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PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 被引量:40
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作者 周复春 陈焕春 +3 位作者 李学伍 方六荣 吴斌怀 济森 《动物医学进展》 CSCD 1997年第2期22-25,共4页
本研究合成了伪狂犬病毒糖蛋白gp50基因引物,该引物能够扩增糖蛋白gp50基因中434~651之间的217bpDNA片段,该片段含SalⅠ酶切位点,应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应(PCR)扩增结果全为... 本研究合成了伪狂犬病毒糖蛋白gp50基因引物,该引物能够扩增糖蛋白gp50基因中434~651之间的217bpDNA片段,该片段含SalⅠ酶切位点,应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应(PCR)扩增结果全为阳性。对自然发病猪、潜伏感染猪、伪狂犬病毒引起的死胎等46头猪161个样品进行了PCR扩增,其中46头猪71个样品PCR扩增结果为阳性。羊口疮病毒(ORFV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)。 展开更多
关键词 PCR 检测 伪狂犬病毒 病毒
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梨病毒病研究新进展 被引量:18
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作者 邓晓云 王国平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期321-325,共5页
综述了梨病毒病的研究进展,包括梨病毒的主要种类、分类地位、生物学及分子生物学特性、株系区分特征与研究现状、检测方法和脱毒技术。现有研究认为,以RT-PCR技术为基础发展的分子生物学方法,结合较成熟的ELISA实验及有效的指示植物作... 综述了梨病毒病的研究进展,包括梨病毒的主要种类、分类地位、生物学及分子生物学特性、株系区分特征与研究现状、检测方法和脱毒技术。现有研究认为,以RT-PCR技术为基础发展的分子生物学方法,结合较成熟的ELISA实验及有效的指示植物作为梨病毒鉴定及株系区分的依据更准确;建立三者相结合的检测体系将可提高梨病毒检测的灵敏度、缩短检测时间;热处理、茎尖培养、化学制剂处理及其联合应用为梨病毒脱除提供了有效途径。 展开更多
关键词 病毒病 理化特性 脱毒方法 种类 性质 检测技术
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侵染西瓜的5种病毒ZYMV、WMV、TMV、SqMV和CMV的多重RT-PCR检测体系的建立与检测应用 被引量:25
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作者 王威麟 张昊 +3 位作者 于祥泉 吴云锋 张文波 张春平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-32,共6页
根据5种病毒小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosai ... 根据5种病毒小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosai cvirus,CMV)的核苷酸保守区序列,设计特异性引物对,从影响多重RT-PCR(mRT-PCR)扩增的引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行反应体系的优化,建立了一种能够同时检测ZYMV、WMV、TMV、SqMV和CMV的多重RT-PCR技术体系,并进行了实际应用。在一个体系中对上述5种病毒复合侵染的西瓜材料进行多重RT-PCR扩增,得到与试验设计相符的5条特异性条带,依次是542、485、410、354和293bp。该体系实现了对侵染西瓜的5种病毒的同时检测,极大地提高了检测效率,降低了检测成本,体现了多重RT-PCR的优越性。 展开更多
关键词 西瓜 多重RT-PCR 检测 病毒
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PCR检测猪伪狂犬病病毒方法的研究 被引量:23
4
作者 赵丽 崔保安 +4 位作者 方忠意 李小康 陈红英 夏平安 朱瑞芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期142-146,共5页
根据编码猪伪狂犬病病毒gH基因保守序列,设计合成一对引物,通过改进病毒核酸提取方法和优化PCR反应条件,成功的从猪伪狂犬病毒感染的细胞中扩增出预期的355bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒和正... 根据编码猪伪狂犬病病毒gH基因保守序列,设计合成一对引物,通过改进病毒核酸提取方法和优化PCR反应条件,成功的从猪伪狂犬病毒感染的细胞中扩增出预期的355bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒和正常细胞均未扩增出相应的片段,经NaeⅠ酶切鉴定,证实了该扩增片段的特异性;敏感性实验表明,该体系可检测到0.48pg的猪伪狂犬病毒DNA。本方法的建立使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、简便、经济、实用。 展开更多
关键词 PCR 检测 猪伪狂犬病毒
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甘薯茎尖培养与脱毒技术研究 被引量:23
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作者 何新民 蒋菁 +3 位作者 唐洲萍 唐家文 刘颂东 刘义明 《广西农业科学》 CSCD 2009年第8期964-968,共5页
以红姑娘2号甘薯为材料,研究6-BA、NAA、GA3不同配组对茎尖培养的影响,并采用温水钝化法及适宜的茎尖大小来提高红薯病毒脱毒率,用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。研究结果表明,培养基中的6-BA、NAA、GA3不同浓度配比对红姑娘... 以红姑娘2号甘薯为材料,研究6-BA、NAA、GA3不同配组对茎尖培养的影响,并采用温水钝化法及适宜的茎尖大小来提高红薯病毒脱毒率,用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。研究结果表明,培养基中的6-BA、NAA、GA3不同浓度配比对红姑娘2号甘薯茎尖培养不定芽、不定根的诱导有明显的影响。在诱导产生愈伤组织和丛芽阶段,培养基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.01mg/L+GA3 0.1mg/L效果较好。而1/2MS+NAA 0.2mg/L是红姑娘2号试管苗的适宜生根培养基。通过指示植物法检测90个无性系,平均脱毒率为96.7%。 展开更多
关键词 甘薯 茎尖培养 脱毒 病毒检测
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2018年伪狂犬病病毒的流行特征及其遗传变异分析 被引量:19
6
作者 孙颖 王雪莹 +8 位作者 梁婉 谢思思 彭忠 陈宏建 华琳 宋文博 汤细彪 陈焕春 吴斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期584-593,共10页
为了了解当前伪狂犬病病毒(PRV)在我国猪群中的流行现状及其遗传变异情况,本研究利用PCR的方法对2018年1-12月来源于我国28个省、市、自治区的1 328份疑似猪伪狂犬病发病猪的组织样品开展了PRV-gE的检测及病毒的分离鉴定,同时针对所分... 为了了解当前伪狂犬病病毒(PRV)在我国猪群中的流行现状及其遗传变异情况,本研究利用PCR的方法对2018年1-12月来源于我国28个省、市、自治区的1 328份疑似猪伪狂犬病发病猪的组织样品开展了PRV-gE的检测及病毒的分离鉴定,同时针对所分离的病毒的gB、gC和gE基因进行PCR扩增和DNA测序,并展开遗传变异分析。结果显示,共有92份样品为PRV-gE基因检测阳性,阳性检出率为6.93%。从92份PRV-gE阳性样品分离到13株PRV。分别基于gB基因部分片段、gC和gE基因进行遗传变异分析发现13株PRV与我国2012年以后流行的毒株(如HeN1等变异株)亲缘关系较近,而与2012年以前所分离的毒株(如Ea等经典毒株)的亲缘关系较远;此外,绝大多数中国分离株与国外分离毒株(如NIA-3、Bartha、Kaplan等)在遗传进化树中位于不同的进化分支;相对于国外分离株及国内早期流行的经典毒株而言,13株PRV分离株的gB、gC和gE蛋白中均存在许多特征性的氨基酸位点变异。本研究对于了解我国PRV流行现状及当前流行的PRV毒株的生物学特征具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 PCR检测 病毒分离 遗传变异分析
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四种血液安全筛查模式对经血传播病毒残余风险的评估 被引量:18
7
作者 何子毅 陈庆恺 +5 位作者 陈少彬 王庆 邹姣丽 余霖 陈静文 车嘉琳 《中国输血杂志》 CAS 2018年第2期140-143,共4页
目的评估东莞市10年间采取的4种血液安全筛查模式(2遍酶联免疫法、2遍酶联免疫法和1遍核酸检测、1遍酶联免疫法和1遍核酸检测、2遍酶联免疫和1遍质量升级版核酸检测)后经血传播病毒HBV、HCV、HIV的残余风险。方法收集2008年1月1日—2... 目的评估东莞市10年间采取的4种血液安全筛查模式(2遍酶联免疫法、2遍酶联免疫法和1遍核酸检测、1遍酶联免疫法和1遍核酸检测、2遍酶联免疫和1遍质量升级版核酸检测)后经血传播病毒HBV、HCV、HIV的残余风险。方法收集2008年1月1日—2017年1月12日期间采取的4种血液安全筛查模式后的试验原始数据,采用残余风险数学模型进行风险评估。结果 4种血液安全筛查模式下HBV标志物的反应率在初次献血者均明显高于重复献血者(P〈0.01),除2遍酶联免疫法检测模式外,其余3种血液筛查模式下初次献血者反应率均明显高于重复献血者(P〈0.01),采取2遍酶联免疫法的检测模式时HBV和HCV的残余风险分别为1/5 429和1/15 599,均高于其他3种筛查模式;HIV残余风险在2遍酶联免疫检测模式时最低(1/546 448);最新的筛查模式2遍ELISA+1遍NAT(v2.0)检测模式下HBV、HCV、HIV的残余风险分别为1/7 405、1/346 020和1/473 934。结论 HBV的残余风险较大,是影响血液安全的主要因素,开展核酸检测可以降低残余风险,选择2遍ELISA+1遍NAT(v2.0)是较好的筛查模式,选择低危献血人群更有利于血液安全。 展开更多
关键词 血液安全 筛查模式 病毒 残余风险 评估
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胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究 被引量:14
8
作者 李月越 陈杭薇 +2 位作者 王萍 李兵 郭文忠 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第18期1652-1654,共3页
目的:观察胶体金免疫层析(GICA)法检测流感病毒的效果.方法:用间接免疫荧光法(IFA)作为"金标准",比较GICA与IFA两种方法对同一份标本甲型及乙型流感病毒检测效果,对GICA法诊断试验做出评价.结果:两种方法的检测结果有较好的... 目的:观察胶体金免疫层析(GICA)法检测流感病毒的效果.方法:用间接免疫荧光法(IFA)作为"金标准",比较GICA与IFA两种方法对同一份标本甲型及乙型流感病毒检测效果,对GICA法诊断试验做出评价.结果:两种方法的检测结果有较好的一致性,GICA法检测流感病毒与IFA法检测结果之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:GICA法操作简单、方便、快速,特异、灵敏,在临床流感病毒抗原的检测中具有较好的应用价值. 展开更多
关键词 胶体金免疫层析 快速检测 流感病毒A型 流感病毒B型
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流感病毒快速检测方法在儿童流感样病例病原诊断中的应用 被引量:16
9
作者 王芳 孙宇 +5 位作者 朱汝南 赵林清 邓洁 廖斌 黄荣妍 钱渊 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2012年第4期289-292,共4页
目的对一种流感病毒快速检测方法在儿童流感样病例病原诊断中的应用效果进行评估。方法 2010年12月至2011年4月采集流感样病例患儿咽拭子标本350例,使用甲型及乙型流感病毒抗原检测试剂盒(QuickNaviTM-Flu,胶乳免疫层析法)进行抗原检测... 目的对一种流感病毒快速检测方法在儿童流感样病例病原诊断中的应用效果进行评估。方法 2010年12月至2011年4月采集流感样病例患儿咽拭子标本350例,使用甲型及乙型流感病毒抗原检测试剂盒(QuickNaviTM-Flu,胶乳免疫层析法)进行抗原检测,并与病毒分离法进行比较。对于抗原检测和病毒分离法结果不相符的标本采用RT-PCR验证。结果 QuickNaviTM-Flu抗原快速检测流感病毒的结果与病毒分离法的一致性好,其检测甲型流感病毒的敏感度为89.9%,特异度为94.4%。经RT-PCR验证,14例抗原检测与病毒分离法结果不相符样本中13例结果为阳性(与抗原检测一致),使得该抗原检测方法的敏感度和特异度升至91.0%和99.6%。抗原检测乙型流感病毒经RT-PCR验证前后的结果一致,敏感度和特异度分别为87.5%和100%。该方法检测出的阳性标本中包括了甲3型、乙型(Victoria和Yamagata系)流感病毒和新发的2009甲型H1N1,并与常见的呼吸道病毒之间无交叉反应。结论 QuickNaviTM-Flu作为流感病毒抗原检测的试剂盒,可一次同时检测出甲型和乙型流感病毒,耗时短,操作简便,具有良好的敏感度和特异度,适用于流感样病例病原的快速诊断。 展开更多
关键词 流感病毒 胶乳免疫层析法 抗原检测 病毒分离法
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茎尖培养法脱除菊花B病毒的研究 被引量:14
10
作者 尤燕平 彭诗怡 +6 位作者 朱文莹 王靓 蒋甲福 陈素梅 房伟民 管志勇 陈发棣 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期144-148,共5页
以感染菊花B病毒(CVB)的菊花品种‘寒小白’为试材,分别切取长度小于0.3 mm、0.3~0.7 mm和0.7~1.0 mm的茎尖接种于MS+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的培养基中,以及第1次切取0.7~1.0 mm菊花茎尖接种于MS培养基中,培养后再... 以感染菊花B病毒(CVB)的菊花品种‘寒小白’为试材,分别切取长度小于0.3 mm、0.3~0.7 mm和0.7~1.0 mm的茎尖接种于MS+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的培养基中,以及第1次切取0.7~1.0 mm菊花茎尖接种于MS培养基中,培养后再切取0.3~0.7 mm的菊花茎尖接种于MS+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA培养基中(二次茎尖培养法),结合RT-PCR方法鉴定脱毒效果,研究茎尖长度及培养方式对茎尖诱导分化成活率和脱毒效果的影响。结果表明:茎尖大小与茎尖诱导成活率成正比,与脱毒效果成反比,即茎尖长度小于0.3 mm时,成活率最低,仅为6%,而脱毒率最高,可达66.67%;当茎尖长度为0.7~1.0 mm时,茎尖成活率最高,为90%,脱毒率最低,仅为6.67%。在一次茎尖培养法的基础上,运用二次茎尖培养法对CVB进行脱毒培养,既保证了较高的成活率(60%),又保证了较高的脱毒率(43.33%)。 展开更多
关键词 菊花 菊花B病毒 检测 脱毒
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猪血凝性脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用 被引量:15
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作者 常灵竹 贺文琦 +4 位作者 陆慧君 单昭 李志平 陈克研 高丰 《中国农学通报》 CSCD 2007年第9期15-18,共4页
为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,... 为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,最低可以检测到10个TCID50/100μl的病毒,说明该方法的有较好的特异性和敏感性。用此RT-PCR方法对感染HEV的小鼠和猪进行检测,结果能从发病动物的多种组织中检测到病原,其中以脑组织的检出率最高。因此,临床疑似病例检测时以脑组织为最佳检测样本。 展开更多
关键词 猪血凝性脑脊髓炎病毒 RT-PCR 病毒检测
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多层次校园网络安全设计 被引量:13
12
作者 林永菁 《吉林师范大学学报(自然科学版)》 2009年第3期150-153,共4页
在分析校园网特征的基础上,归纳出校园网面临的安全问题.对目前流行的几种防护技术,如防火墙技术、入侵检测技术、VPN与病毒检测技术等进行了详细的阐述,在文章的最后提出了一种多层次的校园网设计.
关键词 防火墙技术 入侵检测技术 VPN与病毒检测
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计算机病毒入侵检测技术探讨 被引量:12
13
作者 张岳公 范希骏 李大兴 《微电子学与计算机》 CSCD 北大核心 2005年第11期33-34,38,共3页
计算机病毒是一类很常见的信息安全威胁。本文讨论了病毒的工作原理和检测病毒的常用技术。然后提出了一种基于自我复制行为的病毒检测方法,用图灵机模型给出了形式化的描述,并定性地证明了这种方法可以在图灵机的计算能力范围内自动进行。
关键词 计算机病毒 入侵 检测 反病毒
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2012—2016年中山市流感样病例哨点监测结果分析 被引量:13
14
作者 曾科文 吕春梅 +2 位作者 曾华优 曹东晖 杜宜 《公共卫生与预防医学》 2018年第5期115-118,共4页
目的分析中山市国家级流感哨点医院的流感样病例数和流感核酸检测结果,为防控流感提供可靠依据。方法选取中山市国家级流感哨点医院2012—2016年门急诊上报的流感样病例监测数据以及流感病原学检测结果进行统计分析。结果2012—2016年... 目的分析中山市国家级流感哨点医院的流感样病例数和流感核酸检测结果,为防控流感提供可靠依据。方法选取中山市国家级流感哨点医院2012—2016年门急诊上报的流感样病例监测数据以及流感病原学检测结果进行统计分析。结果2012—2016年上报流感样病例104 414人,流感样病例就诊比例(ILI%)为4. 53%;以0~4岁及5~14岁2个年龄组为主,分别占47. 66%、23. 23%;每年冬春季节为流感高发季节;共采集流感样病例标本5 278例,核酸阳性879例,占16. 65%,且流感病毒核酸阳性比例呈逐年上升趋势,其中优势株为季H3 (8. 24%);整体上男性阳性率比例为53. 81%显著高于女性46. 19%,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论加强流感防控,尤其关注男性以及儿童流感病毒监控,并在冬春季节加强重视程度,另根据流感病毒寿命周期性特点,以及时发现流感病毒变异,利于预测流感疫情,并做好预防控制措施。 展开更多
关键词 流感样病例 流感检测 哨点医院 流感病毒
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甘薯无病毒苗培育技术研究 被引量:11
15
作者 尚佑芬 杨崇良 +1 位作者 赵玖华 李长松 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期121-124,共4页
1991~1996年,甘薯茎尖离体培养采用MS为基本培养基,添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.2mg/L+腺素(Ad)5mg/L,培育出12个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率50.0%~95.6%,成苗期43~60d。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的... 1991~1996年,甘薯茎尖离体培养采用MS为基本培养基,添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.2mg/L+腺素(Ad)5mg/L,培育出12个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率50.0%~95.6%,成苗期43~60d。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关(r=-0.9875),茎尖带1个叶原基时,SPFMV脱毒率为38.1%。培养基中添加适量的植物病毒钝化剂可使脱毒率提高到49.5%,但对成苗率有影响。采用Dot-ELISA血清学检测结合指示植物鉴定,能检出国内已知侵染甘薯的3种病毒,可得到茎尖组培脱毒苗。 展开更多
关键词 甘薯 茎尖培养 脱毒 病毒检测 无病毒苗 培育
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一种基于生物免疫系统的计算机抗病毒新技术 被引量:2
16
作者 姜梅 沈延森 +1 位作者 陈伟 丁秋林 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2001年第6期69-71,共3页
当前计算机病毒呈现出两种新的趋势:计算机病毒的制作速度大大提高;互联网的飞速发展促使病毒传播速度更快,传播空间更广。利用现有抗病毒技术已无法遏制计算机病毒的快速繁衍和传播,对当今的信息社会构成严重威胁。研究和探讨了一... 当前计算机病毒呈现出两种新的趋势:计算机病毒的制作速度大大提高;互联网的飞速发展促使病毒传播速度更快,传播空间更广。利用现有抗病毒技术已无法遏制计算机病毒的快速繁衍和传播,对当今的信息社会构成严重威胁。研究和探讨了一种新的计算机抗病毒技术,即基于生物免疫系统的计算机病毒免疫技术,提出了计算机免疫系统的体系结构。最后论述了计算机抗病毒技术的研究发展现状。 展开更多
关键词 计算机病毒 抗病毒新技术 生物免疫系统
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贝类中诺如病毒的研究进展 被引量:10
17
作者 寇晓霞 吴清平 +1 位作者 薛亮 张菊梅 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2014年第2期200-204,共5页
从贝类中诺如病毒的污染现状、检测组织靶点、病毒浓缩方法及效率、检测方法有效性等多个方面评述贝类中诺如病毒的研究现状、进展、急需解决的问题和未来的发展方向,以期为制定诺如病毒检测技术标准及我国贝类进出口贸易提供参考。
关键词 诺如病毒 贝类 检测靶点 病毒浓缩 反转录-聚合酶链反应
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利用siRNA高通量测序技术检测烟草病毒 被引量:9
18
作者 王芳 周本国 +1 位作者 许大凤 高正良 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期97-100,共4页
烟草是我国的主要经济作物之一,病毒病是烟草生产上的重要病害。常见的烟草病毒主要有马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、烟草脉带花叶... 烟草是我国的主要经济作物之一,病毒病是烟草生产上的重要病害。常见的烟草病毒主要有马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus,TVMBV)等。此外,近年来在烟草上还发生一些新的病毒病害, 展开更多
关键词 烟草病毒 SIRNA 技术检测 高通量 MOSAIC virus 黄瓜花叶病毒 测序
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基于BP神经网络的病毒检测方法 被引量:8
19
作者 郭晨 梁家荣 梁美莲 《计算机工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期152-153,156,共3页
提出了一种基于BP神经网络的病毒检测方法,该方法成功地把BP神经网络的理论引入计算机病毒的检测中。该方法比传统的病毒检测技术更有效地对系统信息和文件系统进行语法分析,快速地诊断出被感染病毒以及病毒类型。
关键词 BP神经网络 文件系统 计算机病毒 系统信息 病毒类型 病毒检测技术 语法分析 诊断 感染病 方法
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犬瘟热病毒抗原表位T’TB和犬细小病毒VP2蛋白的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定 被引量:9
20
作者 王亚君 华育平 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期204-209,共6页
应用PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-VP2,将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位基因T’TB克隆至VP2基因的上游,命名为pFastBacHTc-T’TB-VP2。进而转化含... 应用PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-VP2,将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位基因T’TB克隆至VP2基因的上游,命名为pFastBacHTc-T’TB-VP2。进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T’TB细胞表位和犬细小病毒VP2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T’TB-VP2,将其转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T’TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,结果显示:表达的蛋白具有良好的免疫原性。表达的重组蛋白在无佐剂参与的情况下,按确定的免疫程序免疫6~8周龄的BALB/c小鼠,检测小鼠的体液免疫学指标。结果表明:表达蛋白能诱导小鼠产生抗CDV和CPV的特异性中和抗体。本实验为重组犬瘟热与犬细小病毒新型亚单位疫苗的研制奠定了重要的物质基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒T’TB抗原表位 犬细小病毒VP2基因 杆状病毒表达系统 表达 抗体检测
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