抗体的间接EIISA方法。经酶切和DNA序列分析,成功构建重组菌BL21(pCold I-F4-F5),SDS-PAGE和Western blot分析,融合表达F4-F5相对分子质量为29 000,与ETEC高免血清发生特异性反应,条带单一。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度6ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1∶15 000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间15min。本研究建立F4-F5间接ELISA方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强的特点,是猪场ETEC感染和疫苗免疫效果检测的有效工具,进而指导疫苗使用和新型疫苗研发。 展开更多

关键词 产肠毒索性大肠杆菌 F4菌毛 F5菌毛 间接酶联免疫吸附试验

原文传递

猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测 被引量：1

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作者 陈芳 王丙云 +3 位作者 杨林 黄良宗 刘为民 马春全 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期122-124,共3页

以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒... 以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒素基因的多重PCR方法.该方法对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)EDL933、猪链球菌Streptcoccus、鼠伤寒沙门氏杆菌Salmonella typhimrium和猪肺疫巴氏杆菌Pasteurella pneumotropic的检测结果均为阴性,并且能检测到102cfu/mL稀释度的标准菌.对11株分离自广东佛山地区腹泻仔猪的待检菌株进行检测,结果为:含STa基因的菌株为5株;含STb基因为2株;含LT基因为3株,其中2株同时具有STb和LT基因.结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查. 展开更多

关键词 产肠毒素性大肠埃希菌(etec) 耐热肠毒素(STa STb)基因 不耐热肠毒素(LT)基因 多重PCR 猪

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利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株 被引量：3

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作者 檀克勤 马现永 +2 位作者 崔艺燕 田志梅 邓盾 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期666-675,共10页

本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88的热不稳定性肠毒素(heat-labile toxin,LT)基因进行无痕敲除并获得K88 LT-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列,并... 本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88的热不稳定性肠毒素(heat-labile toxin,LT)基因进行无痕敲除并获得K88 LT-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列,并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段;将供体片段转化至ETEC K88,同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统,对LT基因进行敲除;通过PCR验证获得了K88 LT-缺陷菌株,并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示,λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段,CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除,最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明,K88 LT-缺陷菌株的溶血能力丧失,并且生长速度比野生型菌株减缓,LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌(etec) CRISPR/Cas9 λ-Red同源重组系统 热不稳定性肠毒素

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产肠毒素大肠杆菌的热敏肠毒素B亚基(LT-B)和耐热肠毒素(ST)基因融合及其表达 被引量：3

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作者 徐兵 张兆山 +3 位作者 李淑琴 舒东 俞守义 黄翠芬 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期439-443,共5页

采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌（ Ｅ Ｔ Ｅ Ｃ） 的耐热肠毒素（ Ｓ Ｔ） 基因和热敏肠毒素 Ｂ 亚基（ Ｌ Ｔ Ｂ） 基因融合抗原的疫苗候选株。将 Ｓ Ｔ 基因的５’端与 Ｌ Ｔ Ｂ 基因的３’端连接，并置于同一阅读... 采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌（ Ｅ Ｔ Ｅ Ｃ） 的耐热肠毒素（ Ｓ Ｔ） 基因和热敏肠毒素 Ｂ 亚基（ Ｌ Ｔ Ｂ） 基因融合抗原的疫苗候选株。将 Ｓ Ｔ 基因的５’端与 Ｌ Ｔ Ｂ 基因的３’端连接，并置于同一阅读框。编码 Ｓ Ｔ 的基因是通过 Ｐ Ｃ Ｒ 从ｐ Ｓ Ｌ Ｍ００４ 质粒中扩增得到的，含有 Ｓ Ｔ 的ｐｒｏ 序列（ 其编码 Ｓ Ｔ 前体的ｐｒｏ 区域） ，并应用寡核苷酸定点突变技术将编码 Ｓ Ｔ 的第１４ 位氨基酸残基发生突变，使 Ｓ Ｔ 的第１４ 位氨基酸残基 Ａｌａ 突变为 Ｌｅｕ 。在所构建的结构中，于 Ｌ Ｔ Ｂ 和ｐｒｏ Ｓ Ｔ 之间分别插入了不同长度的氨基酸 Ｌｉｎｋｅｒｓ 。表达的融合多肽同时具有 Ｓ Ｔ 和 Ｌ Ｔ Ｂ 的抗原性，并保留结合 Ｇ Ｍ１ 神经节苷脂的能力，且无 Ｌ Ｔ 和 Ｓ Ｔ 的生物毒性。表达的融合蛋白免疫动物，能诱导产生相应的特异性抗体。 展开更多

关键词 产肠毒素 大肠杆菌 肠毒素 基因融合 基因表达

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产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：3

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作者 何晓杰 侯喜林 +3 位作者 余丽芸 王桂华 刘建奎 魏春华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期333-337,共5页

以纯化的重组F41菌毛蛋白作为检测抗原,建立了检测产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的间接ELISA方法。经优化筛选的最佳反应条件:包被抗原浓度为0.26μg/孔,血清稀释度为1∶800,酶标二抗工作浓度为1∶6 000,30 g/L明胶封闭1 h,底物作用时间... 以纯化的重组F41菌毛蛋白作为检测抗原,建立了检测产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的间接ELISA方法。经优化筛选的最佳反应条件:包被抗原浓度为0.26μg/孔,血清稀释度为1∶800,酶标二抗工作浓度为1∶6 000,30 g/L明胶封闭1 h,底物作用时间为10 min。经试验验证,该方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强等特点。用建立的间接ELISA方法与PCR方法进行符合性试验,总符合率为97.4%。表明,该方法可以用于产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的检测。 展开更多

关键词 产肠毒素性大肠杆菌 重组F41菌毛蛋白 间接酶联免疫吸附试验

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