基于全转录组测序的绵羊胚胎不同发育阶段骨骼肌circRNA的分析与鉴定 被引量：13

1

作者 石田培 王欣悦 +3 位作者 侯浩宾 赵志达 尚明玉 张莉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期642-657,共16页

【目的】肉用性状是家养动物的重要性状,尤其是产肉性能与骨骼肌的发育密切相关,对多数动物而言,骨骼肌的生长取决于肌纤维的早期发育。本研究将揭示绵羊(Ovis aries)胚胎期骨骼肌组织发育重要节点、肌纤维的形成及转换机制,探究骨骼肌... 【目的】肉用性状是家养动物的重要性状,尤其是产肉性能与骨骼肌的发育密切相关,对多数动物而言,骨骼肌的生长取决于肌纤维的早期发育。本研究将揭示绵羊(Ovis aries)胚胎期骨骼肌组织发育重要节点、肌纤维的形成及转换机制,探究骨骼肌在动物胚胎期的生长对后续发育潜力的影响。【方法】在前期绵羊胚胎期组织结构试验的基础上,选择肌纤维发育及类型转换的3个重要时间节点:胎龄85 d(D85)、105 d(D105)、135 d(D135),并对处于这些节点期的中国美利奴绵羊胚胎背最长肌进行全转录组测序。通过生物信息学分析和功能预测筛选出差异表达显著的circRNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对其进行验证。【结果】通过条件筛选(|log2|≥1且P≤0.05)获得差异表达circRNA 1126个。将3组进行比较,在各时间节点都发现较多的特异性表达circRNA。在D85 vs D135比较组中,特异性差异表达数量最多:共发现差异表达circRNA 374个,上调表达201个,下调表达173个,其中具有4倍以上差异的基因167个,占差异基因的44.7%。对这些差异性表达的circRNA进行GO和KEGG功能分析和靶向预测,富集到与肌肉分化和肌纤维发育相关的能量代谢和信号转导通路,包括MAPK、PI3K-Akt、Ras、Regulation of actin cytoskeleton等。结果表明:在D85至D105期间富集到的差异circRNA多与肌细胞发育调控、细胞增殖和存活、细胞周期等相关,而在D105至D135期间富集到的通路则主要与能量转换、物质运输、RNA转运和DNA修复有关。靶向预测结果通过Cytoscape软件绘制出可视化共表达网络,筛选到circRNA8239、circRNA19073,circRNA2765、circRNA1616等核心调控转录物,并在D105找到调节快慢肌类型转换的关键因子circRNA7527,其靶向作用于bta-mi R-135a、bta-mi R-615、chi-mi R-133a-5p进而调控MEF2C基因。通过3个时间节点的差异表达情况和功能预测描述选取了与肌肉发育相关� 展开更多

关键词 绵羊 胚胎 全转录组 骨骼肌 生长发育 circRNA

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胚胎发育中骨骼肌组织的形成及调控 被引量：7

2

作者 张江丽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第21期6447-6448,6566,共3页

在胚胎发育中,骨骼肌组织的形态发生是许多基因精密调控的复杂生物学过程。综述了骨骼肌组织在胚胎发育过程中的起源、骨骼肌组织形成过程及调控机制。

关键词 肌肉发生 胚胎发育 骨骼肌组织 肌肉始祖细胞

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鸭胚骨骼肌生肌调节因子MyoD1和Myf5发育性变化研究 被引量：9

3

作者 陶志云 邹剑敏 +5 位作者 宋迟 宋卫涛 胡艳 束婧婷 章双杰 李慧芳 《中国家禽》 北大核心 2012年第17期16-19,共4页

本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期... 本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期发育中表现出一致的表达规律,均呈"波浪"型;在腿肌早期发育中均呈近似"反√"型的表达趋势,在27日胚龄时表达量最低,出生后7日龄表达量又上升,但MyoD1mRNA的表达量仅有小幅增加,与27日胚龄的表达量差异不显著(P>0.05),而Myf5mRNA的表达量有大幅增加,与27日胚龄的表达量差异极显著(P<0.01),胸肌和腿肌中两基因的mRNA表达量在同一胚龄不同品种间差异均不显著。结果提示:骨骼肌中MyoD1和Myf5基因表达具有显著的时空性,但不存在品种差异,为进一步深入研究MyoD1和Myf5基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 鸭 胚胎期 MyoD1基因 Myf5基因 骨骼肌

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鸭胚骨骼肌成肌细胞中MyoD1和Myf5基因的表达与分析 被引量：8

4

作者 陶志云 朱春红 +3 位作者 姬改革 徐文娟 单艳菊 李慧芳 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第3期299-303,共5页

以高邮鸭和金定鸭为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定生肌调节因子MyoD1和Myf5基因在不同发育阶段鸭胚(13、15、17、19、21和23胚龄)骨骼肌成肌细胞中的表达水平,分析MyoD1和Myf5基因在鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达模式和差异.... 以高邮鸭和金定鸭为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定生肌调节因子MyoD1和Myf5基因在不同发育阶段鸭胚(13、15、17、19、21和23胚龄)骨骼肌成肌细胞中的表达水平,分析MyoD1和Myf5基因在鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达模式和差异.结果表明,Myf5和MyoD1基因在胸腿肌成肌细胞中呈现不同的表达规律:胸肌成肌细胞中,Myf5基因的表达呈"低→高→低→较高"的趋势,类似反"∽"形;MyoD1基因的表达呈"低→高→低"的趋势,在金定鸭17胚龄时达到高峰后迅速下降(P<0.01),并维持在低水平,类似"∧"形,而在高邮鸭17胚龄时达到高峰后维持高水平至19胚龄(P>0.05),再下降并维持在低水平(P<0.05),类似"∩"形.腿肌成肌细胞中,Myf5基因的表达呈"低→高→低"的趋势,类似"∧"形;MyoD1基因的表达呈"较高→低→高→低"的趋势,类似"∽"形.结果提示:Myf5和MyoD1基因在骨骼肌成肌细胞中的表达具有时间和品种依赖性;两基因在两品种鸭胸腿肌中均在17胚龄时达到高峰,表明17胚龄可能是成肌细胞分化和增殖的一个重要时期. 展开更多

关键词 鸭 胚胎 骨骼肌 成肌细胞 MyoD1基因 Myf5基因

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猪PGAM2基因的克隆、序列特征及表达分析 被引量：5

5

作者 伍晓雄 唐中林 +4 位作者 李勇 杨述林 储明星 马月辉 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1183-1189,共7页

克隆了猪PGAM2基因的cDNA序列,并利用生物信息学方法进行分析。所得cDNA序列全长913 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码253个氨基酸。序列分析表明,该基因预测编码蛋白与已报道的狗（97.6%）、人（96%）、黑猩猩（96%）、大鼠（94.5）和... 克隆了猪PGAM2基因的cDNA序列,并利用生物信息学方法进行分析。所得cDNA序列全长913 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码253个氨基酸。序列分析表明,该基因预测编码蛋白与已报道的狗（97.6%）、人（96%）、黑猩猩（96%）、大鼠（94.5）和小鼠（94.1%）等物种的PGAM2蛋白高度同源其在N端和C端分别存在1个ATHR和QGKA模体,在14~15AA处存在1个信号肽切割位点,含有1个典型的碳水化合物运输和代谢（GPMA）保守结构域。该基因在猪胚胎骨骼肌发育过程中差异表达,且在通城猪和长白猪中呈现不同表达模式。在通城猪中,PGAM2基因呈波浪式表达,即妊娠65 d时表达水平最高,且各时间点表达水平差异极显著（P〈0.01）。在长白猪中呈上调表达模式,妊娠65和90 d时表达丰富,且极显著高于妊娠33 d（P〈0.01）。品种间比较来看,在妊娠33和65 d时两品种表达水平相当,但妊娠90 d时长白猪中的表达水平极显著高于通城猪（P=0.006）。 展开更多

关键词 猪 PGAM2基因 序列分析 表达 胚胎骨骼肌

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胚胎运动神经元失神经骨骼肌内种植防治肌萎缩的研究 被引量：3

6

作者 姜广良 顾玉东 张丽银 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期364-365,共2页

目的观察胚胎运动神经元种植对在体失神经骨骼肌萎缩的影响。方法取孕12～14天的胎鼠运动神经元种植至成鼠失神经腓肠肌内,于实验后9、22周取双侧腓肠肌并测定肌湿重;然后行ATP酶组织化学及肌动蛋白免疫组织化学染色,并作图像分析。结... 目的观察胚胎运动神经元种植对在体失神经骨骼肌萎缩的影响。方法取孕12～14天的胎鼠运动神经元种植至成鼠失神经腓肠肌内,于实验后9、22周取双侧腓肠肌并测定肌湿重;然后行ATP酶组织化学及肌动蛋白免疫组织化学染色,并作图像分析。结果实验组腓肠肌的肌湿重、Ⅰ和Ⅱ型纤维面积、肌动蛋白的相对含量均明显优于对照组(P<0.05)。结论胚胎运动神经元种植至失神经骨骼肌内是一种防治失神经肌萎缩的有效方法。 展开更多

关键词 胚胎 运动神经元 肌萎缩 肌神经移植

原文传递

鸡胚胎期糖酵解关键酶mRNA的动态变化规律 被引量：1

7

作者 满斗日花 岩泽淳 +2 位作者 Tushar Roy 敖长金 赵晶昕 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期23-27,共5页

在白色莱航鸡孵化第13d^21d期间,每天随机选取7个-8个胚胎,从中随机选取3个胚胎,分别采肝脏和骨骼肌样品(n=3),用Primer Express2.0(Applied Biosystem)和BLAST(NCBI)软件设计引物,从采取的肝脏和骨骼肌样品中分离出总RNA,采用反转录聚... 在白色莱航鸡孵化第13d^21d期间,每天随机选取7个-8个胚胎,从中随机选取3个胚胎,分别采肝脏和骨骼肌样品(n=3),用Primer Express2.0(Applied Biosystem)和BLAST(NCBI)软件设计引物,从采取的肝脏和骨骼肌样品中分离出总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,合成cDNA。并应用限制性内切酶产物琼脂糖凝胶电泳法和核酸序列分析法对其进行同源性分析和鉴定目的片段。分别对其肝脏和骨骼肌中葡萄糖激酶、己糖激酶-I和己糖激酶-II的mRNA进行定量分析,旨在了解鸡胚胎发育过程中糖酵解关键酶的mRNA表达规律。结果表明:在孵化期的第13d^21d,鸡胚胎肝脏中葡萄糖激酶、己糖激酶-I和己糖激酶-II的mRNA含量均高于骨骼肌中的含量,但差异不显著(p>0.05)。孵化第17d时肝脏中葡萄糖激酶mRNA的含量明显减少(p<0.05),之后缓慢增加,到第21d时其含量仍低于第13d^15d时的含量;肝脏中己糖激酶-I mRNA在孵化第15d明显减少,之后缓慢增加,到孵化第19d时与第13d的含量接近;在孵化第13d^17d期间,肝脏中己糖激酶-II mRNA含量基本没有变化,到孵化第19d时略有升高,但差异均无显著(p>0.05)。骨骼肌中的3个关键酶的mRNA表达,在整个胚胎发育期均无明显的变化(p>0.05)。 展开更多

关键词 鸡胚胎 葡萄糖激酶mRNA 己糖激酶-ImRNA 己糖激酶-IImRNA 肝脏 骨骼肌

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蛋内注射T3对鸭胚骨骼肌发育和MSTN mRNA表达的影响 被引量：1

8

作者 姬改革 胡艳 +3 位作者 陶志云 刘宏祥 朱春红 李慧芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期164-169,共6页

为探讨生长因子三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)对鸭胚骨骼肌生长发育和肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)mRNA表达的影响,在入孵前的鸭种蛋蛋清内分别注射100μl的生理盐水溶液(对照组)和含0.25μg T3的生理盐水溶液(注射组),检... 为探讨生长因子三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)对鸭胚骨骼肌生长发育和肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)mRNA表达的影响,在入孵前的鸭种蛋蛋清内分别注射100μl的生理盐水溶液(对照组)和含0.25μg T3的生理盐水溶液(注射组),检测13、17、21、25、27胚龄鸭胸肌和腿肌发育及骨骼肌MSTN mRNA的表达情况。结果显示,T3处理极显著提高27胚龄鸭胚的胸肌质量,但对腿肌质量影响不显著;21胚龄注射组胸肌MSTN mRNA表达显著高于对照组,27胚龄则显著低于对照组;注射组腿肌MSTN mRNA表达仅在25胚龄显著增加。相关性分析结果显示,两组骨骼肌质量与MSTN mRNA表达呈不同程度的线性相关。表明蛋内注射T3能增加鸭胚胸肌质量,并改变MSTN mRNA表达量,MSTN mRNA的差异表达可能在鸭胚胸肌发育过程中具有重要的作用。 展开更多

关键词 蛋内注射 T3 鸭胚 骨骼肌 MSTN

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鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性 被引量：9

9

作者 边艳超 牧仁 +2 位作者 李向臣 李云章 关伟军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期90-96,共7页

为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞... 为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞表面特异性标志Desmin、MyoD呈阳性表达,RT-PCR检测Desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达;绘制生长曲线,结果说明细胞具有较强增殖能力;应用流式细胞仪对细胞进行周期分析,结果显示S期细胞所占比例为8.94%;骨骼肌卫星细胞向成肌细胞诱导10d后,免疫细胞化学染色检测成肌特异性标志骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达;骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞诱导7d后,油红O染色呈阳性,RT-PCR检测脂肪细胞特异性标志pparγ、LPL呈阳性表达。结果表明试验成功建立了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞的体外扩增培养体系,且该骨骼肌卫星细胞有发育形成肌管和脂肪细胞的多项分化潜能。 展开更多

关键词 鲁西黄牛胚胎 骨骼肌卫星细胞 体外扩增 培养体系 增殖能力 分化

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胚胎运动神经元种植至失神经骨骼肌内的观察 被引量：5

10

作者 姜广良 顾玉东 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期434-436,共3页

目的观察同种异体胚胎运动神经元在失神经骨骼肌内的存活状况。方法用５溴化尿嘧啶（Ｂｒｄｕｒ）标记孕１２天胎鼠运动神经元，种植至成鼠失神经骨骼肌内。在种植后９、２２周，取实验侧肌肉作Ｎｉｓｌ染色、乙酰胆碱酯酶染色、免疫... 目的观察同种异体胚胎运动神经元在失神经骨骼肌内的存活状况。方法用５溴化尿嘧啶（Ｂｒｄｕｒ）标记孕１２天胎鼠运动神经元，种植至成鼠失神经骨骼肌内。在种植后９、２２周，取实验侧肌肉作Ｎｉｓｌ染色、乙酰胆碱酯酶染色、免疫组织化学染色及ＡＴＰ酶染色，以显示种植神经元和肌纤维形态。结果鼠胚胎运动神经元能在失神经骨骼肌内存活，并长出长的轴突与终板连结；可见肌纤维的群化，群化的肌纤维较粗大；对照组肌纤维较细小，且无群化现象。结论同种异体胚胎运动神经元在失神经骨骼肌内能存活，并再支配失神经骨骼肌。 展开更多

关键词 胚胎 运动神经元移植 失神经骨骼肌 神经移植

原文传递

牛胚胎骨骼肌卫星细胞的分离、培养及诱导分化 被引量：3

11

作者 边艳超 何晓红 +4 位作者 牧仁 李向臣 马月辉 李云章 关伟军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1196-1199,1204,共5页

目的分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞，并研究其生物学特性。方法取30～50d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌，联合I型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞，通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、Myo... 目的分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞，并研究其生物学特性。方法取30～50d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌，联合I型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞，通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、MyoD、c．Met、My￡5、pax7，并研究其生物学特性。结果鲁西黄牛卫星细胞传代培养至15代以上，冻存后细胞活率为97．90％±0．96％；免疫细胞化学染色检测卫星细胞标记物desmin，MyoD呈阳性表达；RT—PCR检测desmin、c—Met、My￡5、pax7呈阳性表达；克隆形成率为56．39％±1．41％；染色体核型分析显示分离培养的细胞均来源于正常牛胚胎个体；通过不同的诱导剂将牛卫星细胞成功地诱导为成骨细胞和神经元样细胞，分别进行茜素红，甲苯胺蓝染色呈阳性表达，RT-PCR检测成骨细胞标记物osteopontin，I型胶原蛋白和神经细胞标记物MAP2和nestin均呈阳性表达。结论本试验成功地分离获得了牛卫星细胞，并具有自我更新增殖和多向分化潜能。 展开更多

关键词 鲁西黄牛胚胎 骨骼肌卫星细胞 增殖能力 诱导分化

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人胚肢芽、骨骼肌提取液的运动神经营养活性研究 被引量：1

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作者 韩曙 应荣 +3 位作者 崔静 吐尔逊江 石东文 关华忠 《解剖与临床》 1998年第4期181-183,共3页

目的:从人胚胎肢芽、骨骼肌中提取对运动神经元具有生物活性的神经营养因子。方法:用人胚胎肢芽、骨骼肌制备提取液,以成年Wistar大鼠骨骼肌提取液及生理盐水为对照,在切断单侧坐骨神经的Wistar乳鼠动物模型上,检测运动神经营养活性。结... 目的:从人胚胎肢芽、骨骼肌中提取对运动神经元具有生物活性的神经营养因子。方法:用人胚胎肢芽、骨骼肌制备提取液,以成年Wistar大鼠骨骼肌提取液及生理盐水为对照,在切断单侧坐骨神经的Wistar乳鼠动物模型上,检测运动神经营养活性。结果:在损伤侧局部注射提取液,术后30天损伤侧腰髓运动神经元存活率:第2月人胚肢芽提取液组为73.7％;第4～5月胎儿骨骼肌提取液组为67.2％;成年大鼠骨骼肌提取液组为48.2％;生理盐水空白对照组为25％。结论:人胚胎肢芽、骨骼肌提取液与两个对照组相比均显示了明显的运动神经元营养活性。 展开更多

关键词 人胚肢芽 骨骼肌提取液 运动神经 营养活性

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