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不同压力高压氧预处理与大鼠脑缺血灌注损伤缺血半暗带神经元细胞凋亡 被引量：13
1
作者 蔡宏斌 葛朝明 +1 位作者 赵翀翀 武国德 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-54,共5页
目的:观察不同压力高压氧预处理(HBO-PC)对大鼠脑缺血再灌注后缺血半暗带神经细胞凋亡的影响。方法:将48只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(n=8);对照组:大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(n=8);实验组:HBO-PC+MCAO组(n=32)。实验组再按不同的... 目的:观察不同压力高压氧预处理(HBO-PC)对大鼠脑缺血再灌注后缺血半暗带神经细胞凋亡的影响。方法:将48只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(n=8);对照组:大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(n=8);实验组:HBO-PC+MCAO组(n=32)。实验组再按不同的HBO-PC压力分为1.5ATA(0.15MPa)、2.0ATA(0.20MPa)、2.5ATA(0.25MPa)和3.0ATA(0.30MPa)4个亚组,每组8只。按不同治疗压力,每次吸氧1h、隔天1次、共5次,10d完成。最后一次HBO-PC24h后,根据Zea-Longa线栓法制作MCAO再灌注损伤模型,缺血2h再灌注24h后用免疫组织化学法和原位末端脱氧核糖转移酶标记(TUNEL)法检测脑缺血半暗带神经细胞凋亡情况。假手术组和对照组不进行HBO或常压氧治疗,10d后处理同实验组。结果:实验组动物行为改善,脑梗死灶缩小,脑缺血半暗带凋亡细胞数和半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)阳性细胞数不同程度降低,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达不同水平增高,与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05);而2.0ATA和2.5ATA压力条件相比较1.5ATA和3.0ATA上述凋亡指标差异亦有显著性(P<0.05);但2.0ATA和2.5ATA间,1.5ATA和3.0ATA间差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:通过下调缺血半暗带神经元线粒体途径的凋亡水平,HBO-PC可以减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,组内比较2.0ATA和2.5ATA下HBO-PC优于1.5ATA和3.0ATA。 展开更多
关键词 高压氧 预处理 脑缺血再灌注 半胱天冬蛋白酶-3 B细胞淋巴瘤/白血病-2
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丹参7种水溶性有效成分配伍对脑缺血再灌注所致记忆损伤模型小鼠的影响 被引量：1
2
作者 田慧 王倩 +2 位作者 梅艳飞 张丹参 薛贵平 《神经药理学报》 2014年第6期6-16,共11页
目的:探讨前期研究筛选出的丹参七种水溶性有效成分最优配伍组合样品A2、B4、C11对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion)小鼠学习记忆的保护作用。方法:采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型,应用水迷... 目的:探讨前期研究筛选出的丹参七种水溶性有效成分最优配伍组合样品A2、B4、C11对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion)小鼠学习记忆的保护作用。方法:采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型,应用水迷宫实验,观察配伍组合样品对脑缺血再灌注小鼠记忆功能的保护作用,检测小鼠断头耐缺氧存活时间,脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,ACh E)活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。免疫组织化学方法检测小鼠海马神经元凋亡相关天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-asparate protease-3,caspase-3)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达。结果:丹参7种水溶性有效成分配伍组合样品B4、C11可明显改善小鼠脑缺血再灌注所致的记忆障碍,增强耐缺氧能力,提高脑内SOD,CAT活性,降低ACh E活性和MDA含量;抑制凋亡蛋白caspase-3表达,上调NGF表达。其中以B4(2.8μmol·L-1)、C11(30.0μmol·L-1)组作用最为明显(P<0.01),A2各个剂量组效果不显著(P>0.05)。结论:丹参7种水溶性有效成分配伍组合样品B4、C11对脑缺血再灌注损伤小鼠记忆功能有保护作用,其机制可能通过提高清除脑内自由基能力,抑制小鼠神经细胞凋亡,促进神经再生,来减轻脑缺血再灌注引起的脑组织损伤。 展开更多
关键词 丹参 水溶性成分 脑缺血再灌注 学习记忆 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 神经生长因子
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基于网络药理学和分子对接探讨鸦胆子治疗结直肠癌的作用机制 被引量：7
3
作者 赵韦欣 王晴 +3 位作者 王梦齐 季安璇 郑晶莹 赵淑华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1850-1859,共10页
目的采用网络药理学结合分子对接及体内验证,探究鸦胆子Brucea javanica治疗结直肠癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法从公共数据库中检索并收集鸦胆子的活性成分和对应的靶点以及结直肠癌相关的靶点,通过网络药理学分... 目的采用网络药理学结合分子对接及体内验证,探究鸦胆子Brucea javanica治疗结直肠癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法从公共数据库中检索并收集鸦胆子的活性成分和对应的靶点以及结直肠癌相关的靶点,通过网络药理学分析出鸦胆子治疗结直肠癌的活性成分、成分-疾病的交集靶点以及可能的信号通路。通过分子对接预测活性成分与靶点蛋白的结合能力。通过体内实验进一步验证鸦胆子活性成分治疗结直肠癌的作用和作用机制。结果在满足筛选条件的15个成分中共筛出鸦胆子苦醇、木犀草素、鸦胆子苷B、β-谷甾醇4个鸦胆子生物活性成分及32个鸦胆子治疗结直肠癌的作用靶点,表皮因子生长受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinasparate protease-3,Caspase-3)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)是鸦胆子治疗结直肠癌的关键靶点,EGFR/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路可能在鸦胆子治疗结直肠癌中发挥重要作用。分子对接结果表示4个生物活性成分均可较好结合,其中鸦胆子苦醇与3个关键靶点的平均结合能负值最大,结合最稳定,可能是鸦胆子抗结直肠癌最有效的活性成分。动物实验结果表明,与对照组比较,鸦胆子苦醇明显抑制裸鼠体内移植瘤的体积和质量(P<0.01),下调肿瘤组织中EGFR、PI3K和Akt的蛋白表达水平(P<0.01),下调与G1/G0期细胞阻滞相关的cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)的表达(P<0.01),上调与肿瘤细胞凋亡相关的cleaved Caspase-3表达及B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)/B淋巴细胞瘤-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2)值(P<0.01),下调与迁移和侵袭相关的蛋白基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、MMP7表达(P<0.01);鸦胆子苦醇组裸鼠肝� 展开更多
关键词 鸦胆子 鸦胆子苦醇 结直肠癌 网络药理学 分子对接 木犀草素 鸦胆子苷B Β-谷甾醇 表皮因子生长受体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 细胞周期蛋白D1
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脊髓损伤大鼠脊髓及泌尿生殖道caspase-3和nNOS表达的改变 被引量：3
4
作者 王文婷 周谋望 +3 位作者 陈庆山 杨立元 杨磊 黄红拾 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期773-775,I0004,共4页
目的:观察SD大鼠脊髓损伤后脊髓及泌尿生殖道凋亡促进因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和一氧化氮合成酶(nNOS)表达的改变。方法:成年雄性SD大鼠16只,随机分为对照组(n=8)和脊髓损伤组(n=8);脊髓损伤组采用改良的重物坠落法(Al... 目的:观察SD大鼠脊髓损伤后脊髓及泌尿生殖道凋亡促进因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和一氧化氮合成酶(nNOS)表达的改变。方法:成年雄性SD大鼠16只,随机分为对照组(n=8)和脊髓损伤组(n=8);脊髓损伤组采用改良的重物坠落法(Allen法)制作大鼠T9-T10脊髓节段不完全损伤模型。分别行caspase-3免疫组化及nNOS免疫组化染色,用半定量方法评价正常及脊髓损伤大鼠脊髓、膀胱壁及阴茎组织表达caspase-3和nNOS的改变情况。结果:脊髓损伤后大鼠脊髓内nNOS和caspase-3均表达增强(P<0.001),而膀胱壁及阴茎组织内caspase-3表达增强(P<0.001),nNOS表达减弱(P<0.001)。结论:脊髓损伤大鼠脊髓及泌尿生殖道表达caspase-3和nNOS发生了改变,但并非同步,机制各有不同。 展开更多
关键词 脊髓损伤 脊髓 泌尿生殖系统 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 一氧化氮合成酶
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运动训练对脑出血大鼠脑组织中IL-10和caspase-3表达的影响 被引量：2
5
作者 孙皓 郭富强 +6 位作者 王多姿 张红艳 曾宪容 汪瑾宇 代红源 吴文斌 潘福琼 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期783-786,共4页
目的:研究运动训练与脑出血大鼠脑组织中白细胞介素-10(IL-10)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的相互关系,探讨运动训练促进脑出血(ICH)后神经功能恢复的机制。方法:采用自体血注入法将80只SD大鼠制作成右侧纹状体脑出血模型,造... 目的:研究运动训练与脑出血大鼠脑组织中白细胞介素-10(IL-10)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的相互关系,探讨运动训练促进脑出血(ICH)后神经功能恢复的机制。方法:采用自体血注入法将80只SD大鼠制作成右侧纹状体脑出血模型,造模成功后按照随机化的原则将其分为对照组和运动训练组(运动组),每组又分为第1、3、7、14、21天5个时间点。运动组行网屏训练、平衡木训练、滚笼训练,对照组不作任何干预。分别于不同时间点对大鼠进行神经功能评分。然后将其处死,取右侧脑组织用免疫组化和原位杂交的方法检测IL-10和caspase3的蛋白及mRNA表达。结果:在脑出血后第14天和第21天运动组大鼠的神经功能评分优于对照组,运动组大鼠的IL-10表达高于对照组;在脑出血后第7天运动组大鼠的caspase3表达低于对照组。结论:运动训练可使脑出血大鼠脑组织内IL-10含量增高,而使caspase-3的含量降低,这可能是运动训练促进神经功能的恢复机制之一。 展开更多
关键词 脑出血 运动训练 白细胞介素-10 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 神经功能
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慢性高原病患者骨髓有核红细胞凋亡及Caspase-3的表达 被引量：1
6
作者 韩国雄 谢友邦 +1 位作者 蒋白丽 沈括 《中国临床研究》 CAS 2018年第11期1467-1469,1474,共4页
目的探讨慢性高原病患者骨髓有核红细胞凋亡情况和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平。方法选择2016年1月至2018年3月在青海省人民医院治疗的慢性高原病20例男性患者作为观察组,选择同期同海拔地区的20例健康男性作... 目的探讨慢性高原病患者骨髓有核红细胞凋亡情况和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平。方法选择2016年1月至2018年3月在青海省人民医院治疗的慢性高原病20例男性患者作为观察组,选择同期同海拔地区的20例健康男性作为对照组。分离并培养骨髓单个核细胞并培养3 d,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定(TUNEL)法检测有核红细胞的凋亡指数,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Caspase-3 mRNA的相对表达量。结果培养基内细胞生长良好,圆形透亮。瑞士染色后光镜下进行观察,有核红细胞占(90. 1±4. 0)%。观察组凋亡指数为(7. 4±2. 4)%,低于对照组的(17. 5±5. 7)%,差异有统计学意义(P <0. 05)。观察组Caspase-3 mRNA的相对表达量为(0. 7±0. 3),高于对照组的(0. 5±0. 2),差异有统计学意义(P <0. 05)。观察组Caspase-3 mRNA的相对表达量与凋亡指数呈负相关(r=-0. 684,P <0. 05),凋亡指数与血红蛋白浓度呈负相关(r=-0. 534,P <0. 05),而Caspase-3 mRNA的相对表达量与血红蛋白浓度未见明显相关性(P> 0. 05)。结论慢性高原病患者骨髓有核红细胞凋亡指数降低,Caspase-3 mRNA表达水平增高,提示Caspase-3可能参与了慢性高原病骨髓造血细胞凋亡的异常机制。 展开更多
关键词 慢性高原病 有核红细胞 骨髓 凋亡 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3
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海人藻酸致痫大鼠海马神经元凋亡中caspase-3作用的实验研究 被引量：3
7
作者 赵瑞 刘建民 +3 位作者 赵文元 黎莉 霍克克 周晓平 《神经科学通报》 CSCD 2005年第1期39-43,共5页
目的阐明癫痫模型大鼠海马神经元凋亡中caspase-3的作用机制。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经元凋亡情况,以WesternBlot方法检测其海马神经元中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织制备cDNA文库,以caspase-3的大小亚单位构建酵母... 目的阐明癫痫模型大鼠海马神经元凋亡中caspase-3的作用机制。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经元凋亡情况,以WesternBlot方法检测其海马神经元中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织制备cDNA文库,以caspase-3的大小亚单位构建酵母三杂交诱饵载体,并进行酵母三杂交筛库实验。结果在癫痫发作后12h海马出现凋亡神经元,72h达高峰;发作后24h海马神经元出现eIF2α被caspase-3酶切的片段,逐渐增加至72h。成功制备癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了caspase3酵母三杂交诱饵载体,验证了caspase3与eIF2α之间的相互作用,并经筛库获得caspase3的新底物PIAS1。结论在癫痫模型大鼠海马凋亡神经元中eIF2α被caspase3酶切。酵母三杂交技术可用于筛库寻找caspase3下游底物,从癫痫大鼠海马中获得caspase3的新底物PIAS1,为进一步研究在癫痫发作致神经元损伤中caspase3的作用建立了基础。 展开更多
关键词 癫痫 海马 CASPASE-3 EIF2Α PIAS1 MIZ1
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caspase-3在颞叶癫痫大鼠海马神经凋亡中作用的实验研究 被引量：1
8
作者 赵瑞 刘建民 +3 位作者 赵文元 黎莉 霍克克 王文仲 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2006年第1期38-42,共5页
目的构建癫痫模型大鼠海马凋亡神经元的cDNA文库,采用酵母三杂交技术从中寻找caspase-3潜在的酶切底物。方法制作海人藻酸大鼠癫痫模型,取其海马组织制作酵母三杂交cDNA文库,克隆获得caspase-3的P12、P17两亚基,然后分别定向插入同一pBr... 目的构建癫痫模型大鼠海马凋亡神经元的cDNA文库,采用酵母三杂交技术从中寻找caspase-3潜在的酶切底物。方法制作海人藻酸大鼠癫痫模型,取其海马组织制作酵母三杂交cDNA文库,克隆获得caspase-3的P12、P17两亚基,然后分别定向插入同一pBridge质粒,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体并进行验证,然后对所构建文库进行筛库。结果成功构建癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了caspase-3酵母三杂交诱饵载体,并通过caspase-3与eIF2α之间的相互作用验证,经筛库获得caspase-3的底物MIZ1。结论酵母三杂交技术可用于寻找caspase-3下游底物,从癫痫模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase-3的底物MIZ1,为进一步研究caspase-3在癫痫发作引起的海马神经元损伤中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 癫痫 凋亡 底物 CASPASE-3 MIZ1
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癫癎模型大鼠海马神经元凋亡细胞中caspase3新底物的寻找 被引量：2
9
作者 赵瑞 黎莉 +2 位作者 刘建民 霍克克 赵文元 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期518-520,共3页
目的:在癫癎模型大鼠海马神经元凋亡细胞中寻找caspase 3新底物。方法:建立癫癎模型大鼠海马组织cDNA文库,构建含caspase 3的P12和P17两亚基的三杂交诱饵载体,检测其效果,并进行酵母三杂交筛库。结果:成功建立了癫癎模型大鼠海马组织cDN... 目的:在癫癎模型大鼠海马神经元凋亡细胞中寻找caspase 3新底物。方法:建立癫癎模型大鼠海马组织cDNA文库,构建含caspase 3的P12和P17两亚基的三杂交诱饵载体,检测其效果,并进行酵母三杂交筛库。结果:成功建立了癫癎模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了大鼠caspase 3基因的酵母三杂交诱饵载体,并通过caspase 3与eIF2α之间的相互作用验证;以此三杂交诱饵载体筛库获得caspase 3的新底物PIAS1及MIZ1。结论:从癫癎模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase 3的新底物,为进一步研究caspase 3在癫癎发作引起海马神经损伤中的作用创造了条件。 展开更多
关键词 癫痫 海马 底物 CASPASE 3 PIASl MIZl
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Caspase3基因克隆及在癫痫样放电海马神经元中的表达 被引量：1
10
作者 刘建民 赵文元 +1 位作者 卢亦成 周晓平 《立体定向和功能性神经外科杂志》 2003年第2期63-66,共4页
目的　探讨海马神经元癫痫样放电引起神经元丢失的机制。方法　采用RT PCR法克隆大鼠全长Caspase3cDNA ,然后采用原位杂交和流式细胞技术检测了海马神经元癫痫模型中Caspase3基因表达和神经元凋亡情况。结果　获得了大鼠的全长Caspase3c... 目的　探讨海马神经元癫痫样放电引起神经元丢失的机制。方法　采用RT PCR法克隆大鼠全长Caspase3cDNA ,然后采用原位杂交和流式细胞技术检测了海马神经元癫痫模型中Caspase3基因表达和神经元凋亡情况。结果　获得了大鼠的全长Caspase3cDNA ,发现海马神经元癫痫样放电后出现Caspase3基因表达和神经元凋亡的现象。结论　癫痫样放电启动Caspase3表达 ,继而介导神经元凋亡。 展开更多
关键词 CASPASE3 癫痫 神经元
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