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稻米中蛋白质对淀粉RVA特征谱的影响 被引量:35
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作者 谢黎虹 陈能 +1 位作者 段彬伍 朱智伟 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期524-528,共5页
通过分析蛋白酶或还原剂二巯基苏糖醇(DTT)分别去除稻米蛋白质或打破蛋白质二硫键后,稻米RVA(RapidViscoAnalyzer)特征谱形成和特征值的变化,研究蛋白质对淀粉RVA特征谱的影响,以及对米饭食味品质的作用。在淀粉糊化过程中,蛋白质使RVA... 通过分析蛋白酶或还原剂二巯基苏糖醇(DTT)分别去除稻米蛋白质或打破蛋白质二硫键后,稻米RVA(RapidViscoAnalyzer)特征谱形成和特征值的变化,研究蛋白质对淀粉RVA特征谱的影响,以及对米饭食味品质的作用。在淀粉糊化过程中,蛋白质使RVA特征谱的峰值黏度、冷胶黏度等值升高,改变RVA线性上升段的斜率。蛋白质可能通过二硫键结合形成的蛋白质网络本身和通过吸水减少淀粉水合的有效水量,协同提高糊化多相体系的浓度,增强分散相与黏稠相的互作。蛋白质影响米饭食味品质,可能通过改变米粒的吸水性而起作用。 展开更多
关键词 水稻 蛋白质 二硫键 淀粉 黏滞性
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稻米中含二硫键蛋白对其米饭质地的影响 被引量:22
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作者 陈能 谢黎虹 段彬伍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期167-170,共4页
选用11个水稻品种,通过二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)处理打破蛋白质二硫键后,观察稻米粉快速黏度仪RVA(Rapid Visco Analyzer)特征谱的形成、特征值及其米饭质地的变化,进而研究蛋白质对米饭食味品质的作用。结果表明,供试品种米粉添... 选用11个水稻品种,通过二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)处理打破蛋白质二硫键后,观察稻米粉快速黏度仪RVA(Rapid Visco Analyzer)特征谱的形成、特征值及其米饭质地的变化,进而研究蛋白质对米饭食味品质的作用。结果表明,供试品种米粉添加DTT后,其RVA的峰值黏度和糊化温度大都显著或极显著下降,崩解值大都显著或极显著上升,RVA特征谱上升阶段的线性部分的斜率大都减少;米饭质地则大都变软变黏。稻米中由二硫键形成的蛋白质网络可能增强糊化液的刚性或蛋白质水合作用而改变淀粉的吸水性能,两者共同作用协同提高RVA的峰值黏度和糊化温度等。由二硫键结合而形成的蛋白质网络也可能是影响米饭硬度和黏性的主要作用之一。 展开更多
关键词 水稻 蛋白质 二硫键 淀粉 RVA 质地
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新型含二硫键和硫酯键的乙酰半胱氨酸衍生物的合成与抗肝损伤活性评价 被引量:4
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作者 琚立萍 席建军 +5 位作者 赵艳梅 何若愚 张建康 史婷婷 刘寿荣 庄让笑 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期340-344,共5页
目的设计、合成N-乙酰半胱氨酸衍生物,并评价目标化合物对H_2O_2诱导的LO2细胞氧化损伤的保护作用。方法以L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸为起始原料,采用酰氯酯化法合成具有全新结构的乙酰半胱氨酸衍生物;以H_2O_2损伤LO2人肝细胞建立体... 目的设计、合成N-乙酰半胱氨酸衍生物,并评价目标化合物对H_2O_2诱导的LO2细胞氧化损伤的保护作用。方法以L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸为起始原料,采用酰氯酯化法合成具有全新结构的乙酰半胱氨酸衍生物;以H_2O_2损伤LO2人肝细胞建立体外氧化损伤模型,利用CCK-8法检测不同浓度H_2O_2对LO2细胞存活率的影响,并检测细胞上清中MDA含量和SOD活性。结果共合成了6个全新结构的N-乙酰半胱氨酸衍生物,其结构经1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS确证,目标化合物能够抑制H_2O_2诱导的LO2氧化损伤,并能够降低MDA含量和提高SOD活性(P<0.01或P<0.05)。结论本研究快速、高效地合成了N-乙酰半胱氨酸系列衍生物,目标化合物对体外肝细胞损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 肝损伤 二硫键 硫酯键 活性评价
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半胱氨酸对高效液相色谱法测定多西紫杉醇白蛋白纳米粒含量的影响 被引量:3
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作者 卢懿 邓意辉 +3 位作者 徐缓 石莉 董晓辉 李乐 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1265-1268,共4页
建立多西紫杉醇(docetaxel,DOC)人血清白蛋白纳米粒(human serum album in nanoparticles,HSA-NP)中药物含量测定的方法。利用半胱氨酸(cysteine,Cys)还原人血清白蛋白中交联的二硫键,释放HSA-NP中包裹的药物,再利用HPLC测定药物含量。... 建立多西紫杉醇(docetaxel,DOC)人血清白蛋白纳米粒(human serum album in nanoparticles,HSA-NP)中药物含量测定的方法。利用半胱氨酸(cysteine,Cys)还原人血清白蛋白中交联的二硫键,释放HSA-NP中包裹的药物,再利用HPLC测定药物含量。结果表明,在本实验条件下Cys及制剂中辅料对DOC的含量测定无干扰。1μg/LCys、37℃孵化30min,最后用乙腈沉淀蛋白的方法可以完全测定出制剂中DOC含量。 展开更多
关键词 半胱氨酸 二硫键 人血清白蛋白纳米粒 高效液相色谱
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挂面在常温储藏过程中品质及麦谷蛋白化学特性的变化 被引量:1
5
作者 张剑 李雪杰 +5 位作者 屈念念 李梦琴 赵阳 温娅晴 任秀娟 张伟峰 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第5期45-52,共8页
为了研究挂面在常温储藏过程中麦谷蛋白化学特性的变化及对面条品质的影响,对两种不同筋力的小麦制作的挂面进行常温储藏并提取麦谷蛋白,对比挂面的品质指标和麦谷蛋白的巯基、二硫键、麦谷蛋白大聚体(GMP)、二级结构以及高分子量亚基(H... 为了研究挂面在常温储藏过程中麦谷蛋白化学特性的变化及对面条品质的影响,对两种不同筋力的小麦制作的挂面进行常温储藏并提取麦谷蛋白,对比挂面的品质指标和麦谷蛋白的巯基、二硫键、麦谷蛋白大聚体(GMP)、二级结构以及高分子量亚基(HMW-GS)的变化。结果表明:两种挂面的L∗随着储藏时间的延长均逐渐下降,b∗呈现升高趋势;两种挂面的微观结构随着储存时间的延长均变得越来越松散,面筋蛋白网络的连续性被破坏,导致硬度、弹性等指标和感官评分下降;随着挂面储藏时间的延长,二硫键含量呈现下降趋势,GMP逐渐降解,二级结构的含量变化显著,蛋白质分子的蛋白构象变得混乱,十二烷基酰胺凝胶电泳图显示HMW-GS逐渐发生解聚,面团韧性下降,挂面品质发生劣变从而影响食用品质。综上,挂面在常温储藏过程中麦谷蛋白化学组分的变化与面条食用品质的下降存在一定的相关性。 展开更多
关键词 挂面 常温储藏 微观结构 麦谷蛋白 二硫键
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二硫键的氧化还原状态对Trx融合赤霉酸诱导富含半胱氨酸蛋白内源荧光及变性过程影响 被引量:2
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作者 张腾 冯娟 +4 位作者 李阳 陈锐 汤丽霞 庞小峰 任正隆 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期395-400,共6页
在采用亲和层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对原核表达的赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白(Trx-GcGASA)进行纯化、鉴定的基础上,运用稳态荧光光谱手段研究了二硫苏糖醇(DTT)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、过氧化氢、盐酸胍(GdnHCl)对Trx... 在采用亲和层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对原核表达的赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白(Trx-GcGASA)进行纯化、鉴定的基础上,运用稳态荧光光谱手段研究了二硫苏糖醇(DTT)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、过氧化氢、盐酸胍(GdnHCl)对Trx-GcGASA内源荧光及变性过程的影响,发现(1)在中性缓冲体系中融合蛋白的内源荧光以305 nm的酪氨酸的荧光发射为主;(2)伴随着二硫键还原,融合蛋白中色氨酸和酪氨酸的相对荧光强度比值从0.7变化至1.8倍左右;(3)经过0.5 mmol.L-1GSSG、5 mmol.L-1过氧化氢处理后,酪氨酸和色氨酸的荧光强度下降约12~21%;(4)无论是否采用1 mmol.L-1DTT处理,6 mol.L-1盐酸胍均不能诱导融合蛋白彻底变性;(5)二硫键的存在与否影响了盐酸胍诱导的变性过程。通过两态模型拟合获得Trx-GcGASA变性过程Gibbs自由能变化ΔG约为3.7 kJ.mol-1。相关工作不仅为深入研究融合伴侣Trx对GcGASA变性热力学、动力学及复性过程影响奠定了基础;同时,也为通过光谱手段获取GcGASA的结构信息提供了基础的数据。 展开更多
关键词 赤雷酸诱导的富含半胱氨酸蛋白 内源荧光 二硫键 变性
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IL-33活性调节及在疾病中的调控作用 被引量:5
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作者 刘善辉 张世超 吉尚戎 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期78-81,共4页
IL-33是近期发现的IL-1家族新成员,与传统的细胞因子有所不同,其N端结构域具有核定位信号,具有转录调节活性。IL-33可通过IL-33/ST2L信号途径促进2型免疫反应参与心血管疾病、阿尔茨海默症、癌症、肥胖等多种重大疾病的调节。综述近年IL... IL-33是近期发现的IL-1家族新成员,与传统的细胞因子有所不同,其N端结构域具有核定位信号,具有转录调节活性。IL-33可通过IL-33/ST2L信号途径促进2型免疫反应参与心血管疾病、阿尔茨海默症、癌症、肥胖等多种重大疾病的调节。综述近年IL-33研究进展,阐释不同剪切形式和二硫键分子"开关"对IL-33活性的影响,介绍IL-33/ST2L在一些重大疾病中的调控作用,为后续IL-33在疾病诊断治疗中的应用提供参考。 展开更多
关键词 IL-1家族 IL-33/ST2L信号 2型免疫反应 二硫键
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Simple and efficient method for synthesis of metallodeutero-porphyrin derivatives bearing symmetrical disulphide bond
8
作者 Cheng Guo Sun Bing Cheng Hu Wei You Zhou Shi Chao Xu Quan Zhi Deng Zu Liang Liu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期527-530,共4页
A novel thiol-derivative porphyrin[2,7,12,18-tetramethyl-13,17-di(3-disulfidepropyl)porphyrin]bearing the symmetrical disulphide bond and its metal complexes have been successfully prepared by means of modification ... A novel thiol-derivative porphyrin[2,7,12,18-tetramethyl-13,17-di(3-disulfidepropyl)porphyrin]bearing the symmetrical disulphide bond and its metal complexes have been successfully prepared by means of modification on naturally easily derived heme.The results are described by MS-MS and UV-vis spectroscopy. 展开更多
关键词 Deuteroporphyrin disulphide bond SYNTHESIS
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二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体稳定性研究 被引量:1
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作者 杨铭 程昕 +6 位作者 杜志荣 王彦 范冬梅 刘娟妮 王金宏 纪庆 高瀛岱 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1078-1081,共4页
目的:研究二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体(Diabody)在体外和体内的稳定性。方法:将抗CD3/抗Pgp Diabody置于37℃含0.2%人血清白蛋白(human serumalbumin,HSB)的PBS中,孵育不同时间后,用流式细胞术(FACS)检测其结合活性。建立K56... 目的:研究二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体(Diabody)在体外和体内的稳定性。方法:将抗CD3/抗Pgp Diabody置于37℃含0.2%人血清白蛋白(human serumalbumin,HSB)的PBS中,孵育不同时间后,用流式细胞术(FACS)检测其结合活性。建立K562/A02裸鼠移植瘤模型,用Cy5荧光标记试剂盒标记抗CD3/抗Pgp Diabody,通过尾静脉注射给荷瘤裸鼠,在小动物活体成像系统上动态观察荧光信号。结果:二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp Diabody(Ds-diabdoy)体外孵育72小时后活性无明显下降,而改造前Diabody孵育1小时后活性即开始下降,24小时后活性完全丧失。Ds-diabdoy注射后72小时仍能在肿瘤部位检测到荧光信号,而改造前Diabody在注射后24小时肿瘤部位荧光信号消失。结论:Ds-diabdoy较改造前Diabody稳定性大大提高。 展开更多
关键词 药物稳定性 DIABODY 二硫键 多药耐药
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二硫键稳定的抗CD3/抗CD19微型双功能抗体的表达及活性测定 被引量:1
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作者 杨雨琪 金锐 +2 位作者 高子璐 岳凯 李崴 《药物生物技术》 CAS 2014年第5期389-392,共4页
构建了抗CD3/抗CD19(Diabody)微型双功能抗体,并且为增强其稳定性进一步改造为二硫键稳定的抗CD3/抗CD19(ds-Diabody)微型双功能抗体,表达并纯化后测定其生物学活性。构建二硫键稳定的抗CD3/抗CD19表达载体p AYZds CD3CD19,转化感受态... 构建了抗CD3/抗CD19(Diabody)微型双功能抗体,并且为增强其稳定性进一步改造为二硫键稳定的抗CD3/抗CD19(ds-Diabody)微型双功能抗体,表达并纯化后测定其生物学活性。构建二硫键稳定的抗CD3/抗CD19表达载体p AYZds CD3CD19,转化感受态大肠杆菌16C9进行原核表达,分离纯化后,经12%SDS-PAGE及Westen-blot鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FACS)检测ds-Diabody与CD19+Raji细胞和CD3+Jurkat细胞的结合活性。改造后的ds-Diabody能够在原核表达系统中进行可溶性表达,ds-Diabody在非还原性SDS-PAGE中,在45 k处可见一条带,Westen-blot在同一位置显示有带,在还原性SDSPAGE中45 k处条带消失,在28 k和26 k各有一条带,Western-blot在28 k显示有带,这些均与理论相符,45 k为二硫键稳定的二聚体,在还原剂巯基乙醇作用下二硫键断开,形成28 k和26 k的2条带。FACS检测ds-Diabody可与CD19+Raji细胞和CD3+Jurkat细胞特异结合,并能竞争性抑制单抗HIT3a和HIT19a与上述细胞的结合。说明改造后的二硫键稳定的抗CD3/抗CD19双功能抗体既能在原核系统中进行可溶性表达,同时又保留了与细胞的结合活性。 展开更多
关键词 DIABODY 抗CD3 抗CD19 二硫键 药物稳定性
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二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建、表达及活性测定 被引量:1
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作者 苏晔 刘娟妮 +8 位作者 高瀛岱 秦立 杨铭 王金宏 许元富 邵晓枫 纪庆 熊冬生 杨纯正 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1042-1048,共7页
向抗CD3/抗Pgp(P-glycoprotein)微型双功能抗体(Diabody)中引入二硫键,使diabody两条链以共价键交联,增强其稳定性。用重叠PCR(Overlap PCR)和PCR方法,将抗CD3/抗Pgp diabody中抗CD3或抗Pgp轻重链可变区的适当部位定点突变成半胱氨酸,... 向抗CD3/抗Pgp(P-glycoprotein)微型双功能抗体(Diabody)中引入二硫键,使diabody两条链以共价键交联,增强其稳定性。用重叠PCR(Overlap PCR)和PCR方法,将抗CD3/抗Pgp diabody中抗CD3或抗Pgp轻重链可变区的适当部位定点突变成半胱氨酸,进行原核表达。表达产物经阳离子层析柱和抗Etag亲和层析柱分离纯化,还原性和非还原性SDS-PAGE电泳鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FCM)检测生物学活性。将改造前后的两种抗体分别置37oC含0.2%人血清白蛋白(Human serum albumin,HAS)的PBS中孵育,取多个时间点比较两者与两种把抗原的结合能力。基因重组质粒经测序证实序列正确。向抗Pgp轻重链引入突变的diabody(dsPgp-diabody)在原核表达系统中,SDS-PAGE显示纯化后的蛋白二硫键不能配对。而向抗CD3轻重链引入突变的diabody(dsCD3-diabody)能够在原核表达系统中进行可溶性表达,二硫键能够正确配对。并且与改造前的diabody相比,dsCD3-diabody的抗原结合特异性没有改变,抗原结合和竞争活性均无下降。改造前的diabody在37oCPBS(0.2%HAS)中孵育1h后活性即开始下降,24h后活性完全丧失;而dsCD3-diabody孵育72h后活性并无明显下降。本实验成功构建了dsCD3-diabody,并且能够进行可溶性表达。向diabody抗CD3轻重链区引入的二硫键在宿主菌中可以正确配对,抗原结合活性没有明显下降,而稳定性大大增强。向diabody轻重链区引入二硫键,以增强其稳定性的方法是可行的。 展开更多
关键词 基因工程抗体 DIABODY 二硫键 药物稳定性
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微生物脂肪酶活性构像的形成及激活过程中的影响因子 被引量:2
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作者 舒正玉 杨江科 +1 位作者 徐莉 闫云君 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期61-62,66,共3页
微生物脂肪酶是一类具有重要应用价值的生物催化剂。作为一种胞外酶,其活性构像的形成及激活是一个高度复杂而特异性的生理过程。综述了作为微生物脂肪酶的结构成分,参与脂肪酶折叠和激活过程中的各种因子及其作用机制,这些因子包括脂... 微生物脂肪酶是一类具有重要应用价值的生物催化剂。作为一种胞外酶,其活性构像的形成及激活是一个高度复杂而特异性的生理过程。综述了作为微生物脂肪酶的结构成分,参与脂肪酶折叠和激活过程中的各种因子及其作用机制,这些因子包括脂肪酶特异性的折叠酶、脂肪酶激活因子、前序列、钙离子和二硫键等。 展开更多
关键词 脂肪酶 折叠酶 激活因子 前序列 钙离子 二硫键
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二硫键桥联双二茂铁芳胺修饰纳米金电极
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作者 李长恭 薛峰 +2 位作者 何欢欢 焦星星 尚静艳 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期69-73,共5页
对或间二茂铁苯胺与对-乙酰硫基苯甲醛反应得到两个席夫碱,硼氢化钠还原席夫碱碳氮双键的同时对乙酰硫基脱保护,合成了两个二硫键桥联双二茂铁芳胺类化合物,p-(Fc-Ph-NH-CH2-Ph-S)2和m-(Fc-Ph-NHCH2-Ph-S)2。将化合物自组装到电沉积纳... 对或间二茂铁苯胺与对-乙酰硫基苯甲醛反应得到两个席夫碱,硼氢化钠还原席夫碱碳氮双键的同时对乙酰硫基脱保护,合成了两个二硫键桥联双二茂铁芳胺类化合物,p-(Fc-Ph-NH-CH2-Ph-S)2和m-(Fc-Ph-NHCH2-Ph-S)2。将化合物自组装到电沉积纳米金的玻碳电极上,制得稳定的修饰电极,此电极在LiClO4的乙腈溶液中有一对氧化还原峰,用循环伏安法和交流阻抗谱法研究了修饰电极的电化学性质,化合物m-(Fc-PhNH-CH2-Ph-S)2修饰纳米金/玻碳电极对芦丁有催化氧化作用。 展开更多
关键词 二硫键 纳米金 二茂铁 自组装 电化学
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