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一种用于基因芯片可靠的双轮RNA线性扩增技术
被引量：
1
1
作者
周荣荣
卫军霞
+3 位作者
王亚辉
张亮
程京
周玉祥
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期498-507,共10页
DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改...
DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改进,增加额外的一轮体外转录,并结合Klenow酶标记技术来制备cDNA靶标和寡核苷酸芯片杂交.从纳克量级的总RNA起始,本方法和常规的RNA单轮线性扩增法相比,仍然准确地保留了约70%的基因表达信息.同一RNA样本的自身比较实验及重复实验结果也显示,该方法具有较高的可靠性和重复性.RNA双轮体外扩增法需要的起始RNA相对于常规的单轮扩增法减少了很多(10ng甚至更少),因而非常适合分析那些只能提供微量RNA的样本.
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关键词
DNA微阵列
双轮RNA线性扩增
双轮体外转录
可靠性和重复性
下载PDF
职称材料
题名
一种用于基因芯片可靠的双轮RNA线性扩增技术
被引量：
1
1
作者
周荣荣
卫军霞
王亚辉
张亮
程京
周玉祥
机构
清华大学生物科学与技术系
生物芯片北京国家工程研究中心
生物芯片北京国家工程研究中心
清华大学医学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期498-507,共10页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(No.2002AA2Z2011)
国家自然科学基金资助项目(No.39889001
No.39825108)~~
文摘
DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改进,增加额外的一轮体外转录,并结合Klenow酶标记技术来制备cDNA靶标和寡核苷酸芯片杂交.从纳克量级的总RNA起始,本方法和常规的RNA单轮线性扩增法相比,仍然准确地保留了约70%的基因表达信息.同一RNA样本的自身比较实验及重复实验结果也显示,该方法具有较高的可靠性和重复性.RNA双轮体外扩增法需要的起始RNA相对于常规的单轮扩增法减少了很多(10ng甚至更少),因而非常适合分析那些只能提供微量RNA的样本.
关键词
DNA微阵列
双轮RNA线性扩增
双轮体外转录
可靠性和重复性
Keywords
DNA
microarrays
two-cycle
RNA
linear
amplification
double
in vitro
transcription
reproducibility
and
reliability
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种用于基因芯片可靠的双轮RNA线性扩增技术
周荣荣
卫军霞
王亚辉
张亮
程京
周玉祥
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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