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热处理茎尖组织培养法快速繁育苹果无病毒苗木研究 被引量:2
1
作者 辛玉成 李保华 +2 位作者 冯敬奎 宿暹 王厚臣 《莱阳农学院学报》 1990年第4期305-309,共5页
对热处理茎尖组织培养法繁育苹果无病毒苗木进行实验研究。北斗、王林等5个苹果品种的盆栽苗经38℃±1℃恒温处理21~35天,取处理苗茎尖灭菌后,切取0.10~0.15cm长的生长点置MS+1.5ppm6-BA+0.2ppmIBA培养基中,培养40天后,剪取分化... 对热处理茎尖组织培养法繁育苹果无病毒苗木进行实验研究。北斗、王林等5个苹果品种的盆栽苗经38℃±1℃恒温处理21~35天,取处理苗茎尖灭菌后,切取0.10~0.15cm长的生长点置MS+1.5ppm6-BA+0.2ppmIBA培养基中,培养40天后,剪取分化苗转入各品种适宜的生长分化培养基中,继代培养2~3次,可获足量的试管苗。取少量组培苗研磨成汁,用酶联免疫吸附法(ELISA)和摩擦接种草本指示植物进行病毒检测,北斗、王林、红乔纳金和高岭4品种均不带苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎沟病毒(ASGV),早富士品种仍带有茎沟病毒(ASGV)。剪取组织培养苗,用100ppmIBA处理12小时后,置1/2MS+0.1ppmGA+1.5ppmIAA+0.5g/L活性炭各品种皆适宜的生根培养基中培养,生根率达72%~98%。生根苗在5~30℃的温室内自然光下闭口驯化4周,开口驯化1周,植入普通腐质土中,成活率达90%~100%。 展开更多
关键词 苹果 组织培养 无病毒苗木
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甘薯茎尖培养与脱毒技术研究 被引量:23
2
作者 何新民 蒋菁 +3 位作者 唐洲萍 唐家文 刘颂东 刘义明 《广西农业科学》 CSCD 2009年第8期964-968,共5页
以红姑娘2号甘薯为材料,研究6-BA、NAA、GA3不同配组对茎尖培养的影响,并采用温水钝化法及适宜的茎尖大小来提高红薯病毒脱毒率,用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。研究结果表明,培养基中的6-BA、NAA、GA3不同浓度配比对红姑娘... 以红姑娘2号甘薯为材料,研究6-BA、NAA、GA3不同配组对茎尖培养的影响,并采用温水钝化法及适宜的茎尖大小来提高红薯病毒脱毒率,用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。研究结果表明,培养基中的6-BA、NAA、GA3不同浓度配比对红姑娘2号甘薯茎尖培养不定芽、不定根的诱导有明显的影响。在诱导产生愈伤组织和丛芽阶段,培养基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.01mg/L+GA3 0.1mg/L效果较好。而1/2MS+NAA 0.2mg/L是红姑娘2号试管苗的适宜生根培养基。通过指示植物法检测90个无性系,平均脱毒率为96.7%。 展开更多
关键词 甘薯 茎尖培养 脱毒 病毒检测
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猪血凝性脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用 被引量:15
3
作者 常灵竹 贺文琦 +4 位作者 陆慧君 单昭 李志平 陈克研 高丰 《中国农学通报》 CSCD 2007年第9期15-18,共4页
为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,... 为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,最低可以检测到10个TCID50/100μl的病毒,说明该方法的有较好的特异性和敏感性。用此RT-PCR方法对感染HEV的小鼠和猪进行检测,结果能从发病动物的多种组织中检测到病原,其中以脑组织的检出率最高。因此,临床疑似病例检测时以脑组织为最佳检测样本。 展开更多
关键词 猪血凝性脑脊髓炎病毒 RT-PCR 病毒检测
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组织直接印迹ELISA检测香石竹病毒 被引量:4
4
作者 张爱平 《上海农业学报》 CSCD 1999年第2期84-86,共3页
植物病毒的酶联免疫吸附分析检测技术(ELISA)的反应可以在硝酸纤维膜(NCM)上进行,称为dot-ELISA。为进一步简化实验步骤,改膜上点样为病组织直接印迹,以后则参照间接ELISA程序进行。成功地进行了香石竹斑驳病毒(CarMV)的快速... 植物病毒的酶联免疫吸附分析检测技术(ELISA)的反应可以在硝酸纤维膜(NCM)上进行,称为dot-ELISA。为进一步简化实验步骤,改膜上点样为病组织直接印迹,以后则参照间接ELISA程序进行。成功地进行了香石竹斑驳病毒(CarMV)的快速检测,约比常规dot-ELISA缩短时间3h,灵敏度与聚乙烯板上的间接ELISA相似。讨论了使用辣根过氧化物酶标记抗体存在非特异性反应的可能性及克服办法。 展开更多
关键词 香石竹斑驳病毒 组织直接印迹 植物病毒 ELISA
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计算机病毒及其防范
5
作者 岳千钧 《长沙水电师院自然科学学报》 1992年第2期247-251,共5页
计算机病毒是一些能够自我复制的程序代码,它是由引导模块,感染模块和破坏/表现模块组成,本文介绍了计算机病毒的定义,概念及分类,分析了计算机病毒的工作原理,指出了三种模块在病毒感染过程中的作用,总结了各种病毒感染过程中的基本特... 计算机病毒是一些能够自我复制的程序代码,它是由引导模块,感染模块和破坏/表现模块组成,本文介绍了计算机病毒的定义,概念及分类,分析了计算机病毒的工作原理,指出了三种模块在病毒感染过程中的作用,总结了各种病毒感染过程中的基本特征及它们之间的差异,在此基础上提出了三种反病毒程序,即病毒预防程序,病毒检测程序和病毒识别程序,分析了它们的设计思想和实现方法,在文章的最后简要说明了一些用户安全操作措施. 展开更多
关键词 电子计算机 病毒 检测
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高灵敏度分析检测方法在病毒研究中的应用
6
作者 冯海燕 袁倬斌 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期809-813,共5页
病毒与人类息息相关,病毒的分析与检测一直受到人们的关注。本文主要评述了化学发光法、荧光光谱法和原子力显微镜成像法的工作原理以及它们在病毒研究中的具体应用,为病毒的成像、检测以及组分分析提供了可行的技术手段,并对其的发展... 病毒与人类息息相关,病毒的分析与检测一直受到人们的关注。本文主要评述了化学发光法、荧光光谱法和原子力显微镜成像法的工作原理以及它们在病毒研究中的具体应用,为病毒的成像、检测以及组分分析提供了可行的技术手段,并对其的发展作了展望。 展开更多
关键词 检测 病毒 原子力湿微镜 化学发光法 荧光光谱法
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PCR法对伪狂犬病病猪不同部位的检测及敏感性试验 被引量:17
7
作者 李学伍 陈焕春 +4 位作者 杨艳艳 周复春 方六荣 吴斌 怀济森 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第6期365-368,共4页
应用PCR方法对PRV感染细胞及自然发病猪不同组织样品进行检测,感染细胞毒最低检出量为105个TCID50病料组织样品最低取样为01mg时,仍能得到阳性结果其敏感性显著高于微量血清中和试验。PRV在自然发病猪体内... 应用PCR方法对PRV感染细胞及自然发病猪不同组织样品进行检测,感染细胞毒最低检出量为105个TCID50病料组织样品最低取样为01mg时,仍能得到阳性结果其敏感性显著高于微量血清中和试验。PRV在自然发病猪体内分布很广,脑、三叉神经节(三叉N节)、嗅球、扁桃体、心脏、肝、脾、肺、肾均有PRV的存在,PRV检出率最高的组织为三叉神经节,其检出率为100%。其它对照病毒及传代细胞PCR反应产物电泳结果均为阴性。 展开更多
关键词 多聚酶链反应 检测 伪狂犬病毒
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葡萄卷叶病的研究进展 被引量:6
8
作者 顾沛雯 张军翔 《宁夏农学院学报》 2003年第1期73-75,87,共4页
葡萄卷叶病 (Grapevineleafrolldisease)是葡萄上的一种重要的病毒病 ,现已研究表明 ,引起该病的病毒不止一种 ,目前国际上承认的已有 5种 (GLRaVI-III) ,其中葡萄卷叶伴随病毒III(GLRaV -III)是最主要的一种 ,它分布最广 ,造成的经济... 葡萄卷叶病 (Grapevineleafrolldisease)是葡萄上的一种重要的病毒病 ,现已研究表明 ,引起该病的病毒不止一种 ,目前国际上承认的已有 5种 (GLRaVI-III) ,其中葡萄卷叶伴随病毒III(GLRaV -III)是最主要的一种 ,它分布最广 ,造成的经济损失最大 ,而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒。本文根据生产实际 ,系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原。 展开更多
关键词 葡萄 卷叶病 病原 症状 寄主范围 传播方式 诊断 防治
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利用巴西牵牛试管苗检测甘薯组培苗病毒技术研究 被引量:7
9
作者 张希太 张彦波 +1 位作者 肖磊 谢淑芹 《农学学报》 2013年第12期16-22,共7页
为改进甘薯组培苗的病毒检测工艺,以甘薯病毒指示植物巴西牵牛(Ipomoea setosa)种子在GA32.0 mg/L培养基上萌发苗的茎尖为外殖体,在MS+IBA 0.2 mg/L的培养基上茎尖能够发育成的试管植株且能够以单叶节扦插通过腋芽再植株生长方式快速繁... 为改进甘薯组培苗的病毒检测工艺,以甘薯病毒指示植物巴西牵牛(Ipomoea setosa)种子在GA32.0 mg/L培养基上萌发苗的茎尖为外殖体,在MS+IBA 0.2 mg/L的培养基上茎尖能够发育成的试管植株且能够以单叶节扦插通过腋芽再植株生长方式快速繁殖;在试管中将巴西牵牛试管苗薯试管苗茎段进行试管微嫁接后在MS0培养基上培养,15天后,与带病毒的甘薯试管苗嫁接的巴牛茎段所带的叶片均表现出黄化、花叶等阳性反应。与不带病毒的甘薯试管苗茎段嫁接的巴西牵管苗茎段所带的叶片都正常生长;用甘薯试管苗的无菌研提汁液感染巴西牵牛试管苗茎段切口MS0培养基上培养,15天后,被带病毒甘薯试管苗研提汁液感染的巴西牵牛试管苗茎段所带的叶表现出黄化、花叶等阳性反应,继续培养叶片枯死。被不带病毒甘薯试管苗研提汁液侵染的巴西试管苗茎段所带的叶片都能正常生长;以上2种方法可以替代传统的"巴西牵牛种子苗网室嫁接法"检测甘薯组培苗是否带有病毒。具有灵敏度高、检测结果不受外界环境影响、检测成本低、培件可控、不受季节性限制等优点。 展开更多
关键词 巴西牵牛 组织培养 甘薯和巴西牵牛试管苗嫁接 甘薯试管苗组织研提汁液 感染巴西牵牛试管苗茎段 检测甘薯病毒
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宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测 被引量:5
10
作者 顾沛雯 洪波 +2 位作者 马永明 冯娟 鄢宝仓 《宁夏农学院学报》 2001年第3期21-23,38,共4页
对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的 50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究 ,结果表明 :在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状 ;欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高 ,且程度严重 ;具有欧亚血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均... 对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的 50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究 ,结果表明 :在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状 ;欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高 ,且程度严重 ;具有欧亚血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种 ,但发病率、严重度低于欧亚种。欧亚种中 ,以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低。检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异。 展开更多
关键词 葡萄卷叶病 发病率调查 病毒检测
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基孔肯雅病毒感染实验室诊断研究进展 被引量:3
11
作者 刘江涌 任瑞文 陈月 《热带医学杂志》 CAS 2018年第10期1398-1400,F0003,共4页
基孔肯雅病毒(CHIKV)是一种披膜病毒科甲病毒属病毒,主要传播媒介为伊蚊,无特异性的治疗方法和疫苗。我国人群对CHIKV普遍易感,近年来屡有输入性病例报道,是一种潜在严重威胁我国南方地区公共安全的虫媒病毒。当前CHIKV感染实验室诊断... 基孔肯雅病毒(CHIKV)是一种披膜病毒科甲病毒属病毒,主要传播媒介为伊蚊,无特异性的治疗方法和疫苗。我国人群对CHIKV普遍易感,近年来屡有输入性病例报道,是一种潜在严重威胁我国南方地区公共安全的虫媒病毒。当前CHIKV感染实验室诊断主要包括病毒分离、核酸检测和抗体检测等,本文就基孔肯亚病毒实验室诊断研究进展作一综述。 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 病毒分离 核酸检测 抗体检测
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一般性计算机病毒代码分析和检测方法 被引量:3
12
作者 左小翠 张学亮 《电脑编程技巧与维护》 2010年第4期111-113,共3页
一般性计算机病毒代码依赖于系统特殊的API函数进行感染、传播和隐藏,并使用多种代码保护机制,给病毒代码的查杀带来较大的不便。通过长期的查杀实践,总结出了一般性计算机病毒代码的分析和检测方法。
关键词 一般性计算机病毒代码 病毒代码分析 病毒代码检测
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RT-PCR检测蓝舌病毒技术的建立 被引量:2
13
作者 张芃玮 董长垣 +3 位作者 涂攀 郭淑芳 陈晓 严银芳 《中国病毒学》 CSCD 2001年第4期393-396,共4页
Using primers complementary to the conserved sequence previously published of BTV genomic dsRNA segment 7,a part of the 5′end of segment 7 was synthesized and amplified by RT PCR method.We adapted this method to test... Using primers complementary to the conserved sequence previously published of BTV genomic dsRNA segment 7,a part of the 5′end of segment 7 was synthesized and amplified by RT PCR method.We adapted this method to test on 12 blood samples suspected to be with BTV and the blood sample of a health sheep as a negative control.The results suggested that eleven of the twelve samples were positive,one was negative.In order to compare the sensitivity and reliability of RT PCR technique,Vero cells were used to isolate BTV from these suspected samples and the results will be a control.The study proved that RT PCR is a rapid,sensitive and precise method for detection and identification of bluetongue virus in clinical samples,animal quarantine and scientific research. 展开更多
关键词 蓝舌病毒 DSRNA RT-PCR 病毒核酸检测
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蛋鸡禽白血病的实验室诊断 被引量:3
14
作者 晏晓洪 胡安东 +4 位作者 贺欣薇 温贵兰 文明 皮泉 张霞 《贵州畜牧兽医》 2018年第6期26-28,共3页
对开阳县某蛋鸡场发生的疫病通过发病情况调查、剖检病变观察、细菌分离培养和相关病毒PCR检测。结果:疫病主要发生于160日龄以上鸡群,病变以肝脏和脾脏显著肿大为特征;细菌分离培养未见菌落生长; PCR检测可见禽白血病病毒特异性DNA片段... 对开阳县某蛋鸡场发生的疫病通过发病情况调查、剖检病变观察、细菌分离培养和相关病毒PCR检测。结果:疫病主要发生于160日龄以上鸡群,病变以肝脏和脾脏显著肿大为特征;细菌分离培养未见菌落生长; PCR检测可见禽白血病病毒特异性DNA片段,但未检出鸡马立克氏病病毒特异性DNA片段。综合诊断为禽白血病病毒感染。 展开更多
关键词 禽白血病 细菌分离培养 病毒PCR检测
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Internet上的信息安全保护技术 被引量:37
15
作者 郭晓苗 《现代图书情报技术》 CSSCI 北大核心 2000年第3期50-51,58,共3页
随着人们对 Internet依赖性越来越大 ,Internet上信息安全问题日益重要起来。各种技术手段对于 Internet上信息安全来说非常必要。本文较全面地介绍了当前主要的几种保护 Internet上信息安全的技术 :防火墙、数据加密、病毒防治技术、... 随着人们对 Internet依赖性越来越大 ,Internet上信息安全问题日益重要起来。各种技术手段对于 Internet上信息安全来说非常必要。本文较全面地介绍了当前主要的几种保护 Internet上信息安全的技术 :防火墙、数据加密、病毒防治技术、入侵检测技术。 展开更多
关键词 信息安全 防火墙 数据加密 INTERNET网 病毒防治
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应用三重聚合酶链反应同时检测NDV、IBV、MG的研究 被引量:18
16
作者 谢芝勋 谢志勤 +2 位作者 庞耀珊 刘加波 邓显文 《中国动物检疫》 CAS 2000年第11期20-22,共3页
本文建立了一种同时检测NDV、IBV和MG三种病原体的三重PCR技术。根据NDV、IBV和MG的基因文库,设计了三对分别与NDV、IBV和MG某段基因序列互补的引物,用这三对引物对同一样品中的NDV、 IBV、 MG核... 本文建立了一种同时检测NDV、IBV和MG三种病原体的三重PCR技术。根据NDV、IBV和MG的基因文库,设计了三对分别与NDV、IBV和MG某段基因序列互补的引物,用这三对引物对同一样品中的NDV、 IBV、 MG核酸模板进行多重 PCR扩增,结果均同时得到了三条特异性大小与实验设计相符的310 bp(NDV)、1720 bp(IBV)和732 bp(MG)多重PCR扩增带,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重 PCR技术能检出 10 pg的 IBV、1pg的 NDV RNA模板和 1pg的 MG DNA模板。 展开更多
关键词 传染病 NDV IBV MG PCR 病原检测
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抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定 被引量:13
17
作者 严家新 祝玉桃 +2 位作者 李承平 徐葛林 朱家鸿 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期59-61,F003,共4页
目的 建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法 采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV NP... 目的 建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法 采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV NP的单克隆抗体混合进行标记。结果 制备的试剂有较高的敏感性和特异性 ,经与法国巴斯德诊断用品公司的相应产品进行比较 ,所得结果的符合率为 10 0 %。特别是用后一种方法制备的试剂优点更多。结论 该制品可替代进口产品 。 展开更多
关键词 狂犬病毒核蛋白 荧光标记抗体 单克隆抗体
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同时检测两种对虾病毒和4种弧菌的同步PCR方法的建立 被引量:15
18
作者 许拉 黄健 +1 位作者 戈蕾 杨冰 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2008年第4期39-45,共7页
通过检索、多重比对、分析和筛选GenBank中对虾白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、副溶血弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌和溶藻胶弧菌的基因序列,设计了10对特异性引物,以已知毒株和菌株的DNA为模板进行PCR,均... 通过检索、多重比对、分析和筛选GenBank中对虾白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、副溶血弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌和溶藻胶弧菌的基因序列,设计了10对特异性引物,以已知毒株和菌株的DNA为模板进行PCR,均能扩增出与实验设计相符合的DNA片段,对PCR扩增条件进行优化,建立了可同时检测鉴别WSSV、IHHNV、副溶血弧菌、创伤弧菌、哈维氏弧菌和溶藻胶弧菌,并且能同时区分WSSV不同地理毒株的同步PCR方法。研究结果表明,该方法检测特异性好,检测通量大,适合于对虾多种病原的同时检测。 展开更多
关键词 对虾 PCR 检测 病毒 弧菌
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甘薯无病毒苗培育技术研究 被引量:11
19
作者 尚佑芬 杨崇良 +1 位作者 赵玖华 李长松 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期121-124,共4页
1991~1996年,甘薯茎尖离体培养采用MS为基本培养基,添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.2mg/L+腺素(Ad)5mg/L,培育出12个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率50.0%~95.6%,成苗期43~60d。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的... 1991~1996年,甘薯茎尖离体培养采用MS为基本培养基,添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.2mg/L+腺素(Ad)5mg/L,培育出12个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率50.0%~95.6%,成苗期43~60d。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关(r=-0.9875),茎尖带1个叶原基时,SPFMV脱毒率为38.1%。培养基中添加适量的植物病毒钝化剂可使脱毒率提高到49.5%,但对成苗率有影响。采用Dot-ELISA血清学检测结合指示植物鉴定,能检出国内已知侵染甘薯的3种病毒,可得到茎尖组培脱毒苗。 展开更多
关键词 甘薯 茎尖培养 脱毒 病毒检测 无病毒苗 培育
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应用斑点法检测植物病毒的研究 被引量:7
20
作者 周雪平 濮祖芹 《病毒学杂志》 CSCD 1990年第3期317-321,共5页
应用斑点法检测了病叶粗汁液中的芜菁花叶病毒(TuMV)、大豆花叶病毒(sMV)和黄瓜花叶病毒(CMV),病叶粗汁液可被检测的最大稀释度分别为1:5120、1:2560和1:1280。提纯的大豆花叶病毒和黄瓜花叶病毒可检测的最低限量分别为1.7ng和1.2ng。... 应用斑点法检测了病叶粗汁液中的芜菁花叶病毒(TuMV)、大豆花叶病毒(sMV)和黄瓜花叶病毒(CMV),病叶粗汁液可被检测的最大稀释度分别为1:5120、1:2560和1:1280。提纯的大豆花叶病毒和黄瓜花叶病毒可检测的最低限量分别为1.7ng和1.2ng。以牛血清白蛋白、吐温和聚乙烯吡咯啉酮作封闭液,均可获得满意的结果。应用斑点法检测芜菁花叶病毒和大豆花叶病毒时,其抗血清稀释1:500倍可获得满意效果,稀释2000倍仍可用于检测。 展开更多
关键词 斑点法 植物病毒 检测
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