亮氨酸对蟾蜍卵母细胞膜电位的影响与孕酮的关系 被引量：1

1

作者 王羽峰 李学斌 +3 位作者 成军 姚兰春 马青年 程治平 《佳木斯医学院学报》 1989年第3期215-217,214,共4页

我们以前实验发现,亮氨酸可诱导蟾蜍卵母细胞膜电位去极化。本实验进而探讨亮氨酸的作用与孕酮的关系。实验用1mM浓度亮氨酸培养卵母细胞16～24h,然后测定膜电位。结果发现:亮氨酸不能使裸化的卵母细胞膜电位去极化;也不能增强孕酮所致... 我们以前实验发现,亮氨酸可诱导蟾蜍卵母细胞膜电位去极化。本实验进而探讨亮氨酸的作用与孕酮的关系。实验用1mM浓度亮氨酸培养卵母细胞16～24h,然后测定膜电位。结果发现:亮氨酸不能使裸化的卵母细胞膜电位去极化;也不能增强孕酮所致卵母细胞膜电位去极化。但亮氨酸对卵母细胞的去极化作用可以被雌二醇完全阻断。而且用放射免疫法测定卵母细胞孕酮含量发现,亮氯酸在引起卵母细胞膜电位明显去极化之前,能使卵母细胞孕酮含量增高一倍以上。这些结果提示,亮氨酸可能通过增高卵母细胞孕酮含量来使其膜电位去极化。 展开更多

关键词 亮氨酸 卵母细胞 膜电位 孕酮 蟾蜍

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猪裸卵体外胞质成熟研究 被引量：1

2

作者 郇延军 解炳腾 +2 位作者 朱江 孔庆然 刘忠华 《安徽农业科学》 CAS 2012年第19期10170-10174,共5页

[目的]改善猪裸卵的体外成熟质量,为建立稳定有效的裸卵培养体系提供科学依据。[方法]以第一极体排出比例、卵母细胞谷胱甘肽含量、亮甲酚蓝阳性率以及早期胚胎发育潜能等为主要衡量指标研究了卵泡壁颗粒细胞共培养对猪裸卵胞质成熟的... [目的]改善猪裸卵的体外成熟质量,为建立稳定有效的裸卵培养体系提供科学依据。[方法]以第一极体排出比例、卵母细胞谷胱甘肽含量、亮甲酚蓝阳性率以及早期胚胎发育潜能等为主要衡量指标研究了卵泡壁颗粒细胞共培养对猪裸卵胞质成熟的影响。[结果]体外成熟结果表明,相对于DO组,DO+MGC组卵母细胞排除第一极体的比例无显著差异,但核成熟的进程得到了改善,更接近于COC组;成熟卵母细胞GSH含量检测结果表明,DO+MGC组平均每个卵母细胞谷胱甘肽含量(光密度1 053.67)与COC组(1 426.00)和COC+GC组(1 541.00)差异不显著,但DO组(724.67)显著低于COC组和COC+GC组(P<0.05);G6PDH活性检测结果表明,DO+MGC组BCB阳性卵母细胞比例(88.26%)与COC组(92.75%)以及DO组(82.86%)差异均不显著,但DO组显著低于COC组(P<0.05);成熟卵母细胞孤雌激活后的发育结果表明,DO+MGC组卵裂率(94.98%)和囊胚率(43.67%)显著高于DO组卵裂率(52.54%)和囊胚率(8.97%),与COC组卵裂率(97.11%)和囊胚率(38.30%)差异不显著(P<0.05);成熟卵母细胞体外受精后的发育结果表明,DO+MGC组卵裂率(72.65%)与DO组卵裂率(63.59%)无显著差异,但DO+MGC组囊胚率(17.79%)显著高于DO组(9.88%)(P<0.05)。[结论]卵泡壁颗粒细胞共培养可以显著改善裸卵体外成熟的胞质成熟质量并进而提高后续发育潜力。 展开更多

关键词 裸卵 壁颗粒细胞 体外成熟 胞质成熟 猪

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绵羊卵丘细胞对裸卵体外成熟及孤雌发育影响的研究

3

作者 崔茂盛 张金龙 +2 位作者 张效生 赵启立 冯建忠 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期19-21,共3页

本研究探讨绵羊卵丘细胞对裸卵体外成熟和后期发育的影响。实验分为4组,对照组为卵丘-卵母细胞复合体(COCs);裸卵(DO)组;COCs与DO共培养组(CODO);卵丘细胞(CC)与DO共培养组(CCDO)。体外成熟培养18 h后,检测各组卵子成熟质量并进行孤雌... 本研究探讨绵羊卵丘细胞对裸卵体外成熟和后期发育的影响。实验分为4组,对照组为卵丘-卵母细胞复合体(COCs);裸卵(DO)组;COCs与DO共培养组(CODO);卵丘细胞(CC)与DO共培养组(CCDO)。体外成熟培养18 h后,检测各组卵子成熟质量并进行孤雌发育研究。结果表明:CODO和CCDO组中裸卵活率显著高于DO组(P<0.05),但显著低于COCs组(P<0.05),且COCs组中卵子活率极显著高于DO组(P<0.01);在极体排出率方面,CODO、CCDO和DO3组差异不显著(P>0.05),但是它们都显著低于COCs组(P<0.05)。COCs、CODO、CCDO和DO 4组卵裂率差异均不显著(P>0.05)。然而,DO组的囊胚率显著低于CODO和CCDO组(P<0.05),极显著低于COCs组(P<0.01),但CODO和CCDO 2组中裸卵的囊胚率差异不显著(P>0.05)。总之,无论散在的卵丘细胞还是COCs均能提高裸卵体外成熟及后期发育潜力。 展开更多

关键词 卵丘细胞 裸卵 体外成熟 发育 绵羊

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无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的初步探讨

4

作者 冯贵雪 王晓丽 +3 位作者 卞桂华 石德顺 杨素芳 舒益民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期614-619,共6页

主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团... 主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团共培养(M4)和用卵巢组织包围培养(M5)。无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟培养24 h后检查第一极体(PB1)排出率,随后对这些卵母细胞进行孤雌激活,评定其成熟质量。结果发现,M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组,其它各组间没有显著差异(P>0.05);M5组的孤雌激活卵裂率显著低于M1组和M4组(P<0.05),而与M2组和M3组没有显著差异(P>0.05),但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组(P<0.05)。这些研究结果表明:(1)未扩展卵丘细胞包围法和扩展卵丘细胞团支撑法可促进无卵丘水牛卵母细胞的体外成熟,但与卵丘细胞单层共培养没有作用;(2)卵巢组织包围培养不利于水牛卵母细胞的体外成熟。 展开更多

关键词 水牛 无卵丘的卵母细胞 体外成熟

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无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的研究

5

作者 冯贵雪 杨素芳 +2 位作者 卞桂华 王晓丽 石德顺 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第B09期195-196,共2页

卵母细胞生长发育和成熟调控机理的研究,是生殖生物学领域研究的热点和难点。研究发现,卵丘细胞的存在与否严重影响卵母细胞的体外成熟质量,且小鼠无卵丘的卵母细胞经体外成熟并常规体外受精后未能得到“试管后代”,表明常规体外培养方... 卵母细胞生长发育和成熟调控机理的研究,是生殖生物学领域研究的热点和难点。研究发现,卵丘细胞的存在与否严重影响卵母细胞的体外成熟质量,且小鼠无卵丘的卵母细胞经体外成熟并常规体外受精后未能得到“试管后代”,表明常规体外培养方法明显降低无卵丘的卵母细胞发育潜能。可能的原因是:(1)卵母细胞与颗粒细胞间的间隙连接丢失,这种连接对卵母细胞的胞质成熟是至关重要的。(2)皮层颗粒的减少或继续生成路径的障碍。(3)卵母细胞易于贴底,造成变形,从而可能引起卵母细胞内细胞器机械性移位,造成损伤,且贴底后可能影响卵母细胞与培养基的物质交换。因此,探明卵丘细胞在卵母细胞体外成熟的作用及机制,探索培养无卵丘的水牛卵母细胞的新方法,对于今后进一步提高卵母细胞成熟质量具有重大的指导意义。本研究针对去卵丘细胞的卵母细胞体外培养存在的问题,以卵巢组织、卵丘细胞为介质来模拟卵母细胞在体内的状态,试验分为5组:M1,直接培养法(对照组);M2,与单层卵丘细胞共培养法;M3,未扩展卵丘细胞包围法;M4,扩展卵丘细胞团支撑法;M5,卵巢组织薄片包围法。培养24 h后计算第一极体(PB1)排出率,随后对这些卵母细胞进行孤雌激活。结果发现:成熟24 h时,M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组,其他各组间没有显著差异(P>0.05);孤雌激活结果显示M5组的卵裂率显著低于M1组(P<0.05),而M2组与M1组间没有差异(P>0.05);但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组(P<0.05)。结论:(1)扩展卵丘细胞团支撑法支持无卵丘的水牛卵母细胞的体外核质成熟,而未扩展卵丘细胞包围法促进卵母细胞胞质的成熟,这可能是通过重新构建卵丘-卵母细胞间的间隙连接实现的;(2)与单层卵丘细胞共培养法并不能促进无卵丘的水牛卵母细胞的核成熟及其发育潜力;(3)用� 展开更多

关键词 水牛 无卵丘卵母细胞 体外成熟

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单层细胞共培养对猪去卵丘卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响

6

作者 顾晓龙 孟祥黔 +7 位作者 吴彩凤 戴建军 张廷宇 谢一妮 吴志强 刘亮 曾宪垠 张德福 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期604-608,共5页

本试验比较观察第一极体(The first polar body,PbⅠ)、Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第2次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)卵母细胞判定结果的相关性分析,并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells,pOCCs... 本试验比较观察第一极体(The first polar body,PbⅠ)、Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第2次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)卵母细胞判定结果的相关性分析,并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells,pOCCs)、猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells,pOECs)和猪卵丘颗粒细胞(porcine cumulus cells,pCCs)等3种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞(cumulus cells denuded oocytes,Dos)体外成熟(in vitro maturation,IVM)和孤雌发育的影响。结果显示:(1)Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性(R=0.973,P<0.01,N=90);(2)pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs((52.5±0.30)%vs(43.8±2.18)%,P<0.05),且这2组成熟率显著高于其余各组(P<0.05);Dos在3种单层细胞共培养体系培养后,成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高(P<0.05),pOCCs组GSH含量最高((7.1±0.32)pmol/卵);(3)成熟后的Dos经孤雌激活,pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余2组(P<0.05)。 展开更多

关键词 纺锤体观测系统 共培养 去卵丘卵母细胞 体外成熟

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C-ERBB2促小鼠卵母细胞成熟及在表皮生长因子调控小鼠卵母细胞体外成熟中的作用 被引量：3

7

作者 郑莉萍 汪小浪 +4 位作者 吴磊 郑月慧 高凤兰 肖秋香 李芳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第10期1056-1062,共7页

目的探讨C-ERBB2对小鼠卵母细胞成熟的影响及对表皮生长因子在卵母细胞成熟调控中的作用。方法采用卵母细胞体外培养法,研究反义C-ERBB2寡脱氧核苷酸(C-ERBB2ASODN)对卵母细胞体外自发成熟及对表皮生长因子(EGF)促卵母细胞成熟的影响;利... 目的探讨C-ERBB2对小鼠卵母细胞成熟的影响及对表皮生长因子在卵母细胞成熟调控中的作用。方法采用卵母细胞体外培养法,研究反义C-ERBB2寡脱氧核苷酸(C-ERBB2ASODN)对卵母细胞体外自发成熟及对表皮生长因子(EGF)促卵母细胞成熟的影响;利用RT-PCR检测卵母细胞中C-ERBB2mRNA的表达及在不同处理因素作用下卵母细胞成熟过程中C-ERBB2mRNA表达的变化。结果C-ERBB2ASODN能呈剂量依赖方式抑制卵母细胞的生发泡破裂(GVBD)率和第一极体(PBⅠ)排出率,并且能抑制EGF对卵母细胞的促成熟作用。卵母细胞中存在C-ERBB2mRNA,EGF可以增强其表达,C-ERBB2ASODN可减弱EGF促表达的作用。结论C-ERBB2与卵母细胞的成熟密切相关。EGF可直接促进裸卵的成熟分裂,其机制可能与上调卵母细胞C-ERBB2的表达有关。 展开更多

关键词 C-ERBB2 表皮生长因子 卵母细胞 体外成熟

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未成熟卵母细胞在TCM199与P1培养体系体外成熟的比较 被引量：2

8

作者 石宇 龙晓林 +3 位作者 杜红姿 黄玉玲 张伟良 刘凤华 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2008年第5期346-349,共4页

目的探讨人未成熟卯母细胞适宜的培养体系及培养时间。方法将卯母细胞-卵丘复合体（OCC）332枚和裸卯（DO）393枚随机置入TCM199和P1两种培养体系体外成熟。OCC体外培养48h，观察其成熟情况。DO分别在24、30、48h观察第1极体排出情况，... 目的探讨人未成熟卯母细胞适宜的培养体系及培养时间。方法将卯母细胞-卵丘复合体（OCC）332枚和裸卯（DO）393枚随机置入TCM199和P1两种培养体系体外成熟。OCC体外培养48h，观察其成熟情况。DO分别在24、30、48h观察第1极体排出情况，计算体外成熟率。OCC和DO成熟后称为成熟的卵母细胞，成熟的卯母细胞行精子卵浆内注射技术（ICSI）受精，比较其在两种培养体系的受精率、卯裂率及囊胚形成率。结果在TCM199和P1培养体系中，OCC的成熟率、成熟后成为成熟的卵母细胞的受精率和卵裂率的差异无统计学意义（P均〉0．05），但成熟的卯母细胞的囊胚形成率为53．7％比37．8％（P〈0．05）。DO在TCM199和P1培养体系中体外培养24、30、48h时成熟率的差异无统计学意义；由DO成熟后形成的成熟的卵母细胞在P1培养体系中的受精率、卵裂率和囊胚形成率高于其在TCM199培养体系中，但只有受精率差异具有统计学意义（73．5％比62．9％，P〈0．05）；DO在两种培养体系中体外培养48h和30h的成熟率均明显高于24h（P〈0．05），但48h与30h的成熟率相比无差异。结论OCC适宜在TCM199培养体系的培养；DO适宜在P1培养体系的培养。DO体外成熟形成成熟的卯母细胞的时间可以缩短至30h。 展开更多

关键词 卵母细胞 体外成熟 培养基 精子注射 细胞质内 卵母细胞-卯丘复合体 裸卵

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维生素C或维生素E对猪去卵丘卵体外成熟及发育能力的影响 被引量：3

9

作者 陈华 田宁宁 +2 位作者 霍道坦 陶勇 章孝荣 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2008年第21期12-16,共5页

裸卵的体外培养对于动物繁殖和人类辅助生殖具有重要的意义。实验研究成熟培养基中维生素C和维生素E的添加对猪裸卵(denuded oocytes,DOs)体外发育能力的影响。将维生素C以0、50、100、250、500μmol/L和750μmol/L的浓度,维生素E以0、1... 裸卵的体外培养对于动物繁殖和人类辅助生殖具有重要的意义。实验研究成熟培养基中维生素C和维生素E的添加对猪裸卵(denuded oocytes,DOs)体外发育能力的影响。将维生素C以0、50、100、250、500μmol/L和750μmol/L的浓度,维生素E以0、10、20、50、100μmol/L和250μmol/L的浓度加入成熟液中,比较猪DOs的体外成熟率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率。结果表明:维生素C促进猪DOs的体外成熟和囊胚发育;维生素E对猪DOs的成熟率无影响,增加了囊胚率。综上所述,维生素C和维生素E可提高猪DOs的体外发育能力。 展开更多

关键词 裸卵 维生素C 维生素E 猪

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EGCG用于小鼠裸卵体外培养的研究 被引量：1

10

作者 李拥军 尚利青 +1 位作者 李太坤 李文婷 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期19-22,共4页

以小鼠裸卵为体外培养对象,以添加不同浓度EGCG的HTF和TCM-199为基础培养体系,研究EGCG对小鼠裸卵体外成熟、体外受精及其后期胚胎发育的影响,并分别测定小鼠裸卵细胞内GSH浓度的变化。结果表明:在基础培养体系中添加EGCG对小鼠裸卵作... 以小鼠裸卵为体外培养对象,以添加不同浓度EGCG的HTF和TCM-199为基础培养体系,研究EGCG对小鼠裸卵体外成熟、体外受精及其后期胚胎发育的影响,并分别测定小鼠裸卵细胞内GSH浓度的变化。结果表明:在基础培养体系中添加EGCG对小鼠裸卵作用不明显,不能提高卵母细胞的成熟率,对受精率和胚胎发育率无显著影响。 展开更多

关键词 EGCG 裸卵 体外成熟 体外受精 胚胎发育

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三种颗粒细胞剥除方式对卵母细胞受精率及胚胎发育的影响 被引量：9

11

作者 甄璟然 孙正怡 +2 位作者 郁琦 邓成艳 何方方 《生殖医学杂志》 CAS 2008年第1期20-23,共4页

目的对三种颗粒细胞剥除方式在常规体外受精(IVF)中对卵母细胞受精率及胚胎发育影响进行前瞻性研究。方法2004年1～12月,因输卵管因素不育在我院生殖中心行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者54例,患者年龄均小于35岁。采用随机表法... 目的对三种颗粒细胞剥除方式在常规体外受精(IVF)中对卵母细胞受精率及胚胎发育影响进行前瞻性研究。方法2004年1～12月,因输卵管因素不育在我院生殖中心行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者54例,患者年龄均小于35岁。采用随机表法随机分为三组,每组18例,共818个卵母细胞。对三组卵母细胞在IVF后采取不同的颗粒细胞剥除方式:第一组在受精后4h完全剥除颗粒细胞;第二组在受精后4h部分剥除颗粒细胞,受精后16～18h再将颗粒细胞完全剥除;第三组在受精后16～18h完全剥除颗粒细胞(即传统的过夜培养方式)。对三组的受精率、优质胚胎率、囊胚形成率进行比较。结果第一组及第二组的优质胚胎率高于第三组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组在受精率及囊胚形成率方面没有显著差别。结论第一组的颗粒细胞剥除方式最好,即缩短精-卵共培养时间可以提高胚胎质量,长时间的精-卵共培养对优质胚胎的形成有不利影响。较短时间(12～14h)的颗粒细胞与卵细胞的共培养可能对胚胎发育的质量无显著影响。 展开更多

关键词 颗粒细胞剥除 受精率 优质胚胎率 囊胚形成率

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面向卵细胞自动化拆蛋的液滴制备系统 被引量：1

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作者 魏顶 储成智 +2 位作者 谷森 陈瑞华 汝长海 《化学与生物工程》 CAS 2018年第2期21-25,共5页

研制了一套面向卵细胞自动化拆蛋的液滴制备系统,可以实现液滴的精确制备和盖油操作。该系统主要包括液滴制备和盖油模块、运动控制模块、液滴质量测定模块。基于该系统新型接触式液滴制备方法的机理分析,根据设计的图案制备出不同体积... 研制了一套面向卵细胞自动化拆蛋的液滴制备系统,可以实现液滴的精确制备和盖油操作。该系统主要包括液滴制备和盖油模块、运动控制模块、液滴质量测定模块。基于该系统新型接触式液滴制备方法的机理分析,根据设计的图案制备出不同体积和位置的液滴,并对结果进行分析。结果表明,液滴体积重复精度<5%,液滴定位重复精度≤2%,液滴高径比平均值在0.82~0.98之间、重复精度在5.2%~7.3%之间。 展开更多

关键词 拆蛋 液滴制备 盖油 新型接触式

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