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马尾松胚乳DNA高效提取及SSR-PCR体系优化 被引量：7
1
作者 何卫龙 杨立恒 +2 位作者 王晓锋 林能庆 季孔庶 《林业科技开发》 北大核心 2013年第1期15-18,共4页
以马尾松胚乳为试验材料,用CTAB-SDS法提取单粒胚乳DNA,对其浓度和纯度进行检测。结果表明:运用CTAB-SDS法提取的马尾松胚乳DNA浓度高、纯度好,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,点样孔干净。此外,还对影响PCR结果的Mg2+、dNTP、模板DNA、引物浓... 以马尾松胚乳为试验材料,用CTAB-SDS法提取单粒胚乳DNA,对其浓度和纯度进行检测。结果表明:运用CTAB-SDS法提取的马尾松胚乳DNA浓度高、纯度好,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,点样孔干净。此外,还对影响PCR结果的Mg2+、dNTP、模板DNA、引物浓度、TaqDNA聚合酶5个因素进行了正交设计试验,建立了适合马尾松SSR-PCR的反应体系:即在10μL反应体系中,Mg2+浓度为2.80 mmol/L,dNTP浓度为0.35 mmol/L,引物浓度为0.075μmol/L,模板DNA浓度为20 ng/10μL,TaqDNA聚合酶浓度为0.50 U/10μL。 展开更多
关键词 马尾松 胚乳dna CTAB-SDS法 SSR-PCR
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云南松胚乳DNA提取与ISSR-PCR反应体系的建立 被引量：7
2
作者 刘娜 王昌命 普晓兰 《西南林学院学报》 2009年第2期27-30,共4页
以云南松胚乳为试验材料,用改进的SDS法进行DNA的提取,并对其纯度、浓度及产率进行检测,结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要;采用单因子试验分析法分别研究模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP... 以云南松胚乳为试验材料,用改进的SDS法进行DNA的提取,并对其纯度、浓度及产率进行检测,结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要;采用单因子试验分析法分别研究模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、退火温度对反应体系的影响,建立并优化云南松ISSR-PCR 20μL反应体系:buffer(10 mmol/L Tris-HCl,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L引物,1.5 m mol/L MgCl2,0.5 U TaqDNA聚合酶,0.2 mmol/L dNTPs,30 ng模板DNA,引物(GA)8的最适退火温度为52.5℃。 展开更多
关键词 云南松 胚乳dna提取 ISSR分子标记
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