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悬浮驯化CHO细胞并用于抗前列腺特异性膜抗原的抗体表达 被引量:3
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作者 吴介恒 韩东晖 +6 位作者 魏铭 郑国旭 焦点 席文锦 杨安钢 秦卫军 温伟红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-4,9,共5页
目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬... 目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬浮培养的CHO-S细胞。根据从噬菌体抗体库筛选获得的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体的基因序列,人工设计并合成其重链和轻链基因,分别克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,所得载体命名为pc DNA3.1-HC和pc DNA3.1-LC。将构建好的2个载体按照轻、重链比例为3∶1的量用Free Style MAX转染试剂瞬时转染CHO-S细胞,转染7 d后收集培养上清,用SDS-PAGE和Western blot法检测抗体表达情况,用流式细胞术检测其与PSMA阳性细胞的结合活性。结果成功将贴壁CHO细胞驯化成悬浮CHO-S细胞,成功构建了表达抗PSMA人源性抗体重链和轻链基因的真核表达载体,并在CHO-S细胞中实现了抗体的分泌表达,流式细胞术检测证实其可特异性结合PSMA阳性前列腺癌细胞。结论成功驯化获得悬浮CHO-S细胞,驯化后的CHO-S细胞可用于抗体的真核表达,为后续抗体的大量表达纯化及功能研究提供了工具。 展开更多
关键词 细胞驯化 CHO细胞 抗体表达 真核表达 转染
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走向真实和开放的写作——关于《非构思写作学宣言》的意义 被引量:1
2
作者 张雅秋 《海南师范学院学报(社会科学版)》 2003年第4期58-60,共3页
文章从社会历史角度对马正平的《非构思写作学宣言》作了进一步探讨,提出构思性写作与非构思写作的差异,不仅体现在写作技术和思维运作方式方面,更体现在写作目的方面,二者的此消彼长反映了社会环境的深刻变异,以及对写作的不同需求。
关键词 非构思写作学 构思写作 意识形态 “驯导”
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陆地棉抗凋亡基因DAD1同源拷贝的非对称性驯化改变 被引量:1
3
作者 包颖 梅玉芹 +5 位作者 张霞 孙文静 刘洪岩 岳舒婷 张琳 赵文静 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1453-1458,共6页
抗凋亡基因DAD1是细胞程序性死亡的抑制基因,在植物生长发育中发挥重要作用。为探讨该基因在具有AADD基因组的异源四倍体陆地棉驯化过程中的遗传改变,本研究选取了陆地棉的野生和栽培样品作为研究对象,结合分子克隆、测序以及棉纤维不... 抗凋亡基因DAD1是细胞程序性死亡的抑制基因,在植物生长发育中发挥重要作用。为探讨该基因在具有AADD基因组的异源四倍体陆地棉驯化过程中的遗传改变,本研究选取了陆地棉的野生和栽培样品作为研究对象,结合分子克隆、测序以及棉纤维不同发育阶段的转录组数据分析等方法,对二者在DAD1基因序列和表达水平的差异进行了深入比较,结果显示:陆地棉中,DAD1基因同时具有A和D基因组的2个同源拷贝;驯化对这2个拷贝的影响是不均衡的,其中A基因组的拷贝在基因序列上保持一致,但在表达上出现分化;D基因组拷贝在基因序列上出现了5个核苷酸的变异,包括1个发生在外显子区的同义突变,但在表达上却未出现明显变化。我们目前的研究结果展示了驯化对多倍体植物重要功能基因同源组分的影响是独立的,非对称性的。 展开更多
关键词 陆地棉 抗凋亡基因DAD1 同源拷贝 驯化 序列差异 基因表达
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家蚕驯化过程中受到选择的2个GMC氧化还原酶基因的序列变异分析
4
作者 程道军 唐林 +2 位作者 孟勐 王永虎 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期210-215,共6页
葡萄糖-甲醇-胆碱(glucose-methanol-choline,GMC)氧化还原酶家族在生物体内葡萄糖、胆碱和甾醇等物质的代谢过程中发挥重要作用。比较家蚕和野桑蚕的遗传变异图谱数据发现,GMC氧化还原酶基因家族成员GMC1(BGIBMGA000068)和GMC2(BGIBMGA... 葡萄糖-甲醇-胆碱(glucose-methanol-choline,GMC)氧化还原酶家族在生物体内葡萄糖、胆碱和甾醇等物质的代谢过程中发挥重要作用。比较家蚕和野桑蚕的遗传变异图谱数据发现,GMC氧化还原酶基因家族成员GMC1(BGIBMGA000068)和GMC2(BGIBMGA000158)在家蚕驯化过程中受到显著的选择压力,其完整基因序列发生大量单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphism,SNP)突变,部分SNP突变位于外显子区并导致所编码蛋白质的氨基酸发生替换。基于全基因组芯片数据的表达谱分析显示,GMC1基因主要在家蚕5龄第3天幼虫的中肠和马氏管中表达,GMC2基因主要在丝腺和头部高量表达,暗示GMC1和GMC2在家蚕驯化过程中发生的序列变异可能与其在家蚕体内物质代谢及丝腺发育或丝蛋白合成等生物学过程中的功能有关。从家蚕丝腺组织中克隆获得家蚕GMC2基因的全长cDNA序列并进行原核表达,目的蛋白质以包涵体的形式存在。 展开更多
关键词 家蚕 驯化 葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶 序列变异 基因表达
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无血清悬浮驯化CHO-K1单克隆细胞株的建立及其表达验证
5
作者 谢涛 孙青 +6 位作者 彭秀娥 张朝 张宽 王翠 刘伯宁 李文宾 姚兵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第8期945-951,共7页
目的通过无血清悬浮驯化CHO-K1细胞,筛选出单克隆源性可追溯、生长状态良好的宿主细胞株,并进行表达验证。方法采用逐步降低血清含量的方法,将贴壁状态的CHO-K1细胞驯化成适应无血清培养基培养的悬浮细胞;通过单细胞接种/成像系统Verifi... 目的通过无血清悬浮驯化CHO-K1细胞,筛选出单克隆源性可追溯、生长状态良好的宿主细胞株,并进行表达验证。方法采用逐步降低血清含量的方法,将贴壁状态的CHO-K1细胞驯化成适应无血清培养基培养的悬浮细胞;通过单细胞接种/成像系统Verified In-Situ Plate Seeding(简称VIPS系统)筛选单克隆,经连续培养综合评估单克隆细胞的倍增时间、结团率、细胞直径等参数,确定候选克隆;将候选克隆分别转染携带绿色及红色荧光蛋白的质粒,根据荧光蛋白表达情况确定1株克隆作为工程细胞株的宿主细胞。结果驯化获得的CHO-K1细胞适应无血清悬浮培养,倍增时间为20~24 h;通过单克隆筛选和产量评估确定的单克隆细胞株单克隆源性良好且可追溯,以0.5×10~6个/mL的细胞密度接种,培养7 d最高细胞密度可达8.27×10~6个/mL,活率不低于80%,平均倍增时间20.31 h,能较好地表达外源基因。结论通过无血清驯化培养,成功获得单克隆源性可追溯、生长状态良好且能够用于蛋白高表达的CHO-K1细胞株。 展开更多
关键词 CHO-K1细胞 无血清培养 细胞驯化 单克隆筛选 外源蛋白表达
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家蝇AMP17基因的克隆及其分子特性和表达模式研究 被引量:9
6
作者 陶如玉 李妍 +3 位作者 马慧玲 付萍 吴建伟 国果 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1079-1083,1098,共6页
目的克隆家蝇AMP17基因并进行、序列分析,对其时空表达模式进行初步探索。方法从微生物诱导的家蝇转录组数据库中筛选差异高表达唾液腺蛋白AMP17基因。以该基因的cDNA文库质粒为模板进行PCR扩增,运用生物信息学方法对其编码蛋白进行结... 目的克隆家蝇AMP17基因并进行、序列分析,对其时空表达模式进行初步探索。方法从微生物诱导的家蝇转录组数据库中筛选差异高表达唾液腺蛋白AMP17基因。以该基因的cDNA文库质粒为模板进行PCR扩增,运用生物信息学方法对其编码蛋白进行结构与功能分析。取家蝇不同生活史时期标本(卵,各龄幼虫,蛹,雄雌成虫)及3龄幼虫不同组织部位(体壁、气管、唾液腺、脂肪体、马氏管及中肠)标本,采用实时荧光定量PCR检测AMP17基因表达情况。结果 PCR扩增得到约495bp的特异性AMP17基因片段。AMP17基因ORF全长495bp,编码164个氨基酸,理论分子质量单位17.4×103,等电点为6.09,整个多肽链表现为亲水性。该蛋白属于分泌蛋白,主要分布在细胞外(包括细胞壁)。磷酸化位点分析该蛋白,有5个丝氨酸、3个苏氨酸、1个色氨酸可能成为蛋白激酶磷酸化位点。其二级结构中主要以α-螺旋,不规则卷曲和延伸链为蛋白最大量的结构元件。时空表达谱显示,家蝇不同发育时期中,以卵期作为参照,AMP17基因在3龄及雄成虫时期表达量高,表达水平排列顺序为3龄幼虫>雄成虫>1龄幼虫>雌成虫>蛹期>2龄幼虫>卵,3龄幼虫时期表达量比卵期上调了20 320.98倍(P<0.01);雄成虫上调了10 936.37倍(P<0.01)。以体壁作为参照,AMP17基因在家蝇3龄幼虫不同组织的表达以马氏管表达最高,比体壁上调了2.40倍(P<0.05);其次为唾液腺,比体壁上调了1.31倍(P<0.01)。结论成功克隆了家蝇AMP17基因并初步探索了其时空表达模式,为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 家蝇 AMP17基因 生物信息学分析 表达模式
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Gene expression profiling in porcine mammary gland during lactation and identification of breed- and developmental-stage-specific genes 被引量:3
7
作者 SU Zhixi1, DONG Xinjiao2, ZHANG Bing1, ZENG Yanwu1, FU Yan1, YU Jun1,3 & HU Songnian1,3 1. James D. Watson Institute of Genome Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310008, China 2. School of Life and Environmental Sciences, Wenzhou Normal College, Wenzhou 325027, China 3. Beijing Institute of Genomics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 101300, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2006年第1期26-36,共11页
A total of 28941 ESTs were sequenced from five 5′-directed non-normalized cDNA libraries, which were assembled into 2212 contigs; 5642 singlets using CAP3. These sequences were annotated; clustered into 6857 unique g... A total of 28941 ESTs were sequenced from five 5′-directed non-normalized cDNA libraries, which were assembled into 2212 contigs; 5642 singlets using CAP3. These sequences were annotated; clustered into 6857 unique genes, 2072 of which having no functional annotations were considered as novel genes. These genes were further classified into Gene Ontology categories. By comparing the expression profiles, we identified some breed-and developmental-stage-specific gene groups. These genes may be relative to reproductive performance or play important roles in milk synthesis, secretion; mammary involution. The unknown EST sequences; expression profiles at different developmental stages; breeds are very important resources for further research. 展开更多
关键词 EXPRESSED sequence tags expression profile domestic pig MAMMARY gland.
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牦牛和双峰驼重组朊蛋白的原核细胞表达 被引量:5
8
作者 吴润 陈豪泰 +1 位作者 刘湘涛 谢庆阁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-6,共6页
应用重组DNA技术构建了牦牛和双峰驼重组朊蛋白的4个表达载体,即pGEX-BoPrP(23~242)、pGEX—BoPrP(100~242)、pGEX—CaPrP(25~241)和pGEX—CaPrP(93~241),经转化E.coli BL21(DE3),成功地获得了重组菌E.coli BoPrP(2... 应用重组DNA技术构建了牦牛和双峰驼重组朊蛋白的4个表达载体,即pGEX-BoPrP(23~242)、pGEX—BoPrP(100~242)、pGEX—CaPrP(25~241)和pGEX—CaPrP(93~241),经转化E.coli BL21(DE3),成功地获得了重组菌E.coli BoPrP(23~242)、E.coli BoPrP(100~242)、E.coli CaPrP(25~241)和E.coli CaPrP(93~241),分别可表达大小约为50.2、41.7、49.9和42.4ku的融合蛋白。各重组菌经1.0mmol/L的IPTG于37℃诱导5~6h可产生占细菌总蛋白量30%~45%的融合蛋白。免疫印迹分析表明,除融合蛋白GST—BoPrP(100~242)外,GST—BoPrP(23~242)、GST—CaPrP(25~241)和GST—CaPrP(93~241)均可与抗牛单克隆抗体4C11反应,显示中国黄牛PrP^c与牦牛和双峰驼PrP^c具有共同的抗原成分。 展开更多
关键词 朊粒 牦牛 双峰驼 原核细胞表达
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血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的表达差异分析
9
作者 昂艳芬 汪娅媛 +3 位作者 严涵 田仰清 张学峰 严玉霖 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-233,共6页
【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、... 【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、小肠和肠系膜淋巴结)中的mRNA相对表达水平,并利用免疫组织化学法检测家猫肾脏、胰腺和小肠中ACE2蛋白的组织定位。【结果】ACE2基因在家猫肾脏、胰腺和小肠组织的表达量极显著高于肺脏组织(P<0.01),在心脏、脾脏和肠系膜淋巴结组织的表达量极显著低于肺脏组织(P<0.01);不同性别家猫的ACE2表达量存在一定差异,但不显著;ACE2蛋白在小肠组织中的表达量最高,其次是肾脏,在胰腺的表达量最低。【结论】家猫ACE2基因在各组织中广泛分布且存在一定的表达差异。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 家猫 组织 表达
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贵蚕一号在毕节地区的饲养效果 被引量:3
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作者 胡仕叶 杨胜特 +3 位作者 丁洁 简云峰 罗朝斌 姜虹 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第4期159-161,共3页
为进一步了解贵蚕一号在毕节地区的性状表现,2008年春、秋季分别以春蕾×镇珠和洞庭×碧波为对照,进行家蚕品比试验。结果表明:贵蚕一号春季全龄经过为26.80d,比春蕾×镇珠短1.70d,秋季全龄经过为25.89d,比洞庭... 为进一步了解贵蚕一号在毕节地区的性状表现,2008年春、秋季分别以春蕾×镇珠和洞庭×碧波为对照,进行家蚕品比试验。结果表明:贵蚕一号春季全龄经过为26.80d,比春蕾×镇珠短1.70d,秋季全龄经过为25.89d,比洞庭×碧波长0.28d;抗病性在春季明显优于春蕾×镇珠,4~5龄期发病率比对照少2.59百分点,秋季抗病性稍逊于洞庭×碧波;50kg桑叶产茧量和张种产值春、秋季均比对照种高。贵蚕一号对毕节春、秋季的气候环境有很好的适应性,适宜推广养殖。 展开更多
关键词 家蚕 贵蚕一号 性状表现 饲养成绩 毕节地区
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家蝇(Musca domestica)羧肽酶基因克隆及原核表达 被引量:2
11
作者 修江帆 魏川川 +3 位作者 尚小丽 国果 吴沁怡 吴建伟 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期152-154,I0004,共4页
从构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR扩增,获得CP基因完整编码序列(登录号:KF939629.1)。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚... 从构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR扩增,获得CP基因完整编码序列(登录号:KF939629.1)。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等进行预测和分析。构建PEASY-E1-CP重组质粒,转化到大肠杆菌OrigamiB(DE3)中进行诱导表达。研究结果表明,CP基因ORF全长1 284 bp,编码428个氨基酸,理论分子量47.8ku,等电点为6.10,具有CP家族的蛋白保守结构域;重组原核质粒pEASY-E1-CP经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达。 展开更多
关键词 家蝇 羧肽酶 克隆 原核表达
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家养动物复杂性状基因定位的统计分析和实验设计(英文) 被引量:2
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作者 Y Da 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1183-1192,共10页
复杂性状基因定位的研究是人类、动植物研究中的 1个热点领域。在畜禽的研究中 ,其目的是定位与生产性状、繁殖性状和疾病相关的基因。在人类中 ,复杂性状基因定位的研究具有极大的挑战性。尽管基因定位的结果积累得很快 ,但能得以确认... 复杂性状基因定位的研究是人类、动植物研究中的 1个热点领域。在畜禽的研究中 ,其目的是定位与生产性状、繁殖性状和疾病相关的基因。在人类中 ,复杂性状基因定位的研究具有极大的挑战性。尽管基因定位的结果积累得很快 ,但能得以确认的结果却很少。关于畜禽基因定位的研究结果同样也增长很快 ,目前在鸡、猪、奶牛等物种中几个大尺度的基因定位工作也正在开展中。虽然在不远的将来能够得到新的、可确信的结果 ,但是如何精确地理解这些复杂性状的基因仍然需要一定的时间。近来 ,复杂性状基因定位的方法已被用于通过基因表达的数据研究转录调节因子的定位工作中 ,这是基因定位研究中 1个新的领域。基因定位的统计分析和实验设计是基因定位研究中的关键性步骤 。 展开更多
关键词 复杂性状 基因定位 家养动物 基因表达
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我国家养雉鸡MHC B-F基因表达量测定与分析 被引量:1
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作者 李启军 宋超 +4 位作者 徐超 李新殿 邢秀梅 吴琼 王全凯 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期77-81,共5页
主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)是脊椎动物基因组中最具多态性和基因密集的区域。MHC基因在免疫系统中发挥着重要的作用,能够参与机体内、外抗原的呈递,从而影响机体对疾病的抵抗力。鸡是除哺乳类动物外,... 主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)是脊椎动物基因组中最具多态性和基因密集的区域。MHC基因在免疫系统中发挥着重要的作用,能够参与机体内、外抗原的呈递,从而影响机体对疾病的抵抗力。鸡是除哺乳类动物外,最早及最深入研究MHC基因的一类脊椎动物,研究证实MHC基因是鸡抗病育种研究中的优选标记基因。试验利用罗氏实时荧光定量PCR技术对我国家养的5个雉鸡种群(中国环颈雉、白雉鸡、日本绿雉、申红雉鸡和黑化雉鸡) MHC B-F基因在不同组织中表达含量进行了测定和比较分析。结果表明:MHC B-F基因在各种群雉鸡的7个组织中均有表达,其中肝脏中MHC B-F基因相对表达量最高,肌胃中相对表达量最少。在所测的7个组织中除腺胃外,申红雉鸡MHC B-F基因的相对表达量普遍高于其他种群。试验研究了MHC B-F基因在我国家养雉鸡不同组织器官中的表达量差异,为进一步研究MHC B-F基因对抗感染性疾病的影响及其对疾病的抵抗力提供了基础数据。 展开更多
关键词 家养雉鸡 MHC B-F 表达分析
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国产电影的价值观表达与传播研究——以《流浪地球》为例 被引量:1
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作者 陆海鹏 强军锋 《淮海工学院学报(人文社会科学版)》 2019年第12期56-58,共3页
电影《流浪地球》以宏大而精妙的故事设定,表达和传播了中国价值观的家庭亲情观念、愚公移山的人文精神、集体英雄主义、故土热爱情结以及人类命运共同体理念,体现了舍弃小我、成就大我的牺牲精神,展现了中华优秀传统文化的魅力,彰显了... 电影《流浪地球》以宏大而精妙的故事设定,表达和传播了中国价值观的家庭亲情观念、愚公移山的人文精神、集体英雄主义、故土热爱情结以及人类命运共同体理念,体现了舍弃小我、成就大我的牺牲精神,展现了中华优秀传统文化的魅力,彰显了中国文化自信的力量,成为中国科幻电影攀登世界先进水平的重要标志,满足了中国观众对国产科幻大片多年的期待。 展开更多
关键词 《流浪地球》 国产电影 价值观表达 文化传播
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家蝇溶菌酶MDLZM2基因的克隆、序列分析及原核表达
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作者 魏川川 彭传林 +4 位作者 胡亚 修江帆 王宇 尚小丽 吴建伟 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期95-101,共7页
对家蝇溶菌酶(Musca domestica lysozyme,MDLZM2)基因进行克隆、序列分析,构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达。从Gen Bank家蝇基因组中筛选获得MDLZM2基因。以该基因的序列设计引物,进行PCR扩增,测序分析获得该基因完整编码序列。运... 对家蝇溶菌酶(Musca domestica lysozyme,MDLZM2)基因进行克隆、序列分析,构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达。从Gen Bank家蝇基因组中筛选获得MDLZM2基因。以该基因的序列设计引物,进行PCR扩增,测序分析获得该基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、二级结构、三级结构和保守结构域等方面进行预测和分析。构建p EASY-E1-MDLZM2重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S Chemically Competent Cell中进行诱导表达及纯化。结果表明MDLZM2基因ORF全长552 bp,编码183个氨基酸,理论分子量21.2 k Da;等电点为6.13,具有Lysozyme家族的蛋白保守结构域。成功构建重组原核表达p EASY-E1-MDLZM2并诱导表达、纯化重组蛋白,为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。 展开更多
关键词 家蝇 LYSOZYME 克隆 原核表达 生物信息学
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“家庭暴力”之法律概念解析 被引量:15
16
作者 李洪祥 《吉林大学社会科学学报》 CSSCI 北大核心 2007年第4期79-83,共5页
我国2001年修订的《婚姻法》虽然明确规定"禁止家庭暴力",但并未给予定义;随后《最高人民法院关于适用〈婚姻法〉若干问题解释(一)》虽对"家庭暴力"给予定义,但与国际公约等法律文件相比存在许多不足。这不仅大大... 我国2001年修订的《婚姻法》虽然明确规定"禁止家庭暴力",但并未给予定义;随后《最高人民法院关于适用〈婚姻法〉若干问题解释(一)》虽对"家庭暴力"给予定义,但与国际公约等法律文件相比存在许多不足。这不仅大大削弱了反家庭暴力的力度,而且也不利于保护受害者的权利。由此可见,只有对家庭暴力的主体、客体、方式、程度和行为环境的范围进行深入分析,才能准确界定和在法律上表述家庭暴力的概念,从而为我国反家庭暴力立法提供参考。 展开更多
关键词 家庭暴力 法律概念 概念构成 立法概念表述
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家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)基因的克隆、序列分析及表达模式 被引量:8
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作者 魏川川 修江帆 +3 位作者 胡亚 尚小丽 张迎春 吴建伟 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期1334-1341,共8页
对家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin基因SP2、SP13和SP16进行克隆、序列分析和时空表达模式检测。运用瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Ex PASy)和美国国家生物技术信息中心(NCBI)等有关的生物信息学分析工具,预测和分析3条Ser... 对家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin基因SP2、SP13和SP16进行克隆、序列分析和时空表达模式检测。运用瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Ex PASy)和美国国家生物技术信息中心(NCBI)等有关的生物信息学分析工具,预测和分析3条Serpin基因编码蛋白质的结构与生物学功能。以RPS18(核糖体S18蛋白)为内参基因,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术检测3条Serpin基因在家蝇不同发育时期,以及家蝇3龄幼虫中脂肪体、唾液腺、中肠、马氏管和体壁的表达特征。SP2、SP13、SP16基因序列的开放阅读框ORF全长分别为1191 bp、1137 bp和1212 bp,分别编码含396、378和403个氨基酸残基的蛋白质,其理论分子量分别为45315.3 Da、43701.5 Da和45011.5 Da,等电点分别为9.01、5.98和6.04,蛋白质的N端都含有一段信号肽,并具有Serpin基因的保守结构域,属于Serpin家族。SP2和SP16在蛋白质的C端含反应中心环(Reactive center loop,RCL),而SP13 C端不含RCL。时空表达模式分析结果显示,SP2基因在2龄幼虫中的表达量最高,而雄蝇的表达量与卵期相比有所下调;SP13基因在蛹中的表达量最高,1龄幼虫和雌蝇中的表达量与卵期相近;SP16基因在2龄幼虫和3龄幼虫中的表达量最高,雄蝇与雌蝇的表达量与卵期相比有所下调。在家蝇3龄幼虫的各主要组织中,以体壁为参照,SP2基因在唾液腺表达水平最高,其次是脂肪体,中肠和马氏管均低于体壁;SP13基因在马氏管和脂肪体中的表达水平最高,中肠和唾液腺的表达量低于体壁;SP16基因在唾液腺、中肠、脂肪体和马氏管的表达量均低于体壁。推测Serpin基因在家蝇个体发育和免疫调节中起不同作用。 展开更多
关键词 家蝇 丝氨酸蛋白酶抑制剂 克隆 时空表达 生物信息学
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警示性语义表达在国产香烟包装设计中的正向研究
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作者 郭怡瑛 吴萍 《包装工程》 CAS 北大核心 2023年第16期391-402,共12页
目的 国内香烟包装表达含蓄,对抑制与劝阻性语义表达的设计探索几近空白,针对中国当下新生代消费者,分析其对包装的认知偏好,基于用户情感设计探寻具有中国式警示语义的香烟包装设计方法及策略。方法 对比当前国内外香烟包装设计的现状... 目的 国内香烟包装表达含蓄,对抑制与劝阻性语义表达的设计探索几近空白,针对中国当下新生代消费者,分析其对包装的认知偏好,基于用户情感设计探寻具有中国式警示语义的香烟包装设计方法及策略。方法 对比当前国内外香烟包装设计的现状,分析语义差异性表达对产品销售中用户行为的影响;聚焦国内新生代消费者的吸烟行为、价值观与消费观,借助眼动追踪等信息技术获取其对香烟包装的视觉偏好数据,结合深度访谈构建新生代消费者认知模型。结果 从抑制与劝阻消费行为的角度出发,构建国内香烟包装警示设计策略,形成一套中国文化背景下的香烟包装警示性语义表达设计规范,并利用数字化技术对设计方案的可行性进行多维评价。结论 基于中国新生代消费者吸烟行为与认知偏好的分析研究,通过信息技术赋能,进行警示性语义表达在国产香烟包装设计中的正向研究,提出中国文化背景下香烟包装警示性语义表达设计规范。致力于抑制新生代烟民数量增加的问题,用设计来发声,希望能为该领域的研究提供更多的启示。 展开更多
关键词 国产香烟 包装设计 警示性语义表达 眼动追踪技术
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中国体育建筑的在地性创作表达
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作者 梅洪元 陈玉婷 +1 位作者 杨雨青 张明鑫 《建筑学报》 北大核心 2023年第11期16-22,共7页
基于理论与实践的理性思辨,系统诠释了中国本土体育建筑的发展现状、问题和趋势,从历时性与共时性两个维度,建立了以持续发展与品质提升为目标的本土体育建筑在地性创作思维与方法体系,以期对中国体育建筑的未来发展有所助益。
关键词 本土体育建筑 在地性 创作表达 可持续发展 品质提升
原文传递
论国产悬疑剧的“创伤”叙事 被引量:1
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作者 董鑫 《河北科技师范学院学报(社会科学版)》 2021年第3期55-60,88,共7页
“创伤”作为一种特定的美学范畴与文学“母题”,出现在大量文艺理论、文学文本中。源于社会现实问题的国产悬疑剧近几年发展迅速,在影视表达上有着凝练的方式与路径。以现代都市传说为载体,悬疑剧对中国城市化与现代化进程中的焦虑进... “创伤”作为一种特定的美学范畴与文学“母题”,出现在大量文艺理论、文学文本中。源于社会现实问题的国产悬疑剧近几年发展迅速,在影视表达上有着凝练的方式与路径。以现代都市传说为载体,悬疑剧对中国城市化与现代化进程中的焦虑进行了文化映射。当然,作为一种审美文本,国产悬疑剧掺杂着社会意识形态的规避与张扬,对“创伤”的复原仪式建构与伦理表达,有着完备的经验,体现了深刻的人文关怀。不过,其复原仪式建构与伦理表达路径中不可避免地存在着一些误区。 展开更多
关键词 国产悬疑剧 “创伤”叙事 影视表达 文化映射 人文关怀
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