我国登革2型病毒分离株E蛋白B抗原区的表达与鉴定

1

作者 王立军 赵卫 +2 位作者 龙北国 曹虹 张文炳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1115-1117,共3页

目的登革2型病毒(DEN2)E蛋白B抗原区的融合表达、纯化和抗原性初步分析。方法将DEN2GZ14株E蛋白B抗原区基因连接到克隆载体pGEM-T并转染E.coliDH5α,酶切后连接至表达载体pET-32a(+)并转染E.coliBL21,IPGT诱导表达,WesternBlot和间接EL... 目的登革2型病毒(DEN2)E蛋白B抗原区的融合表达、纯化和抗原性初步分析。方法将DEN2GZ14株E蛋白B抗原区基因连接到克隆载体pGEM-T并转染E.coliDH5α,酶切后连接至表达载体pET-32a(+)并转染E.coliBL21,IPGT诱导表达,WesternBlot和间接ELISA分析表达产物的抗原性。结果含有DEN2E蛋白B抗原区基因质粒的表达菌表达了相对分子量为31kDa的融合蛋白,WesternBlot分析表明其能与小鼠多克隆抗体发生特异性反应,间接ELISA分析其与10例登革2型病毒感染者血清发生阳性反应。结论获得的DEN2GZ14株E蛋白B抗原区的基因表达蛋白有良好的抗原性。 展开更多

关键词 登革病毒 E蛋白 b抗原区 融合蛋白

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嵌合突变嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶结构域B对酶学性质及功能的影响

2

作者 谷海涛 李松 陈阿娜 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期43-48,共6页

为考察嗜酸普鲁兰芽孢杆菌(Bacillus acidopullulyticus)普鲁兰酶结构域B对热稳定性及其他酶学特性和功能的影响,采用嵌合蛋白技术将B.acidopullulyticus普鲁兰酶的结构域B置换为Geobacillus thermoleovorans普鲁兰酶结构域B。嵌合突变... 为考察嗜酸普鲁兰芽孢杆菌(Bacillus acidopullulyticus)普鲁兰酶结构域B对热稳定性及其他酶学特性和功能的影响,采用嵌合蛋白技术将B.acidopullulyticus普鲁兰酶的结构域B置换为Geobacillus thermoleovorans普鲁兰酶结构域B。嵌合突变体在60℃下的半衰期由34.9 min提高至168.4 min,解折叠一半时的温度由65℃提高至72℃,嵌合突变体较野生型具有更加优良的动力学稳定性和热动力学稳定性。结构域B置换后,最适pH碱向偏移至pH6.5,最适温度提高至70℃。比酶活及底物特异性实验结果显示,嵌合突变削弱了酶分子与普鲁兰多糖的结合,转而有利于与糊精及可溶性淀粉的结合。淀粉糖化结果显示,嵌合突变不影响突变体的实际应用性能。上述结果表明,B.acidopullulyticus普鲁兰酶结构域B对酶蛋白酶学性质影响显著,可通过同源置换构建适合于不同淀粉糖化工艺的突变体。 展开更多

关键词 嵌合蛋白 普鲁兰酶 结构域b 酶学特性 淀粉糖化

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结构域B在鼠冠状病毒S蛋白的抗原性及膜融合中的作用

3

作者 徐娅佳 王玉燕 叶荣 《微生物与感染》 2020年第1期22-30,共9页

棘突(spike,S)蛋白是冠状病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒进入宿主细胞时具有结合受体和诱导膜融合的双重作用。大部分冠状病毒S蛋白的受体结合域位于S1-CTD(即相对应的结构域B),而经典的乙型冠状病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatit... 棘突(spike,S)蛋白是冠状病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒进入宿主细胞时具有结合受体和诱导膜融合的双重作用。大部分冠状病毒S蛋白的受体结合域位于S1-CTD(即相对应的结构域B),而经典的乙型冠状病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)的受体mCEACAM1a与S1-NTD(即相对应的结构域A)结合,其结构域B的作用仍未完全清楚。本研究通过构建结构域B和S2膜融合元件的缺失突变体,并使其在鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro-2a内成功表达,证实了结构域B对病毒S蛋白导致的细胞-细胞间膜融合是必需的。用不同方法处理的病毒颗粒作为抗原免疫小鼠,所获得的多克隆抗体进一步显示,结构域B不但是S蛋白的主要抗原决定簇,而且能诱导中和抗体明显抑制病毒感染和S蛋白介导的膜融合作用。此结果为阐述不同冠状病毒的致病性与感染性差异提供了新思路。 展开更多

关键词 鼠冠状病毒 棘突蛋白 结构域b 优势抗原 膜融合

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纤连蛋白及其额外结构域A和B在瘢痕疙瘩中的表达 被引量：1

4

作者 崔婧博 李周娜 +2 位作者 金珊 金哲虎 金承龙 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期268-271,共4页

目的研究瘢痕疙瘩及其成纤维细胞中的纤连蛋白(FN)及额外结构域A(EDA)、额外结构域B(EDB)的表达,探讨其在瘢痕疙瘩中的作用。方法使用蛋白质印迹分析及免疫组织化学等方法检测瘢痕疙瘩组织内及成纤维细胞中FN、FN-EDA、FN-EDB的含量。... 目的研究瘢痕疙瘩及其成纤维细胞中的纤连蛋白(FN)及额外结构域A(EDA)、额外结构域B(EDB)的表达,探讨其在瘢痕疙瘩中的作用。方法使用蛋白质印迹分析及免疫组织化学等方法检测瘢痕疙瘩组织内及成纤维细胞中FN、FN-EDA、FN-EDB的含量。结果蛋白质印迹分析及免疫组织化学染色方法均证明FN、FN-EDA、FN-EDB在瘢痕疙瘩组织中增高明显,且FN-EDA、FN-EDB表达位置与FN差异有统计学意义(P<0.05)。结论瘢痕疙瘩中过表达的FN、FN-EDA、FN-EDB在瘢痕疙瘩形成过程中可能具有不同的促进作用。 展开更多

关键词 瘢痕疙瘩 纤连蛋白 额外结构域A 额外结构域b

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抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体的构建与功能分析 被引量：1

5

作者 李路军 杨艳群 +2 位作者 胡雪平 谢冕 刘梦元 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1665-1673,共9页

为了赋予TNF-α抗体对炎症组织的特异性,构建了抗TNF-α/抗纤维连接蛋白额外域B(ED-B)的基因工程双特异抗体Bs Db。Bs Db在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物经鉴定、纯化和复性制备后,进行了生物学活性和药动学分析。Bs Db可同时结合... 为了赋予TNF-α抗体对炎症组织的特异性,构建了抗TNF-α/抗纤维连接蛋白额外域B(ED-B)的基因工程双特异抗体Bs Db。Bs Db在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物经鉴定、纯化和复性制备后,进行了生物学活性和药动学分析。Bs Db可同时结合重组人TNF-α和ED-B,并中和TNF-α生理作用。在胶原诱导的小鼠关节炎模型中,Bs Db快速从血浆和正常组织清除,但能选择性的积累和保留于炎症关节。说明Bs Db具有炎症组织的特异性和正常组织的低毒性,在类风湿关节炎和其他自身免疫性疾病的治疗上具有较大潜力,为其临床前期研究奠定了基础。 展开更多

关键词 双特异抗体 类风湿关节炎 纤维连接蛋白 肿瘤坏死因子Α 额外域b

原文传递

抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体在酵母中的分泌表达与活性分析

6

作者 胡雪平 谢冕 +2 位作者 李路军 蒋思婧 刘梦元 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期722-733,共12页

赋予抗TNF-α单链抗体片段(TNF-sc Fv)对炎症组织的特异性,用一段来自人清蛋白(HSA)的柔性连接肽在基因水平上连接TNF-sc Fv和抗B型纤维连接蛋白(B-FN)的额外域B(ED-B)的sc Fv L19,构建了抗TNF-α/抗ED-B单链双特异抗体Bs Db,其中B-FN... 赋予抗TNF-α单链抗体片段(TNF-sc Fv)对炎症组织的特异性,用一段来自人清蛋白(HSA)的柔性连接肽在基因水平上连接TNF-sc Fv和抗B型纤维连接蛋白(B-FN)的额外域B(ED-B)的sc Fv L19,构建了抗TNF-α/抗ED-B单链双特异抗体Bs Db,其中B-FN为炎症组织中特异表达的抗原。Bs Db在毕赤酵母中获得了分泌表达,表达产物经鉴定和纯化制备后,进行了功能分析。结果表明,Bs Db保留了其亲本抗体TNF-sc Fv和L19对抗原的免疫反应性,能够同时结合TNF-α和ED-B,并中和TNF-α的生理作用。而且,Bs Db对抗原的亲和力及中和能力与大肠杆菌包涵体来源的亲本抗体相比显著增强。在小鼠佐剂型关节炎(AIA)模型中,Bs Db能选择性地积累和保留于小鼠的炎症关节,并快速从血浆中清除。说明Bs Db兼备炎症组织的特异性和正常组织的低毒性,在类风湿关节炎及其他慢性炎症性疾病的治疗上具有较大潜力。 展开更多

关键词 双特异抗体 肿瘤坏死因子Α 纤维连接蛋白 额外域b 类风湿关节炎

原文传递

微波暗室内壁剩余强散射点的SAR成像诊断研究

7

作者 符礼 高志国 +1 位作者 徐海涛 徐国兵 《微波学报》 CSCD 北大核心 2014年第S1期21-24,共4页

创新性地提出了采用SAR成像技术对微波暗室内壁剩余强散射点进行二维成像诊断,建立了相应的成像模型,选取了时域B-P算法作为成像算法,并对该算法在暗室内成像进行了仿真验证。仿真结果表明,时域B-P算法能够获得暗室内壁剩余强散射点分... 创新性地提出了采用SAR成像技术对微波暗室内壁剩余强散射点进行二维成像诊断,建立了相应的成像模型,选取了时域B-P算法作为成像算法,并对该算法在暗室内成像进行了仿真验证。仿真结果表明,时域B-P算法能够获得暗室内壁剩余强散射点分布的高分辨率、高精度二维像。采用SAR成像技术实现微波暗室内壁的二维成像诊断对经济、有效地提高暗室电性能具有实际的意义。 展开更多

关键词 微波暗室 剩余散射点 SAR 成像 时域 b-P

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DEP结构域蛋白质1B在胰腺癌中的表达及其临床意义 被引量：5

8

作者 李铭旭 仲成成 +2 位作者 张功铭 胡伟 王仲 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期261-268,共8页

背景与目的:已有研究显示,DEP结构域蛋白质1B(DEPDC1B)在多种肿瘤中异常表达并在肿瘤进展中发挥重要作用,DEPDC1B在胰腺癌中的表达水平及临床意义尚不清楚。本研究通过检测胰腺癌组织中DEPDC1B的表达,分析其与胰腺癌患者临床病理特征及... 背景与目的:已有研究显示,DEP结构域蛋白质1B(DEPDC1B)在多种肿瘤中异常表达并在肿瘤进展中发挥重要作用,DEPDC1B在胰腺癌中的表达水平及临床意义尚不清楚。本研究通过检测胰腺癌组织中DEPDC1B的表达,分析其与胰腺癌患者临床病理特征及预后的关系,从而探讨其在胰腺癌中的临床意义。方法:下载癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达数据库(GEO)的胰腺癌患者临床数据,分析DEPDC1B在胰腺癌组织中的表达情况,采用Kaplan-Meier生存曲线及Cox风险模型分析DEPDC1B表达与胰腺癌患者预后的关系。采用免疫组织化学法检测97例胰腺癌组织和癌旁组织中DEPDC1B的表达,根据患者临床资料进一步分析DEPDC1B与胰腺癌临床病理特征以及胰腺癌患者预后的关系。结果:在TCGA与GEO的GSE16515、GSE15471和GSE28735数据集中,DEPDC1B在胰腺癌组织中的表达明显高于匹配的正常组织(均P<0.05);在TCGA数据库与GSE28735数据集中,DEPDC1B高表达胰腺癌患者生存时间明显缩短(均P<0.05);TCGA中DEPDC1B表达是胰腺癌患者预后的独立危险因素(HR=1.32,95%CI=1.118~1.559,P=0.001)。97例临床胰腺癌患者中,胰腺癌组织中DEPDC1B的阳性表达率明显高于癌旁组织胰腺组织(69.07%vs.11.34%,P<0.001);DEPDC1B的表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(均P<0.05);DEPDC1B高表达患者总生存期明显短于低表达患者(P<0.05);DEPDC1B表达是预后的独立危险因素(HR=1.126,95%CI=1.012~1.253,P=0.029)。结论:DEPDC1B高表达可能参与胰腺癌的发生、发展及转移过程,并可作为判断胰腺癌预后的重要指标。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 DEP结构域蛋白质1b 预后 生物标记 肿瘤

原文传递

DEPDC1B结合p65在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及机制研究

9

作者 胡志勇 张海 +1 位作者 顾磊 文斐 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第1期48-54,63,共8页

目的 研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及相关机制。方法 分别将过表达DEPDC1B的质粒(oe-flagDEPDC1B)与对照质粒(oe-NC)转染至H22肝癌细胞系中,采用蛋白质印迹法检测flag和DEPDC1B蛋白表达水平,采用C... 目的 研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及相关机制。方法 分别将过表达DEPDC1B的质粒(oe-flagDEPDC1B)与对照质粒(oe-NC)转染至H22肝癌细胞系中,采用蛋白质印迹法检测flag和DEPDC1B蛋白表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。通过flag抗体富集flag-DEPDC1B结合蛋白,通过质谱进行鉴定,并对免疫共沉淀物进行关键蛋白验证。在oe-flag-DEPDC1B转染细胞中加入p65抑制剂Helenalin,采用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。分别将oe-flag-DEPDC1B和oe-NC转染细胞注射至C57/B6小鼠皮下,注射后2周开始监测小鼠肿瘤体积,注射后5周处死小鼠。分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白质印迹法和ELISA法检测肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果 与oe-NC组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B组细胞中DEPDC1B蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著增强(P均<0.05)。flagDEPDC1B可结合关键蛋白p65,免疫沉淀物中可以检测到p65蛋白。与oe-NC组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平均显著升高(P均<0.05)。与oe-flag-DEPDC1B组细胞比较,oe-flag-DEPDC1B+Helenalin组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平均显著降低,细胞增殖能力均显著减弱(P均<0.05)。在荷瘤小鼠中,与oe-NC组小鼠比较,oe-flag-DEPDC1B组小鼠的肿瘤体积增长更快,肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平均显著升高(P均<0.05)。结论 DEPDC1B可通过结合NF-κB信号通路中关键蛋白p65激活NF-κB信号通路,促进肝癌生长。 展开更多

关键词 肝癌细胞 荷瘤小鼠 DEP结构域蛋白1b NF-κb

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SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达在三阴性乳腺癌组织中的临床意义

10

作者 付刚 封琳 《实用癌症杂志》 2024年第11期1774-1776,1781,共4页

目的探讨分泌性卷曲相关蛋白4(SFRP4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中表达意义。方法选取83例TNBC患者作为研究对象,均于术中采集肿瘤组织及癌旁正常组织... 目的探讨分泌性卷曲相关蛋白4(SFRP4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中表达意义。方法选取83例TNBC患者作为研究对象,均于术中采集肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达情况,比较肿瘤组织及正常组织内上述表达情况;并分析SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达与患者年龄、绝经状态、肿瘤直径、淋巴结转移、肿瘤分期等病理特征的关系。结果肿瘤组织内SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阳性表达患者肿瘤直径≥3 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移占比高于SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1在TNBC组织内存在较高表达,且高表达与肿瘤分期、淋巴结转移关系密切,可用于指导临床完善治疗方案。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 分泌性卷曲相关蛋白4 高迁移率族蛋白b1 DEP结构域蛋白1b 临床表达

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肝细胞癌组织中DEPDC1B和KIF23的表达及其预后预测价值

11

作者 王璨 张雨相 +1 位作者 吴芳 黄振夏 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第2期119-125,共7页

目的探究肝细胞癌(HCC)组织中DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)和驱动蛋白家族成员23(KIF23)的表达及其预后预测价值。方法选择2018年3月至2019年3月湖南中医药高等专科学校附属第一医院诊治的126例HCC患者作为研究对象,收集其HCC组织、癌旁组... 目的探究肝细胞癌(HCC)组织中DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)和驱动蛋白家族成员23(KIF23)的表达及其预后预测价值。方法选择2018年3月至2019年3月湖南中医药高等专科学校附属第一医院诊治的126例HCC患者作为研究对象,收集其HCC组织、癌旁组织及临床资料。采用免疫组织化学法检测组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达情况。分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中HCC组织和癌旁组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA表达水平差异。分析HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者临床病理特征的相关性。采用Kaplan-Meier曲线(Log-rank检验)分析DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者预后的关系。采用单因素及多因素COX比例风险模型分析HCC患者预后的危险因素。结果TCGA数据分析结果显示,HCC组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA相对表达量均显著高于癌旁正常肝组织(1.861±1.271比0.314±0.116,1.652±1.089比0.218±0.157,P均<0.0001)。HCC组织中DEPDC1B阳性表达主要位于细胞质和细胞膜,KIF23阳性表达主要位于细胞质和细胞核。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达阳性率均显著高于癌旁组织[71.43%(90/126)比10.32%(13/126),χ^(2)=97.355,P=0.000;75.40%(95/126)比11.90%(15/126),χ^(2)=103.252;P=0.000]。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关(P均<0.05)。HCC组织中DEPDC1B与KIF23的mRNA表达呈显著正相关(r=0.913,P=0.000),DEPDC1B与KIF23的蛋白表达亦呈显著正相关(Rs=0.811,P=0.000)。DEPDC1B阳性表达组的3年累积生存率显著低于DEPDC1B阴性表达组(χ^(2)=4.433,P=0.035)。KIF23阳性表达组的3年累积生存率显著低于KIF23阴性表达组(χ^(2)=6.125,P=0.013)。肿瘤分期Ⅱ~Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、血管侵犯、DEPDC1B阳性表达及KIF23阳性表达均是HCC患者预后的独立危险因素。结论HCC组织中DEPDC1B和KIF23的表达上调,两者均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关,DEPDC1B、KIF2 展开更多

关键词 肝细胞癌 DEP结构域蛋白质1b 驱动蛋白家族成员23 临床意义

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长链非编码RNA OTUD6B-AS1对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

12

作者 薄芸 杭文璐 +2 位作者 左淑润 董圆 李海泉 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2024年第1期13-17,共5页

目的探讨lncRNA OTUD6B-AS1对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养肺腺癌A549细胞系,瞬时转染OTUD6B-AS1和空载质粒构建过表达和对照细胞模型,分为OTUD6B-AS1过表达组和空载质粒组(NC组)。通过qRT-PCR实验验证OTUD6... 目的探讨lncRNA OTUD6B-AS1对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养肺腺癌A549细胞系,瞬时转染OTUD6B-AS1和空载质粒构建过表达和对照细胞模型,分为OTUD6B-AS1过表达组和空载质粒组(NC组)。通过qRT-PCR实验验证OTUD6B-AS1的转染效率;采用CCK-8实验检测OTUD6B-AS1对肺腺癌细胞增殖活性的影响,采用Transwell法检测OTUD6B-AS1对肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果qRT-PCR检测显示,与NC组相比,过表达组的OTUD6B-AS1表达量显著增高(P<0.05);CCK-8细胞活性检测结果显示,OTUD6B-AS1过表达组的肺腺癌A549细胞增殖活性较NC组显著降低(P<0.05);Transwell侵袭实验结果表明,OTUD6B-AS1过表达组细胞迁移和侵袭能力均显著低于NC组(P<0.05)。结论在肺腺癌细胞A549中lncRNA OTUD6B-AS1的过表达可以抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭的能力。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 卵巢肿瘤结构域的6b反义RNA1 肺癌 迁移 侵袭

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PTD-HBcAg融合蛋白诱导特异性CTL抑制转基因小鼠HBV复制 被引量：2

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作者 陈小华 潘庆春 +2 位作者 汤正好 余永胜 臧国庆 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第29期2972-2977,共6页

目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白体内诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HBV转基因小鼠病毒的抑制作用.方法:20只HBV转基因小鼠随机分组,融合蛋白PTD-HBcAg及对照蛋白HBcAg经皮下免疫小鼠,每周1次,共3次.流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞... 目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白体内诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HBV转基因小鼠病毒的抑制作用.方法:20只HBV转基因小鼠随机分组,融合蛋白PTD-HBcAg及对照蛋白HBcAg经皮下免疫小鼠,每周1次,共3次.流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞因子水平;微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平;荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBVDNA水平;肝脏HE染色及免疫组织化学方法检测HBsAg表达.结果:PTD-HBcAg融合蛋白免疫转基因小鼠后,能有效上调特异性CTL数量,肝组织中炎性细胞的数量明显增多,同时对小鼠血清中HBsAg及HBVDNA水平有明显的抑制作用.肝组织HBsAg免疫组织化学蛋白平均吸光度分析显示,50μg和100μgPTD-HBcAg融合蛋白组中平均吸光度值与空白组和50μgHBcAg组相比明显降低(127.77±4.92,117.71±5.18vs156.84±4.94,138.70±5.92,均P<0.05),且组间比较差异有统计学意义.结论:PTD-HBcAg融合蛋白免疫HBV转基因小鼠后能增加特异性CTL数量,显著降低血清中HBsAg及HBVDNA水平,同时抑制肝脏中HBsAg的表达,在HBV免疫治疗中具有抗病毒作用. 展开更多

关键词 蛋白转导域-乙肝病毒核心抗原 特异性细胞毒性T淋巴细胞 乙型肝炎病毒 转基因小鼠

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DEPDC1B在肝癌增殖、迁移和上皮间质转化中的作用及其临床相关性研究 被引量：1

14

作者 胡志勇 张海 +1 位作者 顾磊 文斐 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2023年第8期692-697,共6页

目的:研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)对肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的作用以及在临床中的相关性。方法:收集39例肝癌肿瘤组织及其癌旁组织,qRT-PCR检测DEPDC1B表达水平并分析与临床病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier数据库分析DEP... 目的:研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)对肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的作用以及在临床中的相关性。方法:收集39例肝癌肿瘤组织及其癌旁组织,qRT-PCR检测DEPDC1B表达水平并分析与临床病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier数据库分析DEPDC1B表达水平与临床预后的相关性。采用qRT-PCR检测L-02正常肝上皮细胞和HepG2肝癌细胞DEPDC1B表达水平,Western Blot检测DEPDC1B、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。将si-DEPDC1B和si-NC转染至HepG2细胞,采用qRT-PCR检测DEPDC1B表达水平,Western Blot检测DEPDC1B、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平,采用CCK8和集落形成实验检测细胞增殖水平,Transwell和细胞划痕实验检测细胞迁移水平。结果:与癌旁组织相比,肿瘤组织中DEPDC1B表达水平升高,DEPDC1B高表达与肿瘤分期和淋巴结转移相关,与治疗后的不良预后相关。与L-02细胞相比,HepG2细胞DEPDC1B表达升高,N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低。与si-NC组比较,si-DEPDC1B组DEPDC1B表达降低,细胞增殖、迁移水平降低,N-cadherin蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高。结论:DEPDC1B可以促进肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化,临床上DEPDC1B高表达与肿瘤晚期、淋巴结发生转移以及不良预后相关。 展开更多

关键词 肝癌 DEP结构域蛋白1b 上皮间质转化 增殖和迁移

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WD重复结构域5B基因rs1067多态性与缺血性脑卒中不同证候及其血糖、血脂的关联

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作者 古联 宋潇宵 +4 位作者 苏莉 陈卓 林爱桃 陈敏丽 胡恕艳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第24期5990-5996,共7页

目的探讨WD重复结构域(WDR)5B基因rs1067多态性与缺血性脑卒中(IS)中医证候及临床标志物的关联性。方法选择IS患者及同期健康对照共1567例。WDR5B基因rs1067多态性的基因分型运用MassARRAY SNP基因分型方法。依据《中风病辨证诊断标准》... 目的探讨WD重复结构域(WDR)5B基因rs1067多态性与缺血性脑卒中(IS)中医证候及临床标志物的关联性。方法选择IS患者及同期健康对照共1567例。WDR5B基因rs1067多态性的基因分型运用MassARRAY SNP基因分型方法。依据《中风病辨证诊断标准》对IS患者进行中医辨证分型。结果WDR5B基因rs1067多态性与IS风证[等位(A/G):P=0.037;显性(AA+GA/GG):P=0.043;加性(AA/GG):P=0.041]发生风险的关联性具有统计学意义;调整性别、年龄后,WDR5B基因rs1067多态性与IS风证[显性(AA+GA/GG):P=0.032;加性(AA/GG):P=0.032]发生风险显著相关。调整性别、年龄后,WDR5B基因rs1067多态性与IS患者的餐后2 h血糖、高密度脂蛋白水平具有统计学差异(P<0.05)。结论WDR5B基因rs1067多态性可能影响IS风证的发生风险,且WDR5B基因rs1067多态性可能影响IS患者餐后2 h血糖及高密度脂蛋白水平。 展开更多

关键词 WD重复结构域5b 缺血性脑卒中 单核苷酸多态性 中医证候 同病异证

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缺血性脑卒中不同证候及表型与WD重复域5B基因多态性的相关性 被引量：1

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作者 古联 陈卓 +4 位作者 梁琳梅 朱路路 周文君 龙建雄 苏莉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第17期3638-3643,共6页

目的分析缺血性脑卒中(IS)中医证候及临床表型与WD重复域5B(WDR5B)基因rs9843165多态性的关联性。方法收集汉族IS患者样本774例,正常对照样本793例,共计1567例。进行基因检测,使用MassARRAY SNP基因分型实验技术检测WDR5B基因rs9843165... 目的分析缺血性脑卒中(IS)中医证候及临床表型与WD重复域5B(WDR5B)基因rs9843165多态性的关联性。方法收集汉族IS患者样本774例,正常对照样本793例,共计1567例。进行基因检测,使用MassARRAY SNP基因分型实验技术检测WDR5B基因rs9843165多态性位点,并行基因分型。应用非条件Logistic回归模型对疾病和遗传模型的关联进行分析,应用PLINK软件进行基因型与表型的遗传关联分析。结果WDR5B基因rs9843165多态性与IS火热证发生风险的关联性有统计学意义[隐性模型:OR(95%CI)=1.93(1.02~3.67),P=0.044];在校正年龄、性别后,WDR5B基因rs9843165多态性与火热证的发生风险仍有统计学关联[隐性模型:OR_(adj)(95%CI)=1.93(1.01~3.67),P_(adj)=0.046]。WDR5B基因rs9843165多态性与IS患者的D-二聚体(D-D)水平显著相关[加性模型:β(95%CI)=0.28(0.02~0.54),P=0.034;隐性模型:β(95%CI)=0.83(0.26~1.39),P=0.004];WDR5B基因rs9843165多态性与IS患者的极低密度脂蛋白(VLDL)水平[加性模型:β(95%CI)=-0.05(-0.10~0.00),P=0.042]及TG水平[加性模型:β(95%CI)=-0.21(-0.42~0.00),P=0.049]的关联性有统计学意义;WDR5B基因rs9843165多态性与IS患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平显著相关[加性模型:β(95%CI)=-0.78(-1.38~-0.17),P=0.012;隐性模型:β(95%CI)=-1.83(-3.13~-0.53),P=0.006]。结论WDR5B基因rs9843165多态性可能影响IS火热证的发生,且该位点多态性可能影响IS患者的Hcy、血脂水平及凝血功能。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 单核苷酸多态性 WD重复域5b 同病异证

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DEPDC1B、NOB1水平变化与三阴性乳腺癌患者相关病理学参数的关系

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作者 李腊梅 《河南医学高等专科学校学报》 2023年第2期123-127,共5页

目的 探讨DEP结构域蛋白质1B(DEPDC1B)、Nin-one结合蛋白(NOB1)水平变化与三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)患者相关病理学参数的关系及临床意义。方法 选取行乳腺癌根治术的81例TNBC患者设为观察组,选取同期因乳腺... 目的 探讨DEP结构域蛋白质1B(DEPDC1B)、Nin-one结合蛋白(NOB1)水平变化与三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)患者相关病理学参数的关系及临床意义。方法 选取行乳腺癌根治术的81例TNBC患者设为观察组,选取同期因乳腺良性疾病行手术治疗的21例患者设为对照组。随访1年后(失访6例)根据预后情况分为预后良好者57例(生存)、预后不良者18例(病死、病情恶化或复发)。比较TNBC组织、癌旁组织、良性病变组织中DEPDC1B、NOB1表达量。分别比较不同病理学参数、不同预后患者癌组织中DEPDC1B、NOB1表达量。分析DEPDC1B、NOB1表达量与病理学参数、预后相关性。结果 TNBC组织、良性病变组织中DEPDC1B、NOB1表达量高于癌旁组织,且TNBC组织高于良性病变组织(P<0.05);预后不良者中DEPDC1B、NOB1表达量高于预后良好者(P<0.05);DEPDC1B、NOB1表达量与淋巴结转移、临床分期、脉管瘤栓呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05);DEPDC1B、NOB1高表达者总生存率(66.67%、65.79%)分别低于其相应低表达者86.11%、86.49%(P<0.05)。结论 DEPDC1B、NOB1在TNBC组织中呈高表达,且与临床病理学参数相关,可能用于预后评估。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 DEP结构域蛋白质1b Nin-one结合蛋白 病理学参数 预后

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Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3B在胰腺癌组织的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 沈雁兵 马丹丹 +5 位作者 李中虎 尚作宏 林振宇 钟彬 张建新 金炜东 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期2239-2242,共4页

目的探讨Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3B(FNDC3B)在胰腺癌中的表达差异与临床病理特征和预后的关系,并探讨其可能发生相互作用的蛋白网络及其在胰腺癌发生发展中调控的可能信号通路。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测FNDC3B在胰... 目的探讨Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3B(FNDC3B)在胰腺癌中的表达差异与临床病理特征和预后的关系,并探讨其可能发生相互作用的蛋白网络及其在胰腺癌发生发展中调控的可能信号通路。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测FNDC3B在胰腺癌组织及癌旁组织中的蛋白表达差异,用GEPIA分析FNDC3B在胰腺癌组织及正常胰腺组织中的mRNA表达差异。在癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取胰腺癌病例资料,利用SPSS 25.0分析FNDC3B表达差异与胰腺癌患者临床病理特征和预后的关系。采用Kaplan-Meier法绘制胰腺癌患者生存曲线。STRING数据库分析与FNDC3B相互作用的蛋白网络。基因集富集分析(GSEA)预测FNDC3B在胰腺癌中调控的可能信号通路。计数资料比较采用χ^(2)检验,单因素及多因素分析采用COX回归分析,组间比较采用t检验。结果 Western blot检测结果显示FNDC3B在胰腺癌组织中的蛋白表达量高于癌旁组织(1.038±0.103比0.341±0.027,t=22.807,P<0.01)。GEPIA数据库分析结果显示FNDC3B在胰腺癌组织中的mRNA表达量高于正常胰腺组织(P均<0.05)。FNDC3B基因表达水平与胰腺癌患者的年龄(χ^(2)=12.115,P<0.01)、病理分级(χ^(2)=11.490,P<0.01)和N分期(χ^(2)=3.962,P<0.05)密切相关,与性别、病理分期、T分期、M分期无明显相关(P均>0.05)。单因素Cox分析结果显示N分期[风险比(HR)=2.001,95%可信区间(CI)=1.193~3.354,P<0.01]和FNDC3B mRNA表达水平(HR=1.595,95%CI=1.051~2.421,P<0.05)对胰腺癌患者的预后存在显著影响。多因素Cox分析结果显示FNDC3B mRNA表达水平(HR=1.565,95%CI=1.011~2.423,P<0.05)是胰腺癌患者预后的独立危险因素。FNDC3B高表达组胰腺癌患者的生存时间显著低于FNDC3B低表达组患者(χ^(2)=4.898,P<0.05,中位生存时间为592 d比634 d)。STRING数据库分析结果表明,与FNDC3B相互作用蛋白有FAM46A(分值=0.687)、ZNF469(分值=0.672)、B3GNT7(分值=0.647)等。GSEA研究结果� 展开更多

关键词 Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3b 胰腺癌 表达 临床意义

原文传递

肝组织中ARID4B和DSN1蛋白表达水平在肝细胞癌患者预后评估中的价值

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作者 闫春伟 田立蕊 张璐 《国际消化病杂志》 CAS 2020年第6期423-430,共8页

目的探索ARID家族富含AT的相互作用域4B(ARID4B)以及Nnf1的剂量抑制因子(DSN1)蛋白表达水平在肝细胞癌(HCC)患者预后评估中的作用。方法使用癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达数据库(GEO)中的数据来分析HCC中ARID4B和DSN1的表达。所有组... 目的探索ARID家族富含AT的相互作用域4B(ARID4B)以及Nnf1的剂量抑制因子(DSN1)蛋白表达水平在肝细胞癌(HCC)患者预后评估中的作用。方法使用癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达数据库(GEO)中的数据来分析HCC中ARID4B和DSN1的表达。所有组织样本均取自2016年6月至2017年6月在秦皇岛市第三医院外科接受肝切除手术且术前未行化学治疗或放射治疗的HCC患者。取新鲜冷冻的130对HCC组织和邻近非癌肝组织(ANLT)样品,采用实时定量聚合酶链反应(real-time qPCR)检测ARID4B mRNA和DSN1 mRNA的表达水平。对130例经37%甲醛溶液固定、石蜡包埋的HCC组织样品进行免疫组织化学分析,以检测ARID4B和DSN1在HCC组织中的表达水平并确定其临床意义。结果生物信息学分析、RT-PCR结果表明,与ANLT相比,ARID4B和DSN1在HCC组织中高表达(P<0.05)。ARID4B高表达与肿瘤结节数(P=0.042)、TNM分期(P=0.001)密切相关。DSN1高表达与性别(P=0.035)、甲胎蛋白(AFP)(P=0.005)、肿瘤结节数(P=0.023)密切相关。此外,Kaplan-Meier和Cox比例风险分析表明,ARID4B和DSN1高表达与HCC患者的不良生存率显著相关,并且ARID4B和DSN1是HCC患者整体生存和无病生存的独立预后因素。结论ARID4B和DSN1可作为预测HCC患者预后的生物学标志物。 展开更多

关键词 肝细胞癌 ARID4b DSN1 总体生存率 无病生存率

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OTUD6B-AS1通过miR-21-5p对高糖诱导的ARPE-19细胞增殖、迁移的影响

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作者 李敏 李霞 +2 位作者 王征 李印 王亚丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第5期364-368,共5页

目的探讨高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中含有卵巢肿瘤结构域的6B反义RNA 1(OTUD6B-AS1)的功能及其作用机制。方法取ARPE-19细胞,加入含30 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,设为高糖组,另取ARPE-19细胞不做任何处理设为... 目的探讨高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中含有卵巢肿瘤结构域的6B反义RNA 1(OTUD6B-AS1)的功能及其作用机制。方法取ARPE-19细胞,加入含30 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,设为高糖组,另取ARPE-19细胞不做任何处理设为对照组。用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂分别将过表达空质粒(pcDNA-NC组)、OTUD6B-AS1过表达质粒(pcDNA-OTUD6B-AS1组)和OTUD6B-AS1过表达质粒+miR-21-5p模拟物(pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组)转染进高糖诱导的ARPE-19细胞。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OTUD6B-AS1和miR-21-5p的表达;用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;荧光素酶报告基因实验验证OTUD6B-AS1与miR-21-5p的靶向关系。结果与对照组比较,高糖组ARPE-19细胞中OTUD6B-AS1表达量显著降低、miR-21-5p表达量显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,高糖组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖率和迁移率均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与pcDNA-NC组比较,pcDNA-OTUD6B-AS1组中细胞增殖率和迁移率显著升高,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,OTUD6B-AS1可靶向miR-21-5p。与pcDNA-OTUD6B-AS1组比较,pcDNA-OTUD6B-AS1+miR-21-5p mimics组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖率和迁移率显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论OTUD6B-AS1可抑制高糖诱导的ARPE-19细胞凋亡,并促进细胞增殖和迁移,其作用机制与miR-21-5p有关。 展开更多

关键词 OTUD6b-AS1 miR-21-5p 视网膜色素上皮细胞

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