昆虫杆状病毒的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶 被引量：7

1

作者 闫庆生 欧阳晓光 +1 位作者 李充璧 庞义 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期241-242,共2页

昆虫杆状病毒的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶（ｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄＵＤＰｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＧＴ）能催化ＵＤＰ糖基连接到蜕皮甾体上，使之失活，从而阻止或推迟蜕皮，有利于病毒复制，所以缺失ｅｇ... 昆虫杆状病毒的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶（ｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄＵＤＰｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＧＴ）能催化ＵＤＰ糖基连接到蜕皮甾体上，使之失活，从而阻止或推迟蜕皮，有利于病毒复制，所以缺失ｅｇｔ基因的病毒能改良杀虫效果，如加速死亡和减少摄食量等．最近几年的研究进展主要集中在基因和蛋白质的一级结构、酶催化反应。 展开更多

关键词 昆虫杆状病毒 egt基因 egt

下载PDF 职称材料

茶尺蠖核型多角体病毒多角体蛋白基因核苷酸序列及其在Baculoviridae中的地位(英文) 被引量：7

2

作者 张传溪 胡萃 吴祥甫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期365-371,共7页

茶尺蠖核型多角体病毒（ＥｏＳＮＰＶ）基因组的ｐｏｌｈ和ｅｇｔ基因区约１４．２ｋｂ的酶切图谱被构建．ｅｇｔ基因位于ｐｏｌｈ基因上游约４．８ｋｂ处，但转录方向与ｐｏｌｈ基因相反．ＥｃｏＲⅤ－Ｌ片段ｐｏｌｈ基因及其旁侧的１... 茶尺蠖核型多角体病毒（ＥｏＳＮＰＶ）基因组的ｐｏｌｈ和ｅｇｔ基因区约１４．２ｋｂ的酶切图谱被构建．ｅｇｔ基因位于ｐｏｌｈ基因上游约４．８ｋｂ处，但转录方向与ｐｏｌｈ基因相反．ＥｃｏＲⅤ－Ｌ片段ｐｏｌｈ基因及其旁侧的１１２５核苷酸序列被测定．ｐｏｌｈ基因编码区长７３８核苷酸，可编码２４６氨基酸的多肽．起始密码子ＡＴＧ上游是一个富含ＡＴ（ＡＴ占７１．２％）的启动子区，在－５２核苷酸处有杆状病毒晚期基因启动子转录起始基序ＡＴＡＡＧ．在终止密码子下游２０８核苷酸有一个ｐｏｌｙ（Ａ）信号，ＡＡＴＡＡＡ．但ＥｏＳＮＰＶｐｏｌｈ基因起始密码子ＡＴＧ相邻核苷酸序列为ＧＴＡＡＴＧＴ，其－３是个Ｇ，这与已知的１６种其它杆状病毒ｐｏｌｈ基因－３位置均是Ａ不相同．在分析了ＥｏＳＮＰＶ和ＨａＳＮＰＶ多角体蛋白基因核苷酸序列的基础上，通过ＭＡＬＩＧＮ程序，比较了目前已发表的２６种杆状病毒包涵体蛋白的序列，ＥｏＳＮＰＶ与黄杉毒蛾核型多角体病毒（ＯｐＳＮＰＶ）的同源性为最高，核苷酸序列的同源性为８３．０％，氨基酸序列达９４．７％；与其它２０种鳞翅目ＮＰＶ的同源性也很高，核苷酸序列同源性为７２．６％～８１．９％，氨基酸序列为８３．７％～９３? 展开更多

关键词 EoSNPV 多角体蛋白基因 杆状病毒 分子进化

下载PDF 职称材料

三种强启动子和egt基因缺陷在重组核型多角体病毒杀虫剂研发中的意义 被引量：4

3

作者 付月君 梁爱华 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期11-13,共3页

核型多角体病毒 (nuclearpolyhedrosisvirus ,NPV)是鳞翅目昆虫的重要病原微生物。采用构建重组高效表达外源毒蛋白的 p10、ph、ocu基因的强启动子 ,以提高野生型NPV的毒力 ;探讨删除杆状病毒中的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶 (ecdyste... 核型多角体病毒 (nuclearpolyhedrosisvirus ,NPV)是鳞翅目昆虫的重要病原微生物。采用构建重组高效表达外源毒蛋白的 p10、ph、ocu基因的强启动子 ,以提高野生型NPV的毒力 ;探讨删除杆状病毒中的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶 (ecdysteroidUDP-glucosyltraansferase ,EGT)基因对改良病毒杀虫剂的杀虫效果 。 展开更多

关键词 基因工程 生物杀虫剂 核型多角体病毒 egt基因 鳞翅目昆虫 基因缺陷

下载PDF 职称材料

斜纹夜蛾核多角体病毒egt基因的克隆和部分序列分析 被引量：4

4

作者 闫庆生 庞义 +2 位作者 农广 欧阳晓光 龙綮新 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期125-127,共3页

用ＡｃＭＮＰＶｅｇｔ基因中的保守区部分片段为探针，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交确定ＳｌＭＮ－ＰＶｅｇｔ基因的位置在ＰｓｔⅠ４９７０ｂｐ和ＸｂａⅠ２６００ｂｐ的片段上．采用双链ＤＮＡ序列分析方法测序，在２６００ｂｐ片段上的... 用ＡｃＭＮＰＶｅｇｔ基因中的保守区部分片段为探针，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交确定ＳｌＭＮ－ＰＶｅｇｔ基因的位置在ＰｓｔⅠ４９７０ｂｐ和ＸｂａⅠ２６００ｂｐ的片段上．采用双链ＤＮＡ序列分析方法测序，在２６００ｂｐ片段上的ＥｃｏＲⅠ位点两侧得到５９４ｂｐＤＮＡ碱基序列，用计算机ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ软件，将５９４ｂｐＤＮＡ碱基序列所推测的氨基酸序列与ＡｃＭＮＰＶ和ＳｌｉＭＮＰＶ的ｅｇｔ基因氨基酸序列进行同源比较，其同源性分别为４５％和８６．５％． 展开更多

关键词 斜纹夜蛾 核多角体病毒 egt基因 克隆 昆虫病毒

下载PDF 职称材料

昆虫激素与杆状病毒

5

作者 王厚伟 牟志美 +3 位作者 崔为正 李卫国 王彦文 高绘菊 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 2000年第4期451-456,462,共7页

近年来 ,提高杆状病毒表达载体系统外源基因表达量是一研究热点。本文综述了昆虫激素对杆状病毒寄主蛋白质合成的调控作用 ,杆状病毒基因组内egt基因的结构功能和表达 ,并综述了昆虫激素与杆状病毒之间的相互影响 ,以现有试验结果为依... 近年来 ,提高杆状病毒表达载体系统外源基因表达量是一研究热点。本文综述了昆虫激素对杆状病毒寄主蛋白质合成的调控作用 ,杆状病毒基因组内egt基因的结构功能和表达 ,并综述了昆虫激素与杆状病毒之间的相互影响 ,以现有试验结果为依据 ,提出了利用外源昆虫激素提高杆状病毒表达载体系统表达量的途径。 展开更多

关键词 昆虫激素 杆状病毒 外源基因表达 寄主 结构功能 试验结果 利用 表达载体 表达量 基因组

全文增补中

舞毒蛾核型多角体病毒PCR检测技术的建立 被引量：3

6

作者 陶婧 韩崇选 +3 位作者 张永安 王玉珠 曲良建 王青华 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2012年第5期616-619,共4页

根据舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)设计一对特异性引物,成功建立了LdMNPV的PCR检测技术体系,其对LdMNPV基因组的灵敏度可达到1 fg.mL-1。应用该技术体系从舞毒蛾带毒幼虫、卵、蛹的基因组... 根据舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)设计一对特异性引物,成功建立了LdMNPV的PCR检测技术体系,其对LdMNPV基因组的灵敏度可达到1 fg.mL-1。应用该技术体系从舞毒蛾带毒幼虫、卵、蛹的基因组中扩增出目的片段,证明了这一技术的可行性。对不同浓度的多角体悬液的扩增结果显示:其检测最低量为5 OBs·mL-1。形态学研究表明:从内蒙舞毒蛾体内分离到的LdMNPV中,少数表面有凹陷的孔洞,病毒粒子从这些孔洞中游离出来,这也阐明了此技术能够从多角体悬液中扩增出目的片段的原因。在将来LdMNPV的检测中,可用虫体进行研磨过滤离心得到的组织液作为模板进行扩增。 展开更多

关键词 舞毒蛾核型多角体病毒 PCR 微量检测 egt基因

下载PDF 职称材料

昆虫杆状病毒egt基因研究进展 被引量：1

7

作者 王海萍 吴小锋 《蚕桑通报》 2017年第1期10-13,共4页

杆状病毒是一类大分子的双链环状DNA病毒,其编码的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)在感染昆虫后表达产生EGT酶。EGT酶的催化使宿主体内的蜕皮激素失活,阻止幼虫蜕皮,从而利于病毒自身的繁殖。已有研究发现,敲除egt基因的杆... 杆状病毒是一类大分子的双链环状DNA病毒,其编码的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)在感染昆虫后表达产生EGT酶。EGT酶的催化使宿主体内的蜕皮激素失活,阻止幼虫蜕皮,从而利于病毒自身的繁殖。已有研究发现,敲除egt基因的杆状病毒感染的昆虫,死亡时间缩短,向上攀爬行为减弱。最近的研究还表明转egt基因的家蚕蚕蛹发育迟缓。从分子水平对EGT酶作用机制及其与宿主蛋白互作关系进行探索,将加深我们对杆状病毒调控宿主生长发育和行为变化策略的认识,有利于农业生产应用(特别是蚕丝业,如鲜茧缫丝),且为新型高效生物杀虫剂的研发提供新思路。 展开更多

关键词 杆状病毒 egt基因 宿主昆虫 生长发育 行为

下载PDF 职称材料

EoNPV的限制性酶切图谱及polyhedrin基因和egt基因的定位 被引量：1

8

作者 张传溪 孙建新 +2 位作者 王根 胡萃 吴祥甫 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期55-59,共5页

用８种限制性内切酶酶解茶尺蠖Ｅｃｔｒｏｐｉｓｏｂｌｉｑｕａ核型多角体病毒（ＥｏＮＰＶ）基因组ＤＮＡ，获得大于０．８８ｋｂ的片段数分别为７、３８、１９、１７、１６、９、３２和１４．由此统计，基因组平均大小大于１１８．５... 用８种限制性内切酶酶解茶尺蠖Ｅｃｔｒｏｐｉｓｏｂｌｉｑｕａ核型多角体病毒（ＥｏＮＰＶ）基因组ＤＮＡ，获得大于０．８８ｋｂ的片段数分别为７、３８、１９、１７、１６、９、３２和１４．由此统计，基因组平均大小大于１１８．５ｋｂ，即Ｍｒ约大于７８．６×１０６．用ＢｍＮＰＶ的多角体蛋白（ｐｈ）基因和ＡｃＭＮＰＶ的ｅｇｔ基因为探针，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法，将ＥｏＮＰＶ的ｐｈ基因定位于ＢａｍＨＩＡ、ＣｌａＩＤ、ＥｃｏＲＩＭ、ＥｃｏＲＶＬ、ＨｉｎｄⅢＦ、ＰｓｔＩＡ、ＳａｌＩＨ和ＸｈｏＩＢ片段上，将ｅｇｔ基因定位于ＢａｍＨＩＡ、ＣｌａＩｌ、ＥｃｏＲＩＫ、ＥｃｏＲＶＡ、ＨｉｎｄⅢＨ、ＰｓｔＩＡ、ＳａｌＩＢ、ＸｈｏＩＩ片段上．通过克隆和酶切鉴定ＥｃｏＲＩＭ和ＥｃｏＲＶＬ片段，测定ｐｈ基因部分序列，并以ＥｃｏＲＩＭ为探针对基因组酶切印迹进行杂交，制作了ＥｏＮＰＶｐｈ基因和ｅｇｔ基因区的酶切图谱，推定ｅｇｔ基因保守区位于ｐｈ基因上游约４．５５ｋｂ处． 展开更多

关键词 茶尺蠖 核型多角体病毒 酶切图谱 基因定位

下载PDF 职称材料

昆虫杆状病毒诱导宿主行为变化及其分子机制

9

作者 王国宝 吴小锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1005-1010,共6页

最近的研究发现杆状病毒感染能够诱导宿主昆虫产生行为变化,典型的表现为寄主运动能力的增强。从生物学的角度分析,这是杆状病毒有利于自身传播的操控策略。本文综述了3种典型杆状病毒诱导宿主昆虫行为发生变化的现象以及其可能的分子... 最近的研究发现杆状病毒感染能够诱导宿主昆虫产生行为变化,典型的表现为寄主运动能力的增强。从生物学的角度分析,这是杆状病毒有利于自身传播的操控策略。本文综述了3种典型杆状病毒诱导宿主昆虫行为发生变化的现象以及其可能的分子机制。其中,舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的egt基因能够引起吉普赛舞毒蛾(Lymantria dispar)出现异常活跃的攀爬行为;而家蚕(Bombyx mori)与甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)幼虫分别被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)感染后,出现爬行异常活跃的行为则是由于病毒中ptp基因的存在。不同种类的杆状病毒对宿主昆虫行为的操控策略不同,对杆状病毒操控宿主行为的分子机制的探索是一个新的研究领域,其研究成果不仅有助于揭示杆状病毒与寄主的互作关系,而且将为农林病虫害的生物防治提供新的参考策略。 展开更多

关键词 杆状病毒 egt基因 ptp基因 昆虫宿主 行为

下载PDF 职称材料

EoSNPV egt基因的克隆和部分核苷酸序列的分析

10

作者 张传溪 何家禄 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期583-588,共6页

以AcM NPV egt基因为探针,通过Southern 杂交和原位杂交,克隆了含EoSNPV egt基因的4.95 kb EcoRⅠ-K 片段,并进一步亚克隆了含完整egt基因编码区的1.8 kb HindⅢ-EcoRⅤ片段。应用双脱氧链终止法,测定了基因编码区中的XhoⅠ-HincⅡ片段4... 以AcM NPV egt基因为探针,通过Southern 杂交和原位杂交,克隆了含EoSNPV egt基因的4.95 kb EcoRⅠ-K 片段,并进一步亚克隆了含完整egt基因编码区的1.8 kb HindⅢ-EcoRⅤ片段。应用双脱氧链终止法,测定了基因编码区中的XhoⅠ-HincⅡ片段471 bp 的核苷酸全序列。计算机分析表明,该片段编码的157 个氨基酸序列与其它杆状病毒egt基因保守区的Ⅳ(部分),Ⅴ,Ⅵ和Ⅶ区同源性很高,与BsSNPV,M bMNPV,LdM NPV,CfMNPV,AcMNPV,SlMNPV 基因相应序列的同源性分别为64.1% ,62.8% ,58.3% ,47.4% ,46.8% 和47.2% 。 展开更多

关键词 茶尺蠖核型 多角体病毒 egt基因 克隆

下载PDF 职称材料

家蚕核型多角体病毒egt基因的结构和功能分析 被引量：5

11

作者 季平 何家禄 +1 位作者 吕鸿声 吴祥甫 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期54-58,共5页

以苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)的egt基因作探针 ,从家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPVZJ- 8)基因组中克隆了egt基因及其旁侧序列 ,作了该片段的酶切图谱 ;测定了BmNPVZJ - 8egt基因序列。与AcMNPV的egt基因相比同源性为 95 % ;... 以苜宿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)的egt基因作探针 ,从家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPVZJ- 8)基因组中克隆了egt基因及其旁侧序列 ,作了该片段的酶切图谱 ;测定了BmNPVZJ - 8egt基因序列。与AcMNPV的egt基因相比同源性为 95 % ;基因大小都为 15 18bp。利用egt基因旁侧序列构建了转移载体pUDegt,以绿色荧光蛋白基因 (EGFP)作报告基因取代egt基因 ,构建了由EGFP取代egt基因的重组病毒BmDegt。将含egt基因的BmNPV和不含egt基因的重组病毒BmDegt分别注射感染四龄家蚕幼虫 ,发现BmDegt感染的家蚕个体生长速度缓慢 ,家蚕个体小 。 展开更多

关键词 家蚕核型多角体病毒 egt 缺失病毒 杀虫效率

下载PDF 职称材料

介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建 被引量：2

12

作者 张春雷 靳立明 +5 位作者 叶昱 张杰 朱俊 高又文 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期564-568,共5页

应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转... 应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体,提取重组Bacmid质粒.将阳性重组Bacmid质粒转染Sf9昆虫细胞,72 h收集培养上清液获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验和Westernblot表明,该重组杆状病毒可以在昆虫细胞实现猪圆环病毒2型Cap蛋白的分泌表达. 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 ORF2基因 egt信号肽 CAP蛋白 重组杆状病毒

下载PDF 职称材料

家蚕核型多角体病毒egt基因在大肠杆菌中的表达 被引量：1

13

作者 季平 王文兵 +1 位作者 何家禄 吴祥甫 《蚕业科学》 CAS CSCD 1999年第1期26-30,共5页

利用ＰＣＲ技术对已克隆的ＢｍＮＰＶＺＪ８株的ｅｇｔ基因５′端非编码区序列进行删除，并将ＰＣＲ片段克隆到质粒ｐＢａｃＰＡＫ８中，测序结果表明ＰＣＲ扩增的片段完全正确，接着将经过改造的ｅｇｔ基因克隆于大肠杆菌表达载体ｐ... 利用ＰＣＲ技术对已克隆的ＢｍＮＰＶＺＪ８株的ｅｇｔ基因５′端非编码区序列进行删除，并将ＰＣＲ片段克隆到质粒ｐＢａｃＰＡＫ８中，测序结果表明ＰＣＲ扩增的片段完全正确，接着将经过改造的ｅｇｔ基因克隆于大肠杆菌表达载体ｐＥＴ２２ｂ（＋）中，在大肠杆菌中高效表达了ＢｍＮＰＶｅｇｔ基因。同时，对ＢｍＮＰＶｅｇｔ基因的密码子使用作了分析。 展开更多

关键词 家蚕 核型多角体病毒 egt基因 基因表达

下载PDF 职称材料

杆状病毒egt基因对昆虫激素表达的调控影响 被引量：1

14

作者 王厚伟 张志芳 +1 位作者 李卫国 何家禄 《蚕业科学》 CAS CSCD 2000年第z1期102-106,共5页

从昆虫激素对宿主相关基因表达的调控机理和杆状病毒egt基因的结构功能和表达方面 ,讨论了昆虫激素和杆状病毒间相互关系的研究进展 ,表明杆状病毒的感染改变了宿主固有的激素平衡 ,从而影响宿主的发育进程。

关键词 杆状病毒 egt基因 昆虫激素 调控

下载PDF 职称材料

灰斑古毒蛾核型多角病毒EcoR I-O片段的克隆与生物信息学分析

15

作者 杨丽荣 闫海霞 +2 位作者 全鑫 薛保国 达楞巴雅尔 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期55-60,共6页

分析了灰斑古毒蛾核型多角体病毒（Orgyia ericae nucleopolyhedrovirus,OrerNPV）EcoR I-O片段分子生物学特征,为研究egt基因分子特性和杆状病毒遗传改良提供科学依据。克隆和分析了OrerNPVEcoR I-O片段所包含的2个基因,并应用生物软件... 分析了灰斑古毒蛾核型多角体病毒（Orgyia ericae nucleopolyhedrovirus,OrerNPV）EcoR I-O片段分子生物学特征,为研究egt基因分子特性和杆状病毒遗传改良提供科学依据。克隆和分析了OrerNPVEcoR I-O片段所包含的2个基因,并应用生物软件对OrerNPV蜕皮甾体尿苷二磷酸葡糖转移酶（egt）基因及其启动子进行了比对分析。结果表明OrerNPVEcoR I-O片段包含egt基因和Ol-129同源基因,在该区域中编码egt基因的开放阅读框（ORF）由1 539个核苷酸组成,可以编码512个氨基酸,预计蛋白质分子质量为57.9 kDa。OrerNPV和NPVs之间的同源性为46%-89%,与白斑天幕毛虫核型多角体病毒（Orgyia leucostigmaNPV,OlNPV）egt基因同源性最高,达89%,与棉褐带卷叶蛾核型多角体病毒（Adoxophyes oranaNPV,AoNPV）同源性最低为46%;而OrerNPV和GVs之间的同源性为44%-55%,小于与NPVs之间的同源性;与昆虫UGT间同源性最低,与家蚕UGT间同源性为41%。EcoR I-O片段＋M13端含有编码OlNPV ORF129（Ol-129）Ol-129同源基因ORF,由597 bp个核苷酸组成,在其起始密码子ATG上游-64,-24 nt处各有1个TATA box,其推测的氨基酸序列与Ol-129同源性最高达81%,与LdNPV ORF127同源性最低,为40%。明确了OrerNPVEcoR I-O片段的序列特征,以及OrerNPVegt基因特性。 展开更多

关键词 灰斑古毒蛾核型多角体病毒 EcoRI-O片段 egt基因 Ol-129同源基因

下载PDF 职称材料