发酵条件对木霉菌株T23的菌丝生长及几丁质酶活性的影响 被引量：10

1

作者 吕淑霞 于晓丹 +1 位作者 张彩霞 陈捷 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期332-335,共4页

为使木霉生防制剂实现工业化生产,本试验对木霉菌株T23的最适菌丝生长和最佳产几丁质酶的发酵条件进行了研究。试验结果得出T23的最佳发酵条件以PDB为培养基,在250mL三角瓶中50mL装瓶量,接种量为6%,起始pH值为5,温度25℃离心机转速180r.... 为使木霉生防制剂实现工业化生产,本试验对木霉菌株T23的最适菌丝生长和最佳产几丁质酶的发酵条件进行了研究。试验结果得出T23的最佳发酵条件以PDB为培养基,在250mL三角瓶中50mL装瓶量,接种量为6%,起始pH值为5,温度25℃离心机转速180r.min-1,培养4d,发酵液中菌丝产量和几丁质酶活分别达到10.64g.L-1和421.3U.mL-1。 展开更多

关键词 木霉 几丁质酶 发酵 生物防治制剂

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几丁质酶产生菌C4发酵培养基优化及其对Bt的增效作用研究 被引量：8

2

作者 丁秀琼 张莉 +2 位作者 刘世贵 刘崑 龙章富 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期425-429,共5页

为提高几丁质酶产生菌C4的产酶效率,加强其对Bt(Bacillus thuringiensis)的增效作用,本研究通过培养基优化,筛选出了该菌发酵优化培养基,配方为:蛋白胨0.8%,酵母膏0.8%KNO30.8%,MgSO40.05%,KH2PO40.03%,pH 7.5.28℃,180 r/min,培养48 h... 为提高几丁质酶产生菌C4的产酶效率,加强其对Bt(Bacillus thuringiensis)的增效作用,本研究通过培养基优化,筛选出了该菌发酵优化培养基,配方为:蛋白胨0.8%,酵母膏0.8%KNO30.8%,MgSO40.05%,KH2PO40.03%,pH 7.5.28℃,180 r/min,培养48 h至对数期,加入1.0%的胶体几丁质,诱导C4菌产生几丁质酶.在此条件下,C4菌产酶周期由5 d缩短为4 d;几丁质酶活力由2.68 U/mL提高到5.95 U/mL.用此发酵菌液与Bt菌液等量混合使用,Bt的杀虫效果提高了47.8%. 展开更多

关键词 几丁质酶 细菌C4 增效作用

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球孢白僵菌胞外蛋白酶及几丁质酶的研究进展 被引量：7

3

作者 王刚 董建臻 +5 位作者 曹伟平 王金耀 王容燕 杜立新 宋健 冯书亮 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第13期175-178,共4页

昆虫病原真菌白僵菌由体表入侵寄主时,分泌蛋白酶、几丁质酶等来分解昆虫体表皮,以完成侵染过程,对致死寄主有相当重要的辅助作用。笔者综述了近年来球孢白僵菌蛋白酶、几丁质酶的研究进展。

关键词 球孢白僵菌 胞外蛋白酶 几丁质酶

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斑节对虾Chitinase-2基因的克隆及其在蜕皮和幼体发育过程中的表达分析 被引量：6

4

作者 周凯敏 江世贵 +5 位作者 黄建华 杨其彬 姜松 邱丽华 杨丽诗 周发林 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期59-68,共10页

研究以斑节对虾(Penaeus monodon)转录组获得的几丁质酶基因(Pm Chi)片段,运用RACE技术克隆了PmChi基因c DNA全长,命名为PmChi-2。PmChi-2基因c DNA全长2 050 bp,其中5'-非编码区(5'-UTR)144 bp、3'-UTR 319 bp和开放阅读框... 研究以斑节对虾(Penaeus monodon)转录组获得的几丁质酶基因(Pm Chi)片段,运用RACE技术克隆了PmChi基因c DNA全长,命名为PmChi-2。PmChi-2基因c DNA全长2 050 bp,其中5'-非编码区(5'-UTR)144 bp、3'-UTR 319 bp和开放阅读框(ORF)1 587 bp,编码528个氨基酸。生物信息学分析显示,PmChi-2与其他甲壳动物Chi-2的相似性为78%~97%。实时荧光定量PCR结果显示,PmChi-2在蜕皮前期(D期)表皮中表达水平最高,在胃、鳃、腹神经节和眼柄中表达水平依次降低,在其他组织(肝胰腺、肠、肌肉、心脏)中几乎不表达。不同蜕皮阶段,PmChi-2在鳃、胃和表皮3种组织中的表达变化模式基本一致,均在蜕皮期(E期)表达量最低,而最高表达量在鳃中出现在蜕皮后期(A期),在胃和表皮中为D期。幼体不同发育阶段分析揭示PmChi-2 mRNA在幼体发育阶段的无节幼体到糠虾幼体第二期表达量维持在一个低水平,在糠虾幼体第三期PmChi-2 mRNA表达水平显著升高,在仔虾期又显著下降,推测PmChi-2 mRNA可能与斑节对虾幼体发育密切相关。研究结果表明PmChi-2基因可能在斑节对虾蜕皮以及幼体的变态发育中发挥重要作用,为深入研究斑节对虾几丁质酶发育调控提供了重要信息。 展开更多

关键词 斑节对虾 几丁质酶 基因克隆 表达分析 蜕皮 变态

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金属离子对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力的影响 被引量：4

5

作者 刘鹏虎 周刚 +1 位作者 陈大福 梁勤 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第1期96-98,共3页

探讨了不同金属离子对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力的影响.结果表明:在0-100 mmol.L-1范围内,一价金属离子Na+、K+随离子浓度的增大,对几丁质酶活力的影响表现为先促进后抑制;在1-10 mmol.L-1范围内,二价金属离子Mg2+、Mn2+起抑制作用,Zn2+... 探讨了不同金属离子对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力的影响.结果表明:在0-100 mmol.L-1范围内,一价金属离子Na+、K+随离子浓度的增大,对几丁质酶活力的影响表现为先促进后抑制;在1-10 mmol.L-1范围内,二价金属离子Mg2+、Mn2+起抑制作用,Zn2+基本没有影响,Ca2+、Fe2+起促进作用;在1-10 mmol.L-1范围内,三价金属离子A l3+起促进作用,Fe3+基本没有影响. 展开更多

关键词 蜜蜂球囊菌 金属离子 几丁质酶 活力

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大豆菌核病拮抗内生细菌的筛选与鉴定 被引量：5

6

作者 窦桂铭 刘晓瑜 +1 位作者 张银东 马玉超 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期78-82,共5页

从北京林业大学校园和海南省儋州植物园共采集6种植物的不同组织,通过五步法表面消毒和选择性分离培养方法共分离得到183株植物内生菌,平板拮抗试验显示,32株内生菌对大豆菌核病病原菌具有拮抗活性,占分离菌株的17.49%;结合抗菌活性、... 从北京林业大学校园和海南省儋州植物园共采集6种植物的不同组织,通过五步法表面消毒和选择性分离培养方法共分离得到183株植物内生菌,平板拮抗试验显示,32株内生菌对大豆菌核病病原菌具有拮抗活性,占分离菌株的17.49%;结合抗菌活性、形态特征和宿主来源,选择10株拮抗菌株进行鉴定,结果显示这些菌株分别属于链霉菌属(Streptomyces)、棒状杆菌属(Microbacterium)、根瘤菌属(Rhizobium)、无色杆菌属(Achromobacter)和芽孢杆菌属(Bacillus),具有丰富的微生物多样性。因此,本研究筛选的大豆菌核病病原菌拮抗菌株为开发生物防治混合菌剂提供了菌种资源,为生物防治菌核病、减少农业经济损失奠定了基础。 展开更多

关键词 大豆菌核病 植物内生菌 拮抗菌 几丁质酶

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人致肺纤维化相关因子的克隆和生物信息学分析 被引量：1

7

作者 陈晓华 蔡国平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期691-698,共8页

几丁质酶是自然界广泛存在的一类降解几丁质的水解酶类,但是直至近些年才在哺乳动物体内发现存在有几丁质酶样蛋白.早年曾于矽肺大鼠中纯化出矽诱导的支气管肺泡灌洗蛋白iSBLP58,体外具有促进人胚肺成纤维细胞2BS增殖的作用,N端测序显... 几丁质酶是自然界广泛存在的一类降解几丁质的水解酶类,但是直至近些年才在哺乳动物体内发现存在有几丁质酶样蛋白.早年曾于矽肺大鼠中纯化出矽诱导的支气管肺泡灌洗蛋白iSBLP58,体外具有促进人胚肺成纤维细胞2BS增殖的作用,N端测序显示与哺乳动物几丁质酶蛋白家族成员具有高度同源性.生物信息学分析表明,来源于人的结肠、肾和胃的几个表达序列标签(EST)克隆和大鼠的这一蛋白质序列匹配.随后成功地从人肾RNA样品中克隆到一组cDNA,其序列及相应的氨基酸序列彼此高度相似,并与GenBank中的几个人几丁质酶蛋白高度相似.和人基因组序列比较,揭示这些分子可能来自于同一基因,为可变剪切的产物. 展开更多

关键词 几丁质酶 表达序列标签(EST) CDNA 生物信息学 可变剪切

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柑橘属果实中过敏原几丁质酶的表达和B细胞抗原表位的预测 被引量：1

8

作者 闫慧清 罗庆华 黄小龙 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期135-139,共5页

I类植物的几丁质酶(chitinase)是许多植物性食品中一种非常重要的过敏原,与乳胶-水果综合症有着密切的关系。大部分致敏性植物中的几丁质酶对人体的健康有着潜在的危害。本文以柑橘属中的过敏原几丁质酶为研究对象,通过比较柑橘属中不... I类植物的几丁质酶(chitinase)是许多植物性食品中一种非常重要的过敏原,与乳胶-水果综合症有着密切的关系。大部分致敏性植物中的几丁质酶对人体的健康有着潜在的危害。本文以柑橘属中的过敏原几丁质酶为研究对象,通过比较柑橘属中不同来源的果实,如琯溪蜜柚、甜橙和温州蜜柑中的几丁质酶基因表达含量,得到温州蜜柑果实的表达量最高。通过Genebank搜索得到几丁质酶的氨基酸序列,采用同源比对说明在不同的物种中可能会导致交叉过敏的现象。最后利用DNAStar软件预测得到几丁质酶的二级结构,当氨基酸的二级结构是β-转角和无规则卷曲,同时抗原指数>0、柔韧性>0、表面可及性>1和亲水性>0的氨基酸区域时,形成B细胞抗原表位的可能性较大。综合这些参数结果表明几丁质酶的B细胞抗原表位结合氨基酸序列的可能区域是在62~69、96~100、126~133、145~149、155~159、169~172、179~182、189~190、256~262,通过预测氨基酸的区域,为制备相应的抗体、培育低过敏品种等后续研究提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 柑橘过敏 几丁质酶 细胞表位

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环状芽孢杆菌产几丁质酶发酵条件的优化

9

作者 薛胜平 闫洪波 +2 位作者 张瑞平 赵士豪 马同锁 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第7期110-114,共5页

微生物几丁质酶在食品及其他行业有着重要的应用价值。环状芽孢杆菌发酵条件的优化是大量获取几丁质酶的重要前提。采用Plackett-Burman(PB)设计法,对影响环状芽孢杆菌发酵产几丁质酶的7个相关因子进行筛选,建立环状芽孢杆菌产几丁质酶... 微生物几丁质酶在食品及其他行业有着重要的应用价值。环状芽孢杆菌发酵条件的优化是大量获取几丁质酶的重要前提。采用Plackett-Burman(PB)设计法,对影响环状芽孢杆菌发酵产几丁质酶的7个相关因子进行筛选,建立环状芽孢杆菌产几丁质酶的最佳工艺。用斐林法测定液态发酵几丁质酶活,结果表明对环状芽孢杆菌发酵产酶具有显著影响的因子是pH、磷酸氢二钾,几丁质酶活达到48.3 u水平。依据普拉基特-伯曼(Plackett-Burman)设计法的筛选结果 ,采用正交设计进行研究,当硫酸铵1.5%,酵母膏0.5%,几丁质0.5%,淀粉1%,硫酸镁0.03%,碳酸钙0.1%,磷酸氢二钾0.1%(质量分数)时,得到较高的几丁质酶活,即66.67u。 展开更多

关键词 几丁质酶 环状芽孢杆菌 发酵条件优化 普拉基特-伯曼(Plackett-Burman)设计

原文传递

血清壳多糖酶3样蛋白1和甲胎蛋白及铁蛋白检测在原发性肝癌诊断中的应用评价 被引量：15

10

作者 毛玉环 谭黎明 +1 位作者 李建英 张晓 《实用预防医学》 CAS 2018年第4期401-404,共4页

目的探讨血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、甲胎蛋白(AFP)和铁蛋白(FER)单一及联合检测在原发性肝癌诊断中的临床应用价值。方法选取HCC患者61例,肝硬化患者31例,慢性肝炎患者31例以及健康体检者32例作为研究对象,采用定量酶联免疫吸附法... 目的探讨血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、甲胎蛋白(AFP)和铁蛋白(FER)单一及联合检测在原发性肝癌诊断中的临床应用价值。方法选取HCC患者61例,肝硬化患者31例,慢性肝炎患者31例以及健康体检者32例作为研究对象,采用定量酶联免疫吸附法检测血清中CHI3L1的水平,化学发光法检测血清AFP及FER水平。采用非参数秩和检验进行差异分析,通过ROC曲线下面积分析,比较单项及联合检测的诊断价值。结果 HCC组、肝硬化组、肝炎组及健康组的血清CHI3L1水平分别为258.60(215.61~296.75)、227.40(127.10~285.20)、145.40(79.60~198.70)、39.40(31.67~45.80)ng/ml;AFP水平分别为9.99(4.20~81.13)、4.34(1.16~26.22)、1.00(0.86~1.87)、1.12(1.00~1.96)ng/ml;FER水平分别为176.27(125.56~201.53)、151.74(81.46~202.59)、119.55(45.70~147.75)、106.67(79.47~147.15)ng/ml,四组三项指标差异均有统计学意义(H=92.39、52.08、33.25,P<0.001)。CHI3L1、AFP及FER三项指标单项检测时AUC分别(0.822±0.033)、(0.796±0.037)、(0.749±0.039)。三指标联合检测时AUC为(0.877±0.027),高于三指标单项检测。结论 CHI3L1在肝癌诊断方面具有一定的潜在价值,CHI3L1、AFP及FER联合诊断能提高诊断效能。 展开更多

关键词 肝癌 壳多糖酶3样蛋白1 甲胎蛋白 铁蛋白 肿瘤标记物

原文传递

野生香蕉几丁质酶基因的克隆与序列分析 被引量：7

11

作者 张妙霞 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 2010年第8期1244-1252,共9页

以野生香蕉叶片为试材,采用RT-PCR结合RACE法,通过T/A克隆测序,获得野生香蕉几丁质酶基因全长序列,并在GenBank登录(登录号为:FJ858155)。野生香蕉几丁质酶基因(ChiⅠ1)全长1115bp,包含924bp的ORF、14bp的5'非编码区、177bp的3'... 以野生香蕉叶片为试材,采用RT-PCR结合RACE法,通过T/A克隆测序,获得野生香蕉几丁质酶基因全长序列,并在GenBank登录(登录号为:FJ858155)。野生香蕉几丁质酶基因(ChiⅠ1)全长1115bp,包含924bp的ORF、14bp的5'非编码区、177bp的3'非编码区及17bp3'poly(A)尾。该基因开放阅读框编码307个氨基酸,分子量为32424.1u,预测的理论等电点为6.28,其结构包括信号肽、几丁质结合区、糖苷水解酶区。蛋白结构分析结果表明,该基因编码蛋白为跨膜蛋白,存在于胞外。野生香蕉几丁质酶基因(ChiⅠ1)属于酸性几丁质酶classⅠb,与大蕉几丁质酶classⅠb相似性仅为59.4%。结构分析结果表明,该基因可能具有几丁质酶/溶菌酶特点,且在过敏反应中起重要作用。 展开更多

关键词 野生香蕉 几丁质酶基因 基因克隆 序列分析

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具几丁质酶抑制活性的中性蛋白酶的筛选与纯化 被引量：1

12

作者 张新军 谢洁 +3 位作者 蓝希钳 肖杰 潘国庆 周泽扬 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第3期513-517,共5页

利用平板快速筛选法,从土壤中筛选到一株细菌BacillusSp.2108,其代谢物对几丁质酶具有较强的抑制活性。对其发酵液离心,用硫酸铵盐析后,经Sephadex G-25脱盐柱脱盐、DEAE Sephrose Fast F low阴离子交换柱层析和低压液相色谱Superdex G... 利用平板快速筛选法,从土壤中筛选到一株细菌BacillusSp.2108,其代谢物对几丁质酶具有较强的抑制活性。对其发酵液离心,用硫酸铵盐析后,经Sephadex G-25脱盐柱脱盐、DEAE Sephrose Fast F low阴离子交换柱层析和低压液相色谱Superdex G 75凝胶过滤层析等步骤进行分离纯化,最后通过SDS-PAGE检测,得到一条单带。纯品经SDS-PAGE,转膜,测序,及序列比对,初步判定此抑制物是一种中性蛋白酶。 展开更多

关键词 几丁质酶 几丁质酶抑制物 纯化 层析 中性蛋白酶

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